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复旦学报（医学版） 2005年第1期32卷 98-100,104,F003页

作者：黄娅林赵鹏程介士复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海200032

目的观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时扫描,动态显示海马神经元二维图像... 详细信息

目的观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时扫描,动态显示海马神经元二维图像,以计算机相应软件对胞内钙的荧光强度变化进行分析统计。结果在 0.5 mmol／L谷氨酸作用下,胞内钙荧光强度迅速升高(P<0.001);0.5 mmol／L谷氨酸与3 mmol／L牛磺酸共同作用于海马神经元时,胞内钙荧光强度明显降低(P<0.001);灌流液中去除牛磺酸后,胞内钙荧光强度上升(P <0.001)。结论抑制性氨基酸牛磺酸可抑制由兴奋性氨基酸谷氨酸所致神经元的胞内钙超载;CLSM以其独特的优势,在高清晰度地显示海马神经元形态的同时,也可动态地观察活细胞在不同环境下胞内钙的快速变化以及定量分析。该技术在动态观察和二维图像的高分辨率上比传统测钙方法有更大的优越性。

关键词：钙超载海马神经元共聚焦激光扫描显微镜牛磺酸谷氨酸 CLSM 大鼠海马荧光强度活细胞 Fluo-3/AM

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迷走神经运动背核内心迷走神经元的GABA能突触前支配受谷氨酸能紧张性调控(英文)

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生理学报 2005年第6期57卷 761-765页

作者：王继江陈咏华李克勇孙凤艳复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海200032

谷氨酸能和GABA能支配是心迷走节前神经元(cardiac vagal neuron,CVN)的主要兴奋性和抑制性突触传入。在CVN 的活动调节中,这两种支配是否有相互作用、以及如何相互作用目前尚不清楚。本研究用神经元逆行荧光染料标记法和电压膜片钳方... 详细信息

谷氨酸能和GABA能支配是心迷走节前神经元(cardiac vagal neuron,CVN)的主要兴奋性和抑制性突触传入。在CVN 的活动调节中,这两种支配是否有相互作用、以及如何相互作用目前尚不清楚。本研究用神经元逆行荧光染料标记法和电压膜片钳方法证明,谷氨酸NMDA型和非NMDA型受体拈抗剂AP5和CNQX在全脑片应用条件下,对疑核(nucleus ambiguus, NA)内CVN的GABA能突触前活动无明显影响,而对迷走神经运动背核(dorsal motor nucleus of the vagus,DMNX)内CVN的 GABA能突触前活动有显著的抑制作用。这些观察结果提示:支配迷走神经运动背核内CVN的GABA能神经元可能接受紧张性谷氨酸能支配,而支配疑核内CVN的GABA能神经元则没有这种紧张性谷氨酸能支配。疑核内和迷走神经运动背核内 CVN的这种调节差异,是两个核团的CVN在心率和心功能调节中功能分工的可能机制之一。

关键词：疑核心脏迷走神经节前神经突触

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褪黑素对MPTP和MPP+引起的线粒体DNA损伤的保护作用及其机制

褪黑素对MPTP和MPP+引起的线粒体DNA损伤的保护作用及其机制

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：沈迪晗陈留记黄娅琳孙凤艳复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

＜正＞目的:本实验主要研究了褪黑素对MPTP/MPP+引起的线粒体DNA氧化损伤的保护作用及其机制。结果:小鼠皮下注射MPTP（24 mg/kg）可以快速引起大脑黑质致密部神经元胞质内DNA 氧化损伤标志物8-羟基鸟苷（8-oxoG）含量增加。腹腔注射褪... 详细信息

＜正＞目的:本实验主要研究了褪黑素对MPTP/MPP+引起的线粒体DNA氧化损伤的保护作用及其机制。结果:小鼠皮下注射MPTP（24 mg/kg）可以快速引起大脑黑质致密部神经元胞质内DNA 氧化损伤标志物8-羟基鸟苷（8-oxoG）含量增加。腹腔注射褪黑素（7.5,15,or 30 mg/kg）可以剂量依赖性地降低MPTP引起的DNA氧化损伤。在人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株上,MPP+ （1 mmol/L）增加8-oxoG含量,并呈时间依赖地诱导增加细胞内不同区域的DNA氧化损伤。MPP+ 处理1h后损伤的DNA主要位于线粒体,3h后则主要位于细胞核,提示线粒体DNA更容易受到氧化损伤。MPP+时间依赖性地增加线粒体氧自由基的累积（1-24 h）,并逐渐降低线粒体膜电位（18-36 h）。在MPP+处理72h后有约49%的细胞死亡。如用褪黑素预孵育,则可以减少MPP+引

关键词：褪黑素 MPTP DNA氧化损伤线粒体膜电位氧自由基

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Parkin蛋白在帕金森病发病过程中的作用研究

Parkin蛋白在帕金森病发病过程中的作用研究

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：卞敏娟何昆燕孙凤艳黄芳复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

＜正＞帕金森病（Parkinson disease,PD）是一种慢性的中枢神经系统退行性疾病,其发病率随年龄的增加而增大。帕金森病的确切致病原因还不清楚,普遍的观点认为其病因有环境因素,也有遗传因素, 或是由两者共同引发。已知的帕金森病相关... 详细信息

＜正＞帕金森病（Parkinson disease,PD）是一种慢性的中枢神经系统退行性疾病,其发病率随年龄的增加而增大。帕金森病的确切致病原因还不清楚,普遍的观点认为其病因有环境因素,也有遗传因素, 或是由两者共同引发。已知的帕金森病相关基因有:alpha-synuclein、parkin、synphilin-1、UCH-L1、presenilin、DJ-1、PINK1、LRRK2、NR4A2、Nurr-1等。帕金森病表现为中脑黑质多巴胺能神经元的进行性丢失,该疾病有一个显著的病理标志,即神经元细胞内的Lewy小体,小体由多种蛋白组成,alpha-Synuclein、Parkin、Synphilin-1、UCH-L1是其主要成分。在正常神经细胞内,错

关键词：帕金森病 parkin

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Bcl-2促进成年大鼠缺血脑内纹状体神经元再生及其成熟

Bcl-2促进成年大鼠缺血脑内纹状体神经元再生及其成熟

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：张嵘孙凤艳复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

＜正＞本文采用大鼠大脑中动脉栓塞短暂性脑缺血实验模型（MCAO）和脑室注射Bcl-2表达质粒的技术研究了脑内高表达Bcl-2能否影响成年大鼠缺血脑内神经元再生作用。用免疫组织化学染色法检测报告基因产物增强型绿色荧光蛋白（EGFP）以反... 详细信息

＜正＞本文采用大鼠大脑中动脉栓塞短暂性脑缺血实验模型（MCAO）和脑室注射Bcl-2表达质粒的技术研究了脑内高表达Bcl-2能否影响成年大鼠缺血脑内神经元再生作用。用免疫组织化学染色法检测报告基因产物增强型绿色荧光蛋白（EGFP）以反映Bcl-2蛋白在脑内的表达情况,通过梗塞体积,激活的Caspase-3免疫活性,退行性神经元标记物Fluoro-JadeB阳性细胞数量的检测来反映Bcl-2的抗缺血脑损伤及其抗神经细胞凋亡的脑保护作用。用BrdU的掺入检测法反映新生神经细胞的增殖情况,结合不同分化时期神经元标记物与BrdU的免疫组织化学双标记技术来检测神经元

关键词： Bcl-2 大脑中动脉栓塞成年神经元再生神经前体细胞迁移

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VEGF促进成年大鼠缺血后脑的修复和纹状体的神经再生

VEGF促进成年大鼠缺血后脑的修复和纹状体的神经再生

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：王永权孙凤艳复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有促进血管生长和直接的神经保护效应。最近的研究表明,VEGF可以促进正常成年大鼠侧脑室下区(subventricular zone,SVZ) 和海马齿状回颗粒细胞层下区(subgranular zone,SGZ... 详细信息

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有促进血管生长和直接的神经保护效应。最近的研究表明,VEGF可以促进正常成年大鼠侧脑室下区(subventricular zone,SVZ) 和海马齿状回颗粒细胞层下区(subgranular zone,SGZ,of hippocampal dentate gyrus,DG)的神经雨生。脑内VEGF基因转染可显著促进成年大鼠海马部位神经前体细胞的增殖并改善学习记忆功能。考虑到神经再生对神经退行性疾病潜在的临床治疗价值,有人研究了VEGF对缺血脑内的生

关键词： VEGF 基因神经元再生纹状体中风核磁共振

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牛磺酸在针刺抗痫中的作用观察

牛磺酸在针刺抗痫中的作用观察

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：靳红兵李青程介士杨茹复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室兰州大学医学院生理学教研室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

癫痫是一种顽固的慢性脑疾病,患病率达0.2%-0.5%,约25%的患者终身不能得到控制。在长期的临床实践中发现针刺可以有效地治疗癫痫。但针刺抗痫机理尚不完全清楚。癫痫发作与抑制性氨基酸的抑制作用下降相关。牛磺酸是人类脑内含量最高的... 详细信息

癫痫是一种顽固的慢性脑疾病,患病率达0.2%-0.5%,约25%的患者终身不能得到控制。在长期的临床实践中发现针刺可以有效地治疗癫痫。但针刺抗痫机理尚不完全清楚。癫痫发作与抑制性氨基酸的抑制作用下降相关。牛磺酸是人类脑内含量最高的抑制性游离氨基酸。文献报道在致痫动物和临床病人中,牛磺酸均可改善癫痫症状。本室以往的研究发现,针刺抑制癫痫发作时,牛磺酸、GABA等抑制性氨基酸释放明显增加。本实验旨在进一步探讨牛酸酸在针刺抗痫中的作用。

关键词：电针癫痫牛磺酸牛磺酸转运体

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神经甾体硫化脱氢表雄酮对前额叶皮层内侧区兴奋性突触传递的作用和机制

神经甾体硫化脱氢表雄酮对前额叶皮层内侧区兴奋性突触传递的作用...

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：董潋滟郑平复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

＜正＞硫化脱氢表雄酮（DHEAS）是人体血循环中最丰富的甾体物质,也是一类重要的调节神经元功能的神经甾体。大量的功能学实验表明DHEAS与记忆和认知有关,血或脑中的DHEAS水平的明显下降可以引起神经系统的失衡:记忆力下降、认知和情绪... 详细信息

＜正＞硫化脱氢表雄酮（DHEAS）是人体血循环中最丰富的甾体物质,也是一类重要的调节神经元功能的神经甾体。大量的功能学实验表明DHEAS与记忆和认知有关,血或脑中的DHEAS水平的明显下降可以引起神经系统的失衡:记忆力下降、认知和情绪受损。作为认知功能核心脑区的前额叶皮层内侧区,它的一个重要的信号转导通路兴奋性突触传递很可能受到DHEAS的作用,从而对认知功能产生影响,但目前DHEAS对该部位兴奋性突触传递的作用研究较少。本实验在前额叶内侧区

关键词：硫化脱氢表雄酮微小兴奋性突触后电流 s1受体 D1受体前额叶

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缺血诱导的功能性神经元再生

缺血诱导的功能性神经元再生

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：孙凤艳复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

大量研究表明,缺血可诱导成年动物脑内的神经元再生。但这些新生的神经元是否能成熟为功能性神经元并与周围神经细胞形成突触联系还有待于进一步研究。为此,我们结合免疫组化多重标记技术和全细胞膜片钳技术研究了实验性脑缺血后大鼠纹... 详细信息

大量研究表明,缺血可诱导成年动物脑内的神经元再生。但这些新生的神经元是否能成熟为功能性神经元并与周围神经细胞形成突触联系还有待于进一步研究。为此,我们结合免疫组化多重标记技术和全细胞膜片钳技术研究了实验性脑缺血后大鼠纹状体内新生神经元在形态和功能上的成熟情况。结果表明,纹状体内新生的神经元主要来源于侧脑室下区(subventricular zone,SVZ), 在形态上可明显分为两种类型,一种胞体较小、突起较短;另一种胞体较大、突起较长。进一步研究表明,这两种细胞分别为γ-氨基丁酸能(GABAergic)和胆碱能(cholinergic)神经元,具有成熟的递质合成酶系。并且,这些新生的神经元表现出与成熟神经元相似的电活动特性,包括相似的动作电位(action potentials)和自发性突触后电流(spontaneous postsynaptic currents,sPSCs)等。进一步研究显示,这些sPSCs能被特异的GABA受体和NMDA受体阻断剂所抑制,提示这些新生的神经元能接收上级神经元发出的抑制性和兴奋性突触传入。综上所述,缺血诱导的新生神经元能成熟为区域特异的功能性神经元,并与周围的神经细胞形成突触联系。这为临床上利用内源性神经元再生实现脑损伤后的功能修复提供了理论基础。

关键词：脑缺血纹状体膜片钳功能性神经元再生迁移

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人类组氨酰TRNA合成酶类似物的原核表达及其多克隆抗体的制备

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中国病理生理杂志 2005年第12期21卷 2407-2409页

作者：孟宪芳施静刘晓春陈金中华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学教研室湖北武汉430030 复旦大学生命科学院遗传工程国家重点实验室上海200030

目的:在原核系统中表达并纯化人类组氨酰TRNA合成酶类似物蛋白,制备多克隆抗体。方法:设计引物扩增其开放阅读框,重组入原核表达载体PQE30,并在大肠杆菌M15中诱导表达;应用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔。结果:①成功构建人类组氨酰T... 详细信息

目的:在原核系统中表达并纯化人类组氨酰TRNA合成酶类似物蛋白,制备多克隆抗体。方法:设计引物扩增其开放阅读框,重组入原核表达载体PQE30,并在大肠杆菌M15中诱导表达;应用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔。结果:①成功构建人类组氨酰TRNA合成酶类似物的原核表达载体;②经NI亲和层析获得纯度较高的重组蛋白;③制备了高滴度的兔抗人类组氨酰TRNA合成酶类似物蛋白的多克隆抗体。结论:原核表达载体的构建、重组蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备为今后研究该蛋白的功能提供了良好的基础。

关键词：人类组氨酰tRNA合成酶类似物原核表达抗体,多克隆

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