检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学杂志 2023年第5期43卷 81-90页

作者：杨雨婷杨国平大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000 大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000

运用生物信息学分析软件预测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv0081蛋白的生物学特征及筛选潜在的优势抗原表位。从NCBI数据库获取Mtb Rv0081蛋白的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件ProtParam、ProtScale及TMPRED分析Rv... 详细信息

运用生物信息学分析软件预测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv0081蛋白的生物学特征及筛选潜在的优势抗原表位。从NCBI数据库获取Mtb Rv0081蛋白的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件ProtParam、ProtScale及TMPRED分析Rv0081蛋白的理化性质及亲疏水性;TMHMM、SignalP-5.0 Server预测蛋白的跨膜区及信号肽;NetNGlyc-1.0 Server、NetPhos 3.1 Server分别预测蛋白的糖基化位点及磷酸化位点;STRING预测能与Rv0081相互作用的蛋白;分别运用SOPMA、SWISS-MODEL预测蛋白的二、三级结构;综合运用softberry、WoLF PSORT预测蛋白的亚细胞定位;运用DNAStar预测蛋白的B细胞抗原表位;综合运用SYFPEITHI、NetCTL 1.2 Server、Net MHC pan 4.1 server预测蛋白的CTL细胞抗原表位;综合运用SYFPEITHI、Net MHCII pan 4.0 server预测蛋白的Th细胞抗原表位。结果表明,Rv0081蛋白由114个氨基酸组成,相对分子质量为12356.32,亚细胞定位于细胞质中,为稳定的疏水性蛋白,无跨膜区和信号肽,含有1个糖基化位点及9个磷酸化位点;二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,结构较松散;与hycE、hycP、Rv0088、Rv0083、hycD、hycQ、Rv0082、devR、Rv0080及Rv0079蛋白存在相互作用关系;综合分析各软件预测结果筛选出6个优势B细胞抗原表位、6个优势CTL细胞抗原表位及7个优势Th细胞抗原表位。Mtb Rv0081蛋白具有较多潜在的候选B、T细胞抗原表位,可作为研发新型结核疫苗的候选抗原。

关键词：结核分枝杆菌 Rv0081蛋白生物信息学抗原表位疫苗

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用于汉滩病毒固有免疫应答研究的永生化人脐静脉内皮细胞系的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第12期37卷 1057-1065页

作者：张惠贾岩靳嘉岩叶伟程林峰雷迎峰张芳琳刘赫空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员三大队十一队陕西西安710032

目的通过导入人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因构建永生化人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC-hTERT),探索永生化HUVEC对汉滩病毒(HTNV)感染效率及细胞固有免疫调控的影响,评价HUVEC-hTERT作为研究HTNV细胞模型的潜能。方法将hTERT基因克隆入慢病... 详细信息

目的通过导入人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因构建永生化人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC-hTERT),探索永生化HUVEC对汉滩病毒(HTNV)感染效率及细胞固有免疫调控的影响,评价HUVEC-hTERT作为研究HTNV细胞模型的潜能。方法将hTERT基因克隆入慢病毒载体,构建pCDH-CMV-hTERT-EF1-puro质粒后包装慢病毒并感染HUVEC;嘌呤霉素筛选稳定表达hTERT基因的HUVEC命名为HUVEC-hTERT;利用显微镜观察和免疫荧光细胞化学染色法对HUVEC-hTERT的形态及内皮细胞标志分子人血管性假血友病因子(vWF)、CD31和血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)进行鉴定;利用免疫荧光法检测HTNV感染后核衣壳蛋白(NP)阳性细胞百分比,观察HTNV对HUVEC和HUVEC-hTERT的感染效率差异;利用实时定量PCR和Western blot法分别检测感染HTNV后,病毒基因组小片段(S)及其编码的NP在不同时间点的复制水平,验证HTNV在细胞中的增殖效率;利用实时定量PCR检测细胞β干扰素(IFN-β)、黏病毒抗性蛋白A(MxA)、MxB、干扰素诱导蛋白2(IFIT2)、干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)及炎症因子环加氧酶2(COX2)、细胞间黏附因子(ICAM)和CC趋化因子配体5(CCL5)的mRNA水平并利用Western blot法检测IFIT2、IFITM3和MxA的蛋白水平,观察细胞固有免疫对HTNV的反应是否一致。利用Western blot、实时定量PCR检测感染HTNV后细胞上述分子的表达情况,观察永生化后细胞固有免疫对HTNV的反应是否一致。结果成功筛选出永生化细胞系HUVEC-hTERT,鉴定出其与HUVEC具有相同的表型并表达内皮细胞标志分子vWF、CD31、VE-cadherin;HUVEC-hTERT和HUVEC均可被HTNV感染且感染效率基本相同;在HTNV感染过程中,HUVEC-hTERT的固有免疫分子,如IFN-β、MxA、MxB、IFIT2、IFITM3、COX2、ICAM及CCL5的表达情况与HUVEC相同,表明HUVEC-hTERT固有免疫调控未发生改变。结论HUVEC-hTERT可在一定程度上代替原代HUVEC用于HTNV感染致固有免疫应答调控的研究。

关键词：永生化人脐静脉血管内皮细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT) 汉滩病毒固有免疫

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空斑试验在微生物实验教学中的改进及应用

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热带医学杂志 2024年第1期24卷 142-145,151页

作者：徐鸣阳朱勋谭泳谣谭姹辉陈剑煌李美玉中山大学医学院基础与临床医学教学实验室广东深圳518107 中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 中山大学中山医学院基础医学实验教学中心广东广州510080

目的通过更换侵染病毒来改进制作“空斑试验”示教板,以得到更鲜明的“空斑试验”结果,使其更好地服务本科实验教学。方法用不同滴度的寨卡病毒和登革病毒感染培养于12孔细胞培养板的Vero细胞,置37℃吸附2 h。吸附后,用1%甲基纤维素Eagl... 详细信息

目的通过更换侵染病毒来改进制作“空斑试验”示教板,以得到更鲜明的“空斑试验”结果,使其更好地服务本科实验教学。方法用不同滴度的寨卡病毒和登革病毒感染培养于12孔细胞培养板的Vero细胞,置37℃吸附2 h。吸附后,用1%甲基纤维素Eagle氏覆盖液进行覆盖步骤,置细胞于37℃培养6~7 d将细胞固定和染色后,用自来水冲洗,待干。结果感染寨卡病毒的未死亡脱落的Vero细胞被结晶紫染色,紫色背景明显。肉眼可看到寨卡病毒感染细胞产生的无色空斑,空斑呈圆形,清晰完整,边缘整齐。空斑数量随着病毒浓度的升高而增加,复孔产生空斑数量趋势一致。感染登革病毒的未脱落Vero细胞被染成紫色,形成较鲜明的紫色背景,登革病毒感染细胞产生了无色空斑,但是空斑的形成数量较少,且不是所有复孔都产生了空斑。随着病毒稀释倍数增加,产生的空斑数量无明显减少趋势。结论用寨卡病毒感染Vero细胞能得到更典型的空斑试验结果,该方法更适用于本科教学制作示教结果用。

关键词：空斑试验 Vero细胞寨卡病毒登革病毒实验教学

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结核分枝杆菌EsxV亚单位疫苗黏膜免疫诱导的免疫应答

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中国人兽共患病学报 2022年第5期38卷 379-386页

作者：白鹭宁唤唤康健梁璇谢燕玲彭钰君张婧瑶路延之柏银兰延安大学生命科学学院延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室西安710032 西北大学生命科学学院西安710069

目的研究结核分枝杆菌抗原Rv3619c(EsxV)黏膜免疫小鼠诱导的免疫应答水平。方法PCR法扩增esxV基因克隆入原核表达载体pET28a(+),获得的重组***诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定蛋白的表达,亲和层析法纯化EsxV蛋白。以E... 详细信息

目的研究结核分枝杆菌抗原Rv3619c(EsxV)黏膜免疫小鼠诱导的免疫应答水平。方法PCR法扩增esxV基因克隆入原核表达载体pET28a(+),获得的重组***诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定蛋白的表达,亲和层析法纯化EsxV蛋白。以EsxV和/或联合环二腺苷酸(c-di-AMP)经鼻黏膜免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠特异性抗体水平及亚类,MTS法检测脾细胞增殖,qRT-PCR检测脾和肺脏细胞因子表达水平,ELISA法检测脾细胞因子分泌水平。结果成功构建EsxV的原核表达载体pET28a(+)-esxV并诱导表达目的蛋白,亲和层析法获得了纯化的重组EsxV蛋白。EsxV经黏膜免疫可诱导显著的体液免疫应答,但诱导的细胞免疫应答水平不高。EsxV与c-di-AMP经黏膜接种可诱导特异性IgG水平增加,EsxV蛋白特异的脾细胞增殖,脾和肺细胞的IFN-γ转录增加。c-di-AMP显著提高EsxV特异的IFN-γ、IL-2、IL-10和IL-17细胞因子分泌,而不诱导炎症因子TNF-α和IL-6表达。结论EsxV与c-di-AMP佐剂构建的亚单位疫苗可诱导特异性体液和细胞免疫应答,可进一步用于新型结核病亚单位疫苗的研制。

关键词：结核分枝杆菌 6kDa早期分泌靶抗原分泌系统蛋白V(EsxV) 亚单位疫苗黏膜免疫环二腺苷酸

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儿童口腔分龄护理和科学防龋专家共识

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空军军医大学学报 2024年第10期45卷 1087-1091,1098页

作者：陈敏珊李刚龚怡吴友农汪俊胡德渝葛立宏彭友俭陈玲冯雪广州舒客实业有限公司广东省口腔护理(舒客)工程技术研究中心广东广州510665 西北大学医学院口腔医学系口腔预防医学教研室陕西西安710069 首都医科大学口腔医学院口腔基础医学教研室北京100050 南京医科大学口腔医学院口腔内科教研室江苏南京210029 上海交通大学口腔医学院儿童口腔医学教研室上海200011 四川大学华西口腔医学院口腔预防医学教研室四川成都610041 北京大学口腔医学院儿童口腔医学教研室北京100081 武汉大学人民医院口腔医学教研室湖北武汉430060 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室广东广州510070 西北大学医学院口腔医学系口腔正畸学教研室陕西西安710069

龋病一直是困扰儿童口腔健康的重要因素,国家卫生健康委员会制定的《健康口腔行动方案(2019—2025年)》规划指出,针对口腔健康问题的长期规划将逐步从“治疗”转向“预防”,而科学的预防则是提升口腔健康的重中之重。科学防龋应从不同... 详细信息

龋病一直是困扰儿童口腔健康的重要因素,国家卫生健康委员会制定的《健康口腔行动方案(2019—2025年)》规划指出,针对口腔健康问题的长期规划将逐步从“治疗”转向“预防”,而科学的预防则是提升口腔健康的重中之重。科学防龋应从不同年龄段儿童口腔特点出发,选择含氟量适宜且牙本质相对磨损值适当的牙膏,使用专属的口腔清洁护理产品,建立长效防蛀的分龄护理观念。本共识从儿童口腔护理现状、家长护理误区、儿童不同年龄段口腔特点、分龄护理、长效防蛀阐述科学防龋策略,从而降低儿童患龋率,提高儿童口腔健康水平。

关键词：龋齿分龄护理牙本质相对磨损科学防龋专家共识

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结核分枝杆菌抗原融合蛋白Ag85B-ESAT6和Rv2031c-Rv2626c重组腺病毒的构建及鉴定

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中国人兽共患病学报 2022年第3期38卷 191-195页

作者：王丽梅姜泓康健靳芊芊陕西省西安市空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室西安710032 传染病诊疗中心空军医科大学附属第二医院西安710038

目的构建表达结核分枝杆菌多阶段抗原融合蛋白Ag85B-ESAT6(AE)和Rv2031c-Rv2626c(R2)的重组腺病毒,为其用于结核病新型疫苗的研究奠定基础。方法体外合成人延长因子1α(EF1α)启动子DNA序列,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,... 详细信息

目的构建表达结核分枝杆菌多阶段抗原融合蛋白Ag85B-ESAT6(AE)和Rv2031c-Rv2626c(R2)的重组腺病毒,为其用于结核病新型疫苗的研究奠定基础。方法体外合成人延长因子1α(EF1α)启动子DNA序列,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建含有CMV、EF1α双启动子的腺病毒穿梭载体。PCR扩增课题组前期构建的AE、R2融合蛋白基因,并依次亚克隆至上述腺病毒穿梭载体的CMV和EF1启动子下游,阳性重组穿梭质粒命名为pAd-AE-R2。将pAd-AE-R2与骨架质粒共转染HEK293细胞,包装获得重组腺病毒,命名为Ad-AE-R2。RT-PCR法和间接免疫荧光法(IFA)对重组腺病毒表达的AE、R2融合蛋白的基因和蛋白表达水平进行鉴定。结果Ad-AE-R2瞬时转染的HEK293细胞中可转录表达AE、R2融合蛋白基因。IFA法采用Ag85B、ESAT-6、Rv2626c和Rv2031c 4种抗原的单克隆抗体可分别检测到Ad-AE-R2感染的巨噬细胞中具有特异性的绿色荧光,表明Ad-AE-R2能够在宿主细胞内表达AE、R2融合蛋白。结论成功构建并包装获得表达结核分枝杆菌多阶段抗原融合蛋白AE、R2的重组腺病毒,为其用于结核病新型疫苗研究奠定基础。

关键词：结核分枝杆菌多阶段抗原 Ag85B ESAT-6 Rv2031c Rv2626c 重组腺病毒

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CC趋化因子配体20在肝细胞癌组织中的表达及其在肝细胞肝癌预后评估中作用的生物信息学分析

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吉林大学学报（医学版） 2022年第4期48卷 1010-1017页

作者：胡连涛邓文俊鹿士振孙跞李学斌黎楚豪王欣然张春斌李玥王伟群佳木斯大学基础医学院生理学教研室黑龙江佳木斯154007 黑龙江省微生物-免疫调解网络与相关疾病重点实验室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学第一临床医学院免疫科黑龙江佳木斯154007 漳州卫生职业学院医学技术教研室/翻译医学检测与应用技术协作创新中心福建漳州363000

目的:研究CC趋化因子配体20(CCL20)在肝细胞肝癌(LIHC)组织中的表达,并探讨其对LIHC患者预后的影响,阐述CCL20影响LIHC恶性行为的机制。方法:采用Rstudio(4.03)软件从癌症基因图谱(TCGA)和UCSC Xena平台获取LIHC患者癌组织和癌旁组织中C... 详细信息

目的:研究CC趋化因子配体20(CCL20)在肝细胞肝癌(LIHC)组织中的表达,并探讨其对LIHC患者预后的影响,阐述CCL20影响LIHC恶性行为的机制。方法:采用Rstudio(4.03)软件从癌症基因图谱(TCGA)和UCSC Xena平台获取LIHC患者癌组织和癌旁组织中CCL20 mRNA表达水平和临床数据,比较CCL20 mRNA在2种组织中的表达差异,并利用GEPIA联合GTEx数据对上述结果进行验证;采用Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析法分析CCL20 mRNA表达水平与LIHC患者预后的关系。通过Pearson相关分析对LIHC患者CCL20 mRNA表达水平与甲胎蛋白(AFP)水平的相关性进行分析,并通过受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)、诺谟图和校正曲线分析LIHC患者CCL20 mRNA表达水平与患者临床诊断和生存预测情况的相关性。采用TCGA数据库对LIHC患者癌组织中CCL20 mRNA的表达进行基因集富集分析(GSEA),分析CCL20 mRNA表达水平与DNA拷贝数突变和DNA甲基化水平的相关性。结果:与癌旁组织比较,LIHC患者癌组织中CCL20 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);Kaplan-Meier生存分析,CCL20 mRNA低表达患者的预后明显优于CCL20 mRNA高表达患者(HR=1.789,P<0.01),且Cox单因素和多因素回归分析表明CCL20 mRNA表达水平为LIHC患者的独立预后因素(P<0.05);Pearson相关分析,LIHC患者癌组织中CCL20 mRNA表达水平与AFP水平呈正相关关系(P<0.01);CCL20 mRNA表达水平在LIHC患者临床诊断评估中具有一定的参考价值(AUC=0.69,P<0.01),且可有效预测LIHC患者生存率。GSEA分析,CCL20可通过趋化因子、NOD样受体(NLR)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)和Toll样受体(TLR)等肿瘤相关信号通路参与LIHC细胞黏附、细胞因子与细胞因子受体相互作用和核糖体功能实施等过程。遗传学和表观遗传学分析,与正常二倍体组比较,拷贝数丢失组和拷贝数扩增组样本中CCL20 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与拷贝数丢失组比较,拷贝数扩增组样本中CCL20 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);CCL20 mRNA表达水平与CCL20 DNA甲基化水平呈负相关关系(cor=-0.11,P<0.01)。结论:LIHC组织中CCL20 mRNA表达上调与患者预后不良有明显的关联性,CCL20通过多种信号途径参与LIHC的恶性进程,可作为评估和预测LIHC患者预后和生存的指标之一。

关键词： CC趋化因子配体20 肝细胞肝癌生物信息学预后临床诊断

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猴痘的病原学、流行病学和防治方法

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国际生物制品学杂志 2023年第5期46卷 289-294页

作者：潘立鑫王冠予樊晓晖广西医科大学基础医学院微生物教研室广西医科大学基因组与个体化医学研究中心南宁530021

猴痘是由猴痘病毒引起的人畜共患病。2022年以前,猴痘主要在非洲流行,仅少数非洲外的国家报道了猴痘病例。然而,自2022年5月英国报道了1例猴痘病例以来,全球已有多个国家和地区报道了疑似病例和确诊病例。此次猴痘疫情的传播模式不同以... 详细信息

猴痘是由猴痘病毒引起的人畜共患病。2022年以前,猴痘主要在非洲流行,仅少数非洲外的国家报道了猴痘病例。然而,自2022年5月英国报道了1例猴痘病例以来,全球已有多个国家和地区报道了疑似病例和确诊病例。此次猴痘疫情的传播模式不同以往,且病毒的基因组测序结果提示病毒存在微进化迹象。此文对猴痘的病原学、流行病学和防治方法进行综述,以期为猴痘的科学防治提供信息。

关键词：猴痘病原学流行病学防治措施

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精神分裂症生物标志物研究的现状与展望

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中华检验医学杂志 2022年第11期45卷 1191-1196页

作者：朱梦圆陈庆李丹王梦霞王仁宇朱雨昕金伟峰陈姝子李萍李振华马佩俊刘帅高琼娄小燕胥杰朱莉莉赵玲梁康怡陈京红程训佳董珂郭晓奎李擎天史云孙隽钰许华斌林萍上海交通大学医学院附属精神卫生中心检验科上海200030 上海交通大学医学院附属精神卫生中心上海市重性精神病重点实验室上海201100 复旦大学基础医学院医学微生物教研室上海200032 上海交通大学医学院全球健康学院上海200025 上海交通大学医学院医学技术学院检验系上海200025 美国希望之城医学中心贝克曼研究所加利福尼亚州91010 伦敦国王学院生命科学与医学学院伦敦WC2R2LS 皖西卫生职业学院附属医院检验科六安237008

精神分裂症是一种严重的精神疾病,临床诊疗过程依赖量表评估、正确的心理疏导、相关的药物治疗等措施,缺乏量化的实验室检测指标以评估疾病进程。该文在荟萃大量文献、临床相关共识、指南和专家建议的基础上,提出了基于循证的精神分裂... 详细信息

精神分裂症是一种严重的精神疾病,临床诊疗过程依赖量表评估、正确的心理疏导、相关的药物治疗等措施,缺乏量化的实验室检测指标以评估疾病进程。该文在荟萃大量文献、临床相关共识、指南和专家建议的基础上,提出了基于循证的精神分裂症潜在实验室诊断相关生物标志物,如遗传学标志物、神经递质、神经发育相关蛋白、肠道菌群等,讨论了这些生物标志物在该领域未来的应用拓展方向,以期为精神分裂症早期精准诊断、治疗、预后康复评估提供客观依据。

关键词：精神分裂症实验室检测遗传学标志物神经递质肠道菌群

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严重急性呼吸综合征冠状病毒2受体血管紧张素转换酶2在人肺的表达

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海军军医大学学报 2022年第11期43卷 1251-1256页

作者：林裕贵李培群钟伟娟解中李周怡李程颐林春秀张增峰广西医科大学基础医学院微生物学教研室南宁530021 广西医科大学生物医药协同创新中心南宁530021 江南大学食品科学与技术国家重点实验室无锡214122

目的考察人肺中严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体血管紧张素转换酶2(ACE2)的表达,探讨ACE2在SARS-CoV-2感染中的意义。方法利用基因型-组织表达(GTEx)数据库分析人体正常组织器官间ACE2的基因转录水平,免疫组织化学检测原... 详细信息

目的考察人肺中严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体血管紧张素转换酶2(ACE2)的表达,探讨ACE2在SARS-CoV-2感染中的意义。方法利用基因型-组织表达(GTEx)数据库分析人体正常组织器官间ACE2的基因转录水平,免疫组织化学检测原代人肺组织中不同解剖部位ACE2的蛋白表达水平。结果人肺中ACE2基因及蛋白表达水平均很低,主要表达于肺泡组织中的少量Ⅱ型肺泡上皮细胞,而在血管内皮组织以及支气管、细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气管等各级支气管组织中均未见表达。结论ACE2在人肺中表达水平很低,主要表达于少量Ⅱ型肺泡上皮细胞,表明人肺具有引起SARS-CoV-2感染的ACE2分子基础,SARS-CoV-2在人肺中可能存在其他感染机制。

关键词：血管紧张素转换酶2 肺严重急性呼吸综合征冠状病毒2 感染受体

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