目的了解结核分枝杆菌PPE68稳定片段,对稳定片段蛋白进行原核表达及纯化,为PPE68的结构解析奠定基础。方法使用Expasy-ProParam、MEME等生信网站对PPE68的基本性状和序列进化保守性进行分析;使用双酶切方法,PCR扩增PPE68基因,并克隆到pGL01载体上;使用大肠埃希菌BL21(DE3)进行PPE68片段蛋白的原核表达,在IPTG(isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导表达后,利用SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)电泳分析表达产物并使用镍离子亲和层析及凝胶过滤层析的方法对表达产物进行体外纯化。后通过胰蛋白酶切实验、质谱分析确定PPE68最稳定片段。结果生物信息学分析初步确定了PPE68可能的稳定片段为第7-354个氨基酸并成功构建pGL01-PPE68(7-354aa)表达载体,蛋白表达纯化后获得2.4mg/mL的PPE68(7-354aa)片段蛋白但纯度较低;针对纯化的PPE68(7-354aa)蛋白较杂问题进行胰蛋白酶切和质谱分析找到稳定片段,为PPE68的第7-180个氨基酸,构建质粒后在大肠埃希菌中能稳定表达并获得2.9mg/mL的纯化蛋白,蛋白纯度可达95%以上。结论成功找到结核分枝杆菌PPE68的稳定氨基酸序列,为未来PPE68蛋白晶体结构解析以及进一步结核病诊断和疫苗开发奠定基础。
为推进中外学生趋同化教育,南京医科大学针对来华内外全科医学学士（Bachelor of Medicine and Bachelor of Surgery,MBBS）教育留学生设计了寄生虫学选修课——《宿敌化盟友》,并采用研究型教学方法对31名留学生进行授课。该课程包括...
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为推进中外学生趋同化教育,南京医科大学针对来华内外全科医学学士（Bachelor of Medicine and Bachelor of Surgery,MBBS）教育留学生设计了寄生虫学选修课——《宿敌化盟友》,并采用研究型教学方法对31名留学生进行授课。该课程包括寄生虫相关知识、科研基本知识和技能、科研进展前沿专题3部分内容,考核内容包括课程签到、课堂活动参与度及科研汇报3个方面。课程考核结果显示,2018—2021、2022级和2023级分别有100%（8/8）、81.8%（9/11）和83.3%（10/12）的学生总得分≥80分,3个年级学生中位得分（四分位间距）[M（QR）]分别为91.1（7.0）、90.8（5.7）分和90.8（5.7）分,差异无统计学意义（H=0.04,P> 0.05）。此外,采用李克特量表以问卷调查的方式调查31名MBBS教育留学生对该课程的学习兴趣以及对课程实用性、重要性的评价,共回收27份有效问卷,问卷回收率为87.1%。问卷调查结果显示,2018—2021、2022级和2023级学生问卷总得分M（QR）分别为7.0（0.8）、6.4（1.4）、6.0（1.1）分,差异无统计学意义（H=2.64,P>0.05）。以上结果表明,该选修课提升了MBBS教育留学生对寄生虫学学科的学习兴趣及其自主学习、团队合作、创新思维等方面的能力。
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