本研究利用全细胞膜片钳技术探索丙泊酚对丘脑室旁核(paraventricular thalamus,PVT)谷氨酸能神经元活性的影响及作用机制。在8周龄C57BL/6J小鼠急性脑片上,用单细胞逆转录PCR技术鉴定PVT神经元类型。记录丙泊酚给药前、后和洗脱后PVT神经元的放电频率(firing frequencies before,during,and after,F_(B),F_(D)and F_(W))及给药前、后的膜电位(membrane potential before and during,MPB and MPD)。探索木防己苦毒素(picrotoxin,PTX)阻断γ-氨基丁酸A型(gamma-aminobutyric acid type A,GABAA)受体后对丙泊酚作用的影响,以及丙泊酚对PVT神经元上自发和微小抑制性突触后电流(spontaneous and miniature inhibitory postsynaptic currents,sIPSCs and mIPSCs)的影响。动物实验已获得复旦大学上海医学院动物实验伦理委员会批准。结果显示,在脂肪乳组和2μmol·L^(-1)丙泊酚组,F_(B)、F_(D)、F_(W)之间无统计学差异。在5、10、20μmol·L^(-1)丙泊酚组,FD与FB相比显著下降(P<0.01),F_(W)与FD相比显著升高(P<0.01),且这3个浓度组之间的抑制程度有显著差异(P<0.01)。MPD与MPB相比仅在20μmol·L^(-1)丙泊酚组有显著下降(P<0.01)。加入PTX后10μmol·L^(-1)丙泊酚不能抑制放电频率。10μmol·L^(-1)丙泊酚使sIPSCs的衰减时间延长(P<0.01),且使mIPSCs的衰减时间延长(P<0.05),幅度升高(P<0.01)。以上结果表明,丙泊酚呈浓度依赖和可逆性地抑制PVT谷氨酸能神经元活性,这种作用可能主要由突触后GABAA受体介导。
暂无评论