检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2017年第3期12卷 156-163页

作者：谢玲玲王风华王德成赵超彭刚牛辰复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 复旦大学脑科学研究院上海200032 三峡大学医学院宜昌443002

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)作为重要的炎性细胞因子,在类风湿关节炎、感染性休克等疾病的发病中起重要作用。为探究TNF-α在宿主抵抗海分枝杆菌感染中的作用,本研究采用成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋... 详细信息

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)作为重要的炎性细胞因子,在类风湿关节炎、感染性休克等疾病的发病中起重要作用。为探究TNF-α在宿主抵抗海分枝杆菌感染中的作用,本研究采用成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9[clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9),CRISPR/Cas9]技术,使野生型斑马鱼TNF-α基因发生突变,成功构建并筛选出含有移码突变的TNF-α突变型(TNF-α-/-)斑马鱼。利用原位杂交技术,发现TNF-α-/-斑马鱼中TNF-αmRNA表达水平显著降低。与野生型斑马鱼相比,海分枝杆菌在TNF-α-/-斑马鱼体内扩散和增殖更显著。结果提示,本研究成功构建TNF-α-/-斑马鱼,有助于深入探究TNF-α在斑马鱼抵抗海分枝杆菌感染中的作用及其免疫调节机制。

关键词：成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9 肿瘤坏死因子α 突变型斑马鱼原位杂交细菌感染

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外泌体与病毒感染及HBV相关肝病的关系

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临床肝胆病杂志 2017年第8期33卷 1465-1470页

作者：贾小芳褚巧芳袁正宏上海市公共卫生临床中心复旦大学上海201508 医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室基础医学院病原生物学系上海医学院复旦大学上海200032

HBV感染后可导致肝脏组织炎症和肝细胞坏死,甚至发生肝纤维化等病理变化,驱动着"慢性肝炎-肝硬化-肝癌"的进展,但其机制尚不完全明了。被HBV感染的肝细胞与其他未感染细胞及宿主免疫系统之间发生相互作用的可能机制即通过肝... 详细信息

HBV感染后可导致肝脏组织炎症和肝细胞坏死,甚至发生肝纤维化等病理变化,驱动着"慢性肝炎-肝硬化-肝癌"的进展,但其机制尚不完全明了。被HBV感染的肝细胞与其他未感染细胞及宿主免疫系统之间发生相互作用的可能机制即通过肝脏微环境中由外泌体介导的细胞与细胞间的相互沟通。多项研究表明病毒感染可以调节外泌体的生成并影响其组成,病毒microRNA、蛋白质甚至整个病毒都可能被包裹进入外泌体,从而影响病毒的免疫识别或调节邻近细胞的功能。阐述了外泌体的产生和组成,及其在病毒感染过程中的作用,并进一步对外泌体与HBV感染等方面的研究进展进行了讨论。

关键词：外泌体肝炎病毒,乙型肝疾病

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上海市某三甲医院幽门螺杆菌耐药性和毒力与其生物膜形成能力的相关性研究

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微生物与感染 2017年第6期12卷 340-347页

作者：赵付菊胡玢婕王小飞孙启娟项平张艳梅瞿涤赵虎复旦大学附属华东医院检验科上海200040 复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 复旦大学附属华东医院胃镜室上海200040

为探讨复旦大学附属华东医院(以下简称本院)分离培养的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)的耐药性、毒力和感染特征与其生物膜形成能力的相关性,收集2014年12月—2015年6月于本院消化内镜中心的胃活检组织标本及相应临床病例资料,分... 详细信息

为探讨复旦大学附属华东医院(以下简称本院)分离培养的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)的耐药性、毒力和感染特征与其生物膜形成能力的相关性,收集2014年12月—2015年6月于本院消化内镜中心的胃活检组织标本及相应临床病例资料,分离培养获得幽门螺杆菌,分析菌株的耐药性、毒力基因型、临床病例特征。结果显示,从胃活检组织样本中共分离培养28株幽门螺杆菌,对左氧氟沙星(levofloxacin,LEV)、甲硝唑(metronidazole,MTZ)和克拉霉素(clarithromycin,CLA)的耐药率分别为32%、75%和11%,未发现阿莫西林(amoxicillin,AMX)耐药。单一药物耐药17株(17/28,61%),双重耐药10株(10/28,36%)。毒力基因cagA、oipA和vacAs1检出率为100%,未检出vacAs2。基因型vacAs1 m1占39%(11/28),vacAs1 m2占61%(17/28);iceA1占54%(15/28),iceA2占21%(6/28),iceA1 A2占25%(7/28);dupA^+占36%(10/28)。28株菌株均能形成生物膜,但能力不尽相同。单因素及独立样本t检验分析显示,45~59岁、iceA1^+dupA^-基因型和甲硝唑敏感菌株形成生物膜的能力较强。结果提示,本院分离的幽门螺杆菌对甲硝唑耐药率最高,双重耐药不容忽视。菌株主要毒力基因型为cagA、oipA、vacAs1 m2。幽门螺杆菌的生物膜形成能力与患者年龄有关,45~59岁组较强;携带毒力基因iceA1的菌株生物膜形成能力强;dupA基因型及甲硝唑耐药与菌株生物膜形成呈负相关。

关键词：幽门螺杆菌生物膜形成耐药毒力基因

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幽门螺杆菌耐药性及毒力与其生物膜形成能力相关性研究

幽门螺杆菌耐药性及毒力与其生物膜形成能力相关性研究

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中华医学会第十三次全国临床微生物学术年会暨第十三次全球华人临床微生物学与感染症学术年会

作者：赵付菊胡玢婕王小飞孙启娟项平张艳梅瞿涤赵虎复旦大学附属华东医院复发大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学附属华东医院胃镜室

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表皮葡萄球菌SrrAB生物信息分析及SrrA蛋白的原核表达

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中国人兽共患病学报 2016年第11期32卷 952-958页

作者：武有聪王涛韩海燕瞿涤白丽大理大学基础医学院病原生物学综合实验室大理671000 复旦大学上海医学院分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的分析表皮葡萄球菌SrrAB生物信息,表达及纯化SrrA蛋白,为SrrA功能研究奠定基础。方法以表皮葡萄球菌SE1457基因组为模板,PCR扩增srrA基因,构建重组表达质粒pET28a-srrA,转入大肠杆菌BL21,利用纯化的重组蛋白SrrA免疫小鼠,制备SrrA多... 详细信息

目的分析表皮葡萄球菌SrrAB生物信息,表达及纯化SrrA蛋白,为SrrA功能研究奠定基础。方法以表皮葡萄球菌SE1457基因组为模板,PCR扩增srrA基因,构建重组表达质粒pET28a-srrA,转入大肠杆菌BL21,利用纯化的重组蛋白SrrA免疫小鼠,制备SrrA多克隆抗体,并检测SrrA在表皮葡萄球菌不同生长时期的表达水平。序列比对利用Clustalw2软件,蛋白结构域分析用DNAMAN软件。结果表皮葡萄球菌SE1457SrrAB单独组成一个操作子,SrrA位于胞浆中,与金黄色葡萄球菌和枯草杆菌类似物的同源性分别为95%和65%,SrrB为跨膜蛋白,与上述细菌类似物的同源性分别为71%和33%;表皮葡萄球菌SrrA于对数生长中期表达量最高。结论成功表达并纯化了表皮葡萄球菌SrrA蛋白,为SrrAB下游调控机制研究奠定基础。

关键词：表皮葡萄球菌 SrrAB 生物信息原核表达

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粪肠球菌临床株生物膜形成特征及相关毒力因子研究

粪肠球菌临床株生物膜形成特征及相关毒力因子研究

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第四届临床微生物学与感染病学国际论坛暨首届微生物耐药防控高峰论坛

作者：郑金鑫吴旸林志伟姚伟明陈重李多云邓启文余治健瞿涤深圳大学附属南山区人民医院感染疾病科深圳市内源性感染诊治重点实验室深圳市 518052 复旦大学医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室复旦大学上海医学院上海市 200032

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GeneXpert MTB／RIF技术在结核病早诊断中的应用

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中国防痨杂志 2017年第1期39卷 71-75页

作者：路丽苹陆斌刘梅洪建军郭晓芹高谦上海市松江区疾病预防控制中心结核病防治科 201620 上海市松江区中心医院检验科复旦大学上海医学院教育部、卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的评估GeneXpertMTB／RIF技术（简称XpertMTB／RIF）检测结核分枝杆菌（MTB）及其利福平耐药的可行性。方法选取2015年1—6月上海市松江区结核病定点医院结核科门诊连续纳入、初次就诊的疑似结核病患者，共556例。收集患者痰液标本，... 详细信息

目的评估GeneXpertMTB／RIF技术（简称XpertMTB／RIF）检测结核分枝杆菌（MTB）及其利福平耐药的可行性。方法选取2015年1—6月上海市松江区结核病定点医院结核科门诊连续纳入、初次就诊的疑似结核病患者，共556例。收集患者痰液标本，分别进行涂片抗酸染色镜检法（简称“涂片法”）、液体分枝杆菌培养管（MGIT）培养法（简称“液体培养法”）、传统比例法药物敏感性试验（简称“药敏试验”）和XpertMTB／RIF检测，比较XpertMTB／RIF法和传统方法检测痰标本中MTB及其耐药性的效能。结果537例患者经涂片法、液体培养法和XpertMTB／RIF检测，阳性率分别为17．32％（93／537）、28．31％（152／537）和28．12％（151／537）。以液体培养为金标准，XpertMTB／RIF检测的敏感度和特异度分别为90．60％（135／149）和95．84％（369／385），且敏感度高于涂片法[涂片法的敏感度为60．53％（92／152）]，差异有统计学意义（χ2=36．71，P％0．01）；XpertMTB／RIF检测涂阳标本的敏感度为96．63％（86／89），明显高于检测涂阴标本的敏感度ES1．67％（49／60）]，差异有统计学意义（χ2=9．43，P〈0．01）。以比例法药敏试验结果为金标准，XpertMTB／RIF检测利福平耐药的敏感度为90．00％（9／10），特异度为99．07％（106／107），一致率为98．29％（115／117）。结论XpertMTB／RIF技术操作简便、快速、安全，敏感度和特异度较高，对基层实验室早期检测MTB及判定利福平耐药具有重要价值。

关键词：分枝杆菌,结核痰核酸扩增技术早期诊断利福平抗药性

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医学微生物学实验教学中的生物安全问题探讨

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中国病原生物学杂志 2016年第2期11卷 I0001-I0003页

作者：武有聪王涛白丽瞿涤大理大学病原生物学综合实验室云南大理671000 复旦大学上海医学院分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

医学院校医学微生物学实验室是培养医学生生物安全意识和无菌观念的重要场所,其开展的实验内容多与人类感染性疾病关系密切。在保证生物安全的条件下培养高素质医学人才是高校管理者探究的热点问题。结合本校医学微生物学实验室存在的... 详细信息

医学院校医学微生物学实验室是培养医学生生物安全意识和无菌观念的重要场所,其开展的实验内容多与人类感染性疾病关系密切。在保证生物安全的条件下培养高素质医学人才是高校管理者探究的热点问题。结合本校医学微生物学实验室存在的生物安全问题,对实验室的安全管理展开探讨,为预防实验室生物安全事故提供参考。

关键词：生物安全实验教学医学微生物学

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高压水动力法建立表面抗原表达缺失的乙型肝炎转染小鼠模型及初步评估

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肝脏 2017年第10期22卷 894-898页

作者：张毅陈捷亮方钟徐国光李军南京医科大学 210029 上海市公共卫生临床中心肝病一科复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫计委重点实验室南京医科大学第一附属医院感染病科

目的探讨HBsAg在小鼠体内模型中对宿主免疫应答调节及病毒感染慢性化中的作用。方法在已有高压水动力法转染pAAV-HBV1.2质粒建立乙肝小鼠模型的基础上,通过点突变技术引入终止密码子至pAAV-HBV1.2质粒上的HBsAg读码框,构建HBsAg无法转... 详细信息

目的探讨HBsAg在小鼠体内模型中对宿主免疫应答调节及病毒感染慢性化中的作用。方法在已有高压水动力法转染pAAV-HBV1.2质粒建立乙肝小鼠模型的基础上,通过点突变技术引入终止密码子至pAAV-HBV1.2质粒上的HBsAg读码框,构建HBsAg无法转录的突变质粒,再利用该质粒构建HBsAg表达缺失的乙肝小鼠模型。通过比较原始质粒建立的乙肝模型小鼠,检测分析外周血中HBV抗原与DNA等病毒感染指标,比较肝脏病变和免疫细胞浸润情况。结果成功构建了HBsAg缺失的乙肝模型小鼠:在乙肝模型小鼠和HBsAg缺失突变的模型小鼠外周血中均能检测到4 COI/mL水平的HBeAg,两组小鼠没有差异,但只有乙肝小鼠体内能检测到102 COI/mL以上的HBsAg和103至106拷贝/mL的HBV DNA,HBsAg缺失的小鼠中无法检测到HBsAg和HBV DNA;动态监测显示HBeAg在乙肝和HBsAg缺失突变的两组小鼠中的阳性率均逐步降低,在HBsAg缺失突变组中降低的更明显,第8周时仅有20%的小鼠为HBeAg阳性,而此时未突变乙肝组的阳性率为60%;免疫组织化学结果显示:在阴性对照小鼠的肝脏结构较完整,未见聚集的浸润免疫细胞,而乙肝和HBsAg缺失的乙肝小鼠肝小叶结构均松散,乙肝小鼠肝脏中有聚集的浸润性免疫细胞,HBsAg缺失的小鼠肝脏缺少免疫细胞的聚集,却存在严重的肝细胞毛玻璃样变性。结论成功构建了HBsAg缺失的乙肝转染小鼠模型;并发现HBsAg在HBV完整病毒颗粒包装和出胞,以及肝脏病变和免疫细胞浸润过程中发挥了重要的作用。

关键词：慢性乙型肝炎乙肝病毒乙肝表面抗原高压水动力法毛玻璃样病变免疫细胞浸润

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新疆野生及栽培一枝蒿多糖对树突状细胞免疫功能的影响

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生物技术通报 2016年第7期32卷 217-226页

作者：杨雨杨秀梅赵干俞益张慧珍张爱莲新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

研究和比较新疆野生与栽培一枝蒿多糖对骨髓来源树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟和功能的影响。超声法制备野生及栽培一枝蒿粗多糖;Sevage法除蛋白;蒽酮-硫酸法测定多糖含量;流式细胞术检测DCs的成熟;ELISA法检测IL-12和TNF-α的... 详细信息

研究和比较新疆野生与栽培一枝蒿多糖对骨髓来源树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟和功能的影响。超声法制备野生及栽培一枝蒿粗多糖;Sevage法除蛋白;蒽酮-硫酸法测定多糖含量;流式细胞术检测DCs的成熟;ELISA法检测IL-12和TNF-α的表达水平。结果显示,野生及栽培一枝蒿多糖含量分别为26.18%和22.14%,去除蛋白质后多糖含量分别为30.94%和27.06%;野生及栽培一枝蒿多糖均可以显著增强小鼠骨髓来源CD11c+DCs表面分子CD40,CD86及CD80的表达(P<0.05);显著促进IL-12和TNF-α的表达(P<0.05);显著降低DCs吞噬FITC-Dextran的能力;且相同剂量对DCs的免疫活性无显著性差异(P>0.05);除蛋白和不除蛋白的野生及栽培一枝蒿多糖的免疫活性均无显著差异(P>0.05)。新疆野生和栽培一枝蒿多糖含量差异较小,并均可以促进小鼠骨髓来源DCs的成熟和功能,且差异不大。

关键词：野生一枝蒿栽培一枝蒿多糖树突状细胞

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