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氟对体外培养大鼠成骨细胞中核因子-κB受体活化因子配体／骨保护素表达的影响

中华地方病学杂志 2014年第1期33卷 37-40页

作者：喻茂娟王丽华秦祥慧金慰芳高建军贵阳医学院流行病学教研室 550004 黄河科技学院郑州市食品药品监督管理局管城分局复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室

目的探讨氟对体外培养大鼠成骨细胞中骨保护素（OPG）／核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）／核因子一KB受体活化因子（RANK）信号传导通路的影响。方法取新生24h内SD大鼠仔鼠，应用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞，取第2代成骨细胞，... 详细信息

目的探讨氟对体外培养大鼠成骨细胞中骨保护素（OPG）／核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）／核因子一KB受体活化因子（RANK）信号传导通路的影响。方法取新生24h内SD大鼠仔鼠，应用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞，取第2代成骨细胞，加入不同浓度[O（对照）、1×10^-3、1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7mol／L]的氟，培养24、48h后，采用实时荧光定量PCR法检测成骨细胞RANKL、OPGmRNA表达；蛋白免疫印迹（Westernblot）法检测成骨细胞RANKL、OPG蛋白表达。结果①染氟24h，成骨细胞RANKL、OPGmRNA表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为30．95、22．62，P均〈0．01），其中1×10^-5mol／L组成骨细胞RANKL mRNA（5．99±0．39）和1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6mol／L组OPG mRNA（3．52±0．09、4．81±0．15、3．68±0．04）的表达高于对照组（3．20±0．19、3．09±0．58，P均〈0．05），1×10^-3mol／L组RANKL mRNA（2．29±0．18）的表达低于对照组（P均〈0．05）；染氟48h，成骨细胞RANKL、OPG mRNA的表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为26．62、5．72，P均〈0．01），其中1×10^-5mol／L组成骨细胞RANKL、OPGmRNA（6．67±0．49、5．05±0．51）的表达高于对照组（4．29±0．07、4．34±0．12，P均〈0．05），1×10^-3 mol／L组OPG mRNA（3．63±0．49）的表达低于对照组（P〈0．05）。②成骨细胞RANKL蛋白表达在染氟24、48h后，组间比较差异无统计学意义（F值分别为0．07、0．49，P均〉0．05）。成骨细胞OPG蛋白的表达，染氟24h后组间比较差异有统计学意义（F=3．26，P〈0．05），1×10^-5mol／L组（1．45±0．10）高于对照组（1．05±0．06，P〈0．05）；染氟48h，成骨细胞OPG蛋白表达组间比较差异无统计学意义（F=0．44，P〉0．05）。结论氟在低浓度时以成骨活动为主；但随着染氟时间和浓度的增加，促进破骨细胞的分化、成熟，以骨吸收为主。

关键词：氟成骨细胞骨保护素核因子-κB受体活化因子配体

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氟对大鼠成骨细胞胰岛素样生长因子－1和其受体表达的影响

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中华地方病学杂志 2013年第3期32卷 267-269页

作者：喻茂娟王丽华秦祥慧金慰芳高建军贵阳医学院公共卫生学院流行病学教研室 550004 河南省郑州市黄河科技学院河南省郑州市管城区卫生监督所复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室

目的探讨氟对大鼠成骨细胞胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和受体mRNA、蛋白表达的影响。方法应用酶消化法分离SD大鼠成骨细胞，取第2代成骨细胞，加入不同浓度[0（对照）、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3mol／L]的氟（FL），在培养24、48h... 详细信息

目的探讨氟对大鼠成骨细胞胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和受体mRNA、蛋白表达的影响。方法应用酶消化法分离SD大鼠成骨细胞，取第2代成骨细胞，加入不同浓度[0（对照）、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3mol／L]的氟（FL），在培养24、48h时采用免疫放射法检测成骨细胞培养液中IGF-1含量：荧光定量PCR法检测成骨细胞IGF-1受体mRNA表达；Westernblot法检测成骨细胞IGF-1受体蛋白表达。结果①随染氟剂量增加，培养24、48h的成骨细胞培养液中IGF-1含量有先升后降的趋势，24h时10μmol／L组IGF-1含量[（65．45±4．84）ng／L]最高，与对照组[（38．83±3．48）ng／L]比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；48h时10-5mol／L组IGF-1含量[（59．14±1．53）ng／L]最高，与对照组[（33．79±1．84）ng／L]比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②24、48h10-5mol／L组成骨细胞IGF-1受体mRNA表达（0．0055±0．0004、0．0262．±0：0040）明显高于相应对照组（0．0022士0．0001、0．0073±0．0008，P均〈0．05）。③随染氟剂量增加，培养24、48h的成骨细胞IGF-1受体蛋白表达有先升后降的趋势，其中24h10-5 mol／L组（1．39±0．16）与对照组（0．86±0．12）比较，差异有统计学意义（P〈0．05），48h各染氟组与对照组比较，差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论氟可影响大鼠成骨细胞IGF—l和受体mRNA、蛋白表达，提示IGFs信号传导通路系统对氟调控骨代谢有重要作用。

关键词：氟成骨细胞胰岛素样生长因子-1

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氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响

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中国地方病学杂志 2011年第3期30卷 266-269页

作者：杜光喻茂娟徐小雅金慰芳高建军贵阳医学院流行病学教研室 550004 复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室

目的观察氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响,探讨其作用机制.方法机械分离法作用于新生SD大鼠四肢长骨,于TC199培养液（含10%胎牛血清）中获得破骨细胞和骨髓基质细胞.将破骨细胞接种于96孔培养板和象牙片培养,而骨髓... 详细信息

目的观察氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响,探讨其作用机制.方法机械分离法作用于新生SD大鼠四肢长骨,于TC199培养液（含10%胎牛血清）中获得破骨细胞和骨髓基质细胞.将破骨细胞接种于96孔培养板和象牙片培养,而骨髓基质细胞接种于6孔培养板培养,分别于2 h后换液并染氟（氟化钠）,对照组、低氟组、中氟组、高氟组染氟剂量分别为0、2.5×10-5、5.0×10-5、10.0×10-5mol/L.培养2、5d后对培养板中破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,光镜下计数破骨细胞数量;培养5 d后象牙片经1%甲苯胺蓝染色,光镜下分析破骨细胞骨吸收陷窝面积.骨髓基质细胞染氟作用8 h后提取总RNA,实时荧光定量PCR法检测细胞核因子κβ受体活化因子配体（RANKL）和骨保护素（0PG）mRNA表达水平.结果 ①体外培养2 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞数量分别为（337.5 4-70.5）、（447.5 ±43.4）、（472.9±34.8）、（475.3±24-3）个/孔,各染氟组明显高于对照组（P均〈0.05）;体外培养5 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞数量分别为（92.5±22.1）、（123.0±26.4）、（135.5 ±22.2）、（136.9 ±23.0）个/孔,各染氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.②体外培养5 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞骨吸收陷窝面积分别为（0.088±0.030）、（0.100 ±0.018）、（0.152±0.015）、（0.242±0.031）mm2/片,中氟组和高氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.③对照组、低氟组、中氟组、高氟组骨髓基质细胞RANKL/OPG mRNA表达比值分别为100.00±56.02、144.95±97.21、223.25 ±184.48、193.98 ±137.93,中氟组和高氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.结论氟中毒可引起体外培养破骨细胞数量增多,促进其细胞分化及骨吸收活性,该作用可能与其上调 RANKL/OPC,mRNA表达比值有关.

关键词：氟化物中毒破骨细胞细胞培养技术细胞核因子κβ受体活化因子配体骨保护素

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肾上腺素受体对骨髓基质干细胞骨相关基因转录的调节作用

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中华实验外科杂志 2011年第4期28卷 532-532页

作者：黄铜勇马昕夏新雷金慰芳戴志杰黄煌渊姜建元复旦大学附属华山医院骨科上海200040 复旦大学附属放射医学院研究所骨代谢研究室

骨髓基质干细胞（BMSCs）存在肾上腺素能受体，交感神经可能通过它们调节骨髓基质细胞的增殖和分化，本研究旨在观察肾上腺素受体对骨髓基质干细胞骨相关基因转录的调节作用。

关键词：骨髓基质干细胞相关基因转录肾上腺素受体调节肾上腺素能受体骨髓基质细胞交感神经

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槐角苷对卵巢摘除引起的大鼠骨质疏松症和生殖系统萎缩的治疗作用的试验研究

槐角苷对卵巢摘除引起的大鼠骨质疏松症和生殖系统萎缩的治疗作用...

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2009第十七届全国中西医结合骨伤科学术研讨会

作者：杜宁金慰芳王洪复高建军周轶丰盛梅许莹莹徐小雅顾淑珠上海金木生物科技有限公司上海复旦大学医学院放射医学研究所骨代谢研究室

目的:观察槐角苷口服给药对卵巢摘除(Ovariectomy OVX)引起的大鼠骨质疏松症(Osteoporosis,OP)的治疗作用.方法:①应用双侧卵巢摘除建立模拟绝经后原发性OP,实验动物术后3月取假摘卵组(Sham)和卵巢摘除组(OVX)各10只,颈动脉放血处死取... 详细信息

目的:观察槐角苷口服给药对卵巢摘除(Ovariectomy OVX)引起的大鼠骨质疏松症(Osteoporosis,OP)的治疗作用.方法:①应用双侧卵巢摘除建立模拟绝经后原发性OP,实验动物术后3月取假摘卵组(Sham)和卵巢摘除组(OVX)各10只,颈动脉放血处死取子宫测重,取股骨和腰椎作骨量和骨生物力学性能测定,确认卵巢摘除大鼠骨质疏松模型建立后进行实验分组.槐角苷治疗分为20mg/Kg/日、40mg/Kg/日和80mg/Kg/日三组,灌服给药,每周6次,并设雌激素(E,诺坤复360ug/Kg/日)、中药制剂(XLGB,仙灵骨葆270mg/Kg/日)和选择性雌激素受体调节剂雷洛昔芬(SERM,易维特3mg/Kg/日)治疗对照组,共治疗6个月.同时采用观察骨量、骨生物力学、骨微结构及骨代谢相关形态计量、血、尿生化指标,及对子宫、阴道的作用,综合评价槐角苷对OP模型的治疗效果.结果:显示卵巢摘除大鼠的骨量、骨生物力学性能均较对照组显著性下降,表明双侧卵巢摘除方法诱导的大鼠骨质疏松模型成立.对OVX模型大鼠,槐角苷各剂量组(20、40、80mg/Kg/d)治疗均能显著增加腰椎与股骨骨密度、股骨干重与灰重、提高股骨三点弯曲与腰椎压缩最大载荷,提高腰椎骨小梁百分面积(P<0.05～0.001),降低血碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)与尿胶原吡啶啉(pyridinoline,Pyd)量,增加矿化沉积率.槐角苷各组与对照药物诺坤复,仙灵骨葆与易维特组比较各项指标均无显著性差别(P>0.05).个别项目优于仙灵骨葆组(股骨三点弯曲最大载荷)和易维特组(腰椎压缩最大载荷).卵巢摘除各组大鼠血清E2水平均显著低于Sham组与诺坤复对照组(P<0.001,P<0.001).槐角苷治疗各组与OVX组比较有增高趋势但无统计学意义;卵巢摘除各组子宫湿重均显著低于Sham组(P<0.01～P<0.001).与OVX组比较,低、中剂量槐角苷治疗后子宫重量稍增加(P>0.05),80mg/Kg组的增加具有显著性(P<0.05),但显著低于诺坤复对照组(P<0.001);大鼠的子宫内膜厚度除诺坤复组外均显著低于Sham组(P<0.001).槐角苷治疗后子宫内膜厚度稍高于摘卵组,但无统计学意义,并均显著低于诺坤复对照组(P<0.001).各药物组大鼠内膜下腺体与OVX组比较无显著差异;与Sham组比较,阴道粘膜厚度除诺坤复对照组外均呈显著下降(P<0.001),与OVX组比较,槐角苷治疗后三种剂量均显著增加阴道粘膜厚度(P<0.05～0.001),但均显著低于诺坤复对照组(P<0.001).结论:槐角苷对卵巢摘除诱发的大鼠OP具有治疗作用,可增加骨量、提高骨生物力学性能、改善骨微结构,20、40、80mg/Kg/d的治疗效果均具有显著性,其治疗作用似通过抑制骨转换而实现.同时表明槐角苷在有效治疗骨质疏松症的剂量对生殖系统仅具有微弱的雌激素样作用,具有开发成天然选择性雌激素受体调节剂可能.

关键词：槐角苷卵巢摘除治疗作用生殖系统骨质疏松症

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老年骨质疏松症病理机制与防治原则

老年骨质疏松症病理机制与防治原则

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第六届全国骨质疏松及代谢性骨病学术会议

作者：王洪复复旦大学上海医学院(原上海医科大学)放射医学研究所骨代谢研究室

骨质疏松症是一种主要发生在绝经后妇女和老年人群中的代谢性骨病，表现为骨量明显丢失和骨脆性增加、容易发生骨折，因而给老年人带来极大的痛苦。本文介绍了老年骨质疏松症主要病理机制，分析了老年骨质疏松症防治原则。

关键词：老年人群骨质疏松症病理机制防治对策

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补肾富钙中药对大鼠卵巢辐射损伤所致骨质疏松形态计量学的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2008年第5期28卷 488-491页

作者：高艳虹高建军金慰芳王洪复汤亭亭戴尅戎上海交通大学医学院新华医院老年科上海200092 复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032 上海交通大学医学院第九人民医院骨科上海200011

目的探讨补肾富钙中药对大鼠卵巢辐射损伤所致骨质疏松形态计量学的影响。方法40只SD大鼠随机分为四组(n=10),分别为假手术组(灌服1%纤维素90 d)、模型组(以50 Gyγ射线局部照射大鼠卵巢建立卵巢辐射损伤模型,1%纤维素灌服90 d)、尼尔... 详细信息

目的探讨补肾富钙中药对大鼠卵巢辐射损伤所致骨质疏松形态计量学的影响。方法40只SD大鼠随机分为四组(n=10),分别为假手术组(灌服1%纤维素90 d)、模型组(以50 Gyγ射线局部照射大鼠卵巢建立卵巢辐射损伤模型,1%纤维素灌服90 d)、尼尔雌醇组(造模后给予尼尔雌醇灌胃90 d)和补肾富钙中药组(造模后给予补肾富钙中药灌胃90 d)。各组大鼠于处死前第14天和第4天分别腹腔注射盐酸四环素(30 mg/kg)进行标记,处死后取右侧股骨组织和L4腰椎组织分别进行骨组织形态计量和扫描电镜观察。结果与模型组比较,补肾富钙中药组和尼尔雌醇组的骨小梁体积显著增加,骨吸收表面减少;尼尔雌醇组的骨形成表面和矿化沉积率下降,但在补肾富钙中药组则无显著变化。扫描电镜观察显示,模型组骨小梁变细、中断、排列稀疏,而补肾富钙中药组和尼尔雌醇组上述变化较轻微。结论补肾富钙中药可有效预防卵巢辐射损伤诱发的骨质疏松。

关键词：补肾富钙中药尼尔雌醇骨质疏松形态计量电离辐射

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卵巢辐射损伤对大鼠腰椎骨密度和生物力学的影响

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医用生物力学 2008年第2期23卷 167-170页

作者：高艳虹高建军金慰芳王洪复汤亭亭戴尅戎上海交通大学医学院附属新华医院老年科上海200092 复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032 上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科上海200011

目的探讨大鼠卵巢辐射损伤后腰椎骨密度、微结构和生物力学的改变。方法手术暴露大鼠双侧卵巢并应用50Gy的γ射线局部照射,术后90d取大鼠腰椎,DEXA测定骨密度,扫描电镜显示微结构,并行压缩实验检测腰椎最大载荷。结果与假手术组相比,卵... 详细信息

目的探讨大鼠卵巢辐射损伤后腰椎骨密度、微结构和生物力学的改变。方法手术暴露大鼠双侧卵巢并应用50Gy的γ射线局部照射,术后90d取大鼠腰椎,DEXA测定骨密度,扫描电镜显示微结构,并行压缩实验检测腰椎最大载荷。结果与假手术组相比,卵巢辐射组大鼠的腰椎骨密度显著减少(P<0.05),骨微结构破坏,生物力学性能下降(P<0.05)。结论卵巢辐射损可导致大鼠腰椎的骨质疏松样改变。

关键词：卵巢辐射骨质疏松骨密度生物力学

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FSHR基因剔除致雌性鼠骨骼呈现骨质疏松的表型特征

FSHR基因剔除致雌性鼠骨骼呈现骨质疏松的表型特征

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中华医学会第四次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议

作者：高建军 Tiwari-Pandey R Miao Dengshun 金慰芳王洪复 Goltzman D 复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室加拿大蒙特利尔临床研究所分子生殖研究室加拿大麦吉尔大学医学中心钙盐研究室

卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)对骨代谢影响的间接作用机制已被广泛接受。随着破骨细胞等细胞表面卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)表达的发现,其直接作用机制在老年性和绝经后骨质疏松病... 详细信息

卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)对骨代谢影响的间接作用机制已被广泛接受。随着破骨细胞等细胞表面卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)表达的发现,其直接作用机制在老年性和绝经后骨质疏松病理中的作用研究倍受重视。FSHR介导FSH的生理效应。FSHR 基因剔除的雌性鼠表现为卵巢发育不良和生殖能力的减低或丧失,并出现骨量的丢失。但其骨表型特点和骨量丢失的机制以及FSH直接作用对骨代谢改变的影响等尚未阐明。目的研究雌性FSHR基因剔除

关键词：基因剔除骨质疏松 OVX

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锦鸡儿有效成分对卵巢摘除大鼠骨质疏松的防治作用

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复旦学报（医学版） 2005年第3期32卷 305-308页

作者：金慰芳王洪复高建军徐培康徐爱红骆宏丰胡昌奇复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032 复旦大学放射医学研究所药学院天然药化教研室上海200032

目的　观察天然药物锦鸡儿(Caraganasinica)的有效部位(HUE)对卵巢摘除(ovariectomy ,OVX)诱发大鼠骨质疏松症(osteoporosis,OP)的防治作用。方法　应用双侧卵巢摘除方法,建立模拟绝经后大鼠模型。每天给予0 .2 75与0 .5 5 g/kgHUE治疗... 详细信息

目的　观察天然药物锦鸡儿(Caraganasinica)的有效部位(HUE)对卵巢摘除(ovariectomy ,OVX)诱发大鼠骨质疏松症(osteoporosis,OP)的防治作用。方法　应用双侧卵巢摘除方法,建立模拟绝经后大鼠模型。每天给予0 .2 75与0 .5 5 g/kgHUE治疗3个月,并与雌激素药物对照。观察骨量(干重、灰重、钙含量与骨密度)、骨生物力学(股骨三点弯曲载荷)、骨小梁微结构及血ALP、尿Pyd等骨代谢生化指标。结果　HUE各剂量组的骨量、骨生物力学性能及骨小梁形态计量均较OVX对照组明显增高(P <0 .0 5～0 .0 0 1)或有增加趋势;HUE药物组大鼠的子宫重量高于OVX对照组(P <0 .0 1～0 .0 0 1) ,但显著低于雌激素对照组(P <0 .0 0 1) ;血ALP较OVX组呈增加、尿Pyd/Cr较OVX组呈降低趋势。结论　HUE对卵巢摘除大鼠骨质疏松症具有预防作用;对子宫可能具有弱的雌激素样效应。

关键词：锦鸡儿大鼠卵巢摘除骨质疏松预防

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