检索结果-内蒙古大学图书馆

由包膜病毒,例如人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)及严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)等引发的传染病,对人类健康和全球公共卫生造成了很大的威胁.目前... 详细信息

由包膜病毒,例如人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)及严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)等引发的传染病,对人类健康和全球公共卫生造成了很大的威胁.目前已有的抗病毒药物大多数通过作用于病毒入侵细胞时或进入细胞后的生活周期来抑制感染.这些药物在遇到游离的病毒时,并不能导致病毒失去感染性,而是等待病毒感染细胞后发挥抑制作用.蛋白类病毒感染失活剂是一类可直接作用于游离病毒并导致其失去感染性的抗病毒蛋白或多肽,其主要通过与病毒颗粒上包膜蛋白(envelope glycoproteins, Envs)中的一个或多个位点相互作用,引发病毒包膜蛋白功能丧失或病毒基因组释放等,从而使病毒失去感染性.值得注意的是,蛋白类病毒感染失活剂有望比传统的抗病毒药物具有更高的利用率,且在体内应用时比化学类失活剂更安全,因此越来越受到关注.本文选择一些研究较多的代表性病毒,重点介绍了HIV, SARS-CoV及SARS-CoV-2,登革病毒(dengue virus, DENV)及寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)的蛋白类病毒感染失活剂研究的最新进展,以及其用于紧急应对新发和再现病毒大暴发、大流行的潜力.

关键词：包膜病毒包膜蛋白病毒感染失活剂新发和再现病毒新型冠状病毒

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乙型肝炎病毒核心颗粒展示新型冠状病毒刺突蛋白B细胞线性表位及其免疫原性分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第3期44卷 234-240页

作者：陈小美袁雯婕王世杰王建荣杭小锋万延民王勇翔复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 海军军医大学长征医院感染科上海200003 复旦大学附属华山医院感染科上海市传染病与生物安全应急响应重点实验室国家传染病医学中心上海200040

目的获得展示新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)刺突蛋白B细胞线性表位的乙型肝炎病毒衣壳样颗粒(capsid-like particles,CLPs)并评价其免疫原性。方法将SARS-CoV-2的4条B细胞线性表位(M1、S1-57、S14P5和S21P2)置换乙型肝炎病毒核心蛋白(hepatitis B virus core protein,HBc)第80位丙氨酸。在大肠埃希菌BL21 Star(DE3)中诱导表达这4种线性表位和HBc的重组融合蛋白(M1-HBc、S1-57-HBc、S14P5-HBc和S21P2-HBc)。SDS-PAGE、Western blot和非变性琼脂糖凝胶电泳(native agarose gel electrophoresis,NAGE)鉴定表达产物。蔗糖密度梯度超速离心纯化CLPs并经Western blot验证其抗原性。用纯化的CLPs免疫BALB/c小鼠,通过ELISA测定血清中的抗体滴度。结果重组融合蛋白M1-HBc和S1-57-HBc自组装成M1-CLP和S1-57-CLP,S1-57-CLP免疫小鼠后靶向S1-57多肽的抗体滴度高达1∶1000000。结论在原核系统中成功表达了展示SARS-CoV-2 M1或S1-57线性表位的乙型肝炎病毒CLPs,S1-57-CLP具有良好的免疫原性,为研制SARS-CoV-2新型诊断试剂和疫苗提供了新思路。

关键词：免疫原性新型冠状病毒 B细胞线性表位衣壳样颗粒抗体

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县级实验室结核病检测方法的诊断效果分析:一项基于真实世界数据的回顾性研究

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中国防痨杂志 2025年第2期47卷 181-188页

作者：邱勇权卓屈榕田发君李蒙王更生王娅郭明成高谦四川省广安市武胜县疾病预防控制中心结核病防治科广安638401 复旦大学上海市重大传染病和生物安全研究院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的:利用县级实验室常规结核病检测数据,评估固体培养、GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)和GeneXpert MTB/RIF Ultra(简称“Xpert Ultra”)在基层定点医疗机构诊断结核病患者的实际效果。方法:纳入2018年7月至2024年1月期间,就诊于武... 详细信息

目的:利用县级实验室常规结核病检测数据,评估固体培养、GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)和GeneXpert MTB/RIF Ultra(简称“Xpert Ultra”)在基层定点医疗机构诊断结核病患者的实际效果。方法:纳入2018年7月至2024年1月期间,就诊于武胜县疾病预防控制中心结核病防治门诊的疑似肺结核患者及其首诊痰标本。就诊患者被要求采集3份痰标本开展涂片、培养和分子生物学检测,用于结核病诊断。以液体培养结果为标准,计算固体培养、Xpert和Xpert Ultra诊断结核病的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值;同时基于涂片结果进行亚组分析,计算3种检测方法分别诊断涂阳和涂阴患者的敏感度。结果:共2769例疑似肺结核患者纳入研究,其中24.56%(680/2769)为女性。涂片、固体培养、液体培养、Xpert和Xpert Ultra的阳性率分别为10.36%(286/2761)、23.66%(362/1530)、29.31%(730/2491)、28.06%(275/980)和35.33%(254/719)。以液体培养结果为标准,固体培养、Xpert和Xpert Ultra的敏感度分别为84.55%(80.53%~88.03%)、91.19%(86.72%~94.54%)和96.20%(92.32%~98.46%),特异度分别为99.00%(98.17%~99.52%)、92.62%(90.27%~94.54%)和86.65%(83.05%~89.73%)。在涂阴但液体培养阳性的患者中,固体培养、Xpert和Xpert Ultra的敏感度分别为76.08%(69.71%~81.69%)、83.74%(76.01%~89.78%)和94.17%(88.35%~97.62%)。Xpert或Xpert Ultra阳性但培养阴性的患者中,49.51%(51/103)的患者就诊前2周内服用过抗结核药物或有结核病病史。Xpert Ultra检测为痕量(Trace)的患者中,74.19%(23/31)可判断为活动性结核病。结论:液体培养和分子诊断工具在真实基层结核病诊断中具有较高敏感度,特别是Xpert Ultra,可以有效实现对当地低菌量患者的快速诊断。加快液体培养和Xpert Ultra在基层实验室的普及可以显著提升患者检出率,并有助于实现结核病的早期诊断和治疗。

关键词：结核实验室诊断敏感性与特异性回顾性研究

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结核病自然史的阶段划分及其诊断的现状与展望

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中国防痨杂志 2021年第11期43卷 1125-1131页

作者：李蒙高谦复旦大学基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

人体从感染结核分枝杆菌到发病是一个复杂的连续的过程,这一过程被人为地划分成多个阶段。以往的科学研究、诊断检测和药物治疗主要关注潜伏感染和活动性结核病,而结核病的持续高疫情使人们逐渐关注其他的阶段。结核病自然史不同阶段的... 详细信息

人体从感染结核分枝杆菌到发病是一个复杂的连续的过程,这一过程被人为地划分成多个阶段。以往的科学研究、诊断检测和药物治疗主要关注潜伏感染和活动性结核病,而结核病的持续高疫情使人们逐渐关注其他的阶段。结核病自然史不同阶段的定义及对每个阶段特征的理解对研发新的诊断技术和制定更合理的干预措施至关重要。笔者就结核分枝杆菌自然史的各个阶段的定义及其特征,以及各阶段诊断的现状与发展方向进行综述,希望能够为研发结核病诊断技术和制定预防干预措施提供思考。

关键词：结核自然史诊断综述文献(主题)

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维生素与免疫系统健康

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四川大学学报（医学版） 2023年第1期54卷 7-13页

作者：孔维溧芦鑫荣侯琳琳孙秀发孙桂芹陈力复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫健委/医科院重点实验室上海200032 青岛农业大学动物医学院青岛266109 华中科技大学同济医学院营养与食品卫生系武汉430030 浙江中医药大学医学技术与信息工程学院杭州310053

维持免疫系统健康是有效的抗感染手段之一。实践证明,除疫苗接种、药物治疗及非药物干预之外,膳食营养及心理健康也是维持免疫系统健康,抗击新发和突发感染的关键因素。维生素作为主要膳食营养素,是免疫应答的调节因子,对人体免疫力的... 详细信息

维持免疫系统健康是有效的抗感染手段之一。实践证明,除疫苗接种、药物治疗及非药物干预之外,膳食营养及心理健康也是维持免疫系统健康,抗击新发和突发感染的关键因素。维生素作为主要膳食营养素,是免疫应答的调节因子,对人体免疫力的影响至关重要。缺乏维生素会引起体内炎症水平增加,免疫力降低等情况,往往最先发生在口腔组织。补充适当的维生素可以帮助机体改善免疫功能,增强口腔免疫,降低病原体感染对机体的影响,这是一种可行性和有效性皆具的通用抗感染方案。本文重点综述了维生素A、B、C、D和E的免疫调节作用,为突破传统单因子单通路的研究局限,利用组学研究进行全方位的维生素免疫调控及抗感染的基础和应用研究提供方向。

关键词：维生素免疫力感染

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盖塔病毒感染性克隆及复制型表达载体的构建

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微生物与感染 2024年第5期19卷 267-279页

作者：王永康曹恒龙钢复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市重大传染病与生物安全研究院上海200032

本研究利用反向遗传学的方法成功拯救了一株盖塔病毒(Getah virus, GETV)(GenBank:OM363683)。首先,将优化后的病毒序列克隆到含有T7或CMV启动子的低拷贝质粒pFK中,分别命名为T7-GETV和CMV-GETV。以T7-GETV为模板,通过体外转录(in vitro... 详细信息

本研究利用反向遗传学的方法成功拯救了一株盖塔病毒(Getah virus, GETV)(GenBank:OM363683)。首先,将优化后的病毒序列克隆到含有T7或CMV启动子的低拷贝质粒pFK中,分别命名为T7-GETV和CMV-GETV。以T7-GETV为模板,通过体外转录(in vitro transcription, IVT)合成病毒RNA。随后,采用脂质体转染的方式将RNA递送到BHK-21细胞中,通过半数组织培养感染量(50%tissue culture infectious dose, TCID_(50))法测定病毒滴度,并利用免疫印迹法(western blot, WB)检测病毒蛋白E1表达,证明盖塔病毒被成功拯救。进一步通过光学显微镜观察细胞病变(cytopathic effect, CPE),以及TCID_(50)法、实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)和WB的方法,系统地表征盖塔病毒的生长特征。此外,在CMV-GETV的基础上,基于盖塔病毒复制子的结构,采取保留非结构蛋白基因并用报告基因mCherry或renilla luciferase(Rluc)代替结构蛋白基因的策略构建盖塔病毒复制型表达载体,分别命名为pFK-GETV-mCherry和pFK-GETV-Rluc。随后构建pFK质粒的CMV启动子并仅插入报告基因的对照质粒,分别命名为pFK-mCherry和pFK-Rluc。Image J软件分析显示,转染pFK-GETV-mCherry后单细胞平均荧光强度比转染pFK-mCherry高约5倍。同时,RT-qPCR结果表明,转染pFK-GETV-mCherry后mCherry基因转录水平也比转染pFK-mCherry高约5倍,两组结果高度一致。WB结果进一步说明,在相同时间点转染pFK-GETV-mCherry组mCherry蛋白表达水平比转染pFK-mCherry组高。荧光素酶检测显示,转染pFK-GETV-Rluc后细胞表达Rluc的效率比转染pFK-Rluc高约3个数量级。本研究为后续盖塔病毒研究提供了有力的反向遗传学工具,同时验证了盖塔病毒复制型表达载体提高外源基因表达水平的能力,为研究盖塔病毒复制型DNA疫苗奠定了基础。

关键词：盖塔病毒感染性克隆病毒拯救复制型表达载体 DNA疫苗

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基于聚谷氨酸聚氨基酯的核酸递送载体构建

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微生物与感染 2024年第1期19卷 1-11页

作者：姚婷婷杨荣苏润萍高西辉复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海市重大传染病和生物安全研究院上海200032

核酸疫苗已成为现代传染病疫苗中的研究热点,然而,核酸疫苗的临床转化仍然面临着转染效率低下和生物相容性不佳等瓶颈,迫切需要研发安全、高效的核酸递送载体。本研究提出一种新的核酸递送策略,在聚(β-氨基酯)[poly(β-amino ester),PB... 详细信息

核酸疫苗已成为现代传染病疫苗中的研究热点,然而,核酸疫苗的临床转化仍然面临着转染效率低下和生物相容性不佳等瓶颈,迫切需要研发安全、高效的核酸递送载体。本研究提出一种新的核酸递送策略,在聚(β-氨基酯)[poly(β-amino ester),PBAE]和核酸自组装形成PBAE纳米颗粒(PBAE nanoparticles,PBAE-NPs)的基础上,进一步采用聚谷氨酸[poly(glutamic acid),PGA]进行修饰,形成PGA修饰的PBAE纳米颗粒(PGA modified PBAE nanoparticles,PPs)。本文将通过结构表征和生物学评价探究PPs作为核酸递送载体的性能。体外表征结果显示,PPs具有粒径小、Zeta电位低和血清稳定性强等良好的生物学特性。细胞溶酶体逃逸实验结果表明,PGA修饰能够提高PPs的溶酶体逃逸能力。流式细胞术结果表明,相较于PBAE-NPs,PPs显著增强了核酸转染效率。此外,CCK-8实验结果显示,PPs具有良好的生物安全性。综上所述,PPs具有安全性好、核酸转染效率高等特点,是一种具有开发前景的核酸递送载体,为今后核酸疫苗载体的设计提供了新的思路。

关键词：核酸疫苗聚(β-氨基酯) 聚谷氨酸纳米颗粒

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基于杂交链反应的新一代RNA-FISH技术检测EV-A71 RNA及其与病毒3D聚合酶的相互作用

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微生物与感染 2023年第4期18卷 203-210页

作者：邢一凡傅美贤龙健儿复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

RNA荧光原位杂交(RNA-fluorescence in situ hybridization,RNA-FISH)技术利用荧光标记的核苷酸探针,通过互补链杂交,对细胞或组织中特定的RNA序列进行检测和定位。由于RNA-FISH产生的阳性信号较弱,需要结合特异性信号放大,提高信噪比... 详细信息

RNA荧光原位杂交(RNA-fluorescence in situ hybridization,RNA-FISH)技术利用荧光标记的核苷酸探针,通过互补链杂交,对细胞或组织中特定的RNA序列进行检测和定位。由于RNA-FISH产生的阳性信号较弱,需要结合特异性信号放大,提高信噪比。但传统信号放大技术的背景难以消除,无法定量且分辨率低,是RNA-FISH技术应用的巨大障碍。本文基于第3代杂交链反应(hybridization chain reaction version 3.0,HCR v3.0),利用一对分裂式探针消除非特异杂交背景,并引发荧光信号放大反应,建立了针对肠道病毒A71(enterovirus-A71,EV-A71)RNA的敏感、特异的FISH检测方法,并将该技术与蛋白免疫荧光(immunofluorescence,IF)检测结合,通过高分辨率激光共聚焦成像,成功地在单个细胞水平上检测了EV-A71感染细胞后病毒RNA与其聚合酶3D蛋白的分布变化和相互作用情况,并对细胞中病毒RNA和3D蛋白进行定量。发现相较于传统定量方法,如逆转录定量聚合酶链反应和免疫印迹,新一代RNA-FISH技术在单个细胞水平上病毒RNA和3D聚合酶的表达情况与群体细胞检测的结果在趋势上有明显差异。这说明,基于杂交链反应的新一代RNA-FISH技术,可以克服群体细胞数量增减掩盖病毒组分变化的缺点,从而真实反映病毒在单个细胞中的变化。

关键词：第3代杂交链反应 RNA原位杂交技术肠道病毒A71 3D聚合酶

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