检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2024年第6期19卷 321-331页

作者：王漫兮刘娜董妮华王永康曹恒龙钢上海市重大传染病与生物安全研究院上海200032 复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

本研究构建了蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)的全长感染性克隆,为深入理解TBEV的复制和发病机制提供了重要工具。首先,预测TBEV全长序列中的原核启动子,并针对这些启动子进行同义突变以消除其活性,从而降低cDNA的细... 详细信息

本研究构建了蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)的全长感染性克隆,为深入理解TBEV的复制和发病机制提供了重要工具。首先,预测TBEV全长序列中的原核启动子,并针对这些启动子进行同义突变以消除其活性,从而降低cDNA的细菌毒性。随后基于对序列复杂性和克隆效率的考虑,将TBEV cDNA序列分为两段进行合成,并利用同源重组技术将其克隆至pFK载体上。通过体外转录获得病毒RNA,并将RNA转染到细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR),使用TBEV病毒E蛋白的特异性引物成功检测到病毒RNA的复制;同时,通过Western blot,利用针对TBEV NS1蛋白的特异性抗体,成功检测到病毒蛋白的表达;半数组织培养感染量(50%tissue culture infectious dose,TCID50)检测显示,病毒滴度在48 h后显著上升,证实了病毒被成功拯救。最后,通过空斑实验,在BHK-21细胞中观察96 h后,验证了二代病毒的感染性,结果显示随着病毒液稀释度的减小,空斑数量显著增加,且病毒RNA的相对表达量和蛋白表达量随时间增加,表明二代病毒液具有感染性和在细胞内复制的能力。这些结果为TBEV的研究提供了新的工具以及感染性克隆构建的通用策略。

关键词：蜱传脑炎病毒全长感染性克隆病毒拯救

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卡介菌多糖核酸免疫治疗结核病小鼠的实验研究

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世界感染杂志 2005年第6期5卷 529-529页

作者：任涛蔡映云金美玲李传友袁正宏田苗赵冰复旦大学附属中山医院呼吸病研究所上海200032 复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部卫生部重点实验室上海200032 北京市结核病胸部肿瘤研究北京101149

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trap基因表达在表皮葡萄球菌生物膜形成及附属基因调节（agr）系统活化中的作用

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世界感染杂志 2006年第5期6卷 482-482页

作者：朱于莉杨晓梅李娜江娟陈洁敏秦智强李敏吕元魏武瞿涤复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学蛋白质组学研究中心上海200032 复旦大学附属华山医院检验医学中心上海200040 上海生物信息技术研究中心上海200235

目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型，二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱... 详细信息

目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型，二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱，实时定量逆转录PCR检测trap基因和RNAⅢ的转录水平，CLUSTALX对表皮葡萄球菌trap基因与金黄色葡萄球菌序列进行分析．Mega软件构建进化树。结果比较分析形成生物膜的表皮葡萄球菌ATCC35984株与不形成生物膜的ATCC12228株生长中期的蛋白质组，发现ATCC35984株的TRAP蛋白量明显高于ATCC12228株。转录水平的检测显示ATCC12228株和生物膜阳性临床SE1457、SE671株的trap基因均低转录，但RNAⅢ的转录水平未降低。SE1457株agr系统突变后，RNAⅢ的转录明显降低，trap基因的转录无变化．RNAⅢ的转录随细菌生长变化而增加，trap基因转录保持不变．trap序列分析显示其在表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌中较为保守，但存在明显的进化距离。结论在本论文所研究的表皮葡萄球菌菌株中，trap基因的转录和翻译与细菌生物膜的形成不存在直接的调控相关性；并提示TRAP蛋白不是表皮葡萄球菌agr系统活化所必需的细菌产物；表皮葡萄球菌trap基因序列与金黄色葡萄球菌之问存在差异，可能与其功能差异相关。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜形成 trap 活化作用基因表达系统基因调节金黄色葡萄球菌

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荧光复合扩增DXS6804、DXS6799和DXS7132基因座

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法医学杂志 2009年第1期25卷 44-44页

作者：沈靓乔可郑海波王科赖江华西安交通大学医学院法医系陕西西安710061 绍兴县公安局浙江绍兴312000 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032 西安交通大学卫生部法医学重点实验室陕西西安710061

应用分子克隆技术制备出DXS6804、DXS6799和DXS7132基因座的等位基因分型标准物，通过研究复合扩增技术，构建3个基因座X—STR复合扩增的荧光检测体系。

关键词：法医遗传学荧光复合扩增 X—STR

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