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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：张懿敏韩国鸽范彪魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学人民医院武汉大学第一临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学中南医院武汉大学第二临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯(Green Tea（-)-Epigallocatechin-3-Gallate，EGCG)对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力的影响，研究在这一过程中EGCG对血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP) 表达水平以及Rac1活性的影响，并进一步探讨Rac1活性与VASP表达之间的关系。方法：体外培养乳腺癌细胞系MCF-7，(1) 培养基中加入不同浓度EGCG（0，10，25，50，100μg/ml) 或多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作为阳性对照，24 h后用细胞侵袭实验和损伤修复实验分别观察不同处理组中MCF-7 细胞的侵袭和迁移能力的差别;（2) 培养基中加(或不加) 入EGCG（50μg/ml) 处理24 h后用（或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，Western blotting和RT-PCR分别检测各组细胞中Rac1和VASP在蛋白和mRNA 两个水平表达水平的差异，并用GST pull-down 试验检测各组细胞Rac1活性的差异;（3）将Rac1-siRNA片段经脂质体转染至MCF-7细胞内，24小时后，Western blotting和RT-PCR分别检测细胞 Rac1和VASP表达水平的变化。结果：(1) EGCG对MCF-7细胞的侵袭迁移能力均有明显的抑制作用，并且随浓度增加抑制作用逐渐增强，浓度为50μg/ml的EGCG对细胞侵袭转移的抑制作用与阳性对照多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作用相当（P）0.05）;(2) EGF（15 ng/ml) 单独处理15 min后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组显著升高（P＜0.05），EGCG（50μg/ml) 单独处理24 h后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组显著降低（P＜0.05），EGCG（50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，细胞内Rac1活性和VASP表达量与空白组无明显差异（P） 0.05）。（3）Rac1-siRNA转染组细胞中Rac1，VASP的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。结论：EGCG 可以有效抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力，这种抑制作用是通过降低细胞内Rac1的活性，进而减少VASP表达而实现的。

关键词：乳腺癌细胞侵袭转移血管扩张刺激磷蛋白体外培养

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松针油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究

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热带医学杂志 2008年第7期8卷 664-666,671,F0004页

作者：魏凤香李美玉王玲李红枝广东药学院基础学院生物学教研室广州510006 中山大学中山医学院基础医学实验教学中心广州510080

目的研究松针油对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用,探讨Hela细胞发生凋亡的分子机制。方法采用水蒸气蒸馏法提取松针油,气相色谱-质谱联用仪分析成分。MTT法测定松针油对Hela细胞增殖的影响。流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用前... 详细信息

目的研究松针油对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用,探讨Hela细胞发生凋亡的分子机制。方法采用水蒸气蒸馏法提取松针油,气相色谱-质谱联用仪分析成分。MTT法测定松针油对Hela细胞增殖的影响。流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用前后细胞凋亡的情况。应用Western blotting观察Hela细胞caspase-3酶原的变化。用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3,8,9的活性。结果MTT结果显示松针油对Hela细胞生长有明显的抑制作用,呈显著的时间和浓度依赖性。流式细胞仪分析显示松针油诱导Hela细胞发生凋亡,细胞表现出典型的凋亡特征,并且可见凋亡小体,且凋亡率具有时间依赖性。松针油诱导Hela细胞凋亡过程中caspase-3被激活。Caspase-8,9活性增高,又有时间依赖性,且有时间顺序。结论松针油对Hela细胞的生长有明显的抑制作用,其作用机制是松针油可诱导Hela细胞发生凋亡。在诱导细胞凋亡的过程中,caspase-3的激活是介导Hela细胞发生凋亡的共同通路。同时,活化的caspase-8,9可能参与了caspase-3的激活,从而诱导凋亡的发生。

关键词：松针油 Hela细胞细胞凋亡 caspase

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VASP下调及其对胃癌细胞SGC7901迁移能力的影响

VASP下调及其对胃癌细胞SGC7901迁移能力的影响

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湖北省暨武汉市病理生理学会第十四届学术年会

作者：王静魏蕾武汉大学医学部基础医学院病理学与病理生理学系武汉大学医学部基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心

目的:肿瘤转移是一个复杂的过程,肿瘤细胞自身的迁移能力与肿瘤的侵袭转移密切相关。由肌动蛋白调节蛋白所调控的肌动蛋白聚合/解聚的动态变化是决定肿瘤细胞迁移能力的关键环节。血管扩张刺激磷蛋白(vasodilator-stimulated phosphopro... 详细信息

目的:肿瘤转移是一个复杂的过程,肿瘤细胞自身的迁移能力与肿瘤的侵袭转移密切相关。由肌动蛋白调节蛋白所调控的肌动蛋白聚合/解聚的动态变化是决定肿瘤细胞迁移能力的关键环节。血管扩张刺激磷蛋白(vasodilator-stimulated phosphoprotein,VASP)作为一种肌动蛋白调节

关键词： SGC7901 Rac1 VASP 迁移

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医学留学研究生病理生理学实验教学体会

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医学教育探索 2008年第4期7卷 430-431页

作者：魏蕾韩国鸽张懿敏李华范彪武军驻武汉大学础医学院病理生理教研室/基础医学实验教学中心湖北武汉430071 武汉大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室湖北武汉430071

留学生教育是我国高等教育的一个重要组成部分。针对近年来我校来华医学留学研究生教育持续发展的现状,我们从抓住学生特点,改进病理生理学教学方法和手段,重视实验教学等方面进行分析,从而探究适合我国的医学留学研究生病理生理学教学... 详细信息

留学生教育是我国高等教育的一个重要组成部分。针对近年来我校来华医学留学研究生教育持续发展的现状,我们从抓住学生特点,改进病理生理学教学方法和手段,重视实验教学等方面进行分析,从而探究适合我国的医学留学研究生病理生理学教学方法。

关键词：医学留学研究生病理生理学研究生课程实验课

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淫羊藿甙对MCF-7细胞侵袭转移的影响及机制

淫羊藿甙对MCF-7细胞侵袭转移的影响及机制

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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：范彪韩国鸽张懿敏陈华奇魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学中南医院武汉大学第二临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学人民医院武汉大学第一临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学人民医院武汉大学第一临床学院

目的：淫羊藿（ICA）是小檗科多年生草本植物，别名仙灵脾，是具补肾壮阳，祛风除湿功效的特色传统中草药。本实验中着重观察ICA对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力的影响，研究在这一过程中ICA对血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulat... 详细信息

目的：淫羊藿（ICA）是小檗科多年生草本植物，别名仙灵脾，是具补肾壮阳，祛风除湿功效的特色传统中草药。本实验中着重观察ICA对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力的影响，研究在这一过程中ICA对血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP) 表达水平以及Rac1活性的影响，并进一步探讨Rac1活性与VASP表达之间的关系。方法：体外培养乳腺癌细胞系MCF-7：（1) 培养基中加入不同浓度ICA（0，10，25，50，100μg/ml) 或多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作为阳性对照，24 h后用细胞侵袭实验和损伤修复实验分别观察不同处理组中MCF-7细胞的侵袭和迁移能力的差别;（2) 培养基中加(或不加)入ICA（50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，Western blotting和RT-PCR分别检测各组细胞中 Rac1和VASP在蛋白和mRNA两个表达水平的差异，并用GST pull-down试验检测各组细胞Rac1活性的差异。（3）将Rac1-siRNA片段经脂质体转染至MCF-7 细胞内，24小时后，Western blotting和RT-PCR分别检测细胞Rac1和VASP表达水平的变化。结果：（1) ICA对MCF-7 细胞的侵袭迁移能力均有明显的抑制作用，并且随浓度增加抑制作用逐渐增强，浓度为50μg/ml的ICA对细胞侵袭转移的抑制作用与阳性对照多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作用相当（P）0.05）;（2) EGF（15 ng/ml) 单独处理15 min后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组明显升高（P＜0.05），ICA（50μg/ml) 单独处理24 h后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组明显降低（P＜0.05），ICA（50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，细胞内Rac1活性和VASP表达量与空白组无明显差异（P）0.05）。（3）Rac1-siRNA转染组细胞中Rac1，VASP的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。结论：ICA 可以有效抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力，这种抑制作用是通过降低细胞内Rac1的活性，进而减少VASP表达而实现的。

关键词：乳腺癌淫羊藿甙细胞侵袭迁移血管扩张刺激磷蛋白

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VASP对内皮细胞ECV304迁移的调节作用的研究

VASP对内皮细胞ECV304迁移的调节作用的研究

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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：陈华奇王静竹梦魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学第二临床学院武汉大学中南医院

目的：内皮细胞的迁移在血管新生、伤口愈合、内皮损伤的修复等过程中起着重要的作用。肌动蛋白的重排在细胞移动过程中起着重要作用。血管扩张刺激磷蛋（vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP）能调节细胞移动过程中的肌动蛋... 详细信息

目的：内皮细胞的迁移在血管新生、伤口愈合、内皮损伤的修复等过程中起着重要的作用。肌动蛋白的重排在细胞移动过程中起着重要作用。血管扩张刺激磷蛋（vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP）能调节细胞移动过程中的肌动蛋白的重排。我们通过RNA干扰抑制内皮细胞ECV304中肌动蛋白相关蛋白VASP的表达水平，研究VASP在内皮细胞ECV304迁移过程中的作用。方法：化学合成针对VASP的特异性siRNA片段（VASP-942、VASP-1002、VASP-1024）和阴性对照siRNA，通过半定量RT-PCR和Western blotting分别检测mRNA和蛋白表达水平，细胞损伤修复实验检测转染细胞的迁移能力。（1) 通过半定量RT-PCR和Western blotting分别检测VASP的mRNA和蛋白表达水平，筛选出针对VASP的最有效的siRNA 片段;（2）以筛选出的最有效的VASP-siRNA转染ECV304细胞，设立阴性对照和空白对照，检测细胞中VASP的mRNA表达水平和蛋白表达水平以及细胞的迁移能力。结果： VASP-siRNA 转染ECV304 后，与对照组相比，被转染细胞中VASP的 mRNA和蛋白表达水平明显下降（P<0.05），细胞的迁移能力明显增强（P<0.05）。结论：成功设计并筛选出针对VASP的特异性siRNA片段;（2）VASP对内皮细胞 ECV304的迁移能力有着重要的调节作用，内皮细胞ECV304中VASP表达水平的下降可促进内皮细胞的迁移。

关键词：内皮细胞血管扩张刺激磷蛋细胞移动伤口愈合

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多媒体教学与传统教学在人体寄生虫学实验教学中的结合应用

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热带医学杂志 2008年第9期8卷 993-994,986页

作者：张瑞琳徐劲中山大学中山医学院基础医学实验教学中心广州510080 中山大学中山医学院寄生虫学教研室广州510080

目的探讨多媒体实验与传统实验在人体寄生虫学实验教学中的应用效果。方法制作多种寄生虫多媒体实验教学课件,配合传统实验教学内容在本科实验教学中试用。结果多媒体实验在人体寄生虫学实验教学中起着重要作用,但多媒体实验教学并不能... 详细信息

目的探讨多媒体实验与传统实验在人体寄生虫学实验教学中的应用效果。方法制作多种寄生虫多媒体实验教学课件,配合传统实验教学内容在本科实验教学中试用。结果多媒体实验在人体寄生虫学实验教学中起着重要作用,但多媒体实验教学并不能代替传统的实验教学。结论多媒体教学与传统教学相结合的实验教学模式在人体寄生虫学实验教学中有较好效果。

关键词：人体寄生虫学多媒体实验教学传统实验教学

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槲皮素对氧化高密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用

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微循环学杂志 2008年第2期18卷 16-18页

作者：肖秀凤杨瑞莉林淑贤刘译聪苏可周璇喻红魏蕾武汉大学基础医学实验教学中心武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉430071 武汉大学第二临床学院武汉大学基础医学院生物化学与分子生物学系

目的:研究槲皮素(Que)对含氧化高密度脂蛋白(oxHDL)血浆致人内皮细胞株(ECV304)损伤的保护作用。方法:常规培养ECV304细胞被分成5组:对照组(ECV304+HDL)、oxHDL组(ECV304+ox-HDL)、Que大剂量处理组(ECV304+oxHDL+80μmol/LQue)、Que中剂量处理组(ECV304+oxHDL+60μmol/LQue)及Que小剂量处理组(ECV304+oxHDL+40μmol/LQue),培养24h后平行检测各组ECV304形态、细胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量、细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:中、大剂量组ECV304形态较oxHDL组有明显改善,更接近于对照组;与oxHDL组相比,中、大剂量Que处理组ECV304培养液中LDH活性及MDA含量明显降低(P<0.01),而小剂量Que处理组结果无显著差异(P>0.05)。结论:Que对oxHDL致ECV304损伤有保护作用。

关键词：内皮细胞损伤氧化高密度脂蛋白保护作用槲皮素心血管疾病动脉粥样硬化内皮细胞功能常见多发病

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紫外线减毒弓形虫对小鼠旋毛虫感染的影响

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热带医学杂志 2008年第10期8卷 1038-1040页

作者：朱佩娴郑焕钦王树萍张瑞琳黄世光吕芳丽暨南大学医学院广州510632 中山大学中山医学院寄生虫学教研室广州510080 石河子大学医学院石河子832002 中山大学基础医学实验教学中心广州510080

目的探讨紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染的影响。方法ICR小鼠分为两组,实验组为紫外线减毒弓形虫免疫3周后再感染旋毛虫,对照组为旋毛虫单独感染。结果与旋毛虫单感染相比,小鼠预先经紫外线减毒弓形虫免疫再感染旋毛虫,在感染后5... 详细信息

目的探讨紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染的影响。方法ICR小鼠分为两组,实验组为紫外线减毒弓形虫免疫3周后再感染旋毛虫,对照组为旋毛虫单独感染。结果与旋毛虫单感染相比,小鼠预先经紫外线减毒弓形虫免疫再感染旋毛虫,在感染后5～14d其小肠内的成虫数明显增加(肠道排虫明显延迟),而感染后23～90d其肌肉中的幼虫数明显下降。结论紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染具有一定的免疫调节和异源性保护作用。

关键词：旋毛虫紫外线减毒弓形虫免疫调节

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Rac1表达及其活性对人乳腺癌细胞侵袭力的影响

Rac1表达及其活性对人乳腺癌细胞侵袭力的影响

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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：韩国鸽张懿敏范彪魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学人民医院武汉大学第一临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学中南医院武汉大学第二临床学院武汉大学人民医院武汉大学第一临床学院

目的：比较Rac1 表达及其活性在正常人乳腺细胞HUMEC，以及不同侵袭能力乳腺癌细胞系MCF-7，MDA-MB-231 中的差异，并观察转染Rac1-siRNA 片段对乳腺癌细胞MCF-7，MDA-MB-231 中Rac1 表达和活性以及细胞侵袭力的影响。方法：以Weste... 详细信息

目的：比较Rac1 表达及其活性在正常人乳腺细胞HUMEC，以及不同侵袭能力乳腺癌细胞系MCF-7，MDA-MB-231 中的差异，并观察转染Rac1-siRNA 片段对乳腺癌细胞MCF-7，MDA-MB-231 中Rac1 表达和活性以及细胞侵袭力的影响。方法：以Western blot和GST Pull down方法分别检测Rac1和active-Rac1在 HUMEC，MCF-7和MDA-MB-231 乳腺细胞系中的表达。利用计算机辅助设计 Rac1 特异性siRNA，体外化学合成Rac1序列特异性双链RNA（dsRNA），以脂质体法转染Rac1-siRNA 至乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231。以Western blot和RT-PCR方法鉴定Rac1-siRNA对Rac1 表达的作用，Transwell实验测定转染前后细胞穿透matrigel的能力。结果：高侵袭力的MDA-MB-231 乳腺癌细胞系内Rac1 表达量及活性明显高于低中侵袭力的MCF-7 乳腺癌细胞系以及正常人乳腺细胞系HUMEC。转染 Rac1-siRNA 48小时后的乳腺癌细胞系MCF-7，MDA-MB-231中Rac1的mRNA和蛋白水平的表达均被干扰片段有效沉默（P<0.05）。转染Rac1-siRNA 48h后人乳腺癌细胞MCF-7，MDA-MB-231的侵袭力均明显降低（P<0.01）。结论：Rac1表达及其活性影响人乳腺癌细胞侵袭能力，而Rac1-siRNA能有效抑制人乳腺癌细胞株Rac1 mRNA和蛋白的表达，并降低其侵袭力。

关键词：乳腺癌细胞侵袭力癌细胞

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