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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2016年第3期51卷 164-168页

作者：刘春红杨晨丁国强马英陈小英吴旸郑春泉赵可庆复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科上海200031 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院检验科上海200031 复旦大学附属华山医院皮肤科上海200040 上海交通大学医学院附属瑞金医院皮肤科 200025 复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的观察光敏疗法（photodynamic therapy,PDT）对慢性鼻-鼻窦炎（CRS）患者鼻腔多重耐药金黄色葡萄球菌（金葡菌）和表皮葡萄球菌（表葡菌）的杀伤作用.方法选取保守治疗无效的CRS患者45例,术中使用拭子自中鼻道处取鼻腔分泌物,分离... 详细信息

目的观察光敏疗法（photodynamic therapy,PDT）对慢性鼻-鼻窦炎（CRS）患者鼻腔多重耐药金黄色葡萄球菌（金葡菌）和表皮葡萄球菌（表葡菌）的杀伤作用.方法选取保守治疗无效的CRS患者45例,术中使用拭子自中鼻道处取鼻腔分泌物,分离金葡菌和表葡菌并进行药敏鉴定,筛选能够形成生物膜的菌株.使用发光二极管（light emitting diode,LED）光动力治疗仪、5-氨基酮戊酸（5-aminolevulinic acid,ALA）光敏剂进行PDT参数测定及细菌杀伤实验.将获得的存活菌落形成单位（colony forming unit,CFU）进行以10为底的对数转换后,以Graph Pad Prism 5软件对数据进行统计分析.结果 45例患者中共收集金葡菌13株、表葡菌16株,皆为多重耐药菌,其中能够形成生物膜的菌株金葡菌4株,表葡菌5株.实验结果以lg（CFU）显示,游离金葡菌对照组为8.32±0.31,实验组为6.47±0.67,差异有统计学意义（=9.01,P＜0.01）;表葡菌对照组为8.34±0.20,实验组为6.97±0.59,差异有统计学意义（t=8.84,P＜0.01）.生物膜金葡菌对照组为8.68±0.05,实验组为6.90±0.96,差异有统计学意义（t=3.68,P＜0.05）;表葡菌对照组为8.67±0.05,实验组为7.29±0.61,差异有统计学意义（t=5.07,P＜0.01）.结论利用ALA作为光敏剂,LED作为光源的PDT能于体外有效杀伤CRS患者鼻腔来源的多重耐药金葡菌和表葡菌,为后续的安全性和体内实验及该治疗手段的临床应用奠定了基础.

关键词：光化学疗法鼻窦炎葡萄球菌,金黄色葡萄球菌,表皮抗药性,细菌

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鼠冠状病毒核衣壳蛋白电荷非均一性与其磷酸化的相关性

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微生物与感染 2019年第5期14卷 267-276页

作者：文荣王玉燕叶荣复旦大学上海医学院基础医学院教育部卫健委医科院医学分子病毒学重点实验室病原生物学系

核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白是病毒必不可少的结构蛋白,具有保护病毒基因组和调控病毒复制进程的重要作用。作为冠状病毒的经典模型,鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)N蛋白的磷酸化调控病毒RNA复制转录和装配已有报道。本研究发现... 详细信息

核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白是病毒必不可少的结构蛋白,具有保护病毒基因组和调控病毒复制进程的重要作用。作为冠状病毒的经典模型,鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)N蛋白的磷酸化调控病毒RNA复制转录和装配已有报道。本研究发现MHV-A59感染鼠neuro-2a细胞后期表达的N蛋白呈现明显的电荷不均一性,其中只有小部分发生磷酸化并被装配至病毒颗粒中;等电聚焦电泳显示N蛋白的电荷呈连续分布。用蛋白脂酰化抑制剂2-溴棕榈酸(2-BP)和蛋白酶体抑制剂MG-132处理后显示病毒复制水平不但与N蛋白电负性相关,而且与细胞的PKCαS657磷酸化和内质网蛋白水平相关。结果提示磷酸化修饰与鼠冠状病毒N蛋白电荷不均一性及稳定性密切相关。

关键词：鼠冠状病毒核衣壳蛋白电负性 PKCα 磷酸化

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疫苗犹豫及其引发的后果

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国际流行病学传染病学杂志 2019年第3期46卷 173-174页

作者：宋洁玉汪萱怡教育部/卫健委医学分子病毒学重点实验室暨生物医学研究院复旦大学上海医学院上海200032

疫苗犹豫与疫苗相伴而生。疫苗犹豫导致疫苗接种率下降,从而威胁疫苗所预防传染病的控制。虽然在我国尚未出现反疫苗运动,但存在不同程度的疫苗犹豫。因此,应进一步完善我国疫苗免疫体系,维系公众疫苗接种意愿,控制好我国疫苗可预防的... 详细信息

疫苗犹豫与疫苗相伴而生。疫苗犹豫导致疫苗接种率下降,从而威胁疫苗所预防传染病的控制。虽然在我国尚未出现反疫苗运动,但存在不同程度的疫苗犹豫。因此,应进一步完善我国疫苗免疫体系,维系公众疫苗接种意愿,控制好我国疫苗可预防的传染病。

关键词：疫苗反疫苗运动传染病控制

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丙型肝炎病毒高水平复制细胞株的构建及其机制初步研究

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微生物与感染 2020年第5期15卷 285-292页

作者：宋武慧易志刚复旦大学上海医学院基础医学院病原生物系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

旨在探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)cured细胞株的易感机制。本研究将体外转录的HCV RNA电转入肝癌细胞系Huh 7细胞,建立HCV复制子细胞株,用γ-干扰素(interferon,IFN)处理复制子细胞株,获得HCV cured Huh 7A和Huh 7B细胞株... 详细信息

旨在探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)cured细胞株的易感机制。本研究将体外转录的HCV RNA电转入肝癌细胞系Huh 7细胞,建立HCV复制子细胞株,用γ-干扰素(interferon,IFN)处理复制子细胞株,获得HCV cured Huh 7A和Huh 7B细胞株。用插入报告基因的HCV毒株Jc1-G感染上述细胞株,分别进行荧光素酶活性测定、蛋白质印迹法和荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测以验证其易感性。收集Huh 7、Huh 7.5、Huh 7A和Huh 7B细胞并利用IFN-α处理,之后用蛋白质印迹法及荧光定量PCR进行检测,验证细胞株中IFN诱生信号通路中关键因子内源性表达及抗病毒活性ISGs的激活水平。结果显示,在Huh 7A和Huh 7B细胞中检测不到病毒RNA,与Huh 7细胞一致。病毒感染实验中,与Huh 7细胞相比,Huh 7A和Huh 7B细胞株中荧光素酶活性增高百倍,病毒蛋白表达和RNA水平亦显著上调,与Huh 7.5细胞株中的表达水平接近。IFN信号通路实验中,与Huh 7细胞相比,Huh 7A和Huh 7B细胞株中RIG-I/MDA5/MAVS内源性蛋白表达和mRNA水平无明显差异;IFN-α处理细胞后IFN刺激基因isg56,mx1,mx2,oax1,oax2,viperin,cxcl10,ifitm1和ifitm3激活水平亦无显著变化。结果提示,本研究制备的Huh 7A和Huh 7B细胞株可支持HCV高水平复制,将为研究病毒复制机制提供有力的支持。

关键词：丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒cured细胞株 γ-干扰素干扰素刺激基因

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细胞因子在慢性乙型肝炎治疗中的研究进展

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临床肝胆病杂志 2022年第8期38卷 1710-1715页

作者：高子翔沈忠良刘晶谢幼华复旦大学教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海医学院基础医学院病原生物学系上海200032 复旦大学附属华山医院感染科上海市传染病与生物安全应急响应重点实验室国家传染病医学中心上海200040 复旦大学生物医学研究院上海200032 上海市重大传染病和生物安全研究院上海200032

目前,全球范围内仍有约2.5亿人慢性感染HBV,严重威胁人类的生命健康。慢性乙型肝炎(CHB)可进一步发展为肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌等肝脏疾病,而现有的临床抗病毒治疗药物有限,治愈率很低,急需研发新型抗病毒药物。HBV具有强嗜肝性,自... 详细信息

目前,全球范围内仍有约2.5亿人慢性感染HBV,严重威胁人类的生命健康。慢性乙型肝炎(CHB)可进一步发展为肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌等肝脏疾病,而现有的临床抗病毒治疗药物有限,治愈率很低,急需研发新型抗病毒药物。HBV具有强嗜肝性,自然情况下只感染人、黑猩猩等少数灵长类动物。免疫反应(固有免疫与适应性免疫)能否有效识别并清除或抑制HBV是导致病毒感染后不同结局的重要因素。其中,细胞因子发挥了重要的免疫调节作用。本文就一些关键细胞因子在CHB感染及治疗中的研究进展进行了总结与讨论。

关键词：乙型肝炎病毒细胞因子类乙型肝炎,慢性治疗学

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不同麻醉方法对人外周血淋巴细胞促炎性细胞因子基因表达的影响

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中国临床医学 2001年第6期8卷 583-585页

作者：张光明蒋豪薛张纲方浩王文逸瞿涤复旦大学附属中山医院麻醉科上海200032 复旦大学医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的 :研究复合麻醉中人外周血淋巴细胞IL - 8、IL - 1β基因表达 ,探讨异氟醚吸入和硬膜外阻滞对外周血炎性反应的影响。方法 :2 4例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚组 (n =12 )和硬膜外组 (n =12 ) ,在麻醉诱导后即刻和 4h分别取... 详细信息

目的 :研究复合麻醉中人外周血淋巴细胞IL - 8、IL - 1β基因表达 ,探讨异氟醚吸入和硬膜外阻滞对外周血炎性反应的影响。方法 :2 4例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚组 (n =12 )和硬膜外组 (n =12 ) ,在麻醉诱导后即刻和 4h分别取静脉血 2 0ml用外周血淋巴细胞分离液 (Ficoll)进行梯度离心 ,从收获的淋巴细胞中提取RNA ,逆转录合成cDNA ,PCR后电泳扫描求积 ,检测淋巴细胞IL - 8、IL - 1β的mRNA表达。结果 :异氟醚组麻醉维持 4h后比麻醉诱导后即刻IL - 8、IL - 1β的表达增加 ,(P <0 .0 5 ) ,硬膜外组麻醉维持 4h与麻醉诱导后即刻IL - 8、IL - 1β的表达无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论 :复合麻醉中吸入异氟醚能增强肝脏部分切除病人外周血淋巴细胞促炎性细胞因子mRNA表达 ,即在转录水平上 ,异氟醚能增强外周血炎性反应 ,而硬膜外阻滞无此效应。

关键词：麻醉细胞因子逆转录-聚合酶链反应外周血淋巴细胞

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糖苷酶抑制剂的基础与临床应用研究

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中国新药与临床杂志 2023年第3期42卷 145-152页

作者：刘瑞杰陈妍雯袁舒颖张绍兴芦鑫荣孔维溧陈力孙桂芹浙江中医药大学医学技术与信息工程学院浙江杭州310053 复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫生健康委员会重点实验室上海200032

糖苷酶可水解含糖化合物的糖苷键,在细胞代谢和病毒识别中发挥着重要作用。糖苷酶异常与多种疾病相关,如病毒感染、糖尿病、溶酶体贮积症和癌症等。糖苷酶抑制剂可调控糖苷酶活性,用于疾病治疗。现已从植物和微生物中分离出上百种糖苷... 详细信息

糖苷酶可水解含糖化合物的糖苷键,在细胞代谢和病毒识别中发挥着重要作用。糖苷酶异常与多种疾病相关,如病毒感染、糖尿病、溶酶体贮积症和癌症等。糖苷酶抑制剂可调控糖苷酶活性,用于疾病治疗。现已从植物和微生物中分离出上百种糖苷酶抑制剂,其中α-葡糖苷酶抑制剂阿卡波糖、葡糖神经酰胺合成酶抑制剂麦格司他等已应用于临床。此外,糖苷酶在一些疾病中表达下调或缺失,其激活剂的研发也值得重视。

关键词：糖苷酶糖苷水解酶抑制剂药理作用机制糖尿病癌治疗

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健康增龄人群血浆氧化三甲胺水平与年龄和性别的相关性研究

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老年医学与保健 2024年第1期30卷 23-27,32页

作者：杨浩王同尧潘苗苗钱程朗赵超复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部卫健委重点实验室上海200032 国家老年疾病临床医学研究中心(华山) 上海200040

目的探讨健康增龄过程中影响血浆氧化三甲胺水平的因素。方法对2020年12月—2021年1月在上海市宝山区社区医院进行体检的健康群体使用随机数进行抽样,共抽取87例,并签署知情同意书。研究样本年龄分布为30~96岁,平均(69.3±17.4)岁,... 详细信息

目的探讨健康增龄过程中影响血浆氧化三甲胺水平的因素。方法对2020年12月—2021年1月在上海市宝山区社区医院进行体检的健康群体使用随机数进行抽样,共抽取87例,并签署知情同意书。研究样本年龄分布为30~96岁,平均(69.3±17.4)岁,其中男性39例,女性48例。使用社区电子病历采集健康增龄人群的临床数据,并使用CKD-EPI估算受试者的肾小球滤过率(eGFR)。采用超高效液相色谱—质谱技术对健康人群的血浆氧化三甲胺(trimethylamine N-oxide,TMAO)及其前体物三甲胺(trimethylamine,TMA)进行绝对定量。根据性别对健康增龄人群的临床指标、TMAO和TMA进行分组比较。分析与年龄和TMAO的相关因素,并使用偏相关分析探讨增龄过程中影响血浆TMAO含量的因素。结果肌酐、红细胞数、血红蛋白、血小板、尿酸、直接胆红素和总胆固醇具有性别差异(P<0.05)。血尿素氮、TMAO、单个核细胞数、总胆汁酸、肌酐与年龄呈显著正相关(P<0.05),红细胞、血红蛋白、血小板、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、谷丙转氨酶、钙、肾滤过率与年龄呈显著负相关(P<0.05)。年龄、单核细胞、肌酐、总胆汁酸、血尿素氮、胆碱与TMAO呈显著正相关,eGFR与TMAO呈显著负相关(P<0.05)。在校正TMA和eGFR对TMAO的影响后,血浆TMAO含量仍与年龄呈显著正相关(P<0.05)。结论血浆TMAO水平在人群健康增龄过程中显著上升。在校正其前体来源(TMA)和排泄(肾小球滤过率)后,TMAO仍呈现出与年龄的显著正相关,表明增龄是血浆TMAO水平增加的独立因素。

关键词：增龄衰老健康氧化三甲胺三甲胺

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Hepatology|不同表观转录状态下HBV cccDNA微染色体的稳定性差异

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临床肝胆病杂志 2022年第6期38卷 1382-1382页

作者：王洋陈捷亮 WANG Y LI Y ZAI W 复旦大学基础医学院病原生物学系暨医学分子病毒学教育部/卫健委重点实验室不详

HBV感染肝细胞后在细胞核形成共价闭合环状DNA(cccDNA)并以微染色体形式长期存留。由于cccDNA难以被现有药物有效靶向和清除,被认为是HBV感染慢性化和乙型肝炎难治愈的核心分子基础。

关键词： cccDNA 乙型肝炎 HBV感染肝细胞微染色体靶向

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可调控性uPA诱导表达系统的构建及功能鉴定

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中国比较医学杂志 2015年第1期25卷 1-8,I0001页

作者：陈丽香周晓静刘文文周文江任晓楠于士颜周晓辉上海市公共卫生临床中心上海201508 蚌埠医学院第一附属医院安徽蚌埠233004 赤峰学院附属医院内蒙古赤峰024000 复旦大学医学分子病毒学教育部卫生部重点实验室上海200032

目的构建可调控性尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,u PA)诱导表达系统并进行相关鉴定,可为进一步构建可诱导型肝脏人源化u PA-SCID动物模型奠定基础。方法可调控性u PA诱导表达系统即在强力霉素(doxycycli... 详细信息

目的构建可调控性尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,u PA)诱导表达系统并进行相关鉴定,可为进一步构建可诱导型肝脏人源化u PA-SCID动物模型奠定基础。方法可调控性u PA诱导表达系统即在强力霉素(doxycycline,Dox)诱导下通过tet-on系统调控u PA表达。为此,需要构建两个重组质粒,分别为p LNHXO1O2-Alb-GLUC-FMN2A-rt TA和p LNHXO5O6-TRE2-u PA-IRES-Zs Green,前者引入Gaussia荧光素酶(gaussia enzyme fluorescent element,Gluc)与四环素反式激活因子(reverse tetracycline transactivator,rt TA)偶联表达,以便于监测rt TA表达水平;后者同时偶联表达Zs Green,以便于用荧光显微镜观察基因表达。重组逆转录病毒载体进行表达功能鉴定后,将构建质粒与病毒包装衣壳蛋白VSV-G质粒共转染GP2-293包装细胞系后获得具有感染能力的病毒颗粒,利用该病毒感染NIH/3T3细胞,并用G418筛选出阳性细胞;期间各取部分细胞,使用PCR方法鉴定其基因组内是否含有相应基因转录调控本。结果成功构建p LNHXO1O2-Alb-GLUC-FMN2A-rt TA和p LNHXO5O6-TRE2-u PA-IRES-Zs Green克隆。功能鉴定显示,p LNHXO1O2-Alb-GLUC-FMN2A-rt TA克隆可表达rt TA;p LNHXO5O6-TRE2-u PA-IRES-Zs Green克隆转染Hep G-Tet-on细胞,加Dox可诱导u PA表达。包装病毒感染NIH/3T3细胞后通过G418筛选获得单细胞克隆,通过PCR方法鉴定表明其基因组内含有相应转录本,从而成功构建u PA诱导表达稳定细胞株。结论本研究初步建立了可调控性u PA诱导表达系统,从而为可诱导肝损的u PASCID转基因小鼠的构建及在此基础上的肝脏人源化动物模型的建立奠定了基础。

关键词：可调控肝脏损伤 Alb uPA 肝脏人源化小鼠

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