检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肝脏病杂志 2009年第9期17卷 718-720页

作者：汪萱怡姚忻郭利民许丽锋沈心亮徐道振赵铠闻玉梅复旦大学生物医学研究院上海200032 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室北京地坛医院北京生物制品研究所

乙型肝炎（简称乙肝）是我国感染病中最常见的疾病。虽然核苷类（核苷酸类）抗病毒药物对慢性乙肝治疗已取得较大成果，但调动患者的免疫应答也是控制和治疗慢性乙肝不可缺少的治疗措施。抗原抗体复合物型（IC）治疗性乙肝疫苗自1988年... 详细信息

乙型肝炎（简称乙肝）是我国感染病中最常见的疾病。虽然核苷类（核苷酸类）抗病毒药物对慢性乙肝治疗已取得较大成果，但调动患者的免疫应答也是控制和治疗慢性乙肝不可缺少的治疗措施。抗原抗体复合物型（IC）治疗性乙肝疫苗自1988年获国家高技术研究发展计划（863计划）资助以来，已经历20年的历程，现将研究历程及进展综述如下。

关键词：肝炎乙型疫苗治疗性

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质粒介导16S rRNA甲基化酶肺炎克雷伯菌临床分离株的检测及分子流行病学研究

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中华检验医学杂志 2009年第3期32卷 268-273页

作者：余方友陈婵杜卫良李国安张雪青陈增强陈坚王良兴朱涛瞿涤温州医学院附属第一医院检验科 325000 温州医学院附属第一医院呼吸科 325000 复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的调查16SrRNA甲基化酶在肺炎克雷伯菌临床分离株中的流行情况。方法收集我院2006年1月至2007年9月从临床标本中分离的肺炎克雷伯菌337株，所有菌株均为非重复株。菌种鉴定采用全自动微生物分析仪，庆大霉素、阿米卡星和妥布霉素的药... 详细信息

目的调查16SrRNA甲基化酶在肺炎克雷伯菌临床分离株中的流行情况。方法收集我院2006年1月至2007年9月从临床标本中分离的肺炎克雷伯菌337株，所有菌株均为非重复株。菌种鉴定采用全自动微生物分析仪，庆大霉素、阿米卡星和妥布霉素的药敏试验采用琼脂稀释法。超广谱B内酰胺酶（ESBLs）检测采用美国临床和实验室标准协会（CLSI）规定的纸片确证法。使用PCR检测16SrRNA甲基化酶基因、整合酶基因和ESBL基因。接合试验检测质粒的可转移性；脉冲场电泳分析菌株的同源性。结果337株肺炎克雷伯菌对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星的耐药率分别为19．0％（64／337）、8．3％（28／337）和16．3％（55／337）。21株16SrRNA甲基化酶基因阳性，阳性率为6．2％（21／337），其中13株rmtB阳性、3株armA阳性、5株rmtB和armA同时阳性。所有16SrRNA甲基化酶基因阳性株对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星同时耐药且都为高度耐药（MICs≥256彬L），21株甲基化酶基因阳性株有19株产ESBLs，ESBL基因主要为CTX-M-14-like、CTX-M-15-like和SHV．12-like。21株均为Ⅰ类整合酶基因阳性。13株通过接合试验把质粒传递给受体菌***53。所有接合子Ⅰ类整合酶基因阳性、blaTEM-1基因阳性、产ESBLs及对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星和复方磺胺甲略唑耐药，对其他抗菌药物敏感。接合子ESBL基因型与供菌一致。21株16SrRNA甲基化酶基因阳性株经脉冲场凝胶电泳（PFGE）分成14个基因型，主要为A型和I型。结论armA和rmtB型16SrRNA甲基化酶基因已经在肺炎克雷伯菌中播散，既可通过克隆株播散也可通过接合性质粒在不同菌株间播散。

关键词：克雷伯菌,肺炎 RNA,核糖体,16S 甲基转移酶类质粒

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质粒介导16SrRNA甲基化酶在奇异变形杆菌临床分离株的流行情况研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第9期29卷 813-815页

作者：杜卫良余方友陈坚张雪青姚丹朱涛瞿涤王良兴温州医学院附属第一医院呼吸科 325000 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室温州医学院附属第一医院检验科 325000

到目前为止，在革兰阴性杆菌中已发现ArmA、RmtA、RmtB、RmtC、RmtD和NpmA6种16SrRNA甲基化酶，且编码这些酶的基因通常和超广谱β-内酰胺酶（ESBL）基因共处一个质粒上，通过质粒在不同的菌株之间播散。

关键词： 16SrRNA 甲基化酶质粒介导奇异变形杆菌临床分离株流行情况超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌

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利用基因分析仪鉴定结核分枝杆菌可变数目串联重复基因型

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中华检验医学杂志 2009年第9期32卷 1047-1050页

作者：徐鹏方仁东赵明武洁李静姚火春梅建高谦南京农业大学 210095 上海市疾病预防控制中心复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

结核分枝杆菌可变数目串联重复（variable-number tandem repeats，VNTR）或散在分布重复单位（mycobacterial interspersed repetitive units typing，MIRU）基因型分型法是利用结核分枝杆菌基因组中特定位点上VNTR进行基因型分型的方... 详细信息

结核分枝杆菌可变数目串联重复（variable-number tandem repeats，VNTR）或散在分布重复单位（mycobacterial interspersed repetitive units typing，MIRU）基因型分型法是利用结核分枝杆菌基因组中特定位点上VNTR进行基因型分型的方法，通过不同位点和数目的组合其分辨率可以达到或接近于“金标准”IS 611 限制性片段长度多态性（IS6110 restriction fragment length polymorphism, IS 6110-RFLP）分型法。

关键词：结核分枝杆菌基因型分型可变数目串联限制性片段长度多态性分析仪鉴定 “金标准” VNTR

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鸭乙型肝炎病毒核心抗原DNA疫苗的构建及其诱导的体液免疫应答

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微生物与感染 2009年第3期4卷 140-145,151页

作者：蒋定锋闫梁贲海静赵艳丰秦智强瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)真核表达质粒的免疫原性,分析DHBcAgDNA疫苗诱导的体液免疫应答,首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)Core基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析,分别构建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去... 详细信息

为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)真核表达质粒的免疫原性,分析DHBcAgDNA疫苗诱导的体液免疫应答,首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)Core基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析,分别构建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去除疏水性序列的DHBcAg片段(E-DHBc180)的真核表达质粒,间接免疫荧光检测结果显示可在COS7细胞内表达。进一步构建原核表达质粒p-DHBc263和p-DHBc180,仅p-DHBc180可表达蛋白,纯化后作为酶联免疫吸附试验(ELISA)包被抗原,用于DHBcAb的检测。分别用E-DHBc263和E-DHBc180免疫小鼠,采用间接ELISA检测DHBcAb。结果显示,E-DHBc180可诱导免疫小鼠产生DHBcAb免疫应答,加强免疫后效价可达1∶100～1∶400。结果提示,E-DHBc180可作为DHBcAgDNA疫苗,在DHBV感染鸭模型中评价其效果。

关键词：鸭乙型肝炎病毒核心抗原克隆 DNA疫苗

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开展多学科双向性转化型研究

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微生物与感染 2009年第1期4卷 3-3,12页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

虽然转化型研究已被提出数年,但一般强调的是基础理论研究联系临床医学或预防医学的问题并在一定程度上予以解决。实现多学科、双向性转化型研究(muhidisciplinary bidirectional translational research),如加强基础医学与临床医学、... 详细信息

虽然转化型研究已被提出数年,但一般强调的是基础理论研究联系临床医学或预防医学的问题并在一定程度上予以解决。实现多学科、双向性转化型研究(muhidisciplinary bidirectional translational research),如加强基础医学与临床医学、预防医学及实验诊断学等多学科之间的相互交叉,将可促进转化型研究向更高、更深层次发展。在医学及生命科学中,一个常用的词是从实验室到临床(frombenchtobed),实际上基础研究不仅应解决患者的疾苦,还应着眼于预防疾病、环境卫生、卫生经济学等多学科的问题。[第一段]

关键词：转化型多学科双向性预防医学临床医学环境卫生基础理论基础医学

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ArlR反应调节蛋白在表皮葡萄球菌不同生长期表达的检测

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微生物与感染 2009年第2期4卷 92-96页

作者：刘敬然孙志平许涛吴旸李达文瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis,SE）是寄居在人体和黏膜表面的条件致病菌,因可在医疗植入材料表面形成生物膜（biofilm）而具有致病性。细菌双组分信号转导系统可调控生物膜形成,但其调控机制在SE中研究甚少。本课题对arlR... 详细信息

表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis,SE）是寄居在人体和黏膜表面的条件致病菌,因可在医疗植入材料表面形成生物膜（biofilm）而具有致病性。细菌双组分信号转导系统可调控生物膜形成,但其调控机制在SE中研究甚少。本课题对arlRS双组分信号转导系统的反应蛋白ArlR在细菌不同生长期的表达情况进行初步研究。首先构建ArlR原核表达质粒,用纯化重组ArlR免疫小鼠,获得多克隆抗-ArlR抗体,免疫Dot方法检测结果显示小鼠抗-ArlR血清效价〉1∶100000。进一步采用蛋白免疫印迹法检测ArlR在SE1457野生株不同生长期中的表达水平,结果显示,ArlR在2h表达量较低,到4h达高峰,6-10h表达量较4h降低。利用反转录实时荧光定量聚合酶链反应检测arlR基因在不同生长期的转录水平,结果显示相应时间点ArlR蛋白表达水平与arlR基因转录水平一致。本研究结果为后期研究双组分信号转导系统arlRS对SE生物膜形成的影响奠定基础。

关键词：表皮葡萄球菌双组分信号转导系统 arlR基因 ArlR

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一起邮轮诺如病毒痰隋的病原学检测

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中国国境卫生检疫杂志 2009年第2期32卷 69-71页

作者：王家栋韩晓辉刘江霞章琪方筠田桢干陆晔张晓航王健上海国际旅行卫生保健中心复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部、卫生部重点实验室

[目的]总结诺如病毒实验室诊断经验，进一步完善诺如病毒的检测方法。（方法]针对上海口岸发生的又1起邮轮急性胃肠炎爆发疫情，应用酶联免疫吸附实验（ELISA）、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、电镜观察等技术，对送检的9份粪便标本... 详细信息

[目的]总结诺如病毒实验室诊断经验，进一步完善诺如病毒的检测方法。（方法]针对上海口岸发生的又1起邮轮急性胃肠炎爆发疫情，应用酶联免疫吸附实验（ELISA）、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、电镜观察等技术，对送检的9份粪便标本进行检测。[结果]运用2种ELISA试剂盒在9份标本中分别检出4份和5份标本诺如病毒抗原阳性；运用逆转录-聚合酶链方法，发现9份标本中有7份扩增出诺如病毒特异性条带；运用电镜在镜下观察到诺如病毒颗粒。[结论]诺如病毒检测方法的建立将为口岸公共卫生突发事件应急体系的建设提供重要的技术支持。

关键词：诺如病毒急性胃肠炎实验室诊断口岸

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不同来源人肝细胞系β干扰素诱生及其信号通路的比较

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微生物与感染 2009年第2期4卷 81-87页

作者：陈辉邬敏于士颜陈捷亮袁正宏复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508

β干扰素(IFN-β)是一种在抗病毒固有免疫应答过程中具有重要作用的细胞因子,而肝细胞作为肝炎病毒的宿主细胞被认为具有IFN-β诱生的能力,但目前尚未建立合适的体外人肝细胞模型用以研究乙型肝炎病毒(HBV)与肝细胞干扰素系统的相互作... 详细信息

β干扰素(IFN-β)是一种在抗病毒固有免疫应答过程中具有重要作用的细胞因子,而肝细胞作为肝炎病毒的宿主细胞被认为具有IFN-β诱生的能力,但目前尚未建立合适的体外人肝细胞模型用以研究乙型肝炎病毒(HBV)与肝细胞干扰素系统的相互作用。为此,本研究选取了3株人肝细胞系PH5CH8、Huh7、HepG2作为研究对象,以IFN-β诱生剂新城疫病毒(NDV)与多聚次黄苷酸-胞苷酸〔poly(I∶C)〕处理细胞,从转录、蛋白水平及功能学角度检测产生IFN-β的能力。结果显示,与Huh7和HepG2细胞相比,PH5CH8细胞经NDV与poly(I∶C)诱导可产生高水平的IFN-β。进一步利用蛋白免疫印迹法比较3株细胞系内IFN-β诱生信号通路相关蛋白的表达水平,结果显示,与PH5CH8细胞相比,Huh7和HepG2细胞内多种信号蛋白的表达水平偏低。本研究结果为选择合适肝细胞系用于HBV与干扰素系统作用的研究提供了实验依据,并为重建IFN诱生系统选择性缺陷的肝细胞系提供了理论基础。

关键词：肝细胞 β干扰素诱生信号通路 β干扰素诱生剂

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沙门菌侵袭研究进展

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微生物与感染 2009年第2期 124-128页

作者：王雪琴周道国复旦大学医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室美国普渡大学生物科学系

鼠伤寒沙门菌表达两个不同的Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion/translocation systems,TTSS),分别由致病岛1和2(pathogenicity islands1and2,SPI-1and SPI-2)编码。细菌依赖TTSS将效应蛋白转运至宿主细胞,通过"触发"机制诱导细... 详细信息

鼠伤寒沙门菌表达两个不同的Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion/translocation systems,TTSS),分别由致病岛1和2(pathogenicity islands1and2,SPI-1and SPI-2)编码。细菌依赖TTSS将效应蛋白转运至宿主细胞,通过"触发"机制诱导细菌进入宿主细胞。这些效应蛋白可诱导细胞骨架重排,导致"巨吞饮",促使细菌入侵。本综述依据多种沙门菌效应蛋白的功能,建立沙门菌侵袭模型。TTSS活化并转运效应蛋白进入宿主细胞发挥功能(Ⅰ)。小G蛋白交换因子SopE和肌醇磷酸酯酶SopB通过激活CDC42和Rac1,诱导内陷相关的蛋白聚集(Ⅱ)。SipA和SipC通过降低肌动蛋白临界浓度、刺激网素成束、稳定纤维状肌动蛋白(fibrousactin,F-actin)以及使肌动蛋白核化等功能,促使细菌入侵(Ⅲ)。SopB可使膜内陷区PIP2的浓度降低以及VAMP8聚集,促使细胞膜分裂(Ⅳ)。这些效应蛋白的联合作用,使膜皱褶在局部向外显著延伸,使沙门菌被细胞内形成的特殊膜结构包裹。沙门菌的另一种效应蛋白SptP,通过刺激小G蛋白内源性GTPase的活性,抑制小G蛋白的活化,使细胞膜恢复至原有状态(Ⅴ)。

关键词：沙门菌侵袭模式效应蛋白

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