检索结果-内蒙古大学图书馆

生命科学 2021年第4期33卷 407-418页

作者：傅美贤龙健儿复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

核糖体进入位点(internal ribosome entry sites,IRES)常见于许多正链RNA病毒基因组以及部分细胞基因。在营养缺乏、内质网应激、缺氧和病毒感染等不利条件下,细胞翻译也能够从经典的帽子依赖型翻译转换为依赖于IRES的翻译机制。事实上,... 详细信息

核糖体进入位点(internal ribosome entry sites,IRES)常见于许多正链RNA病毒基因组以及部分细胞基因。在营养缺乏、内质网应激、缺氧和病毒感染等不利条件下,细胞翻译也能够从经典的帽子依赖型翻译转换为依赖于IRES的翻译机制。事实上,自IRES被发现以来,其相关的翻译机制调控被认为是病毒感染的关键步骤,对病毒毒力、组织靶向性和致病性具有重要作用。因此,研究IRES的结构及其功能有助于揭示病毒致病的机制,对发展有效的病毒预防或控制策略具有重要意义。该文主要对RNA病毒中目前发现的IRES结构、类型及其相关的反式调控因子和作用机制作一综述。

关键词： IRES依赖型蛋白翻译 IRES结构 IRES反式调控因子

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拉米夫定治疗前后HBV全基因序列检测对比

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中华传染病杂志 2003年第4期21卷 260-264页

作者：张继明刘芳尹有宽张清波邬祥惠翁心华复旦大学附属华山医院上海200040 复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的　对比研究同一慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前及病情急性恶化后乙型肝炎病毒 (HBV)株的结构基因组。方法　对治疗前及出现病情急性恶化后的慢性乙型肝炎患者的两株HBV全基因进行克隆、测序 ,分析各读码框架核苷酸和氨基酸的变化... 详细信息

目的　对比研究同一慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前及病情急性恶化后乙型肝炎病毒 (HBV)株的结构基因组。方法　对治疗前及出现病情急性恶化后的慢性乙型肝炎患者的两株HBV全基因进行克隆、测序 ,分析各读码框架核苷酸和氨基酸的变化。结果　出现病情急性恶化后的HBV株与治疗前毒株比较 ,共有 30个氨基酸发生替代 (包括YMDD基序的M 5 5 0V变异和上游的L5 2 6M变异 ) ,P、X、S和PreC/Core 4个开放读码框架的替代氨基酸数 (变异率 )分别为 10 (1.2 % )、4(2 .6 % )、8(2 .0 % )和 8(3.8% ) ,氨基酸总变异率为 1.9%。其中 ,HBVPreC区的第 1898位核苷酸发生G→A变异 ,产生一个终止密码子 ,导致HBeAg缺失 ;PreS2的起始密码子出现ATG→ATA变异 ,可致PreS2表达缺陷 ;另有变异位点分布于已知CTL、B和T细胞的细胞表位。结论　对拉米夫定耐药并致病情急性恶化的HBV株在YMDD基序之处共有 2 9个氨基酸变异。

关键词：慢性乙型肝炎拉米夫定治疗 HBV全基因基因克隆基因测序

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抑制性IgG受体(FcγRIIB)的免疫调节作用及意义

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生命科学 2009年第1期21卷 49-52页

作者：姚忻闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

FcγRIIB作为低亲和力IgG受体介导对多种免疫细胞功能的负反馈调节。它的两种主要分子异构体IIB1、IIB2分布于不同的细胞表面并发挥不同的抑制效应。FcγRIIB可以通过依赖和不依赖于其胞浆区ITIM结构域的方式抑制细胞的激活效应。FcγR... 详细信息

FcγRIIB作为低亲和力IgG受体介导对多种免疫细胞功能的负反馈调节。它的两种主要分子异构体IIB1、IIB2分布于不同的细胞表面并发挥不同的抑制效应。FcγRIIB可以通过依赖和不依赖于其胞浆区ITIM结构域的方式抑制细胞的激活效应。FcγRIIB在与BCR交联后,抑制BCR与脂筏形成稳定结构,并阻止B细胞的免疫突触形成。FcγRIIB的表达失衡将导致自身免疫病、肿瘤和感染性疾病的发生发展。进一步研究阐明影响FcγRIIB受体表达或其信号传导机制的因素,将有助于人们找到治疗和控制这些疾病的新方法。

关键词：抑制性IgG受体 FcγRIIB 免疫调节

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表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS基因生物学功能研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第10期27卷 946-953页

作者：王家学朱涛娄强吴旸韩聪瞿涤复旦大学上海医学院生物医学研究院病原生物学研究所教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室200032

目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重组质粒在43℃条件下振摇培养,筛选表皮葡萄球菌1457菌株的arlS缺失突变株(SE1457-△arlS);采用微量板半定量方法检测arlS删除突变对细菌生物被膜形成的影响,通过检测A595值观察其生长曲线,检测过夜培养上清液对菌细胞裂解的活性,并用0.1%TritonX-100诱导细菌自溶的方法检测SE1457-△arlS突变株的自溶情况。结果成功构建pBT2-△arlS质粒,利用同源重组基因删除的方法表皮葡萄球菌1457 arlS基因被删除。△arlS突变株与野生株的生长曲线基本相似,提示arlS基因删除对细菌的增殖无明显影响,但SE1457-△arlS突变株形成生物被膜的能力明显低于野生株,降低90.96%;在0.1%Triton X-100诱导下SE1457-△arlS基因删除突变株的裂解率为97.83%,野生株为55.38%;而△arlS突变株过夜培养上清液对靶细菌裂解的活性则低于野生株,其裂解率为20.50%,野生株为56.12%。结论表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统arlS基因可调控细菌生物被膜形成、菌细胞自溶以及胞外细菌裂解酶的活性。

关键词：表皮葡萄球菌双组分信号转导系统 arLS基因

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结核分枝杆菌对宿主细胞凋亡效应的调控研究

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科技导报 2009年第23期27卷 111-115页

作者：黄新华何思为李晨潇王德成复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

由结核分枝杆菌(MTB)引起的结核病是严重危害人类健康的重大传染病,全世界约有1/3的人口潜伏感染MTB。近几年随着耐多药MTB和HIV混合感染的流行,使结核病控制形势更加严峻。细胞凋亡是生物有机体一种古老的免疫防御反应,在帮助机体清除... 详细信息

由结核分枝杆菌(MTB)引起的结核病是严重危害人类健康的重大传染病,全世界约有1/3的人口潜伏感染MTB。近几年随着耐多药MTB和HIV混合感染的流行,使结核病控制形势更加严峻。细胞凋亡是生物有机体一种古老的免疫防御反应,在帮助机体清除胞内菌过程中发挥关键作用。已有研究结果表明,结核分枝杆菌对宿主细胞凋亡的调控过程非常复杂,即表现为有双重性:有些基因能促进凋亡,而有些则表现为抑制效应,且本研究组初步的研究结果表明细菌的毒力与凋亡有一定的内在联系,但是相关的分子机制还很不清楚。因此,鉴定MTB基因组中与凋亡相关的基因可以为研究细菌和宿主细胞之间的相互作用奠定基础,并且有助于研发新的药物靶标和候选疫苗。

关键词：巨噬细胞凋亡结核分枝杆菌毒力

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分枝杆菌细胞壁脂质PDIM致病机制研究进展

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科技导报 2012年第7期30卷 63-67页

作者：黄新华王德成复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

结核分枝杆菌(MycobacteriumTuberculosis,MTB)是导致人和动物结核病的病原体。MTB细胞壁成分复杂,功能多样,不但帮助分枝杆菌抵御外界不良的生活环境,同时在细菌逃逸宿主免疫攻击和致病过程中也发挥重要作用。脂质占细胞壁干重的60%以... 详细信息

结核分枝杆菌(MycobacteriumTuberculosis,MTB)是导致人和动物结核病的病原体。MTB细胞壁成分复杂,功能多样,不但帮助分枝杆菌抵御外界不良的生活环境,同时在细菌逃逸宿主免疫攻击和致病过程中也发挥重要作用。脂质占细胞壁干重的60%以上,其高含量与细菌毒力密切相关。MTB不含内毒素,也不产生外毒素和侵袭性酶类,其致病性主要与占细胞壁干重60%以上的脂质成分密切相关。PDIM(phthioceroldimycocerosate)作为细胞壁组分中独特而重要的结构,在维持细菌正常结构上发挥重要作用。由于PDIM在细胞壁分布的广泛性,研究发现PDIM在病原体-宿主的相互作用过程中也扮演重要角色,尤其是在细菌的早期侵染及进入巨噬细胞环节中发挥积极作用。对PDIM重要致病和毒力损伤机制研究,不仅加深对病原体-宿主互作网络中的理解,还有望为结核病的治疗带来新的希望与突破。

关键词：分枝杆菌 PDIM 脂质致病机制

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CpG岛岸甲基化调控人T细胞系中lag3表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2015年第7期35卷 491-495页

作者：郝书民仇超张林霞张晓燕徐建青复旦大学附属公共卫生临床中心上海201508 复旦大学生物医学研究院复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（1ympho—cyteactivationgene3，lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平，选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分... 详细信息

目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（1ympho—cyteactivationgene3，lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平，选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分布以确定潜在表观调控区（CpG岛和CpG岛岸），分别测定各T细胞系中相关区段的DNA甲基化水平。用5-杂氮胞苷（5-Aza．2＇-deoxycytidine，5-Aza-2’-dc）对细胞系做去甲基化处理，检测z0邸表达水平及DNA甲基化水平的变化。结果lag3表达水平在***1．6和CEM细胞中极低，在JurkatE6-1细胞中相对较高。不同细胞系中，CpG岛均高度甲基化；CpG岛岸在***1．6和CEM细胞中高度甲基化，但在JurkatE6—1细胞中甲基化水平较低。5-Aza-2’-dc处理后，***1．6和CEM细胞中lag3mRNA和蛋白质的表达均显著上调，且伴随CpG岛岸去甲基化；而JurkatE6-1细胞中，未见CpG岛岸甲基化和lag3表达水平的显著变化。5-Aza-2＇-dc处理不能使CpG岛去甲基化。结论CpG岛岸的甲基化与去甲基化是lag3转录的表观调控开关。

关键词： DNA甲基化 CpG岛岸 lag3 人T细胞系

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异氟醚对肝脏部分切除术病人肺泡巨噬细胞促炎性细胞因子mRNA表达的影响

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中华麻醉学杂志 2002年第8期22卷 459-461页

作者：张光明蒋豪薛张纲方浩王文逸瞿涤复旦大学附属中山医院麻醉科 200032 复旦大学教育部医学分子病毒学重点实验室 200032

目的观察异氟醚麻醉中人肺泡巨噬细胞IL-8、IL-1β基因表达的变化,以探讨异氟醚对肺炎性反应的影响。方法24例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚全麻观察组（n=12）和硬膜外+全麻对照组（n=12）。两组病人均快速诱导,气管内插管,麻... 详细信息

目的观察异氟醚麻醉中人肺泡巨噬细胞IL-8、IL-1β基因表达的变化,以探讨异氟醚对肺炎性反应的影响。方法24例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚全麻观察组（n=12）和硬膜外+全麻对照组（n=12）。两组病人均快速诱导,气管内插管,麻醉维持用药均包括异丙酚4～6mg·kg-1·h-1、芬太尼和维库溴铵。观察组吸入异氟醚,使呼气末异氟醚浓度保持在1.0％,对照组在诱导后经硬膜外注入1.0％利多卡因+0.2％丁卡因混合液5ml/h。在气管插管后即刻和4h用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗,从灌洗液中收获肺泡巨噬细胞提取RNA,逆转录合成cDNA,PCR后电泳扫描求积,检测肺泡巨噬细胞IL-8、IL-1βmRNA的表达。结果麻醉维持4h后比气管插管后即刻IL8-、IL-1βmRNA的表达增加,观察组比对照组IL-8、IL-1βmRNA的表达更强（P<0.05）。结论异氟醚能增强肝脏部分切除病人肺泡巨噬细胞促炎性细胞因子mRNA的表达,即在转录水平上,异氟醚能增强肺部的炎性反应。

关键词：异氟烷肺泡巨噬细胞肝切除术白细胞介素8 白细胞介素1 基因表达麻醉

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎小鼠感染模型的建立与评估

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中国抗生素杂志 2011年第8期36卷 617-620页

作者：王星周文江沈艳刘芳杨华高谦王德成教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院上海200032 上海市公共卫生临床中心复旦大学附属公共卫生临床中心上海201508

目的本研究采用临床分离鉴定的ST239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)感染BALB/c小鼠,建立小鼠肺炎模型,对小鼠的临床症状、肺载菌量与组织病理学变化进行时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠的治疗效果。方法取35只小鼠随机分成MRS... 详细信息

目的本研究采用临床分离鉴定的ST239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)感染BALB/c小鼠,建立小鼠肺炎模型,对小鼠的临床症状、肺载菌量与组织病理学变化进行时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠的治疗效果。方法取35只小鼠随机分成MRSA感染组、药物组和对照组,通过滴鼻方式分别滴入50μL细菌(前两组)与PBS(对照组);感染一天后对药物组用同样的方式滴入万古霉素,CT检测肺部的变化,并对肺载菌量和组织病理学变化进行观察。结果与对照组比较,CT和细菌计数等结果表明MRSA感染组和药物组的肺组织有明显的炎症反应,载菌量较高;与感染组相比,药物组小鼠肺部的载菌量明显降低,气管和肺部的组织病理学症状明显减轻。结论本实验结果表明小鼠MRSA肺炎模型成功建立,并可用于药物疗效的比较评估。该模型的建立,将为进一步研究临床分离的MRSA的病原特性、发病机理、治疗方法等,提供可靠的小动物模型。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型

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活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖

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复旦学报（医学版） 2014年第3期41卷 384-388页

作者：乔可王晴岚李紫煜牛辰复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 北京东胜创新生物科技有限公司分子影像部北京100085

目的利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法用经GFP标记的野生型海分枝杆菌（Mycobacterium marinum,Mm）分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨... 详细信息

目的利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法用经GFP标记的野生型海分枝杆菌（Mycobacterium marinum,Mm）分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨噬细胞,使用活细胞显微成像系统连续记录胞内分枝杆菌的增殖动态,同时优化不同细胞接种浓度和感染复数（multiplicity of infection,MOI）对胞内菌增殖动态的追踪效果。结果使用GFP标记和活细胞成像的方法可以实时追踪胞内分枝杆菌的增殖过程和形态学变化。γ干扰素对Mm在巨噬细胞中的增殖有抑制作用。当接种巨噬细胞浓度为1×105/孔,MOI为1时,可直观清晰地分析实时追踪图像中胞内菌的增殖过程。结论通过活细胞成像技术分析荧光蛋白标记的分枝杆菌,可实时追踪巨噬细胞内分枝杆菌增殖过程和形态学变化,是一种体外分析胞内分枝杆菌增殖的理想方法,可应用于其他相关病原菌和宿主相互作用及影响因素的研究。

关键词：海分枝杆菌(Mm) 巨噬细胞活细胞成像细菌增殖感染复数(MOI)

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