检索结果-内蒙古大学图书馆

中华口腔医学杂志 2010年第8期45卷 498-501页

作者：王艳冯希平谢幼华陶丹英栾晓玲上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院口腔预防儿童科上海市口腔医学研究所上海市口腔医学重点实验室 200011 复旦大学医学分子病毒学教育部卫生部重点实验室

目的克隆唾液链球菌57.Ⅰ的尿素酶基因,并在不添加外源性镍离子的情况下表达出有活性的尿素酶,以期为进一步研究口腔细菌的尿素分解机制和牙菌斑生物膜的产碱活性提供依据.方法将尿素酶基因分成前、中、后三段,分别设计引物,应用聚合... 详细信息

目的克隆唾液链球菌57.Ⅰ的尿素酶基因,并在不添加外源性镍离子的情况下表达出有活性的尿素酶,以期为进一步研究口腔细菌的尿素分解机制和牙菌斑生物膜的产碱活性提供依据.方法将尿素酶基因分成前、中、后三段,分别设计引物,应用聚合酶链反应（PCR）法进行克隆并测序鉴定;进而采用双酶切的方法将分段克隆的产物逐步连接为完整的尿素酶基因;将含有完整尿素酶基因的质粒转化感受态大肠杆菌TG-1,经酚红脲酶试验检测其尿素分解活性.结果所克隆的唾液链球菌57.Ⅰ尿素酶基因序列正确;无需添加氯化镍,该克隆能够在大肠杆菌中表达出有活性的尿素酶,分解培养基中的尿素产生氨,升高环境中的pH值.结论本研究克隆的唾液链球菌尿素酶基因无需添加外源性镍离子就能够表达出尿素分解活性,可用于今后替代疗法防龋研究中构建更适合临床应用的产碱效应菌.

关键词：链球菌,口腔尿素酶镍龋齿

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤脓肿小鼠感染模型的建立与评估

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中国实验动物学报 2010年第3期18卷 221-224,I0007页

作者：王德成王星周文江彭秀华高谦教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院上海200032 上海市公共卫生临床中心复旦大学附属公共卫生临床中心上海201508

目的建立耐甲氧西林金黄葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)小鼠皮肤脓肿感染模型,观察脓肿形成动态变化及药物对脓肿愈合的影响。方法 45只SPF级裸鼠随机分为PBS对照组、感染组及给药组,用临床分离鉴定的ST-... 详细信息

目的建立耐甲氧西林金黄葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)小鼠皮肤脓肿感染模型,观察脓肿形成动态变化及药物对脓肿愈合的影响。方法 45只SPF级裸鼠随机分为PBS对照组、感染组及给药组,用临床分离鉴定的ST-239型MRSA菌株皮下注射感染裸鼠,对脓肿的形成过程进行时相性观察,测定脓肿体积的变化,并通过H.E染色观察皮肤的组织病理学改变。结果 PBS处理组小鼠皮肤无脓肿形成,显微镜下皮肤各层结构清楚;感染组和给药组可见到典型的脓肿,临床症状的时相性过程明显,感染组小鼠皮肤真皮层的胶原纤维消失,可见大量炎性细胞浸润,给药组小鼠的脓肿体积在整个实验周期内低于感染组,且在第5天时与感染组相比有差异。结论成功建立MRSA小鼠皮肤脓肿感染模型,该模型的建立可为进一步研究来源于临床MRSA菌株的病原特性、发病机制、治疗方法等提供可靠的动物模型。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤脓肿裸鼠

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α-Actinin影响丙型肝炎病毒非结构蛋白与脂筏的关联及复制

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微生物与感染 2010年第4期5卷 218-224页

作者：宋武慧潘婷婷袁正宏复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

本文旨在探讨α-actinin参与丙型肝炎病毒(HCV)复制的机制。将α-actinin转染Huh7.5细胞,用JFH1感染,发现过表达α-actinin可显著增加HCVRNA水平及非结构蛋白表达,感染性HCV颗粒也同时增多。膜漂浮实验显示,α-actinin可与HCV非结构蛋白... 详细信息

本文旨在探讨α-actinin参与丙型肝炎病毒(HCV)复制的机制。将α-actinin转染Huh7.5细胞,用JFH1感染,发现过表达α-actinin可显著增加HCVRNA水平及非结构蛋白表达,感染性HCV颗粒也同时增多。膜漂浮实验显示,α-actinin可与HCV非结构蛋白NS5A共定位于脂筏。抑制内源性α-actinin表达,可使复制子细胞内NS5A表达减少,且对非离子去污剂敏感而从脂筏脱落。免疫荧光实验显示,NS5A与内质网标志分子calnexin核周共定位消失。以上结果提示,α-actinin可通过影响非结构蛋白与脂筏的关联而参与HCV RNA的合成,为临床治疗及研制新型抗HCV药物提供理论依据和实验基础。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白 α-Actinin 脂筏内质网

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新的动物模型给肠道病毒71型疫苗研发带来新希望

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微生物与感染 2010年第4期5卷 199-199,217页

作者：王宾复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

近年来手足口病病例增多,逐渐成为人们担忧的公共卫生问题,研制出相应疫苗成为关注的焦点.但此项疫苗的开发并不如人们想象中的那样简单.其中一个重要原因是,没有一个合适的动物模型来对研发后的疫苗进行免疫效果和安全性评价.本期刊登... 详细信息

近年来手足口病病例增多,逐渐成为人们担忧的公共卫生问题,研制出相应疫苗成为关注的焦点.但此项疫苗的开发并不如人们想象中的那样简单.其中一个重要原因是,没有一个合适的动物模型来对研发后的疫苗进行免疫效果和安全性评价.本期刊登了关于"肠道病毒71型灭活疫苗免疫恒河猴在攻毒实验中的感染动力学"的论文,就前期工作基础上研制的EV71灭活疫苗在成年恒河猴模型中进行了免疫保护效果的评价.

关键词：动物模型肠道病毒71型疫苗发带公共卫生问题安全性评价免疫效果

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沙门菌PhoP-PhoQ双组分信号转导系统

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微生物与感染 2010年第4期5卷 239-242页

作者：陈嘉瑜蔡霞瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

PhoP-PhoQ是调控沙门菌毒力的重要双组分信号转导系统,由组氨酸蛋白激酶PhoQ和反应调节蛋白PhoP组成。PhoP-PhoQ可调节沙门菌对Mg2+及其他周质环境的适应性,并调控沙门菌感染中毒力基因的转录和表达。PhoP-PhoQ调控的毒力基因参与沙门... 详细信息

PhoP-PhoQ是调控沙门菌毒力的重要双组分信号转导系统,由组氨酸蛋白激酶PhoQ和反应调节蛋白PhoP组成。PhoP-PhoQ可调节沙门菌对Mg2+及其他周质环境的适应性,并调控沙门菌感染中毒力基因的转录和表达。PhoP-PhoQ调控的毒力基因参与沙门菌对上皮细胞的侵袭、胞内生存、对抗菌肽的抵抗反应、脂质A的修饰、Ⅲ型分泌系统效应蛋白的分泌等环节。PhoP-PhoQ还可与其他双组分信号转导系统或调节子合作,调控沙门菌的毒力。因此,PhoP-PhoQ双组分信号转导系统在沙门菌的毒力调控中发挥重要作用。

关键词： PhoP-PhoQ 镁离子双组分信号转导系统

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结核分枝杆菌进化与致病性的研究

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微生物与感染 2010年第2期5卷 106-110页

作者：董丹丹高谦复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

分子流行病学是研究结核分枝杆菌传播和种群进化的有力工具。特别是近年来建立起来的单核苷酸多态性分型方法,能将结核分枝杆菌临床菌株分为三大家族,并且确立其种系发生关系。研究表明,不同进化分支上的结核分枝杆菌在不同的国家和地... 详细信息

分子流行病学是研究结核分枝杆菌传播和种群进化的有力工具。特别是近年来建立起来的单核苷酸多态性分型方法,能将结核分枝杆菌临床菌株分为三大家族,并且确立其种系发生关系。研究表明,不同进化分支上的结核分枝杆菌在不同的国家和地区流行,不同基因型菌株的致病性和传播力不尽相同。如细胞和动物模型都证明在东亚流行的北京基因型菌株比其他基因型菌株具有更高的毒力,能抑制宿主的免疫反应。本文综述近年来在结核分枝杆菌进化、分型及菌株致病性方面的研究成果。

关键词：结核分枝杆菌基因型单核苷酸多态性致病性毒力

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影响表皮葡萄球菌icaA+/BF-临床株生物膜形成因素的研究

影响表皮葡萄球菌icaA+/BF-临床株生物膜形成因素的研究

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中华医学会2010’全国临床微生物及感染免疫学术研讨会

作者：刘敬然江娟胡健朱涛娄强吴吻瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室 200032

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上海2009甲型H1N1流行性感冒病毒全基因组分析

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微生物与感染 2010年第4期5卷 225-231页

作者：宋志刚田棣张小楠任广旭周志统何静袁正宏胡芸文上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

2009年全球暴发2009甲型H1N1流行性感冒(简称流感)疫情,上海于2009年5月出现第1例输入型病例。为了解上海地区输入型2009甲型H1N1流感病毒的生物学特征,以上海较早发现的2例输入型甲型H1N1流感患者作为研究对象,分离出A/Shanghai/37T/2... 详细信息

2009年全球暴发2009甲型H1N1流行性感冒(简称流感)疫情,上海于2009年5月出现第1例输入型病例。为了解上海地区输入型2009甲型H1N1流感病毒的生物学特征,以上海较早发现的2例输入型甲型H1N1流感患者作为研究对象,分离出A/Shanghai/37T/2009和A/Shanghai/71T/2009病毒,利用实时定量荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定病毒,通过扫描透射电子显微镜观察、免疫荧光检测、全基因组测序和生物信息软件分析,对这2株流感病毒形态、结构、耐药性、基因特点和病毒型别等进行研究。结果显示,病毒呈现正黏病毒颗粒形态特征;犬肾(MDCK)细胞内的病毒能与患者恢复期血清反应。此2株病毒的全基因核酸序列和氨基酸序列与美国参考株A/California/04/2009(H1N1)有较高同源性,其中第31位氨基酸残基发生改变。对金刚烷胺耐药,而对奥司他韦敏感。基于全基因组的系统发育分析,确认此2株病毒属2009甲型H1N1流感病毒。

关键词： 2009甲型H1N1流行性感冒病毒病毒分离株核酸测序进化树分析

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肠杆菌科丝氨酸蛋白酶自动转运家族研究进展

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微生物与感染 2010年第2期5卷 100-105页

作者：张俊琪瞿涤复旦大学上海医学院病原生物系上海200032 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

肠杆菌科丝氨酸蛋白酶自动转运家族(SPATE)蛋白是指致病性肠道杆菌通过自动转运方式产生的一类毒性蛋白。此类蛋白的氨基酸同源性可达35%～55%,均由3个部分组成:N端信号肽序列,协助分泌性毒性蛋白穿越细菌内膜;中部载乘区域,是发挥各种... 详细信息

肠杆菌科丝氨酸蛋白酶自动转运家族(SPATE)蛋白是指致病性肠道杆菌通过自动转运方式产生的一类毒性蛋白。此类蛋白的氨基酸同源性可达35%～55%,均由3个部分组成:N端信号肽序列,协助分泌性毒性蛋白穿越细菌内膜;中部载乘区域,是发挥各种生物学功能的主要结构域;C端转运单位,促使载乘结构域自细菌周浆间隙向胞外分泌。α螺旋的铰链区连接载乘区域和C端转运单位,其中14个氨基酸残基的组成序列EVNNLNKRMGDLRD非常保守,是蛋白酶水解位点,也是整个蛋白中最长的保守氨基酸序列,在SPATE蛋白的分泌和成熟过程中起着十分重要的作用,其改变往往会引起该蛋白家族不能正常分泌和成熟。目前,有研究将其作为药物作用的新靶点。

关键词：肠杆菌科丝氨酸蛋白酶自动转运家族结构转运分泌功能

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大肠埃希菌临床分离株质粒介导16S rRNA甲基化酶基因的检测及转移机制研究

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中华检验医学杂志 2010年第1期33卷 56-59页

作者：余方友陈坚陈冲李俏俏杨乐和姚丹叶青青吴聪张雪青潘景业王良兴瞿涤复旦大学生物医学研究院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室 200032 温州医学院附属第一医院检验科温州医学院附属第一医院重症监护室温州医学院附属第一医院呼吸科温州医学院

近年来，发现一类质粒介导的16S rRNA甲基化酶，该酶能够保护细菌的30S核糖体的16S rRNA不与氨基糖苷类药物结合，造成其对包括阿贝卡星在内的所有的氨基糖苷类药物耐药，并且为高水平耐药。

关键词： rRNA 质粒介导甲基化酶 16S 酶基因临床分离株大肠埃希菌转移机制

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