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中国癌症杂志 2011年第9期21卷 675-680页

作者：贺建宇张利能上海市第六人民医院奉贤分院肿瘤科上海201400 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学教研室上海200032

背景与目的:PI3K/Akt信号传导通路与肿瘤转化、进展及放化疗抵抗密切相关。因此,此通路是一个潜在的肿瘤靶点。小分子化合物Erufosine为Akt抑制剂,能抑制多种肿瘤细胞生长。本研究观察小分子化合物Erufosine对胃癌细胞和正常骨髓细胞的... 详细信息

背景与目的:PI3K/Akt信号传导通路与肿瘤转化、进展及放化疗抵抗密切相关。因此,此通路是一个潜在的肿瘤靶点。小分子化合物Erufosine为Akt抑制剂,能抑制多种肿瘤细胞生长。本研究观察小分子化合物Erufosine对胃癌细胞和正常骨髓细胞的增殖及对信号传导分子Akt表达的影响,并探讨其对癌细胞的作用机制。方法:使用MTS方法观察胃癌AGS细胞在Erufosine作用下的增殖抑制,计算其IC50及IC90值;在种植胃癌AGS瘤鼠尾静脉内注射Erufosine,定量计数胃癌AGS细胞、人及鼠骨髓细胞的骨髓克隆形成实验(colony forming unit-granulocyte-macrophage,CFU-GM)数,用Western blot法检测Erufosine对AGS瘤细胞Akt表达的影响。结果:Erufosine对胃癌AGS细胞的增殖有明显抑制作用,AGS细胞的IC50和IC90分别为(5.8±2.6)μmol/L和(13.5±4.6)μmol/L;人骨髓细胞的IC50和IC90分别为(96.5±32.6)μmol/L和(232.8±42.8)μmol/L,鼠骨髓细胞的IC50和IC90分别为(65.5±28.6)μmol/L和(228.8±54.8)μmol/L,与对肿瘤细胞的抑制相比,Erufosine对人和鼠骨髓细胞的毒性较低,两组IC50及IC90的差异均有统计学意义(P<0.01)。人和鼠骨髓细胞的CFU-GM抑制较低,人骨髓细胞的CFU-GM IC50和IC90分别为(86.5±18.6)μmol/L和(250.8±48.8)μmol/L,胃癌AGS细胞的CFU-GM IC50和IC90分别为(7.8±2.5)μmol/L和(13.6±3.6)μmol/L,抑制明显,两者的IC90相差约25倍,两组IC50及IC90的差异均有统计学意义(P<0.01);Erufosine抑制胃癌AGS细胞的Akt表达。结论:Erufosine是对胃癌细胞具有明显抑制,且对骨髓有保护作用的新化合物。

关键词： Erufosine 胃癌增殖抑制

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PTEN下调FAK磷酸化来抑制EGFR受体突变体引起的胶质瘤细胞侵袭

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中国癌症杂志 2008年第1期18卷 30-34页

作者：蔡秀梅王丽影查锡良复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学教研室上海200032

背景与目的:抑癌基因PTEN在胶质瘤中突变率达20%～40%,且PTEN缺失和表皮生长因子受体突变体EGFRvⅢ同时存在EGFR表达的胶质瘤组织中。PTEN通过直接与FAK作用从而降低其酪氨酸磷酸化来抑制肿瘤细胞侵袭。EGFRvⅢ表达,PTEN缺失都是肿瘤细... 详细信息

背景与目的:抑癌基因PTEN在胶质瘤中突变率达20%～40%,且PTEN缺失和表皮生长因子受体突变体EGFRvⅢ同时存在EGFR表达的胶质瘤组织中。PTEN通过直接与FAK作用从而降低其酪氨酸磷酸化来抑制肿瘤细胞侵袭。EGFRvⅢ表达,PTEN缺失都是肿瘤细胞侵袭性增加的原因之一。PTEN功能的丧失可能是EGFRvⅢ表达的肿瘤进一步发展成恶性侵袭性肿瘤的原因之一。本文将探讨在EGFRvⅢ表达和PTEN缺失的肿瘤细胞中转入PTEN以观察其是否能抑制EGFRvⅢ所引起的肿瘤细胞的侵袭。方法:将野生型PTEN及其突变体分别导入人胶质瘤细胞U87ΔEGFR中,利用Transwell-细胞侵袭实验观察细胞侵袭运动变化;免疫印迹实验检查FAK磷酸化变化;FAK表达载体来转染FAK磷酸化程度低的U87ΔEGFR-wtPTEN细胞,观察细胞侵袭运动变化。结果:PTEN和PTEN(G129E)能够抑制U87ΔEGFR细胞侵袭,并且下调FAK397位点磷酸化水平。U87ΔEGFR-wtPTEN细胞中FAK397位点磷酸化水平增加伴随着细胞侵袭能力的提高。结论:PTEN可能通过下调FAK397位点磷酸化水平来抑制EGFRvⅢ引起的胶质瘤细胞侵袭。

关键词： PTEN EGFRvm FAK 磷酸化细胞侵袭胶质瘤

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2型糖尿病患者血清番茄红素与体内氧化应激反应的关系

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复旦学报（医学版） 2007年第5期34卷 749-752页

作者：黄玥沈新南李永烶刘珊林复旦大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室上海200032 上海市第八人民医院检验科上海200235 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系上海200032

目的研究糖尿病(DM)患者血清番茄红素(lycopene,LP)含量与氧化应激反应的关系。方法检测55例2型糖尿病患者和62例对照组血清LP、β-胡萝卜素(β-carotene,β-CAR)和维生素E(Vit.E)含量及血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)... 详细信息

目的研究糖尿病(DM)患者血清番茄红素(lycopene,LP)含量与氧化应激反应的关系。方法检测55例2型糖尿病患者和62例对照组血清LP、β-胡萝卜素(β-carotene,β-CAR)和维生素E(Vit.E)含量及血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量等指标,采用t检验、相关分析和多元回归分析等进行医学统计分析。结果DM组血清LP[(0.27±0.15)vs(0.33±0.14),μg/mL],SOD[(89.32±12.23)vs(106.43±14.19),U/mL],GSH-Px[(148.06±8.94)vs(195.23±8.85),U/mL],T-AOC[(10.14±1.14)vs(14.29±1.51),U/mL]水平均明显低于对照组(P<0.05),血清MDA含量高于对照组[(5.91±1.34)vs(4.86±1.30),nmol/mL](P<0.01)。血清LP含量与MDA的相关系数为负值,与血清SOD、GSH和T-AOC等的相关系数为正值(P<0.01)。进一步的多因素分析发现,控制BMI、年龄等因素后,血清LP与血清MDA含量呈负相关,与血清GSH-Px和T-AOC呈正相关。结论血清LP可能是影响2型DM患者体内氧化应激反应的因素,随着血清LP水平增高,2型DM患者血清MDA含量降低,GSH-Px活力及T-AOC水平提高。

关键词：糖尿病血清番茄红素氧化应激

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应用高通量实时荧光定量PCR方法筛选FL细胞对低剂量微囊藻毒素LR暴露的应答基因

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水生生物学报 2007年第6期31卷 909-911页

作者：王秀敏邵敏华卢大儒徐立红余应年浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室杭州310031 复旦大学遗传学研究所上海200433 浙江大学医学院病理生理学教研室杭州310031

摘要: 微囊藻毒素是蓝藻的一些属产生的单环七肽, 在发生水华的水体中普遍存在. 含有微囊藻毒素的水华能引起野生动物、鱼类、家畜、家禽等中毒和死亡, 也对人类健康构成严重威胁. 流行病学调查发现, 人群原发性肝癌、大肠癌发病率与饮... 详细信息

摘要: 微囊藻毒素是蓝藻的一些属产生的单环七肽, 在发生水华的水体中普遍存在. 含有微囊藻毒素的水华能引起野生动物、鱼类、家畜、家禽等中毒和死亡, 也对人类健康构成严重威胁. 流行病学调查发现, 人群原发性肝癌、大肠癌发病率与饮水源中的微囊藻毒素有关. 其中微囊藻毒素LR 是微囊藻毒素中最常见的一种, 因其高急性毒性, 强促癌活性而受到广泛的关注. 有研究结果表明微囊藻毒素LR 可引起多种细胞发生凋亡, 本实验室先前的研究也发现微囊藻毒素LR 能激活在凋亡过程中起重要作用的酶Caspase-3, 及引起P53、Bax、Bcl-2 等凋亡相关蛋白表达变化, 但其详细的致毒机制仍知之甚少. 从预防和早期检测角度出发, 毒素的低剂量效应引起人们越来越广泛的关注, 低浓度微囊藻毒素LR 暴露后细胞特异的应答基因方面的文献国内外报道很少. 近年来, 随着高通量基因芯片技术的发展和广泛运用, 使得高通量的目的基因筛选成为可能. 因此, 本研究应用高通量实时荧光定量PCR 方法研究细胞在低浓度微囊藻毒素LR 暴露后其基因在mRNA 水平上的改变, 进而筛选其特异的应答基因. 这不仅能为研究微囊藻毒素的毒性机理研究提供新的方向, 也可以得到一些更有效的指标来指示和检测早期低浓度的微囊藻毒素暴露.

关键词：微囊藻毒素LR 应答基因高通量实时荧光定量PCR

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P13K信号通路通过Skp2、p27调节肝癌细胞的增殖

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生物化学与生物物理进展 2008年第11期35卷 1263-1269页

作者：傅奕方征宇王丽影李增霞杨勇查锡良复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系扬州大学医学院生化教研室

探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路调节肝癌细胞增殖的机制.用LY294002特异性阻断P13K信号通路后,人肝癌细胞(SMMC-7721)的增殖明显被抑制.RT-PCR及蛋白质印迹结果显示,LY294002增加了p27蛋白的表达,但不影响p27的mRNA表达.在LY29400... 详细信息

探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路调节肝癌细胞增殖的机制.用LY294002特异性阻断P13K信号通路后,人肝癌细胞(SMMC-7721)的增殖明显被抑制.RT-PCR及蛋白质印迹结果显示,LY294002增加了p27蛋白的表达,但不影响p27的mRNA表达.在LY294002处理的细胞中转入p27的RNAi质粒以干扰p27蛋白的表达后,肝癌细胞的增殖能力可部分恢复.放线菌酮(Chx)处理实验表明,阻断P13K信号通路使p27蛋白的半衰期延长,稳定性增加.进一步研究发现,LY294002可抑制介导p27蛋白降解的关键分子Skp2的rnRNA表达,还可缩短Skp2蛋白的半衰期,降低Skp2蛋白的稳定性.但在SMMC-7721中分别转染P13K下游重要靶分子Akt的持续激活和失活突变体,却并不影响p27蛋白的表达.这些结果表明,P13K信号通路在转录及翻译后水平调节Skp2的表达而影响p27蛋白的降解,从而调节肝癌细胞的增殖,但Akt并没有参与这种调节.

关键词： P13K 信号通路 p27 Skp2 Akt 蛋白质降解

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三氧化二砷诱导恶性黑色素瘤A_(375)和B_(16)细胞凋亡的研究

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癌变．畸变．突变 2002年第4期14卷 218-221页

作者：陈治文夏俊胡守芬马栋柱王丽蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233003 复旦大学医学部生物化学与分子生物学教研室上海200032

目的 :研究不同浓度的三氧化二砷 (As2 O3 )对恶性黑色素瘤人A3 75细胞和小鼠B16细胞的凋亡诱导作用 ,为As2 O3 治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。方法 :用流式细胞术 (FCM )检测A3 75细胞和B16细胞的凋亡诱导及杀伤作用 :用不... 详细信息

目的 :研究不同浓度的三氧化二砷 (As2 O3 )对恶性黑色素瘤人A3 75细胞和小鼠B16细胞的凋亡诱导作用 ,为As2 O3 治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。方法 :用流式细胞术 (FCM )检测A3 75细胞和B16细胞的凋亡诱导及杀伤作用 :用不同剂量的As2 O3 (0 .1mmol·L-1、0 .2 5mmol·L-1和 0 .5mmol/L-1) ,对小鼠进行腹腔注射 (10ml·kg-1,连续注射 10d后 ,检测小鼠血清与心、肝、肾有关的生化指标。结果 :As2 O3 浓度分别为 5 μmol·L-1、10 μmol·L-1和 2 0 μmol·L-1时 ,A3 75和B16细胞的凋亡率分别为 11.85 %、5 5 .5 1%、5 4 .90 %和 9.81%、2 6 .4 5 %、9.93% :As2 O3 诱导A3 75和B16细胞总的凋亡和坏死率分别为11.90 %、5 5 .71%、5 7.4 0 %和 12 .96 %、2 6 .99%、87.13% ;不同剂量的As2 O3 (0 .1mmol·L-1～ 0 .5mmol·L-1)对小鼠肝、肾和心肌等功能无明显影响 ,与对照组各项指标无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :不同浓度的As2 O3 能明显诱导恶性黑色素瘤A3 75及B16细胞凋亡和坏死 ,对A3 75细胞的凋亡诱导作用强于B16细胞。As2 O3 (0 .1mmol·L-1～ 0 .5mmol·L-1)对小鼠肝。

关键词：细胞凋亡三氧化二砷恶性黑色素瘤 A275细胞 B16细胞

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γ射线对白血病细胞K562 ppGalNAcT2 mRNA表达的影响及中药多糖的防护作用

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中国血液流变学杂志 2003年第3期13卷 207-209页

作者：吴士良陈克平仇灏范雁陈惠黎苏州大学医学院生物化学及分子生物学教研室苏州215007 复旦大学上海医学院生化及分子生物学系上海200032

目的探讨γ射线对白血病细胞株K562中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mR-NA表达的影响,并探讨中药多糖对此种影响的防护作用。方法以不同剂量的^(60)COγ射线照射K562细胞,并设加中药多糖实验组,观察不同剂... 详细信息

目的探讨γ射线对白血病细胞株K562中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mR-NA表达的影响,并探讨中药多糖对此种影响的防护作用。方法以不同剂量的^(60)COγ射线照射K562细胞,并设加中药多糖实验组,观察不同剂量(5Gy、10Gy、15Gy)γ射线对K562细胞ppGalNAcT2 mRNA表达影响,及加入不同剂量中药(50mg/L,100mg/L,200mg/L)后对10Gy照射K562细胞组中T2 mRNA表达的防护作用。以RT-PCR法检测ppGalNAcT2 mRNA的表达差异变化。结果 γ射线照射K562细胞后ppGalNAcT2 mRNA表达明显减少,且与剂量呈负相关,而中药多糖则可对抗此种作用,使加中药多糖组细胞在照射后ppGalNAcT2 mRNA表达水平维持在正常细胞水平。结论 5～15Gyγ射线照射抑制白血病细胞ppGal-NAcT2 mPNA表达,可能与肿瘤细胞受照后分化抑制有关,而中药多糖明显对抗此种抑制作用。

关键词： γ射线白血病细胞 K562 ppGalNAcT2 mRNA 表达影响中药多糖防护作用

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黄酮类化合物抗肿瘤作用研究进展

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中国新药与临床杂志 2002年第7期21卷 428-433页

作者：黄华艺查锡良广西民族医院临床医学研究所肿瘤分子细胞生物学实验室广西南宁530001 卫生部糖复合物重点实验室复旦大学上海医学院生物化学教研室上海200032

黄酮类化合物是一类存在于多种植物中的多酚化合物 ,研究发现它们具有许多潜在的药用价值 ,其中抗肿瘤作用是一个研究热点。其抗肿瘤作用主要表现在抗细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预细胞信号转导和增强抑癌基因活性及抑制癌基因表达等功... 详细信息

黄酮类化合物是一类存在于多种植物中的多酚化合物 ,研究发现它们具有许多潜在的药用价值 ,其中抗肿瘤作用是一个研究热点。其抗肿瘤作用主要表现在抗细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预细胞信号转导和增强抑癌基因活性及抑制癌基因表达等功效。本文就黄酮类化合物抗肿瘤作用的研究进展进行综述。

关键词：黄酮类肿瘤抗肿瘤药细胞凋亡基因肿瘤抑制基因

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重组BCMA-Fc在毕赤酵母的表达,纯化及生物活性的鉴定

重组BCMA-Fc在毕赤酵母的表达,纯化及生物活性的鉴定

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第七届全国医学生物化学与分子生物学和第四届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术研讨会暨医学生化分会会员代表大会

作者：孟宪超复旦大学上海医学院生物化学及分子生物学实验室

目的:用毕赤酵母菌株表达具有生物活性的BCMA-Fc融合蛋白,为进一步研制治疗自身免疫性疾病的新药奠定基础。方法:1.计算机模拟BCMA-Fc蛋白质结构,并进行动力学计算。***胞外区结构域基因于人IgGFc片段编码基因融合,并插入Xho I和Not I... 详细信息

目的:用毕赤酵母菌株表达具有生物活性的BCMA-Fc融合蛋白,为进一步研制治疗自身免疫性疾病的新药奠定基础。方法:1.计算机模拟BCMA-Fc蛋白质结构,并进行动力学计算。***胞外区结构域基因于人IgGFc片段编码基因融合,并插入Xho I和Not I酶切位点。根据N型糖基化

关键词： BCMA-Fc 毕赤酵母活性测定生物活性

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β_2肾上腺素能受体基因多态性与维吾尔族肥胖的关系

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西安交通大学学报（医学版） 2011年第6期32卷 690-694页

作者：焦谊张丽王延蛟王笑峰张丽萍关亚群新疆医科大学基础医学院生物化学暨分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011 复旦大学生命科学院遗传学研究所上海200433

目的探讨β2肾上腺素能受体(β2-adrenergic receptor,β2-AR or ADRB2)基因R16G、Q27E多态性与新疆维吾尔族人群肥胖发生的相关性。方法采用Taqman技术对新疆754例维吾尔族受试者进行β2-AR基因R16G、Q27E位点基因分型,并分析各基因型... 详细信息

目的探讨β2肾上腺素能受体(β2-adrenergic receptor,β2-AR or ADRB2)基因R16G、Q27E多态性与新疆维吾尔族人群肥胖发生的相关性。方法采用Taqman技术对新疆754例维吾尔族受试者进行β2-AR基因R16G、Q27E位点基因分型,并分析各基因型和等位基因频率在不同体重指数(BMI)水平的分布及其与超重、肥胖的关系。结果维吾尔族人群中超重组与肥胖组的血压、甘油三酯及胆固醇水平显著高于正常体重组(P<0.05)。R16G、Q27E两个多态位点的基因型频率与等位基因频率在正常体重组、超重组与肥胖组之间的分布均无统计学差异(P>0.05);按性别分层后基因型与等位基因频率的分布在3组间亦未见统计学差异。R16G、Q27E多态构成的4种单倍型在正常体重组、超重组与肥胖组的分布无统计学差异(P>0.05)。维吾尔族与汉族人群间比较,Q27E基因型与等位基因频率分布的差异有统计学意义(P<0.001)。结论β2-AR基因R16G、Q27E多态性与新疆维吾尔族人群肥胖发生无关,但Q27E基因型与等位基因频率分布在汉族与维吾尔族人群间不同。

关键词：维吾尔族肥胖 β2肾上腺素能受体基因基因多态性

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