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诺如病毒:“完美的人类病原”

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微生物与感染 2015年第2期10卷 108-110页

作者：王丹甄珊珊汪萱怡复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学上海医学院生物医学研究院上海200032 复旦大学上海医学院老年医学研究中心上海200032

诺如病毒是近来在我国北京、上海、浙江、广东等地导致病毒性胃肠炎暴发的病原体。本文对该病毒的生物学特征与流行病学进行简短综述,并对正在研发的疫苗作介绍。

关键词：诺如病毒病毒样颗粒疫苗

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四环素诱导的丙型肝炎病毒非结构蛋白5B稳定细胞株的构建和检测

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微生物与感染 2011年第2期6卷 84-89页

作者：王耀辉丁焕平王燏婵袁正宏复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学生物医学研究院上海200032 上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508

丙型肝炎病毒(HCV)感染个体后在宿主细胞内长时间保持低水平复制,与慢性肝炎、肝硬化及肝细胞肝癌的发生密切相关。目前,HCV感染后肝细胞发生转化的具体机制还不清楚。非结构蛋白5B(NS5B)是HCV编码的非结构蛋白之一,具有RNA依赖的RNA聚... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)感染个体后在宿主细胞内长时间保持低水平复制,与慢性肝炎、肝硬化及肝细胞肝癌的发生密切相关。目前,HCV感染后肝细胞发生转化的具体机制还不清楚。非结构蛋白5B(NS5B)是HCV编码的非结构蛋白之一,具有RNA依赖的RNA聚合酶活性(RdRp),是病毒复制所需的关键酶。除参与病毒复制外,NS5B通过直接与宿主蛋白相互作用影响细胞的正常功能逐渐成为人们关注的焦点。为深入了解NS5B在病毒复制和致病过程中的作用,本研究在肝癌细胞系HepG2细胞中构建了可由四环素诱导(Tet-On)的NS5B稳定细胞株。结果显示,与对照组相比,加入四环素可成功诱导NS5B。加入不同浓度的四环素或经过不同的诱导时间,目的蛋白均能同时被标签抗体和抗NS5B抗体检测。免疫荧光法进一步证实NS5B存在于细胞质内。本研究所构建的NS5B稳定细胞株可用于诸多后续试验,为深入研究NS5B的功能提供了细胞模型。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5B HepG2 Tet-On

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微小RNA对人类免疫缺陷病毒感染的影响:飞向入侵者的子弹?

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微生物与感染 2011年第3期6卷 158-164页

作者：朱凌燕仇超徐建青上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508 温州医学院温州325035 复旦大学生物医学研究院上海201508 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

微小RNA(miRNA)是一类内源性小RNA,通过结合mRNA的3′非翻译区对基因进行转录后的调节,具有广泛的生物学功能。已有研究表明,宿主miRNA能调节人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因表达,影响HIV的复制能力、感染性,并可能与HIV的潜伏有关。与此同... 详细信息

微小RNA(miRNA)是一类内源性小RNA,通过结合mRNA的3′非翻译区对基因进行转录后的调节,具有广泛的生物学功能。已有研究表明,宿主miRNA能调节人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因表达,影响HIV的复制能力、感染性,并可能与HIV的潜伏有关。与此同时,HIV来源的病毒miRNA同样在病毒的生活史以及病毒与宿主的相互作用中发挥重要作用。更多与HIV相关的miRNA仍然有待发现,其相应的调节机制也有待进一步阐明。

关键词：人类免疫缺陷病毒微小RNA 复制潜伏

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乙型肝炎病毒与干扰素在宿主细胞相互作用的研究

乙型肝炎病毒与干扰素在宿主细胞相互作用的研究

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首届北京地坛感染病学术会议

作者：袁正宏医学分子病毒学教育部卫生部重点实验室复旦大学上海医学院上海市公共卫生中心复旦大学生物医学研究院

@@目前Ⅰ型干扰素（下简称干扰素）已被临床广泛用于慢性乙型肝炎的治疗，但尚存在治疗效果有限、目前仍不清楚HBV与Ⅰ型干扰素在细胞内如何相互作用以拮抗干扰素的治疗等缺点。

关键词：乙型肝炎病毒干扰素宿主细胞拮抗干扰素

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T细胞耗竭与慢性病毒感染疾病的研究进展

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微生物与感染 2013年第2期8卷 124-130页

作者：田晓玲仇超徐建青上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508 复旦大学生物医学研究院上海200032 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室医学微生物学研究所上海200032

急性病毒感染常形成有效的抗病毒免疫应答,初始T细胞经历克隆扩增,产生大量的抗原特异性T细胞。这些T细胞有的分化成效应T细胞,分泌细胞因子,在快速清除病毒后绝大多数死亡;存活的T细胞分化为能长期提供保护性免疫的记忆T细胞,当再次遇... 详细信息

急性病毒感染常形成有效的抗病毒免疫应答,初始T细胞经历克隆扩增,产生大量的抗原特异性T细胞。这些T细胞有的分化成效应T细胞,分泌细胞因子,在快速清除病毒后绝大多数死亡;存活的T细胞分化为能长期提供保护性免疫的记忆T细胞,当再次遇到同源抗原,能形成有效的抗病毒免疫应答。相比之下,慢性病毒感染导致T细胞的功能逐渐减弱,从而使对病毒感染的控制能力大大降低。持续抗原刺激可能导致T细胞逐步失去效应功能和增殖能力而耗竭,最终影响寄主的抗病毒保护能力。本文就T细胞耗竭特性及保持和促进这种耗竭状态的机制,特别是对在慢性人类免疫缺陷病毒感染中的研究进展进行了综述。

关键词： T细胞耗竭慢性感染人类免疫缺陷病毒抑制受体

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穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞活化及特异性抗体应答的影响

穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞活化及特异性抗体应答的影响

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第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议

作者：王维王静刘春红 ITALIANI,Paola BORASCHI,Diana 马世平瞿涤中国药科大学中药药理教研室复旦大学上海医学院生物医学研究院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室病复旦大学上海医学院原微生物研究所医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室复旦大学上海医学院病原微生物研究所

目的:研究穿心莲内酯对小鼠天然免疫和适应性免疫应答的影响。方法:小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,经LPS诱导向M1活化或IL-4诱导向M2活化,同时以穿心莲内酯(10μg/ml)处理;利用real-time PCR检测巨噬细胞活化相关的M1和M2类细胞因子基因转... 详细信息

目的:研究穿心莲内酯对小鼠天然免疫和适应性免疫应答的影响。方法:小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,经LPS诱导向M1活化或IL-4诱导向M2活化,同时以穿心莲内酯(10μg/ml)处理;利用real-time PCR检测巨噬细胞活化相关的M1和M2类细胞因子基因转录水平(M1:IL-1β,IL-18,IL-12等;M2:IL-1Ra,IL-18B P,IL-10等),流式细胞术检测巨噬细胞活化及抗原提呈功能相关的细胞表面分子(CD40,CD80,CD86,MHC等)。用乙肝表面抗原(HBsAg)免疫小鼠,同时腹腔注射给予穿心莲内酯(1mg/kg);利用ELISA方法检测anti-HBsAg,ELISPOT法检测分泌IL-4的脾淋巴细胞数量。结果:穿心莲内酯单独处理巨噬细胞24小时后使其偏向M2活化(IL-12/IL-10比例从0.78降低至0.12),处理LPS激活的巨噬细胞抑制其向M1分化(IL-12/IL-10比例从30.97降低至10.77),处理IL-4激活的巨噬细胞促进其向M2分化(IL-12/IL-10比例从0.32降低至0.15);并且穿心莲内酯下调了LPS激活的巨噬细胞表面分子CD40,CD80,CD86及MHC I的表达。HBsAg免疫的小鼠给予穿心莲内酯后血清特异性抗体anti-HBs滴度下降,分泌IL-4的脾淋巴细胞数量减少。结论:穿心莲内酯可调节小鼠的天然免疫和适应性免疫应答,调节巨噬细胞的活化并减少特异性抗体的产生。

关键词：穿心莲内酯免疫调节巨噬细胞细胞因子抗体

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马纳维诺凝胶作为候选杀微生物剂的生物学活性和稳定性体外评价

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微生物与感染 2014年第2期9卷 102-106页

作者：李良峰贲银银李亮助张晓燕上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心复旦大学生物医学研究院上海201508 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

为了在体外评价马纳维诺凝胶的生物学活性和稳定性,用TZM-bl和Jurkat-T细胞系检测马纳维诺与0.015%羟乙基纤维素(HEC)复合而成的凝胶制剂的细胞毒性,对其抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)SVPB16和SVPC12亚型假病毒感染的活性进行评价。同时将... 详细信息

为了在体外评价马纳维诺凝胶的生物学活性和稳定性,用TZM-bl和Jurkat-T细胞系检测马纳维诺与0.015%羟乙基纤维素(HEC)复合而成的凝胶制剂的细胞毒性,对其抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)SVPB16和SVPC12亚型假病毒感染的活性进行评价。同时将马纳维诺溶于1.5%HEC中,终浓度为6mmol/L,分别置于4℃、室温、30℃和40℃,保持相对湿度75%,每隔1周检测其抗病毒活性。结果显示,当马纳维诺与HEC复合后,其细胞毒性并没有增加,而抗病毒活性轻微增强。马纳维诺凝胶置于上述4个温度,持续8周,在高于人体温度的40℃仍保持较好的抗病毒活性。综上所述,作为候选杀微生物剂,马纳维诺凝胶具有较好的生物学活性和稳定性。

关键词：马纳维诺羟乙基纤维素人类免疫缺陷病毒杀微生物剂

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Scirpusin A和scirpusin B体外抗人类免疫缺陷病毒1型的作用

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微生物与感染 2014年第3期9卷 157-162页

作者：朱景玙杨国勋孟哲峰徐建青张晓燕上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508 复旦大学生物医学研究院上海200032 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学药学院上海201203

Scirpusin A和scirpusin B是从药用植物中发现的2种天然茋类二聚体,具有一定的抗病毒效应。本研究利用人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)包膜和水疱性口炎病毒G蛋白(VSV-G)包膜的HIV假病毒及实验室适应株HIV-1ⅢB,在体外评价2种药物的抗病毒... 详细信息

Scirpusin A和scirpusin B是从药用植物中发现的2种天然茋类二聚体,具有一定的抗病毒效应。本研究利用人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)包膜和水疱性口炎病毒G蛋白(VSV-G)包膜的HIV假病毒及实验室适应株HIV-1ⅢB,在体外评价2种药物的抗病毒效果并初步探讨其作用机制。研究发现,scirpusin A和scirpusin B不仅能在体外有效抑制HIV假病毒感染TZM-bl细胞(一种HIV-1易感细胞),还能抑制实验室适应株HIV-1ⅢB。Scirpusin B的作用优于scirpusin A。对实验室适应株HIV-1ⅢB,scirpusin B的半数抑制浓度(IC50)为1.33μmol/L,scirpusin A的IC50为4.77μmol/L。此外,scirpusin A和scirpusin B还能抑制VSV-G包膜假病毒,提示其作用可能与病毒在细胞内的复制过程相关。Scirpusin A在病毒进入细胞后仍可发挥抑制作用,但具体机制尚待深入研究。

关键词：人类免疫缺陷病毒1型 Scirpusin A Scirpusin B 茋类化合物中药水疱性口炎病毒G蛋白

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穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞活化及特异性抗体应答的影响

穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞活化及特异性抗体应答的影响

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第五届全国中医药免疫学术研讨会-暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议

作者：王维王静刘春红 ITALIANI,Paola BORASCHI,Diana 马世平瞿涤中国药科大学中药药理教研室复旦大学上海医学院生物医学研究院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室病复旦大学上海医学院原微生物研究所医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室复旦大学上海医学院病原微生物研究所意大利国立研究院生物医学技术研究所免疫生物学组细胞因子实验室

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乙型肝炎病毒小表面抗原各拓扑区段对其表达和分泌的影响

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微生物与感染 2016年第5期11卷 278-286页

作者：沈忠良饶玉良王葳马张妹刘晶潘少坤谢幼华复旦大学生物医学研究院上海200032 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海健康医学院基础医学院上海201318 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔预防科上海200011

乙型肝炎病毒小表面抗原(small hepatitis B virus surface antigen,SHB)在细胞内质网上表达,沿着细胞分泌途径分泌到胞外。为系统分析SHB拓扑结构对SHB表达和分泌的影响,首先通过生物信息学预测临床病毒株HBV C8和8种基因型(A^H)代表株... 详细信息

乙型肝炎病毒小表面抗原(small hepatitis B virus surface antigen,SHB)在细胞内质网上表达,沿着细胞分泌途径分泌到胞外。为系统分析SHB拓扑结构对SHB表达和分泌的影响,首先通过生物信息学预测临床病毒株HBV C8和8种基因型(A^H)代表株的SHB拓扑结构,发现这些SHB均为四次跨膜蛋白,拥有基本相同的拓扑结构。相对内质网膜而言,SHB的拓扑结构拥有3个内质网腔内区段(Inside1~Inside3)、4个跨膜螺旋区(Tmhelix1~Tmhelix4)和2个内质网膜外区段(Outside1和Outside2)。6种基因型(基因型A、B、C、D、E和G)代表株与病毒株C8的SHB拓扑结构预测结果完全相同,而基因型F和H的SHB有4个区段与C8等不完全一致。通过对C8的SHB拓扑结构各区段进行缺失突变研究,发现Inside1区段不是SHB表达和分泌所必需的;Outside1、Tmhelix2和Inside2区段是SHB表达和分泌所必需的;Tmhelix1和Outside2不是SHB表达所必需的,但为SHB分泌所必需;Tmhelix3和Tmhelix4对SHB表达有重要影响,也是SHB分泌所必需的。进一步对Outside1和Outside2进行小片段(6个氨基酸)的缺失突变研究,发现小片段缺失基本不显著影响SHB的表达,但Outside1的氨基酸55~78及Outside2是SHB分泌所必需的。本研究首次系统性分析了SHB的拓扑结构各区段对SHB表达和分泌的影响,为深入探索SHB结构与功能的关系提供了线索。

关键词：乙型肝炎病毒小表面抗原缺失突变表达分泌

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