检索结果-内蒙古大学图书馆

临床肝胆病杂志 2020年第5期36卷 983-988页

作者：宰文静陈捷亮袁正宏复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫健委重点实验室上海200032

已知HBV cccDNA在感染肝细胞的细胞核内以微染色体的形式持续稳定存在,难以被靶向调控和清除。围绕HBV cccDNA持续沉默或降解清除机制及策略的研究是当前慢性乙型肝炎“功能性治愈”目标下的重点。介绍了目前对cccDNA基本生物学特性、... 详细信息

已知HBV cccDNA在感染肝细胞的细胞核内以微染色体的形式持续稳定存在,难以被靶向调控和清除。围绕HBV cccDNA持续沉默或降解清除机制及策略的研究是当前慢性乙型肝炎“功能性治愈”目标下的重点。介绍了目前对cccDNA基本生物学特性、转录和代谢调控机制及相关宿主因子的认知,重点分析了cccDNA沉默清除的可能途径和靶向调控策略。

关键词：乙型肝炎病毒 DNA,环状代谢转录调控抗病毒策略

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异氟醚对人单核细胞株THP-1细胞炎性细胞因子mRNA表达的影响

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复旦学报（医学版） 2006年第3期33卷 343-346,367页

作者：张光明蒋豪瞿涤薛张纲复旦大学附属中山医院麻醉科复旦大学上海医学院-教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究异氟醚对人类单核细胞株（THP-1）细胞、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ7（IFN-γ）、IL-4和IL-10 mRNA表达的影响。方法在吸入不同浓度异氟醚0、2、4、6h收获THP-1细胞．从收获的细胞... 详细信息

目的研究异氟醚对人类单核细胞株（THP-1）细胞、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ7（IFN-γ）、IL-4和IL-10 mRNA表达的影响。方法在吸入不同浓度异氟醚0、2、4、6h收获THP-1细胞．从收获的细胞中提取RNA，逆转录合成cDNA，以β—actin作内对照半定量PCR后电泳扫描求积．检测THP-1细胞与炎性反应关系密切的上述细胞因子mRNA表达。结果在吸入异氟醚过程中观察到明显的促炎性细胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α mRNA表达增加，未检测到IFN-γ、IL-4和IL-10 mRNA表达。IL-1β、IL-8、TNF-α mRNA表达在异氟醚吸入过程中的4和6h比0h增加4～8倍。在异氟醚吸入浓度为2．0最低肺泡有效浓度（minimal alveolar ***）时，IL-1β mRNA表达呈时间依赖关系（0h：0．55±0．06；2h：3．12±0．11；4h：3．45±0．14；6h：3．92±0．07）。在吸入4和6h时，IL-1β mRNA表达呈剂量依赖关系．分别为[对照：0．71±0．13；异氟醚：（1．69±0．07）1．0MAC；（3．45±0．14）2．0MAC]和[对照：0．65±0．09；isoflurane：（2．11±0．12）1．0MAC；（3．92±0．07）2．0MAC]。这些数据提示THP-1细胞吸人异氟醚过程中伴随有促炎性细胞因子mRNA表达增加。结论异氟醚能在转录水平上调节THP-1细胞炎性反应，当吸人浓度〉1．0MAC时．异氟醚以剂量和时间依赖方式显著增加THP-1细胞促炎性细胞因子mRNA表达。

关键词：异氟醚人类单核细胞株细胞因子逆转录-聚合酶链反应

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saeRS对金黄色葡萄球菌临床分离株的hla和lukS-PV表达的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第2期33卷 91-96页

作者：屠金晶张协许园园尚永朋楼丹萍武有聪瞿涤王良兴余方友温州医学院第一附属医院呼吸科 325000 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的研究双组分信号调控系统saeRS对金黄色葡萄球菌临床分离株a溶血素基因（hla）和***杀白细胞素基因（1ukSIF-PV）表达的影响。方法利用同源重组技术敲除saeRS基因，获得金黄色葡萄球菌saeRS基因敲除株，并构建saeRS回复突变株。应用S... 详细信息

目的研究双组分信号调控系统saeRS对金黄色葡萄球菌临床分离株a溶血素基因（hla）和***杀白细胞素基因（1ukSIF-PV）表达的影响。方法利用同源重组技术敲除saeRS基因，获得金黄色葡萄球菌saeRS基因敲除株，并构建saeRS回复突变株。应用SDS-PAGE检测金黄色葡萄球菌saeR／S野生株、敲除株及回复突变株分泌蛋白的变化，采用RT—PCR检测金黄色葡萄球菌saeR／S野生株、敲除株及回复突变株hlamRNA和lukS—PVmRNA。结果成功构建了金黄色葡萄球菌saeRS基因敲除株SA75AsaeRS。与野生株SA75相比，SA75／XsaeRS的生长无明显差异，但分泌蛋白种类和数量有明显减少且溶血能力明显减弱。saeRS基因回复突变株SA75／XsaeRS—C可以基本恢复敲除株的溶血能力。在3、6和10h3个时间点与野生株相比，SA75AsaeRS的hlamRNA均有明显下降，分别是野生株的7．6％、0％和0．1％。lukS—PVmRNA也均有明显下降，分别是野生株lukS—PV表达量的37．2％、19．2％和20．4％。结论saeRS基因是调节金黄色葡萄球菌分泌蛋白的关键因子。saeRS基因对金黄色葡萄球菌的hla和lukS—PV的表达具有正调控作用。

关键词：金黄色葡萄球菌 saeRS hla lukS F-PV

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表皮葡萄球菌AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制

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复旦学报（医学版） 2006年第5期33卷 569-573页

作者：欧元祝朱于莉陈洁敏秦智强江娟杨晓梅瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平,用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量,并用DNA酶(DNaseⅠ)研究... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平,用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量,并用DNA酶(DNaseⅠ)研究表皮葡萄球菌胞外DNA在生物膜形成和起始黏附中的作用;采用pBT2质粒同源重组敲除的方法构建了表皮葡萄球菌1457的atlE基因突变株,研究atlE基因敲除突变对起始黏附能力、生物膜形成及胞外DNA释放能力的影响。结果表皮葡萄球菌atlE基因的表达与胞外DNA的释放量有相关性;DNA酶能影响未成熟生物膜且能降低起始黏附能力;ΔatlE菌株胞外DNA的释放减少,起始黏附能力明显降低,不形成生物膜。结论表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白能通过释放胞外DNA在表皮葡萄球菌的生物膜起作用。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜 atlE基因胞外DNA

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CpG岛岸甲基化调控人T细胞系中lag3表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2015年第7期35卷 491-495页

作者：郝书民仇超张林霞张晓燕徐建青复旦大学附属公共卫生临床中心上海201508 复旦大学生物医学研究院复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（1ympho—cyteactivationgene3，lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平，选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分... 详细信息

目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（1ympho—cyteactivationgene3，lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平，选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分布以确定潜在表观调控区（CpG岛和CpG岛岸），分别测定各T细胞系中相关区段的DNA甲基化水平。用5-杂氮胞苷（5-Aza．2＇-deoxycytidine，5-Aza-2’-dc）对细胞系做去甲基化处理，检测z0邸表达水平及DNA甲基化水平的变化。结果lag3表达水平在***1．6和CEM细胞中极低，在JurkatE6-1细胞中相对较高。不同细胞系中，CpG岛均高度甲基化；CpG岛岸在***1．6和CEM细胞中高度甲基化，但在JurkatE6—1细胞中甲基化水平较低。5-Aza-2’-dc处理后，***1．6和CEM细胞中lag3mRNA和蛋白质的表达均显著上调，且伴随CpG岛岸去甲基化；而JurkatE6-1细胞中，未见CpG岛岸甲基化和lag3表达水平的显著变化。5-Aza-2＇-dc处理不能使CpG岛去甲基化。结论CpG岛岸的甲基化与去甲基化是lag3转录的表观调控开关。

关键词： DNA甲基化 CpG岛岸 lag3 人T细胞系

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医源性表皮葡萄球菌ica操纵子转录水平对生物膜表型的影响

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上海医学 2006年第1期29卷 40-44页

作者：江娟孙景勇欧元祝秦智强陈洁敏瞿涤复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子转录水平对生物膜表型差异的影响。方法采用微量板半定量法检测细菌生物膜表型,用Southern杂交和聚合酶链反应检测icaA基因及ica操纵子中是否存在插入序列,用RNA狭缝杂交和逆转录实时定量聚合酶... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子转录水平对生物膜表型差异的影响。方法采用微量板半定量法检测细菌生物膜表型,用Southern杂交和聚合酶链反应检测icaA基因及ica操纵子中是否存在插入序列,用RNA狭缝杂交和逆转录实时定量聚合酶链反应检测icaA基因和icaR基因的转录水平;采用χ2检验分析icaA基因与生物膜表型的相关性,采用单因素方差检验分析转录水平的差异。结果101株临床分离株中,32.7%(33/101株)能形成生物膜,其中22株icaA基因阳性;67.3%(68/101株)无生物膜形成,其中15株icaA基因阳性。15株icaA+/生物膜表型-分离株中,ica操纵子各基因中均不存在插入序列,icaA基因的转录水平明显低于生物膜阳性的ATCC35984株(P<0.05),其中2株icaR基因的转录水平高于ATCC35984株(P<0.01)。结论表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子的存在与生物膜表型相关(χ2=19.045,P<0.01);ica操纵子的低转录是icaA+/生物膜表型-临床株不形成生物膜的主要原因。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜 ica操纵子转录插入

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活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖

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复旦学报（医学版） 2014年第3期41卷 384-388页

作者：乔可王晴岚李紫煜牛辰复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 北京东胜创新生物科技有限公司分子影像部北京100085

目的利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法用经GFP标记的野生型海分枝杆菌（Mycobacterium marinum,Mm）分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨... 详细信息

目的利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法用经GFP标记的野生型海分枝杆菌（Mycobacterium marinum,Mm）分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨噬细胞,使用活细胞显微成像系统连续记录胞内分枝杆菌的增殖动态,同时优化不同细胞接种浓度和感染复数（multiplicity of infection,MOI）对胞内菌增殖动态的追踪效果。结果使用GFP标记和活细胞成像的方法可以实时追踪胞内分枝杆菌的增殖过程和形态学变化。γ干扰素对Mm在巨噬细胞中的增殖有抑制作用。当接种巨噬细胞浓度为1×105/孔,MOI为1时,可直观清晰地分析实时追踪图像中胞内菌的增殖过程。结论通过活细胞成像技术分析荧光蛋白标记的分枝杆菌,可实时追踪巨噬细胞内分枝杆菌增殖过程和形态学变化,是一种体外分析胞内分枝杆菌增殖的理想方法,可应用于其他相关病原菌和宿主相互作用及影响因素的研究。

关键词：海分枝杆菌(Mm) 巨噬细胞活细胞成像细菌增殖感染复数(MOI)

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CpG ODN对活动性肺结核患者外周血Th1/Th2型免疫应答的调节作用

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复旦学报（医学版） 2005年第6期32卷 648-652页

作者：任涛金美玲蔡映云胡芸文袁正宏复旦大学附属中山医院呼吸病研究所复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部重点实验室上海200032

目的观察CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法20例活动性肺结核患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、结核菌素纯化蛋白衍... 详细信息

目的观察CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法20例活动性肺结核患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、结核菌素纯化蛋白衍化物(PPD)组(10ng/mL)、CpG ODN组(2nmoL/mL)和CpG ODN+PPD组。用real ti me-PCR法检测PBMCIFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达。结果①活动性肺结核患者PBMC空白对照组IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10mRNA的表达与健康人相似(P>0.05);②经PPD刺激,IFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达较空白对照组增高(P<0.01,P<0.01,P<0.01),但IFN-γmRNA的表达低于健康人(P<0.01),IL-12mRNA的表达与健康人相似(P>0.05),IL-10mRNA的表达高于健康人(P<0.01);③经CpGODN刺激,IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达高于空白对照组(P<0.01,P<0.01),但低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人也无差别(P>0.05);④经CpGODN+PPD刺激,IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达较空白对照组增高(P<0.01,P<0.01),但IFN-γmR-NA的表达低于健康人(P<0.01),IL-12mRNA的表达与健康人相似(P>0.05),IL-10mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人也无差别(P>0.05);⑤经CpG ODN+PPD刺激,肺结核患者IL-12mRNA的表达高于PPD组(P<0.05),IL-10mRNA的表达低于PPD组(P<0.01)。结论CpG ODN可促进活动性肺结核患者PBMC产生IFN-γ和IL-12,增强Th1型免疫反应。CpG ODN与PPD联合应用可进一步促进PPD对IL-12表达的诱导,并抑制PPD对IL-10表达的增强作用。

关键词：肺结核 CpG寡脱氧核苷酸 γ干扰素白细胞介素10 白细胞介素12

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结核分枝杆菌(MTB)异质性耐药研究进展

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复旦学报（医学版） 2013年第1期40卷 1-4页

作者：柳清云孙刚高谦复旦大学上海医学院生物医学研究院-医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

异质性耐药,是指在同一样本中同时存在耐药菌和敏感菌的现象,这体现了细菌群体从部分耐药向完全耐药转变的过程。研究异质性耐药对于认识耐药结核病的发展过程,以及评估治疗方案和指导临床用药具有重要的意义。本文对结核分枝杆菌(Mycob... 详细信息

异质性耐药,是指在同一样本中同时存在耐药菌和敏感菌的现象,这体现了细菌群体从部分耐药向完全耐药转变的过程。研究异质性耐药对于认识耐药结核病的发展过程,以及评估治疗方案和指导临床用药具有重要的意义。本文对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)异质性耐药的产生及其对临床的影响进行了综述。

关键词：结核分枝杆菌(MTB) 异质性耐药耐药结核病

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N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)的研究进展

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生物化学与生物物理进展 2022年第9期49卷 1630-1637页

作者：陈妍雯袁舒颖刘瑞杰张绍兴邹琳芦鑫荣孔维溧陈力孙桂芹浙江中医药大学医学技术与信息工程学院杭州310053 复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫生健康委员会重点实验室上海200032

N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNG... 详细信息

N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNGase基因功能缺陷会导致先天性去糖基化障碍,小鼠PNGase缺陷会导致胚胎致死性,线虫PNGase缺陷使其寿命下降。本文对PNGase在不同物种的分布、蛋白质结构、酶学功能及生物学功能进行阐述,为PNGase的生理病理功能及致病机制的基础研究提供思路,为PNGase作为糖生物学工具酶或药物开发的创新应用研究奠定基础。

关键词： N-糖蛋白去糖基化酶分布蛋白质结构酶学功能生物学功能

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