检索结果-内蒙古大学图书馆

四川大学学报（医学版） 2015年第1期46卷 27-30页

作者：娄强王耀辉瞿涤马远方河南大学医学院河南省医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室开封475004 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究不同浓度的葡萄糖对表皮葡萄球菌野生株、saeRS基因删除突变株及回复株生存能力的影响及机制。方法在BM培养基中添加不同浓度(7.0mmol/L、14mmol/L、28mmol/L、56mmol/L)的葡萄糖,分析3种表皮葡萄球菌的生存能力、生物膜形成能... 详细信息

目的研究不同浓度的葡萄糖对表皮葡萄球菌野生株、saeRS基因删除突变株及回复株生存能力的影响及机制。方法在BM培养基中添加不同浓度(7.0mmol/L、14mmol/L、28mmol/L、56mmol/L)的葡萄糖,分析3种表皮葡萄球菌的生存能力、生物膜形成能力、培养基的酸度及抵抗抗生素生存的能力。结果与表皮葡萄球菌野生株相比,葡萄糖能明显促进saeRS删除突变株的生存能力和生物膜形成能力,但能够明显降低其对抗生素(比如青霉素、苯唑西林、庆大霉素、环丙沙星和丁胺卡那霉素)的抵抗能力;saeRS删除突变株和回复株在14mmol/L浓度时生存能力最强,在28mmol/L浓度时生物膜形成能力最强,而葡萄糖浓度对于野生株的生存能力及生物膜形成能力无显著影响。在添加14mmol/L葡萄糖时,saeRS删除突变株培养基(pH=8.07)的酸度比野生株(pH=7.0)明显降低。结论 SaeRS可能通过介导葡萄糖的利用影响了表皮葡萄球菌的生存能力;双组分信号转导系统saeRS影响抗生素如青霉素、苯唑西林、庆大霉素、环丙沙星和丁胺卡那霉素对表皮葡萄球菌的杀菌作用。

关键词：葡萄糖代谢双组分信号转导系统saeRS 生物膜形成表皮葡萄球菌

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激光扫描共聚焦显微镜检测分枝杆菌与溶酶体融合的实验教学设计

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实验技术与管理 2015年第12期32卷 187-189,193页

作者：乔可王晴岚牛辰复旦大学基础医学院病原生物学系教育部、卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

介绍了使用经绿色荧光蛋白标记的海分枝杆菌侵染巨噬细胞,再利用激光扫描共聚焦显微技术检测分枝杆菌与巨噬细胞溶酶体融合的实验教学设计。该实验对研究分枝杆菌与巨噬细胞的相互作用以及分枝杆菌的致病机制具有重要意义,同时在教学实... 详细信息

介绍了使用经绿色荧光蛋白标记的海分枝杆菌侵染巨噬细胞,再利用激光扫描共聚焦显微技术检测分枝杆菌与巨噬细胞溶酶体融合的实验教学设计。该实验对研究分枝杆菌与巨噬细胞的相互作用以及分枝杆菌的致病机制具有重要意义,同时在教学实验中使学生更深入地理解激光扫描共聚焦显微镜检测技术,并培养学生的实践能力和科研创新意识。

关键词：激光扫描共聚焦显微镜绿色荧光蛋白分枝杆菌巨噬细胞

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抗MERS-CoV小分子化合物的研究进展

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药学学报 2015年第12期50卷 1520-1526页

作者：曾晓云陆路姜世勃刘叔文南方医科大学药学院广东广州510515 南方医科大学广东省新药筛选重点实验室广东广州510515 复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

中东呼吸系统综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)引起的MERS流行,其死亡率高达35%。自被发现以来,大多数MERS-CoV感染病例主要发生在中东地区。而2015年MERS疫情在韩国严重爆发,引起了全球的关注... 详细信息

中东呼吸系统综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)引起的MERS流行,其死亡率高达35%。自被发现以来,大多数MERS-CoV感染病例主要发生在中东地区。而2015年MERS疫情在韩国严重爆发,引起了全球的关注。目前对于MERS-Co V的感染尚无经临床上验证有效的抗病毒药物。现今抗MERS-CoV候选药物主要包括单克隆抗体、多肽、小分子化合物等。其中,小分子化合物因其具有合成方便、价格低廉、性质稳定等优势值得进一步的开发。本文综述了抗MERS-CoV小分子化合物的研究进展。

关键词：中东呼吸系统综合征冠状病毒药物靶点小分子化合物

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上海市中老年体检人群慢性病及共病流行病学分析

上海市中老年体检人群慢性病及共病流行病学分析

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中法老年医学高峰论坛2016暨第二届中国老年医学研究机构联盟大会

作者：王姣锋王一倩保志军张紫欢赵超黄一沁复旦大学附属华东医院老年科上海市老年医学临床重点实验室复旦大学老年医学研究中心复旦大学附属华东医院消化科上海市长宁区社区卫生管理中心复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部重点实验室复旦大学附属华东医院消化科上海市老年医学临床重点实验室复旦大学老年医学研究中心

探讨中老年体检人群慢性病及共病患病分布特征及其影响因素.选取上海市某医院中老年体检者资料4394份.分析体检者慢性病及共病的患病情况,采用检验对性别、年龄、体质指数等慢性病影响因素进行分析,利用多分类Logistic回归进行慢性病共... 详细信息

探讨中老年体检人群慢性病及共病患病分布特征及其影响因素.选取上海市某医院中老年体检者资料4394份.分析体检者慢性病及共病的患病情况,采用检验对性别、年龄、体质指数等慢性病影响因素进行分析,利用多分类Logistic回归进行慢性病共病影响因素分析.结果表明，中老年居民慢性病及共病患病率较高，年龄偏大及超重或肥胖可能增加慢性病及其共病患病风险，应加强慢性病研究及慢病管理，并根据慢性病患病特点进行干预。

关键词：中老年人慢性病流行病学共病患病率分布特征

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结核分枝杆菌新型抗原Rv3117联合DDA/MPL佐剂作为亚单位疫苗在小鼠体内的免疫评估

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上海交通大学学报（医学版） 2015年第1期35卷 1-7页

作者：叶娟高孟哲张舒林陈力孙战强复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学实验室上海200032 上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海200025 郑州大学医学实验中心郑州450006 复旦大学生命科学院上海200433

目的用结核分枝杆菌(***)特异性抗原Rv3117联合双十八烷基二甲基溴化铵(DDA)/单磷酰脂质体A(MPL)佐剂构建结核亚单位疫苗(Rv3117/DDA/MPL),并在C57BL/6小鼠体内评估其加强卡介苗(BCG)首次免疫后的免疫效应。方法采用分子克隆方法构建重... 详细信息

目的用结核分枝杆菌(***)特异性抗原Rv3117联合双十八烷基二甲基溴化铵(DDA)/单磷酰脂质体A(MPL)佐剂构建结核亚单位疫苗(Rv3117/DDA/MPL),并在C57BL/6小鼠体内评估其加强卡介苗(BCG)首次免疫后的免疫效应。方法采用分子克隆方法构建重组质粒p ET32a-Rv3117,转入感受态大肠埃希菌BL21(DE3)PLys S,诱导表达并纯化目的蛋白,用Triton X-114相分离法去除目的蛋白中的内毒素,然后与DDA/MPL佐剂充分乳化构建亚单位疫苗。C57BL/6小鼠随机分为对照组(未予任何处理)、PBS组(免疫PBS)、BCG组(单纯首次免疫BCG)、BCG+DDA/MPL组(首次免疫BCG,2周后用佐剂DDA/MPL加强免疫2次)和BCG+Rv3117/DDA/MPL组(首次免疫BCG后用亚单位疫苗Rv3117加强免疫2次),每组5只。分别采用酶联免疫斑点检测(ELISPOT)和酶联免疫吸附测定(ELISA)技术对免疫小鼠的细胞免疫和体液免疫进行评估。结果成功克隆表达并纯化结核特异性抗原Rv3117。ELISPOT和ELISA结果显示:受10.0μg/m L结核菌素纯化衍生蛋白(PPD)刺激后,与对照组、PBS组、BCG组和BCG+DDA/MPL组比较,BCG+Rv3117/DDA/MPL组小鼠T细胞产生γ干扰素(IFN-γ)的水平明显升高(P<0.05);BCG+DDA/MPL组培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素12(IL-12p70)细胞因子水平均显著高于对照组和PBS组(P<0.05),总抗体Ig G和Ig G1亚型水平亦较高;而BCG+Rv3117/DDA/MPL组上述指标水平均显著优于BCG+DDA/MPL组(P<0.05)。结论亚单位疫苗Rv3117/DDA/MPL在C57BL/6小鼠体内可增强BCG的细胞免疫和体液免疫效应。结核分枝杆菌特异性抗原Rv3117有望成为新的结核疫苗设计及结核诊断的候选抗原。

关键词：结核分枝杆菌 Rv3117 亚单位疫苗体液免疫细胞免疫

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一种高效的葡萄球菌基因敲除方法的建立与应用

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中国人兽共患病学报 2015年第12期31卷 1098-1102页

作者：朱涛段芹李朝品瞿涤皖南医学院医学寄生虫学教研室芜湖241002 皖南医学院口腔医学院芜湖241002 复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的建立一种高效构建葡萄球菌基因敲除突变株的方法。方法通过融合PCR将vraSR操纵子上、下游同源片段连接起来;通过基于位点特异性重组的Gateway克隆技术将融合PCR产物连接入温度敏感型穿梭质粒pKOR1,转化修饰缺陷型大肠杆菌DC10B,获... 详细信息

目的建立一种高效构建葡萄球菌基因敲除突变株的方法。方法通过融合PCR将vraSR操纵子上、下游同源片段连接起来;通过基于位点特异性重组的Gateway克隆技术将融合PCR产物连接入温度敏感型穿梭质粒pKOR1,转化修饰缺陷型大肠杆菌DC10B,获得同源重组质粒pKOR1-vraSR;电转化表皮葡萄球菌RP62A株;在高温和氯霉素双重选择压力下,质粒通过第1次同源重组整合到表皮葡萄球菌染色体上;转移到无抗生素的培养基中继续培养,发生第2次同源重组;将菌液涂布于含1μg/mL脱水四环素的培养基上进行反向筛选,那些未发生重组的整合菌株因表达必需基因secY的反义RNA而无法生存,最后,挑取菌落通过PCR进行鉴定。结果成功构建了难以转化的表皮葡萄球菌RP62A株的vraSR基因敲除突变株。结论利用大肠杆菌DC10B和穿梭质粒pKOR1对葡萄球菌进行基因敲除的方法简便高效,适用的范围更广泛。

关键词：基因敲除葡萄球菌反向选择限制修饰系统

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针对中东呼吸综合征冠状病毒的全人源单克隆抗体的研究进展

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微生物与感染 2015年第6期10卷 330-337页

作者：王丽丽应天雷复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)是继严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)之后发现的一种能引起人类严重急性呼吸道疾病、具有高致死率的新型冠状病毒。该病毒已从主要流行的中东地区逐渐蔓延至多个国家,具有全球流行的潜在趋势,引... 详细信息

中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)是继严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)之后发现的一种能引起人类严重急性呼吸道疾病、具有高致死率的新型冠状病毒。该病毒已从主要流行的中东地区逐渐蔓延至多个国家,具有全球流行的潜在趋势,引起世界各国的极大关注。本文对近期抗MERS-CoV人中和单克隆抗体的研究进展进行总结,描述这些抗体的作用机制,分析其防治MERS的潜在能力,并探讨抗体类抗病毒药物用于新发传染病防治的应用前景和发展方向。

关键词：中东呼吸综合征冠状病毒新型冠状病毒人中和单克隆抗体

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5-氨基酮戊酸光动力疗法对不同疾病来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外杀伤作用

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微生物与感染 2016年第4期11卷 228-233页

作者：赵可庆杨晨吴旸郭丽敏刘华勇吉建陈小英郑春泉复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科上海市耳鼻咽喉科临床重点学科上海200031 上海交通大学医学院附属瑞金医院耳鼻咽喉科上海200025 复旦大学基础医学院病原生物学系教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院检验科上海200031 上海交通大学医学院附属瑞金医院皮肤科上海200025

光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)利用光敏剂与光源反应后产生的活性氧,破坏细菌组分,进而致细菌死亡。其多靶位杀伤特性在治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)感染方面有应用前景,... 详细信息

光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)利用光敏剂与光源反应后产生的活性氧,破坏细菌组分,进而致细菌死亡。其多靶位杀伤特性在治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)感染方面有应用前景,但相关研究尚处于起步阶段。本研究MRSA菌株取自烧伤、急性咽炎、鼻窦炎和肺炎4类临床常见MRSA感染性疾病患者,使用5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,ALA)光敏剂、发光二极管光源,于体外检测ALA介导的PDT(ALA-PDT)对MRSA菌株的杀伤作用。结果显示,经5mmol/L ALA孵育1h后,给予360J/cm^2强光[(633±10)nm]照射1h,ALA-PDT对MRSA菌株具有1.80log_(10)cfu的有效杀伤作用。结果提示,在相同实验条件和参数下,ALA-PDT对上述4种疾病来源的MRSA菌株体外杀伤作用无统计学差异。

关键词：光动力疗法 5-氨基酮戊酸耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

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病毒持续性感染难治愈的因素及对策

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微生物与感染 2015年第2期10卷 67-72页

作者：闻玉梅复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

病毒持续性感染引起的病程多为慢性或反复发作,难以治愈,在部分患者甚至可引发肿瘤或自身免疫性疾病等,是严重危害人类健康及造成社会重大经济负担的常见病及多发病。持续性感染难以治愈的原因涉及病毒基因组与宿主细胞染色体整合,或以... 详细信息

病毒持续性感染引起的病程多为慢性或反复发作,难以治愈,在部分患者甚至可引发肿瘤或自身免疫性疾病等,是严重危害人类健康及造成社会重大经济负担的常见病及多发病。持续性感染难以治愈的原因涉及病毒基因组与宿主细胞染色体整合,或以附加体的形式长期存在,以及病毒的酶或蛋白抑制机体的免疫应答等特性。此外,机体天然免疫或获得性免疫低下、免疫网络失调及感染微环境改变等,也是病毒建立并维持持续性感染的原因。本文根据持续性感染难以治愈的原因,从病原学与机体免疫应答两方面研讨一些对策,希望以此为切入点,为治疗持续性感染提供新思路与新策略。

关键词：持续性感染病毒免疫应答免疫治疗

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mkl基因在海分枝杆菌抵抗宿主免疫中的作用

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微生物与感染 2015年第3期10卷 173-179页

作者：华亦斐王晴岚牛辰高谦复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

本研究利用MycoMarT7噬菌体建立了海分枝杆菌随机突变库,鉴定获得1株转座子插在基因MMAR_0994(mkl)上的突变株。用野生株和突变株分别感染斑马鱼成鱼,通过观察斑马鱼的存活情况,研究mkl基因对海分枝杆菌毒力的影响;利用尾静脉注射感染孵... 详细信息

本研究利用MycoMarT7噬菌体建立了海分枝杆菌随机突变库,鉴定获得1株转座子插在基因MMAR_0994(mkl)上的突变株。用野生株和突变株分别感染斑马鱼成鱼,通过观察斑马鱼的存活情况,研究mkl基因对海分枝杆菌毒力的影响;利用尾静脉注射感染孵出48h后的斑马鱼幼鱼,于荧光显微镜下观察突变株及野生株在幼鱼体内的播散情况,以检测mkl基因在细菌与宿主天然免疫相互作用中的功能;将野生株和突变株分别感染小鼠来源巨噬细胞,检测其在巨噬细胞内的增殖。此外,还检测了突变株对酸性环境的耐受情况。结果显示,mkl基因突变株感染斑马鱼成鱼后25d内没有鱼死亡;在斑马鱼幼鱼感染模型和细胞感染模型中,突变株的增殖明显减弱;突变株对酸性环境压力更敏感。以上结果提示,mkl基因在海分枝杆菌抵抗宿主免疫及致病中发挥重要作用。

关键词：海分枝杆菌 mkl基因巨噬细胞斑马鱼感染模型

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