检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2014年第5期32卷 257-262页

作者：李新艳陈良马张妹毛日成黄玉仙张继明上海市公共卫生临床中心肝病科 201508 复旦大学上海医学院教育部、卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学附属华山医院感染科

目的建立一种新的、简便的HBV表型耐药分析方法,通过置换完整的反转录酶（RT）区研究药物敏感性.方法首先全基因扩增未经核苷（酸）类似物治疗患者的HBV DNA,构建含HBV野毒株全基因组表达质粒PHY536207（B基因型）及PHY97（C基因型）... 详细信息

目的建立一种新的、简便的HBV表型耐药分析方法,通过置换完整的反转录酶（RT）区研究药物敏感性.方法首先全基因扩增未经核苷（酸）类似物治疗患者的HBV DNA,构建含HBV野毒株全基因组表达质粒PHY536207（B基因型）及PHY97（C基因型）,继而在RT区上、下游设计限制酶切位点,改造后的质粒分别命名为mPHY536207及mPHY97.以CHB患者血清中分离到的拉米夫定（LAM）耐药变异株和阿德福韦酯（ADV）耐药变异株为骨架,分别构建LAM耐药株质粒PHY634和ADV耐药株质粒PHY6923,再用耐药株的RT区段取代mPHY536207中的RT区构建重组质粒,命名为RT634（LAM耐药）及RT6923（ADV耐药）.分别用RT区置换前、后的质粒转染Huh7细胞,用ELISA法检测分泌到细胞上清液中的HBsAg水平,用实时PCR和Southern印迹法检测细胞内HBVDNA水平.结果成功构建B型和C型野毒株表达质粒PHY536207和PHY97,经转染Huh7细胞证实有HBV复制能力,6孔细胞培养板中每孔细胞所抽提的HBV DNA均＞1＆#215;107拷贝/mL;在RT区上游设计的Pst Ⅰ酶切位点不影响HBV的表型（HBsAg的表达及HBV DNA的复制）.在PHY634及RT634转染实验中,HBV DNA水平却并未随LAM浓度的升高而明显下降,50％抑制浓度（IC50）＞100 μmol/L,mPHY536207仅为0.18 μmol/L;PHY6923及RT6923转染实验中,HBV DNA对外加的ADV不敏感,IC50＞100 μmol/L,明显高于mPHY536207（1.2 μmol/L）.结论本研究建立了一种新的HBV表型耐药分析方法,可通过RT区置换来研究RT区变异对药物敏感性的影响.

关键词：肝炎病毒,乙型 RNA指导的DNA聚合酶抗药性表型

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埃博拉病毒及其致病机制

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微生物与感染 2014年第4期9卷 197-201页

作者：瞿涤袁正宏闻玉梅复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

自2014年2～3月，西非埃博拉病毒感染的暴发流行已呈播散趋势，受到世界卫生组织的高度重视。我国也提高了防止埃博拉病毒进入国内的警示，并采取了相应措施。现将有关埃博拉病毒的生物学特性、致病机制及相关流行病学与防治策略作简要... 详细信息

自2014年2～3月，西非埃博拉病毒感染的暴发流行已呈播散趋势，受到世界卫生组织的高度重视。我国也提高了防止埃博拉病毒进入国内的警示，并采取了相应措施。现将有关埃博拉病毒的生物学特性、致病机制及相关流行病学与防治策略作简要综述，供参考。

关键词：埃博拉病毒致病机制流行病学

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以HA2为基础的流感病毒候选疫苗同时与H5N1、H1N1和H3N2亚型毒株产生交叉反应

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中山大学学报（医学科学版） 2014年第3期35卷 321-328页

作者：魏美丽陈燕霞王宇徐俊熊为亮姜世勃潘春根中山大学中山医学院人类病毒学研究所//教育部热带病防治研究重点实验室广东广州510080 中山大学药学院药物分子设计研究中心广东广州510006 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

【目的】探讨以流感病毒(IAV)血凝素蛋白茎部(HA2)保守表位为免疫原来诱导针对不同血清型流感病毒的广谱体液免疫应答。【方法】我们构建了一个重组的IAV疫苗IR30-Fd,由A/Viet Nam/1203/2004(H5N1)病毒株HA2的30个保守的氨基酸残基(IR30... 详细信息

【目的】探讨以流感病毒(IAV)血凝素蛋白茎部(HA2)保守表位为免疫原来诱导针对不同血清型流感病毒的广谱体液免疫应答。【方法】我们构建了一个重组的IAV疫苗IR30-Fd,由A/Viet Nam/1203/2004(H5N1)病毒株HA2的30个保守的氨基酸残基(IR30)和一个连在碳端的三聚体基序(foldon,Fd)组成。原核表达该蛋白,圆二色谱和Western Blot验证IR-30-Fd的室间结构之后,分别免疫BALB/c小鼠和新西兰白兔,并同时免疫IR30多肽为对照,制备血清抗体。然后应用ELISA和Western Blot方法检测抗体的滴度,应用细胞ELISA和Western Blot方法检测抗体与不同的IAV菌株HA2蛋白的交叉反应性。【结果】IR30-Fd能够形成具有α螺旋的三聚体空间结构。用IR30-Fd和IR30免疫BALB/c小鼠和新西兰白兔后获得了高效价的抗IR30的特异性抗体。鼠抗IR30-Fd抗体能与H3N2和H1N1的HA蛋白反应而鼠抗IR30抗体不能。鼠抗IR30-Fd抗体稀释6 400倍、兔抗IR30-Fd抗体稀释8.2×105倍均可以与H5N1的HA蛋白反应。细胞ELISA表明兔抗IR30-Fd抗体与天然状态下的H5N1和H3N2的HA蛋白的结合亲和力高于兔抗IR30抗体。【结论】本研究结果表明IR30-Fd蛋白能够模拟H5N1 HA2蛋白保守序列的天然三聚体结构,并且能够诱导产生针对H5N1 H1N1和H3N2亚型HA蛋白的广谱交叉反应抗体,为研制通用的流感病毒疫苗提供了结构基础。

关键词：甲型流感病毒通用疫苗 HA2 三聚体

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长期住院老年患者感染的鲍曼不动杆菌耐药性分析

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微生物与感染 2014年第3期9卷 167-173页

作者：赵付菊方毅刘华勇周丽芳庞立峰刘文健赵虎复旦大学附属华东医院检验科上海200040 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

为了解复旦大学附属华东医院长期住院老年患者感染的鲍曼不动杆菌的耐药性特征，本研究收集了2011年9月-2012年8月临床分离自老年病区长期住院患者的52株鲍曼不动杆菌，分析菌株的耐药性、产酶类型、生物膜形成能力及耐药基因的携带情... 详细信息

为了解复旦大学附属华东医院长期住院老年患者感染的鲍曼不动杆菌的耐药性特征，本研究收集了2011年9月-2012年8月临床分离自老年病区长期住院患者的52株鲍曼不动杆菌，分析菌株的耐药性、产酶类型、生物膜形成能力及耐药基因的携带情况。结果显示，菌株主要分布在呼吸重症监护室，分离的标本以痰标本为主，占86．54％。52株鲍曼不动杆菌中，多重耐药菌株最高，占76．92％。对头孢哌酮／舒巴坦耐药率最低，为30．77％，对其余抗菌药物耐药率均在50％以上。产酶阳性率为82．69％，其中产其他水解酶的菌株最多，占63．46％。生物膜形成的检出率为5．77％。6株广泛耐药菌株共检出9种耐药基因。结果提示，从老年病区长期住院患者分离的鲍曼不动杆菌耐药现状严重。因此，医院感染控制应以呼吸重症监护室为重点，同时加强对生物膜阳性菌株所分布病区的耐药性监测和消毒隔离，以预防和控制耐药菌的产生和传播。

关键词：鲍曼不动杆菌耐药性生物膜医院感染老年患者

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从DNA疫苗到耐受疫苗:全新的适应症和抑炎前景

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生命的化学 2014年第1期34卷 23-28页

作者：耿爽钟一维王宾复旦大学上海医学院教育部和卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

DNA疫苗技术从1990年代发现到至今,已经创造成功了4个临床兽用疫苗或产品,并仍然有数十个产品正在临床验证的不同阶段。通过不断提高DNA质粒进入体细胞的效率,DNA疫苗将具有更强的免疫应答效率,从而使得DNA疫苗走向更多和更广泛的临床... 详细信息

DNA疫苗技术从1990年代发现到至今,已经创造成功了4个临床兽用疫苗或产品,并仍然有数十个产品正在临床验证的不同阶段。通过不断提高DNA质粒进入体细胞的效率,DNA疫苗将具有更强的免疫应答效率,从而使得DNA疫苗走向更多和更广泛的临床应用。DNA疫苗不仅可以增强机体免疫系统的应答反应,利用其与蛋白质疫苗共免疫的方式也可以产生特异性的免疫耐受反应用于抑制免疫反应。基于DNA疫苗的诱导免疫耐受的疫苗技术开辟了全新的过敏性疾病和自主免疫疾病的干预领域,具有重要的临床潜力和应用前景。

关键词： DNA疫苗耐受疫苗共免疫佐剂过敏性疾病自主免疫疾病

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HIV进入抑制多肽VIR576可抑制抗原特异性CD4^+T细胞的体外活化:一种潜在的双功能杀微生物剂(英文)

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南方医科大学学报 2014年第5期34卷 597-602页

作者：李珉珉张瑞涛胡义平李建军姜世勃李晓娟刘叔文暨南大学附属第一医院广东广州510630 三峡大学医学院药理学部湖北宜昌443000 南方医科大学药学院广东广州510515 复旦大学医学院病原微生物研究所教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的观察VIR576对CD4+T细胞活化的作用。方法分离DO11.10小鼠脾细胞并用OVA或ConA分别刺激,观察VIR576对抗原特异性和非特异性T细胞活化的影响;培养A2b CD4+T细胞株和磁珠分离的DO11.10小鼠脾脏CD4+CD25-效应性T细胞,分别用特异性抗原激... 详细信息

目的观察VIR576对CD4+T细胞活化的作用。方法分离DO11.10小鼠脾细胞并用OVA或ConA分别刺激,观察VIR576对抗原特异性和非特异性T细胞活化的影响;培养A2b CD4+T细胞株和磁珠分离的DO11.10小鼠脾脏CD4+CD25-效应性T细胞,分别用特异性抗原激活,观察VIR576对抗原特性CD4+T细胞活化的影响。结果 VIR576抑制抗原特异性T细胞的活化,但对非抗原特异性T细胞活化的影响不显著,非特异性T细胞活化不需要TCR和CD3的交联。进一步研究发现,VIR576也可以下调抗原特异性CD4+T细胞的活化。结论粘膜活化的CD4+T细胞对HIV-1高度易感,VIR576不仅具有抑制HIV进入的活性还能够抑制CD4+T细胞活化,提示VIR576是一种有开发潜能的预防HIV性传播的杀微生物剂。

关键词： HIV进入抑制多肽 gp41 融合多肽 VIR576 CD4’T细胞活化

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表皮葡萄球菌色氨酰-tRNA合成酶抑制剂W-23的抗菌活性研究

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中国科技论文在线精品论文 2014年第23期7卷 2362-2366页

作者：吴旸毛嘉琳瞿涤复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的:检测色氨酰-tRNA合成酶(tryptophanyl-tRNA synthetase,WRS)抑制剂W-23对葡萄球菌的抗菌活性.方法:采用肉汤稀释法检测W-23对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并检... 详细信息

目的:检测色氨酰-tRNA合成酶(tryptophanyl-tRNA synthetase,WRS)抑制剂W-23对葡萄球菌的抗菌活性.方法:采用肉汤稀释法检测W-23对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并检测其与氨苄青霉素或氯霉素联用对表皮葡萄球菌的联合抗菌效果.结果:化合物W-23对葡萄球菌属的MIC为2～4 mg/L,抗菌类型属于抑菌剂,与氨苄青霉素联用对耐甲氧西林表皮葡萄球菌具有协同抗菌作用.结论:W-23对葡萄球菌抗菌活性较强,具有潜在应用价值.

关键词：医学微生物葡萄球菌色氨酰-tRNA合成酶抑制剂W-23

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不同干扰素应答慢性乙型肝炎患者的基因组DNA甲基化谱差异分析

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微生物与感染 2014年第4期9卷 217-223页

作者：邬敏张小楠陈捷亮袁正宏上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

α干扰素,包括长效干扰素——聚乙醇化α干扰素(PEG-IFNα),是临床用以治疗慢性乙型肝炎的首选药物。但干扰素治疗通常只能在有限的患者中获得完全应答。目前干扰素治疗应答相关指标预测的灵敏度与特异度远未令人满意,因此继续寻找潜在... 详细信息

α干扰素,包括长效干扰素——聚乙醇化α干扰素(PEG-IFNα),是临床用以治疗慢性乙型肝炎的首选药物。但干扰素治疗通常只能在有限的患者中获得完全应答。目前干扰素治疗应答相关指标预测的灵敏度与特异度远未令人满意,因此继续寻找潜在的与干扰素疗效预测相关的分子标记仍是一个十分有意义的工作。为探讨慢性乙型肝炎患者基因组DNA甲基化状态与干扰素治疗疗效的关系,本研究采用RocheNimbleGen人甲基化DNA免疫共沉淀-芯片(MeDIP-chip)技术,分析20例不同干扰素疗效慢性乙型肝炎患者的血浆基因组启动子甲基化谱差异,并利用MeDIP-定量聚合酶链反应(MeDIP-qPCR)检验部分基因启动子区域DNA甲基化的水平。结果显示,与快速应答组相比,无应答组中有588个基因启动子区甲基化水平存在显著差异(P<0.05)。这些基因主要涉及多个信号通路,即钙离子信号通路、细胞周期调节通路、肝脏代谢相关通路等。MeDIP-qPCR验证与芯片结果的一致性超过80%。本研究为探讨差异甲基化基因在干扰素应答中的作用及发现潜在的预测干扰素疗效的血液分子标记奠定了基础。

关键词：乙型肝炎病毒干扰素甲基化 DNA免疫共沉淀-芯片

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上海松江2006-2011年新登记肺结核时空分布规律及影响因素

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中华疾病控制杂志 2014年第8期18卷 709-714页

作者：路丽苹洪建军高谦王伟炳上海市松江区疾病预防控制中心结核病防制科上海201620 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室上海200032 复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的了解上海市松江区2006-2011年新登记肺结核(tuberculosis,TB)的时空分布规律及其影响因素。方法收集2006-2011年TB相关信息,应用时空扫描统计量探测TB的时空聚集区,应用Logistic回归模型分析影响TB聚集区形成的危险因素。结果松江区... 详细信息

目的了解上海市松江区2006-2011年新登记肺结核(tuberculosis,TB)的时空分布规律及其影响因素。方法收集2006-2011年TB相关信息,应用时空扫描统计量探测TB的时空聚集区,应用Logistic回归模型分析影响TB聚集区形成的危险因素。结果松江区2006-2011年新登记2 916例TB,单纯空间扫描统计显示全部TB及全部菌阳TB均在车墩镇聚集,本地TB及本地菌阳TB的空间聚集区为西南部的五个镇(新浜、石湖荡、小昆山、泖港和永丰),流动TB的聚集区为车墩镇,流动菌阳TB的聚集区为车墩镇、叶榭镇和泖港镇。时空扫描统计量显示松江区肺结核病例在2007-2008年出现聚集现象,聚集区域为工业区所在地的车墩镇和新桥镇。对于本地患者,农民职业者及就诊延误与空间聚集区呈独立相关;流动患者中,职业为蓝领工人、年龄小于60岁及来源于中国中西部地区是形成空间聚集区的危险因素。结论松江区TB的分布具有一定的时空聚集性。东部工业区是流动TB的聚集区域,西南五镇是本地TB的聚集区域,TB防控的工作重点应聚焦于这些区域;流动人口是TB聚集的重要因素,应重点关注。

关键词：结核,肺危险因素流行病学

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数控剪切流微流体技术及其在细菌生物膜研究中的应用

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微生物与感染 2014年第3期9卷 163-166页

作者：蔡霞郝殿明瞿涤复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 冷泉港生物科技股份有限公司上海200122

细菌生物膜是指微生物（细菌、真菌等）黏附、聚集形成的一个群体，该群体产生并分泌胞外聚合物（extracellular polymeric substance，EPS），形成一定的三维结构，含有营养物质、氧气等生长必需物质交换的通道，微生物细胞在EPS中增... 详细信息

细菌生物膜是指微生物（细菌、真菌等）黏附、聚集形成的一个群体，该群体产生并分泌胞外聚合物（extracellular polymeric substance，EPS），形成一定的三维结构，含有营养物质、氧气等生长必需物质交换的通道，微生物细胞在EPS中增殖、生存[1]。

关键词：细菌生物膜流体技术剪切流微生物细胞应用数控胞外聚合物三维结构

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