检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2016年第3期11卷 144-152页

作者：贾然陆路梁小珍孙志武谭令兵徐梦华苏犁云徐锦复旦大学附属儿科医院临床检验中心上海201102 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 中国科学院上海巴斯德研究所上海200031

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是导致婴幼儿严重下呼吸道感染的最重要病原体,但该病毒的灭活疫苗可引起RSV疫苗增强性疾病(RSV vaccine-enhanced disease,RVED),因此至今仍未研制出安全、有效的疫苗。RVED的发生机... 详细信息

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是导致婴幼儿严重下呼吸道感染的最重要病原体,但该病毒的灭活疫苗可引起RSV疫苗增强性疾病(RSV vaccine-enhanced disease,RVED),因此至今仍未研制出安全、有效的疫苗。RVED的发生机制目前仍不清楚。使用能有效模拟RVED的动物模型是探索RVED发生机制的主要手段,而本研究的目的就是建立能稳定模拟RVED表现的小鼠模型。将BALB/c小鼠分成3组,即甲醛灭活RSV疫苗接种组(FV组)、活RSV接种组(VV组)和对照组(BV组),并模拟自然感染对其攻毒。通过小鼠体重监测、肺组织苏木精-伊红染色、荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、流式细胞术等,观察FV组小鼠感染RSV后的病毒载量、肺部炎症和T细胞免疫状态。结果显示,与VV组和BV组相比,FV组小鼠RSV攻毒后的体重占初始体重百分比显著降低,肺部炎症最明显,且仅FV组出现支气管和毛细血管周围有大量淋巴细胞浸润及嗜酸性粒细胞浸润。荧光定量PCR显示,FV组小鼠的肺部RSV载量最低。流式细胞术显示,攻毒4d后FV组CD^(4+) T细胞数与其他两组相比显著增加,且CD^(4+) T细胞分泌的白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)及IL-4/γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)比值显著高于其他两组,而CD^(8+) T细胞分泌的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和IFN-γ低于VV组。结果提示,RVED小鼠呈现出Th2优势型免疫应答及CD^(8+) T细胞功能不足,模型初步建立成功,为RVED发生机制的探索和RSV疫苗的研发奠定了良好基础。

关键词：呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒疫苗增强性疾病 Th2优势型免疫应答

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Zika病毒感染的实验室诊断

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微生物与感染 2016年第3期11卷 137-143页

作者：宋志刚王蔚胡芸文上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心病原体检测与生物安全部上海201508 复旦大学基础医学院病原生物学系教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

Zika病毒是一种新现虫媒黄病毒,近期在美洲暴发流行,并有向全球扩散的趋势,已成为国际关注的突发公共卫生事件。Zika病毒感染的临床诊断主要依据实验室检测结果。本文就Zika病毒的核酸检测、抗原和抗体检测、病毒分离鉴定等方面进行综述。

关键词： Zika病毒实验室检测反转录-聚合酶链反应

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线粒体ALDH2缺失对小鼠骨髓源性内皮祖细胞功能的影响

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中国分子心脏病学杂志 2016年第5期16卷 1857-1860页

作者：孙晓垒孙淑惠朱洪董震马鑫韩莎莎孙爱军复旦大学生物医学研究院上海市200032 复旦大学上海医学院基础医学院病原生物系教育部、卫计委医学分子病毒重点实验室上海市200032 复旦大学附属中山医院上海市200032

目的研究线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)缺失对体外培养的小鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)生长状态及功能的影响。方法分别取C57BL/6小鼠(WT)和相同背景来源的A/d/h2基因缺失(Aldh2-/-,KO)小鼠的股骨和胫骨,PBS冲洗获得骨髓细胞组份,密度梯度离心... 详细信息

目的研究线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)缺失对体外培养的小鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)生长状态及功能的影响。方法分别取C57BL/6小鼠(WT)和相同背景来源的A/d/h2基因缺失(Aldh2-/-,KO)小鼠的股骨和胫骨,PBS冲洗获得骨髓细胞组份,密度梯度离心收集单个核细胞白膜层,并进行细胞计数,同时观察不同基因型来源的细胞在不同的培养体系及不同时间点的生长特点,采用乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)吞噬实验和荆豆凝集素(FITC-UEA-1)结合实验验证EPC的状态和功能。结果 Aldh2-/-小鼠的骨髓单个核(BMNCs)数目与野生型小鼠相比显著降低(p<0.05,n=7),但是成集落能力两组之间无差异。在M199培养基中培养不同基因型来源的BMNCs时,细胞呈链条状结构,而在EGM-2培养基中培养时,细胞呈集落式生长。培养第十天时,WT小鼠来源EPCs的Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1双阳性率达到80.23±3.98%,而A/dh2-/-小鼠EPCs的双阳性率只有52.66±10.54%。培养至第三周时,CD31流式检测表明,Aldh2基因缺失降低EPCs CD31的表达。结论A/dh2基因缺失影响EPCs的增殖效率及功能。这一作用可能会影响其在临床缺血性疾病中的推广应用。

关键词：乙醛脱氢酶2 骨髓单个核细胞内皮祖细胞

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乙型肝炎病毒小表面抗原各拓扑区段对其表达和分泌的影响

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微生物与感染 2016年第5期11卷 278-286页

作者：沈忠良饶玉良王葳马张妹刘晶潘少坤谢幼华复旦大学生物医学研究院上海200032 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海健康医学院基础医学院上海201318 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔预防科上海200011

乙型肝炎病毒小表面抗原(small hepatitis B virus surface antigen,SHB)在细胞内质网上表达,沿着细胞分泌途径分泌到胞外。为系统分析SHB拓扑结构对SHB表达和分泌的影响,首先通过生物信息学预测临床病毒株HBV C8和8种基因型(A^H)代表株... 详细信息

乙型肝炎病毒小表面抗原(small hepatitis B virus surface antigen,SHB)在细胞内质网上表达,沿着细胞分泌途径分泌到胞外。为系统分析SHB拓扑结构对SHB表达和分泌的影响,首先通过生物信息学预测临床病毒株HBV C8和8种基因型(A^H)代表株的SHB拓扑结构,发现这些SHB均为四次跨膜蛋白,拥有基本相同的拓扑结构。相对内质网膜而言,SHB的拓扑结构拥有3个内质网腔内区段(Inside1~Inside3)、4个跨膜螺旋区(Tmhelix1~Tmhelix4)和2个内质网膜外区段(Outside1和Outside2)。6种基因型(基因型A、B、C、D、E和G)代表株与病毒株C8的SHB拓扑结构预测结果完全相同,而基因型F和H的SHB有4个区段与C8等不完全一致。通过对C8的SHB拓扑结构各区段进行缺失突变研究,发现Inside1区段不是SHB表达和分泌所必需的;Outside1、Tmhelix2和Inside2区段是SHB表达和分泌所必需的;Tmhelix1和Outside2不是SHB表达所必需的,但为SHB分泌所必需;Tmhelix3和Tmhelix4对SHB表达有重要影响,也是SHB分泌所必需的。进一步对Outside1和Outside2进行小片段(6个氨基酸)的缺失突变研究,发现小片段缺失基本不显著影响SHB的表达,但Outside1的氨基酸55~78及Outside2是SHB分泌所必需的。本研究首次系统性分析了SHB的拓扑结构各区段对SHB表达和分泌的影响,为深入探索SHB结构与功能的关系提供了线索。

关键词：乙型肝炎病毒小表面抗原缺失突变表达分泌

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乙型肝炎病毒Ｘ蛋白的优势氨基酸序列与热点突变位点的生物信息学分析

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微生物与感染 2016年第6期11卷 338-346页

作者：王葳何永刚浦永兰潘少坤谢幼华复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室太仓市第一人民医院感染科上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔预防科

乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)全长154个氨基酸,与肝癌发生密切相关。为确定HBx的优势氨基酸序列和热点突变位点,在GenBank中下载所有HBx的氨基酸序列13 950条,剔除插入突变、缺失突变和起始密码子非甲硫氨酸的序... 详细信息

乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)全长154个氨基酸,与肝癌发生密切相关。为确定HBx的优势氨基酸序列和热点突变位点,在GenBank中下载所有HBx的氨基酸序列13 950条,剔除插入突变、缺失突变和起始密码子非甲硫氨酸的序列,最后保留7 126条。通过分析这7 126条序列,计算出HBx每个位点的氨基酸分布情况,出现频率最高的氨基酸为该位点的优势氨基酸,其他氨基酸为突变氨基酸。154个位点的优势氨基酸组成HBx优势氨基酸序列。突变率>10.0%的热点突变位点有32个。其中第36、42、44、87、88和127位氨基酸有4种(突变率>1.0%)以上突变形式,具有较高的多态性。与肝癌密切相关的K130M/V131I双突变率为34.7%。通过7 126条HBx序列与优势序列的同源性比较,随机选出其中50条序列(2条与优势序列同源性<75%,48条同源性为76%~99%),与23条参考序列及优势序列共同构建系统发生树。结果显示,HBx优势氨基酸序列属于基因型C,这与基因型C为全球主要流行型一致。本研究首次系统性分析了GenBank中HBx的优势序列,确定了32个HBx热点突变位点和6个多态性较高的位点,为基于HBx突变的基础和应用研究奠定了基础。

关键词：乙型肝炎病毒Ⅹ蛋白热点突变优势序列

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CpG岛岸甲基化调控人T细胞系中lag3表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2015年第7期35卷 491-495页

作者：郝书民仇超张林霞张晓燕徐建青复旦大学附属公共卫生临床中心上海201508 复旦大学生物医学研究院复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（1ympho—cyteactivationgene3，lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平，选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分... 详细信息

目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（1ympho—cyteactivationgene3，lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平，选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分布以确定潜在表观调控区（CpG岛和CpG岛岸），分别测定各T细胞系中相关区段的DNA甲基化水平。用5-杂氮胞苷（5-Aza．2＇-deoxycytidine，5-Aza-2’-dc）对细胞系做去甲基化处理，检测z0邸表达水平及DNA甲基化水平的变化。结果lag3表达水平在***1．6和CEM细胞中极低，在JurkatE6-1细胞中相对较高。不同细胞系中，CpG岛均高度甲基化；CpG岛岸在***1．6和CEM细胞中高度甲基化，但在JurkatE6—1细胞中甲基化水平较低。5-Aza-2’-dc处理后，***1．6和CEM细胞中lag3mRNA和蛋白质的表达均显著上调，且伴随CpG岛岸去甲基化；而JurkatE6-1细胞中，未见CpG岛岸甲基化和lag3表达水平的显著变化。5-Aza-2＇-dc处理不能使CpG岛去甲基化。结论CpG岛岸的甲基化与去甲基化是lag3转录的表观调控开关。

关键词： DNA甲基化 CpG岛岸 lag3 人T细胞系

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上海地区中老年体检人群慢性病及共病流行病学分析

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老年医学与保健 2016年第2期22卷 116-120页

作者：王姣锋王一倩保志军张紫欢赵超黄一沁复旦大学附属华东医院老年科、上海市老年医学临床重点实验室(13dz2260700)、复旦大学老年医学研究中心上海市200040 长宁区社区卫生管理中心上海市200051 复旦大学基础医学院、医学分子病毒学教育部重点实验室上海市200032 不详

目的探讨中老年体检人群慢性病及共病患病分布特征及其影响因素。方法选取上海市某医院中老年体检者资料4 394份。分析体检者慢性病及共病的患病情况,采用X^2检验对性别、年龄与体质指数等慢性病影响因素进行分析,利用多分类Logistic回... 详细信息

目的探讨中老年体检人群慢性病及共病患病分布特征及其影响因素。方法选取上海市某医院中老年体检者资料4 394份。分析体检者慢性病及共病的患病情况,采用X^2检验对性别、年龄与体质指数等慢性病影响因素进行分析,利用多分类Logistic回归进行慢性病共病影响因素分析。结果体检人群中慢性病患病率为85.82%,患病率排名前5位的慢性病依次为高脂血症(52.50%)、高血压(39.03%)、高尿酸血症(30.41%)、脂肪肝(22.23%)和糖尿病(9.95%)。体检人群中34.21%患有一种慢性病,51.62%患有2种及以上慢性病。患有任2种慢性病为1421例(32.34%),最常见组合为高血压+高脂血症(20.39%);患有任3种慢性病为670例(15.25%),最常见组合为高血压+高脂血症+高尿酸血症(5.69%)。多分类Logistic回归结果显示,以45~54(岁)组为对照,65岁及以上组患2种及以上慢性病风险较高(P=0.038),OR值为1.42(1.02~1.97)。以BMI正常组为对照,超重组和肥胖组患2种及以上慢性病的风险较高(P均<0.001),OR值分别为1.55(1.28~1.88)和1.90(1.39~2.60)。结论中老年居民慢性病及共病患病率较高,年龄偏大及超重或肥胖可能增加慢性病及其共病患病风险,应根据慢性病患病特点进行干预。

关键词：中老年人慢性病共病流行病学

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乙型肝炎病毒Ⅹ蛋白的优势氨基酸序列与热点突变位点的生物信息学分析

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微生物与感染 2016年第6期11卷 338-346页

作者：王葳何永刚浦永兰潘少坤谢幼华复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 太仓市第一人民医院感染科太仓215400 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔预防科上海200011

乙型肝炎病毒X蛋白（hepatitis B virus X protein,HBx）全长154个氨基酸,与肝癌发生密切相关.为确定HBx的优势氨基酸序列和热点突变位点,在GenBank中下载所有HBx的氨基酸序列13950条,剔除插入突变、缺失突变和起始密码子非甲硫氨酸的序... 详细信息

乙型肝炎病毒X蛋白（hepatitis B virus X protein,HBx）全长154个氨基酸,与肝癌发生密切相关.为确定HBx的优势氨基酸序列和热点突变位点,在GenBank中下载所有HBx的氨基酸序列13950条,剔除插入突变、缺失突变和起始密码子非甲硫氨酸的序列,最后保留7126条.通过分析这7126条序列,计算出HBx每个位点的氨基酸分布情况,出现频率最高的氨基酸为该位点的优势氨基酸,其他氨基酸为突变氨基酸.154个位点的优势氨基酸组成HBx优势氨基酸序列.突变率〉10.0%的热点突变位点有32个.其中第36、42、44、87、88和127位氨基酸有4种（突变率〉1.0%）以上突变形式,具有较高的多态性.与肝癌密切相关的K130M/V131I双突变率为34.7%.通过7126条HBx序列与优势序列的同源性比较,随机选出其中50条序列（2条与优势序列同源性〈75%,48条同源性为76%~99%）,与23条参考序列及优势序列共同构建系统发生树.结果显示,HBx优势氨基酸序列属于基因型C,这与基因型C为全球主要流行型一致.本研究首次系统性分析了GenBank中HBx的优势序列,确定了32个HBx热点突变位点和6个多态性较高的位点,为基于HBx突变的基础和应用研究奠定了基础.

关键词：乙型肝炎病毒X蛋白热点突变优势序列

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激光扫描共聚焦显微镜检测分枝杆菌与溶酶体融合的实验教学设计

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实验技术与管理 2015年第12期32卷 187-189,193页

作者：乔可王晴岚牛辰复旦大学基础医学院病原生物学系教育部、卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

介绍了使用经绿色荧光蛋白标记的海分枝杆菌侵染巨噬细胞,再利用激光扫描共聚焦显微技术检测分枝杆菌与巨噬细胞溶酶体融合的实验教学设计。该实验对研究分枝杆菌与巨噬细胞的相互作用以及分枝杆菌的致病机制具有重要意义,同时在教学实... 详细信息

介绍了使用经绿色荧光蛋白标记的海分枝杆菌侵染巨噬细胞,再利用激光扫描共聚焦显微技术检测分枝杆菌与巨噬细胞溶酶体融合的实验教学设计。该实验对研究分枝杆菌与巨噬细胞的相互作用以及分枝杆菌的致病机制具有重要意义,同时在教学实验中使学生更深入地理解激光扫描共聚焦显微镜检测技术,并培养学生的实践能力和科研创新意识。

关键词：激光扫描共聚焦显微镜绿色荧光蛋白分枝杆菌巨噬细胞

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抗MERS-CoV小分子化合物的研究进展

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药学学报 2015年第12期50卷 1520-1526页

作者：曾晓云陆路姜世勃刘叔文南方医科大学药学院广东广州510515 南方医科大学广东省新药筛选重点实验室广东广州510515 复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

中东呼吸系统综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)引起的MERS流行,其死亡率高达35%。自被发现以来,大多数MERS-CoV感染病例主要发生在中东地区。而2015年MERS疫情在韩国严重爆发,引起了全球的关注... 详细信息

中东呼吸系统综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)引起的MERS流行,其死亡率高达35%。自被发现以来,大多数MERS-CoV感染病例主要发生在中东地区。而2015年MERS疫情在韩国严重爆发,引起了全球的关注。目前对于MERS-Co V的感染尚无经临床上验证有效的抗病毒药物。现今抗MERS-CoV候选药物主要包括单克隆抗体、多肽、小分子化合物等。其中,小分子化合物因其具有合成方便、价格低廉、性质稳定等优势值得进一步的开发。本文综述了抗MERS-CoV小分子化合物的研究进展。

关键词：中东呼吸系统综合征冠状病毒药物靶点小分子化合物

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