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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第02期 198-204页

作者：吴银娟易雪晴李美玉徐安远武奥迅钟籽丰李学荣中山大学中山医学院寄生虫学教研室中山大学教育部热带病防治研究重点实验室广东省媒介生物防控工程技术研究中心中山大学中山医学院基础医学实验教学中心

目的探究华支睾吸虫外泌体中关键miRNA分子在肝纤维化中的作用，以期为华支睾吸虫致肝纤维化的机制提供新的线索。方法从阳性家猫肝脏剖取华支睾吸虫成虫，体外培养，从排泄/分泌产物中提取外泌体，透射电子显微镜观察并对粒径分布进... 详细信息

目的探究华支睾吸虫外泌体中关键miRNA分子在肝纤维化中的作用，以期为华支睾吸虫致肝纤维化的机制提供新的线索。方法从阳性家猫肝脏剖取华支睾吸虫成虫，体外培养，从排泄/分泌产物中提取外泌体，透射电子显微镜观察并对粒径分布进行鉴定。提取外泌体总RNA并测序，miRDeep2软件预测miRNA，与miRBase数据库中序列进行比对，测算比较每个miRNA的表达量并筛选。使用miRanda、miRDB、PITA软件分别对选定mi RNA进行靶基因预测分析，top GO、cluster Profiler软件分别对靶基因的基因本体和信号通路进行富集分析。分别用浓度为5、10、20μg/ml外泌体与肝星状细胞（HSC）共培养24、48 h，设置空白对照组；终浓度为50 nmol/L的选定miRNA （Csi-miR-125a）转染HSC 48 h，设置阴性对照组，均采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组HSC增殖情况。使用小鼠抗人β-actin、兔抗人α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、兔抗人Ⅲ型胶原、兔抗人微管相关蛋白1A/1B-轻链3 （LC3）、兔抗人p62、兔抗人细胞外信号调节激酶（ERK）、兔抗人p-ERK抗体（1∶1 000）作为一抗，辣根过氧化物酶（HRP）标记的山羊抗小鼠或抗兔Ig G （1∶10 000）作为二抗，蛋白质免疫印迹（Western blotting）检测HSC的活化相关蛋白α-SMA、Ⅲ型胶原，自噬相关蛋白LC3、p62的表达水平及信号通路相关ERK蛋白磷酸化水平。结果华支睾吸虫外泌体呈小泡状，具有磷脂双分子层结构，粒径分布主峰值为72 nm，分布范围主要为30～150 nm。外泌体中含有多种miRNA，选择表达量次高且与已知miRNA序列相似度高的CsimiR-125a进行后续研究。Csi-miR-125a存在301个靶基因预测位点重合，主要富集在细胞质、胞浆等细胞组件，参与蛋白结合、离子结合等分子功能，涉及生物调节、系统发育、神经系统发育等生物过程；靶基因信号通路大多富集于Hedgehog信号通路、细胞外基质-受体互作的相关通路、NOD样受体信号通路等。CCK-8法检测结果表明，外泌体浓度为10μg/ml、孵育24 h时A450达最高，为1.707;Csi-miR-125a共孵育组A450为1.122，高于阴性对照组（0.492）。Western blotting检测结果显示，阴性对照组及Csi-miR-125a组的α-SMA条带灰度值分别为0.588和0.904（t=10.560,P<0.01）；Ⅲ型胶原条带灰度值分别为0.783和0.997 （t=6.483,P<0.05）。阴性对照组和Csi-miR-125a组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ条带灰度比值分别为1.093和2.215 （t=5.206,P<0.05）,p62条带灰度值分别为0.537和1.369（t=13.100,P<0.01）,p-ERK/ERK条带灰度比值分别为0.791和1.037 （t=5.067,P<0.05）。结论华支睾吸虫外泌体中miRNA种类丰富多样，且涉及多种细胞功能和多条信号通路。Csi-miR-125a可能通过阻断HSC自噬流和激活ERK信号通路促进HSC增殖活化从而在肝纤维化的发生中发挥一定的作用。

关键词：华支睾吸虫肝纤维化外泌体 Csi-miR-125a ERK信号通路

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红景天对异丙肾上腺素(ISO)致大鼠急性心肌缺血的保护作用

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复旦学报（医学版） 2015年第1期42卷 72-76页

作者：尹博马丁陈鹴柴昉张惠琴马淑兰复旦大学基础医学院2009级临床医学八年制2班上海200032 复旦大学基础医学院基础医学院医学实验教学中心上海200032

目的研究中药红景天(Rhodiola Rosea,R)对异丙肾上腺素(isoproternol,ISO)致大鼠急性心肌缺血的保护作用并初步探讨其机制。方法 SD雌性大鼠28只,随机分为4组,每组7只:正常对照组(N组);ISO模型组(ISO组);红景天保护组(R组);普萘洛尔(pro... 详细信息

目的研究中药红景天(Rhodiola Rosea,R)对异丙肾上腺素(isoproternol,ISO)致大鼠急性心肌缺血的保护作用并初步探讨其机制。方法 SD雌性大鼠28只,随机分为4组,每组7只:正常对照组(N组);ISO模型组(ISO组);红景天保护组(R组);普萘洛尔(propranolol,PRO)阳性对照组(PRO组)。采用皮下注射ISO的方法建立大鼠急性心肌缺血模型。观察各组心电图改变、血流动力学参数(LVSP、LVEDP、±dp/dt max)的变化,测量各组心肌缺血面积(myocardial ischemia area,MIA),并检测血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力。结果 ISO组心电图J点改变大于N组(P<0.05);与ISO组相比,R组的±dp/dt max有明显升高(P<0.05),MIA明显减少(P<0.05),SOD活力明显升高(P<0.05)。结论红景天对ISO致大鼠急性心肌缺血具有保护作用,该作用可能与清除受损心肌细胞内自由基有关。

关键词：红景天异丙肾上腺素(ISO) 心肌缺血

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莨菪烷类M3受体拮抗剂的合成、活性测定及其分子结构与活性的定量关系

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上海交通大学学报（医学版） 2019年第4期39卷 366-371页

作者：金玉杰刘慧中胡优敏张建华蔡玉兴李宁钮因尧上海交通大学基础医学院基础医学实验教学中心化学生物学实验室上海200025 上海交通大学基础医学院基础医学实验教学中心功能学实验室上海200025 上海交通大学基础医学院化学教研室上海200025

目的·建立莨菪烷类M3受体拮抗剂的定量结构-活性关系(quantitative structure-activity relationship,QSAR)模型,为后续高活性分子的设计提供指导。方法·以3α-羟基莨菪烷(J0)为起始物,通过对莨菪烷母核C-3α位的结构进行改良... 详细信息

目的·建立莨菪烷类M3受体拮抗剂的定量结构-活性关系(quantitative structure-activity relationship,QSAR)模型,为后续高活性分子的设计提供指导。方法·以3α-羟基莨菪烷(J0)为起始物,通过对莨菪烷母核C-3α位的结构进行改良,合成新莨菪烷类化合物(J1～J6)。选取富含M3受体的豚鼠气道环为测试样本,通过离体组织功能实验,测试新莨菪烷类化合物对M3受体的拮抗参数(antagonistic parameter,pA_2)。利用新合成的和课题组原有的莨菪烷类化合物的pA_2建立QSAR模型,通过分析该模型的能量场(立体场、静电场)对莨菪烷类化合物拮抗活性的影响,获得结构优化提示。结果·本研究共合成6个新莨菪烷类化合物。上述化合物均可对M3受体产生拮抗作用,其中J4的拮抗活性最大(pA_2=7.992)。QSAR模型的交叉验证相关系数平方(q^2)为0.585,非交叉验证相关系数平方(r^2)为0.993。结论·在化合物C-3α位的R取代基中,环上π键的共轭程度较大且有O或N原子参与共轭时,可明显提高化合物的拮抗活性。

关键词：慢性阻塞性肺疾病莨菪烷 M3 受体拮抗剂定量结构-活性关系

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类胰蛋白酶通过PAR2激活JAK-STAT通路促进小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1表型转换

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复旦学报（医学版） 2015年第5期42卷 607-612,627页

作者：张亚东卢涵宇陈亮李晓波殷莲华王松梅复旦大学基础医学院医学实验教学中心上海200032 复旦大学生理与病理生理学系上海200032

目的研究类胰蛋白酶促进小鼠巨噬细胞表型转换的作用及其机制。方法体外分离培养小鼠巨噬细胞(对照组),并诱导为M1和M2亚型,经类胰蛋白酶和PAR2激动剂分别作用后,通过real-time PCR和Western blot检测巨噬细胞亚型标志物以及JAK-STAT信... 详细信息

目的研究类胰蛋白酶促进小鼠巨噬细胞表型转换的作用及其机制。方法体外分离培养小鼠巨噬细胞(对照组),并诱导为M1和M2亚型,经类胰蛋白酶和PAR2激动剂分别作用后,通过real-time PCR和Western blot检测巨噬细胞亚型标志物以及JAK-STAT信号通路的变化。结果成功分离培养小鼠骨髓来源的巨噬细胞,并诱导其分化为M1和M2亚型。PAR2激动剂(2-Furoyl-LIGRLO-amide)和类胰蛋白酶分别与M1型巨噬细胞分别作用后,M1型标记物iNOS和IL-12高于对照组,而M2型标记物arg1和mrc1与对照相比无明显变化,提示类胰蛋白酶和PAR2激动剂可以促进巨噬细胞向M1型转化,而不会促进M1型向M2型转化。PAR2激动剂和类胰蛋白酶分别与M2型巨噬细胞作用后,M2型标记物arg1和mrc1明显下降,而M1型标记物iNOS和iL-12有所增加,提示类胰蛋白酶和PAR-2激动剂均可促进M2型向M1型转化。类胰蛋白酶作用于M1型巨噬细胞后,JAK2磷酸化水平、STAT和p-STAT的表达水平均无明显变化。类胰蛋白酶作用于M2型巨噬细胞后,JAK2的磷酸化随着时间延长明显升高,STAT的磷酸化水平同时升高,提示类胰蛋白酶可以通过和PAR-2结合而激活JAK2-STAT信号通路,进而引起M2型向M1型转化。结论类胰蛋白酶可能通过与其受体PAR2相互作用后激活JAK-STAT通路,促进小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1亚型转化,起到促进炎症发展的作用,从而进一步加重动脉粥样硬化的发展。

关键词：类胰蛋白酶 PAR2 巨噬细胞M1/M2 JAK-STAT 小鼠

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药物调节自噬治疗阿尔茨海默病

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药学学报 2019年第6期54卷 984-990页

作者：谭成勇田慧珍况煌洪芬芳杨树龙南昌大学基础医学院江西南昌330031 南昌大学基础医学实验教学中心江西南昌330006

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是以认知功能障碍为临床表现的疾病。过去虽然对AD发病机制研究取得了显著进展,但阻断AD病情发展的有效治疗方法并不令人满意。自噬(autophagy)异常被认为参与AD发病机制,自噬的调节可能成为AD治... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是以认知功能障碍为临床表现的疾病。过去虽然对AD发病机制研究取得了显著进展,但阻断AD病情发展的有效治疗方法并不令人满意。自噬(autophagy)异常被认为参与AD发病机制,自噬的调节可能成为AD治疗新策略。经mTOR依赖性和非依赖性(Bcl-2/Beclin-1、GSK-3β和p-AKT等)途径调节自噬的药物显示出很好的缓解AD症状作用。此外,一些从植物中提取出的化合物也被报道可经多途径、多靶标调节自噬阻止AD进展。本文对近期有关药物包括植物提取药物调节自噬治疗AD的研究进展作一综述,为临床治疗AD提供新的理论基础。

关键词：自噬阿尔茨海默病植物提取化合物药物

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鸡胚心脏心电位场电势分布的研究

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南方医科大学学报 2010年第9期30卷 2087-2088,2092页

作者：周翔南方医科大学基础医学院医学实验教学中心广东广州510515

目的探讨心电位场电势分布的本质。方法在电导率不同的3种液态媒质中,将参比点置于远离心电场源的近零电位处,分别采集60个5日龄鸡胚心脏2组相反方向上若干离场源不同距离的测试点的心电图。结果在2种电导率不同的液态媒质中,4个测试方... 详细信息

目的探讨心电位场电势分布的本质。方法在电导率不同的3种液态媒质中,将参比点置于远离心电场源的近零电位处,分别采集60个5日龄鸡胚心脏2组相反方向上若干离场源不同距离的测试点的心电图。结果在2种电导率不同的液态媒质中,4个测试方向上所有采取点都记录到以正波为主的心电图;相同媒质相反方向相同距离点上记录的正立心电图,其R(r)波的振幅无统计学差异(P>0.05)。结论排除了导联参比点对心电标测的影响,以及多腔室壁厚薄的纷扰,心电位场电势一致向外的分布方式,表明心脏电位场不是偶极场,而可能是拟球状面分布的类单源场。

关键词：鸡胚心脏电势分布偶极场拟球面类单源场

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低分子壳聚糖的抗肝纤维化作用及其对TLR_4表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2014年第5期40卷 1013-1017,I0005页

作者：马佳男敬海峰张春梅董友杰何海涛韩旭费瑞吉林大学基础医学院细胞生物学系吉林长春130021 吉林大学基础医学院基础医学实验教学中心吉林长春130021

目的:阐明低分子壳聚糖(LMCTS)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的抑制作用,探讨其对Toll样受体4(TLR4)表达的影响,为开发临床治疗肝纤维化的天然候选药物奠定基础。方法:将72只雄性Wistar大鼠随机均分空白对照组、CCl4组(模型组)、甘... 详细信息

目的:阐明低分子壳聚糖(LMCTS)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的抑制作用,探讨其对Toll样受体4(TLR4)表达的影响,为开发临床治疗肝纤维化的天然候选药物奠定基础。方法:将72只雄性Wistar大鼠随机均分空白对照组、CCl4组(模型组)、甘利欣(DG)组和50、100及150mg·kg-1 LMCTS组(低、中和高剂量组)。除空白对照组外,其余5组大鼠腹腔注射40%CCl4植物油(1.75mL·kg-1),每周2次,共8周;空白对照组大鼠腹腔注射等量100%植物油。从第9周起,DG组及LMCTS组大鼠分别灌胃给予DG和LMCTS(每天1次,共4周)。实验结束后检测各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的活性,光镜下观察肝组织病理学改变,并采用RT-PCR和Western blotting法检测TLR4表达情况。结果:血清学指标,中和高剂量LMCTS组大鼠血清ALT、AST和ALP活性均低于模型组(P<0.05);与低剂量LMCTS组比较,中剂量LMCTS组ALP活性明显降低(P<0.05),而ALT和AST活性降低不明显(P>0.05);高剂量LMCTS组ALT、AST和ALP活性与中剂量LMCTS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色,模型组大鼠部分肝细胞脂肪变性,有明显的炎性细胞浸润和胶原纤维增生,肝小叶破坏明显,而LMCTS组大鼠肝组织的变化有所减轻。RT-PCR和Western blotting法,与模型组比较,LMCTS组大鼠肝组织中TLR4表达水平降低(P<0.05或P<0.01),以高剂量LMCTS组最为明显,不同剂量组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:高剂量LMCTS具有良好的降低肝纤维化大鼠血清转氨酶活性和改善肝纤维化大鼠肝功能的作用,且此过程与TLR4表达水平降低有关。

关键词：低分子壳聚糖四氯化碳肝纤维化 Toll样受体4

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噬菌体治疗肺炎克雷伯菌感染的研究进展

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微生物学报 2024年第1期64卷 61-75页

作者：钟家琪周雨非徐雨林龚思烨张灼阳上海交通大学医学院上海200025 上海交通大学医学院基础医学实验教学中心上海200025

随着细菌的进化以及部分抗生素的滥用,耐药细菌的感染已成为21世纪主要的公共卫生挑战之一。其中,耐药肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)问题尤为突出。噬菌体在治疗耐药细菌感染引起的疾病方面展现出一定的潜力及独特优势,但目前噬... 详细信息

随着细菌的进化以及部分抗生素的滥用,耐药细菌的感染已成为21世纪主要的公共卫生挑战之一。其中,耐药肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)问题尤为突出。噬菌体在治疗耐药细菌感染引起的疾病方面展现出一定的潜力及独特优势,但目前噬菌体治疗尚缺乏统一的临床指导规范。虽然临床上有少数将噬菌体用于治疗肺炎克雷伯菌感染的成功案例,但多数情况下是采用噬菌体配合抗生素疗法,噬菌体在其中的作用仍不明确。本文综合评述国内外研究数据,回顾与噬菌体治疗肺炎克雷伯菌感染相关的数个重点问题,包括噬菌体的特性以及影响其疗效的因素,旨在为肺炎克雷伯菌和其他耐药细菌的噬菌体治疗提供参考。

关键词：肺炎克雷伯菌耐药细菌噬菌体治疗

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上海交通大学医学院基础医学实验教学中心

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基础医学教育 2022年第2期24卷 F0003-F0003页

作者：蔡玉兴上海交通大学医学院基础医学实验教学中心

上海交通大学医学院基础医学实验教学中心成立于2007年,现为国家级虚拟仿真实验中心和上海市实验教学示范中心之一,是医学院立德树人、实践育人的重要基地。同时,中心也是高等学校基础医学实验中心规范化建设和管理工作组组长单位及国... 详细信息

上海交通大学医学院基础医学实验教学中心成立于2007年,现为国家级虚拟仿真实验中心和上海市实验教学示范中心之一,是医学院立德树人、实践育人的重要基地。同时,中心也是高等学校基础医学实验中心规范化建设和管理工作组组长单位及国家虚拟仿真实验教学创新联盟基础医学类专业工作委员会牵头单位。中心实行主任负责制,戎伟芳教授为现任主任,下设病原生物学、形态学、功能学、细胞与分子生物学和化学生物学共五个实验教学平台。

关键词：实践育人立德树人实验教学示范中心基础医学实验教学中心实验教学平台组长单位创新联盟化学生物学

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大黄酸对小鼠非酒精性脂肪肝病的治疗效果分析

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中国临床医学 2021年第1期28卷 106-110页

作者：林晓平余立华海军军医大学基础医学院基础医学实验教学中心上海200433

目的:探讨脂肪相关基因(fat mass and obesity associated gene,FTO)及其抑制剂大黄酸(rhein)在非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的作用。方法:采用高脂饲料喂养的方法构建NAFLD小鼠模型,利用灌胃的方式使... 详细信息

目的:探讨脂肪相关基因(fat mass and obesity associated gene,FTO)及其抑制剂大黄酸(rhein)在非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的作用。方法:采用高脂饲料喂养的方法构建NAFLD小鼠模型,利用灌胃的方式使用rhein进行治疗。为评估造模是否成功及药物治疗效果,分别采用H-E染色、油红染色确定小鼠肝细胞中脂肪沉积的情况,采用Western blot检测FTO蛋白在小鼠肝脏组织中的变化情况。结果:与普饲组相比,高脂组小鼠的摄食量明显降低(P<0.01),高脂+rhein组小鼠的体质量明显低于高脂组(P<0.05)。与高脂组相比,高脂+rhein组小鼠肝细胞中脂肪空泡明显减少,高脂组小鼠肝细胞中脂肪沉积明显多于普饲组,rhein灌胃的小鼠肝细胞中脂肪沉积明显减少。与高脂组相比,高脂+rhein组小鼠的脂肪代谢明显恢复。FTO蛋白在高脂组小鼠的肝组织中显著增多,而在高脂+rhein组小鼠肝组织中FTO蛋白的表达量明显回落。结论:Rhein可减少NAFLD小鼠模型中肝组织FTO蛋白的表达,有治疗NAFLD的潜能。

关键词：脂肪相关基因大黄酸非酒精性脂肪肝病治疗机制

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