检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2014年第10期34卷 798-802页

作者：王蕾马丽俐孙桂芹李蒙策力木格陈力复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室 200032 浙江中医药大学附属第一医院杭州340006

1987年在大肠杆菌K12的碱性磷酸酶（ iap）基因的3′侧翼区首先发现了一类具有短回文特质的DNA重复序列［1］。2002年，这类结构被正式命名为成簇恒间隔短回文重复序列（CRISPR），CRISPR关联蛋白也同时得以命名［2］。2005年，3个研究... 详细信息

1987年在大肠杆菌K12的碱性磷酸酶（ iap）基因的3′侧翼区首先发现了一类具有短回文特质的DNA重复序列［1］。2002年，这类结构被正式命名为成簇恒间隔短回文重复序列（CRISPR），CRISPR关联蛋白也同时得以命名［2］。2005年，3个研究课题组同时发现间隔序列可能源自于细菌染色体外的其他遗传物质，如噬菌体和接合质粒，并推论CRISPR／Cas系统可以抵制入侵的外源 DNA［3-5］。2007年，来源于侵染噬菌体的新的整合间隔序列得到实验验证；研究同时建立了新获得的间隔序列与细菌抵抗该噬菌体侵袭的直接关联关系，证明了CRISPR／Cas系统是抵抗噬菌体的获得性免疫系统［6］。 Marraffini和Sontheimer［7］证实CRISPR／Cas系统对于接合现象和质粒转化的干扰作用。最近基于CRISPR／Cas作用机制的研究，发现了其在细菌毒力、致病性以及如何逃避宿主免疫系统等方面的相关作用［8］。

关键词： Cas系统回文序列蛋白系统成簇 DNA重复序列大肠杆菌K12 Ⅱ型细菌染色

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CXCR4 HIV-1抑制剂的设计合成及活性研究

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军事医学 2014年第8期38卷 602-607页

作者：叶建涵周尚民王茜陆路董铭心陈红飙姜世勃戴秋云湘潭大学化学学院湖南湘潭411105 军事医学科学院生物工程研究所北京100071 复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的设计、合成一系列新型四氢喹啉-苄基或苯并咪唑多胺类化合物,作为潜在的靶向CXCR4辅助受体的新型抑制剂,并测定其抗HIV-1活性。方法组合HIV-1辅助受体CXCR4抑制剂三氮构效团与CCR5部分药效团,设计并合成一系列新化合物并经1H-NMR、M... 详细信息

目的设计、合成一系列新型四氢喹啉-苄基或苯并咪唑多胺类化合物,作为潜在的靶向CXCR4辅助受体的新型抑制剂,并测定其抗HIV-1活性。方法组合HIV-1辅助受体CXCR4抑制剂三氮构效团与CCR5部分药效团,设计并合成一系列新化合物并经1H-NMR、MS表征,用HIV-1ⅢB病毒测定化合物抑制活性。结果与结论设计合成的10个目标化合物未见文献报道。活性测试结果显示,四氢喹啉-苯并咪唑多胺类化合物具有较好的抗HIV活性(IC50<1μmol/L),四氢喹啉-苄基多胺类化合物活性较差(IC50>8μmol/L)。

关键词： CXCR4 HIV-1 抑制剂合成活性

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N-糖苷酶基因在脑膜炎败血伊丽莎白金菌临床分离株中的分布

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微生物与感染 2014年第4期9卷 224-229页

作者：李蒙孙桂芹陈菁李天胜王蕾策力木格陈力复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

N‐糖苷酶（PNGase）是真核生物中的常见酶，但在原核生物中极为罕见，目前仅报道在脑膜炎败血伊丽莎白金菌（EM）中存在。本文旨在检测 PNGase基因在EM临床分离株中的分布，为该菌的亚型分类及快速核酸分子检测提供依据，为研究PNGase... 详细信息

N‐糖苷酶（PNGase）是真核生物中的常见酶，但在原核生物中极为罕见，目前仅报道在脑膜炎败血伊丽莎白金菌（EM）中存在。本文旨在检测 PNGase基因在EM临床分离株中的分布，为该菌的亚型分类及快速核酸分子检测提供依据，为研究PNGase在原核生物中的生物学功能奠定基础。于2010年7月～2012年12月收集浙江省3家三级甲等医院的65株EM临床分离株，提取细菌基因组 DNA ，利用16 S rRNA细菌通用引物、PNGase F和PNGase F‐Ⅱ特异性引物，进行组合聚合酶链反应（PCR）。阳性扩增产物测序后与美国国立生物技术信息中心（NCBI）数据库中已知EM序列比对确认。结果显示，PNGase阳性菌64株，总阳性率为98．5％；PNGase F和PNGase F‐Ⅱ共阳性菌39株，共阳性率为60．0％。 PNGase F阳性菌41株，阳性率为63．1％；PNGase F‐Ⅱ阳性菌62株，阳性率为95．4％，PNGase F‐Ⅱ阳性率高于 PNGase F （配对χ^2检验， P＜0．01），提示 PNGase可能对EM具有重要的生物学意义。结果还表明，本研究建立的组合PCR可应用于E M菌株中 PN G ase基因分型。

关键词：脑膜炎败血伊丽莎白金菌聚合酶链反应 N-糖苷酶F-Ⅱ Peptide:N-glycanase F-Ⅱ

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肠-肝轴与非酒精性脂肪性肝病

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微生物与感染 2014年第2期9卷 65-70页

作者：丁佳吴健复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

肠道菌群组成和数量的改变影响宿主的能量代谢、免疫应答和炎症反应状态。非酒精性脂肪性肝病患者常伴有小肠细菌过度生长或某些菌群种类和数量的改变,以及肠道黏膜通透性增加。肠道细菌通过增强肝脏脂肪合成、诱导机体胰岛素抵抗、激... 详细信息

肠道菌群组成和数量的改变影响宿主的能量代谢、免疫应答和炎症反应状态。非酒精性脂肪性肝病患者常伴有小肠细菌过度生长或某些菌群种类和数量的改变,以及肠道黏膜通透性增加。肠道细菌通过增强肝脏脂肪合成、诱导机体胰岛素抵抗、激活天然免疫系统相关分子模式等机制,诱发肝脏炎症反应,启动纤维化进程,促进单纯性脂肪变向脂肪性肝炎发展。鉴定影响机体能量代谢和炎症反应的肠道菌群及其产物将为阐明肠-肝轴对肝脏炎症发生、发展所起的作用奠定基础,为揭示非酒精性脂肪性肝病发生、发展的机制开辟新思路,为该病的防治探索新策略。

关键词：肠-肝轴非酒精性脂肪性肝病肠道菌群

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表皮葡萄球菌PhoU同源物(SERP0316)的抗体制备及免疫鉴定

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微生物与感染 2014年第3期9卷 174-181页

作者：韩海燕王小飞武有聪许涛刘华勇蔡霞瞿涤复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

表皮葡萄球菌可在植入性医疗材料表面形成生物膜,对多种抗生素耐受,而持留菌的形成是导致细菌生物膜耐药的原因之一。研究发现,大肠埃希菌中PhoU可影响持留菌的形成,与细菌对多种抗生素及压力条件的耐受相关,但表皮葡萄球菌中PhoU的功... 详细信息

表皮葡萄球菌可在植入性医疗材料表面形成生物膜,对多种抗生素耐受,而持留菌的形成是导致细菌生物膜耐药的原因之一。研究发现,大肠埃希菌中PhoU可影响持留菌的形成,与细菌对多种抗生素及压力条件的耐受相关,但表皮葡萄球菌中PhoU的功能仍不清楚。生物信息学分析显示,在表皮葡萄球菌中存在2个phoU同源基因,其中serp0956位于pst操纵子中,命名为phoU1;另一个编码功能未知蛋白的phoU基因同源物(serp0316)命名为phoU2。前期研究显示,敲除phoU1并不影响表皮葡萄球菌生长、生物膜形成等生物学特性,为此本研究对PhoU2进行了初步探讨。利用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测phoU2基因在表皮葡萄球菌SE1457不同生长时期的转录水平,发现其在细菌生长不同时间点持续表达,其中对数期(6h)表达量相对较高。为进一步研究表皮葡萄球菌中PhoU2的表达情况,对PhoU2蛋白进行原核表达和纯化,并用纯化的重组PhoU2蛋白免疫小鼠制备PhoU2多克隆抗体。在此基础上,利用蛋白免疫印迹法检测PhoU2在SE1457菌株不同生长时间点的表达水平,结果显示PhoU2在细菌生长对数期和平台期均有表达。另外,在不同的表皮葡萄球菌临床分离株中均检测到PhoU2蛋白表达,表明PhoU2具有一定的保守性。以上研究提示,PhoU2可能作为PhoU的功能同源物发挥一定的作用,为进一步研究表皮葡萄球菌PhoU2的生物学功能及其在生物膜和持留菌形成中的作用奠定了基础。

关键词：表皮葡萄球菌 phoU同源基因原核表达持留菌

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埃博拉病毒及其致病机制

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微生物与感染 2014年第4期9卷 197-201页

作者：瞿涤袁正宏闻玉梅复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

自2014年2～3月，西非埃博拉病毒感染的暴发流行已呈播散趋势，受到世界卫生组织的高度重视。我国也提高了防止埃博拉病毒进入国内的警示，并采取了相应措施。现将有关埃博拉病毒的生物学特性、致病机制及相关流行病学与防治策略作简要... 详细信息

自2014年2～3月，西非埃博拉病毒感染的暴发流行已呈播散趋势，受到世界卫生组织的高度重视。我国也提高了防止埃博拉病毒进入国内的警示，并采取了相应措施。现将有关埃博拉病毒的生物学特性、致病机制及相关流行病学与防治策略作简要综述，供参考。

关键词：埃博拉病毒致病机制流行病学

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以HA2为基础的流感病毒候选疫苗同时与H5N1、H1N1和H3N2亚型毒株产生交叉反应

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中山大学学报（医学科学版） 2014年第3期35卷 321-328页

作者：魏美丽陈燕霞王宇徐俊熊为亮姜世勃潘春根中山大学中山医学院人类病毒学研究所//教育部热带病防治研究重点实验室广东广州510080 中山大学药学院药物分子设计研究中心广东广州510006 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

【目的】探讨以流感病毒(IAV)血凝素蛋白茎部(HA2)保守表位为免疫原来诱导针对不同血清型流感病毒的广谱体液免疫应答。【方法】我们构建了一个重组的IAV疫苗IR30-Fd,由A/Viet Nam/1203/2004(H5N1)病毒株HA2的30个保守的氨基酸残基(IR30... 详细信息

【目的】探讨以流感病毒(IAV)血凝素蛋白茎部(HA2)保守表位为免疫原来诱导针对不同血清型流感病毒的广谱体液免疫应答。【方法】我们构建了一个重组的IAV疫苗IR30-Fd,由A/Viet Nam/1203/2004(H5N1)病毒株HA2的30个保守的氨基酸残基(IR30)和一个连在碳端的三聚体基序(foldon,Fd)组成。原核表达该蛋白,圆二色谱和Western Blot验证IR-30-Fd的室间结构之后,分别免疫BALB/c小鼠和新西兰白兔,并同时免疫IR30多肽为对照,制备血清抗体。然后应用ELISA和Western Blot方法检测抗体的滴度,应用细胞ELISA和Western Blot方法检测抗体与不同的IAV菌株HA2蛋白的交叉反应性。【结果】IR30-Fd能够形成具有α螺旋的三聚体空间结构。用IR30-Fd和IR30免疫BALB/c小鼠和新西兰白兔后获得了高效价的抗IR30的特异性抗体。鼠抗IR30-Fd抗体能与H3N2和H1N1的HA蛋白反应而鼠抗IR30抗体不能。鼠抗IR30-Fd抗体稀释6 400倍、兔抗IR30-Fd抗体稀释8.2×105倍均可以与H5N1的HA蛋白反应。细胞ELISA表明兔抗IR30-Fd抗体与天然状态下的H5N1和H3N2的HA蛋白的结合亲和力高于兔抗IR30抗体。【结论】本研究结果表明IR30-Fd蛋白能够模拟H5N1 HA2蛋白保守序列的天然三聚体结构,并且能够诱导产生针对H5N1 H1N1和H3N2亚型HA蛋白的广谱交叉反应抗体,为研制通用的流感病毒疫苗提供了结构基础。

关键词：甲型流感病毒通用疫苗 HA2 三聚体

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从DNA疫苗到耐受疫苗:全新的适应症和抑炎前景

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生命的化学 2014年第1期34卷 23-28页

作者：耿爽钟一维王宾复旦大学上海医学院教育部和卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

DNA疫苗技术从1990年代发现到至今,已经创造成功了4个临床兽用疫苗或产品,并仍然有数十个产品正在临床验证的不同阶段。通过不断提高DNA质粒进入体细胞的效率,DNA疫苗将具有更强的免疫应答效率,从而使得DNA疫苗走向更多和更广泛的临床... 详细信息

DNA疫苗技术从1990年代发现到至今,已经创造成功了4个临床兽用疫苗或产品,并仍然有数十个产品正在临床验证的不同阶段。通过不断提高DNA质粒进入体细胞的效率,DNA疫苗将具有更强的免疫应答效率,从而使得DNA疫苗走向更多和更广泛的临床应用。DNA疫苗不仅可以增强机体免疫系统的应答反应,利用其与蛋白质疫苗共免疫的方式也可以产生特异性的免疫耐受反应用于抑制免疫反应。基于DNA疫苗的诱导免疫耐受的疫苗技术开辟了全新的过敏性疾病和自主免疫疾病的干预领域,具有重要的临床潜力和应用前景。

关键词： DNA疫苗耐受疫苗共免疫佐剂过敏性疾病自主免疫疾病

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长期住院老年患者感染的鲍曼不动杆菌耐药性分析

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微生物与感染 2014年第3期9卷 167-173页

作者：赵付菊方毅刘华勇周丽芳庞立峰刘文健赵虎复旦大学附属华东医院检验科上海200040 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

为了解复旦大学附属华东医院长期住院老年患者感染的鲍曼不动杆菌的耐药性特征，本研究收集了2011年9月-2012年8月临床分离自老年病区长期住院患者的52株鲍曼不动杆菌，分析菌株的耐药性、产酶类型、生物膜形成能力及耐药基因的携带情... 详细信息

为了解复旦大学附属华东医院长期住院老年患者感染的鲍曼不动杆菌的耐药性特征，本研究收集了2011年9月-2012年8月临床分离自老年病区长期住院患者的52株鲍曼不动杆菌，分析菌株的耐药性、产酶类型、生物膜形成能力及耐药基因的携带情况。结果显示，菌株主要分布在呼吸重症监护室，分离的标本以痰标本为主，占86．54％。52株鲍曼不动杆菌中，多重耐药菌株最高，占76．92％。对头孢哌酮／舒巴坦耐药率最低，为30．77％，对其余抗菌药物耐药率均在50％以上。产酶阳性率为82．69％，其中产其他水解酶的菌株最多，占63．46％。生物膜形成的检出率为5．77％。6株广泛耐药菌株共检出9种耐药基因。结果提示，从老年病区长期住院患者分离的鲍曼不动杆菌耐药现状严重。因此，医院感染控制应以呼吸重症监护室为重点，同时加强对生物膜阳性菌株所分布病区的耐药性监测和消毒隔离，以预防和控制耐药菌的产生和传播。

关键词：鲍曼不动杆菌耐药性生物膜医院感染老年患者

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表皮葡萄球菌色氨酰-tRNA合成酶抑制剂W-23的抗菌活性研究

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中国科技论文在线精品论文 2014年第23期7卷 2362-2366页

作者：吴旸毛嘉琳瞿涤复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的:检测色氨酰-tRNA合成酶(tryptophanyl-tRNA synthetase,WRS)抑制剂W-23对葡萄球菌的抗菌活性.方法:采用肉汤稀释法检测W-23对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并检... 详细信息

目的:检测色氨酰-tRNA合成酶(tryptophanyl-tRNA synthetase,WRS)抑制剂W-23对葡萄球菌的抗菌活性.方法:采用肉汤稀释法检测W-23对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并检测其与氨苄青霉素或氯霉素联用对表皮葡萄球菌的联合抗菌效果.结果:化合物W-23对葡萄球菌属的MIC为2～4 mg/L,抗菌类型属于抑菌剂,与氨苄青霉素联用对耐甲氧西林表皮葡萄球菌具有协同抗菌作用.结论:W-23对葡萄球菌抗菌活性较强,具有潜在应用价值.

关键词：医学微生物葡萄球菌色氨酰-tRNA合成酶抑制剂W-23

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