目的研究机械牵张对心脏侧群干细胞(cardiac side population cell,CSP)增殖的作用及机制。方法通过流式细胞仪分选并培养大鼠乳鼠CSP,牵张后观察细胞的增殖。并通过胸主动脉缩窄(transverse aorta constriction,TAC)建立压力负荷小鼠模...
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目的研究机械牵张对心脏侧群干细胞(cardiac side population cell,CSP)增殖的作用及机制。方法通过流式细胞仪分选并培养大鼠乳鼠CSP,牵张后观察细胞的增殖。并通过胸主动脉缩窄(transverse aorta constriction,TAC)建立压力负荷小鼠模型,流式细胞仪分选后观察CSP的比例。进一步通过荧光染色以及Western blot检测CSP的LRP6磷酸化水平。结果成功分离及培养CSP,机械牵张可促进CSP增殖。体内实验表明,压力负荷可明显促进CSP比例的升高。免疫荧光及Western blot实验表明,机械牵张可明显促进CSP的LPR6磷酸化。CSP过表达LRP6可明显增强机械牵张介导的促增殖效应。结论机械牵张可促进LRP6磷酸化,从而促进CSP增殖,有利于机体对病理性刺激产生适应性反应以维持心功能。
目的:建立并优化心肌线粒体蛋白质组研究的双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术。方法:分离200 g雄性SD大鼠心肌线粗体,抽提心肌线粒体的全蛋白,以固相pH梯度、等电聚焦为第一向和垂直SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳...
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目的:建立并优化心肌线粒体蛋白质组研究的双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术。方法:分离200 g雄性SD大鼠心肌线粗体,抽提心肌线粒体的全蛋白,以固相pH梯度、等电聚焦为第一向和垂直SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向行双向凝胶电泳,对样品制备、上样量、电泳参数、不同固定方式等相关技术进行优化。凝胶行硝酸银染色．扫描仪获取凝胶图像并用PDQuest软件进行分析。结果:45％乙醇和5％乙酸的固定液对蛋白质固定效果曩好;构建了心肌线粒体高分辨率和重复性的双向凝胶电泳图谱。结论:建立了SD大鼠心肌线粒体蛋白质组的双向凝胶电泳分析技术。
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