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2011 International Symposium of Microbizl Biofilm 2011年国际生物膜学术研讨会)

作者：胡健刘华勇余方友黄娅琳瞿涤许涛何年安朱涛娄强王雪琴吴旸黄仁政刘敬然复旦大学教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032中国复旦大学干细胞与再生医学研究所复旦大学附属中山医院

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利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌临床分离株sarA基因

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中国卫生检验杂志 2009年第1期19卷 17-20页

作者：余方友陈坚王薇薇李美兰黄金伟陈增强张雪青朱涛瞿涤温州医学院附属第一医院检验科浙江温州325000 浙江省丽水市中心医院检验科浙江丽水323000 复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的:利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌临床分离株sarA基因。方法:构建含有Em抗性基因(ermB)和sarA基因上、下游同源DNA片段的pBT2-ΔsarA质粒,将pBT2-ΔsarA质粒电转入金黄色葡萄球菌RN4220中,再把pBT2-ΔsarA质粒转入金黄色葡萄球... 详细信息

目的:利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌临床分离株sarA基因。方法:构建含有Em抗性基因(ermB)和sarA基因上、下游同源DNA片段的pBT2-ΔsarA质粒,将pBT2-ΔsarA质粒电转入金黄色葡萄球菌RN4220中,再把pBT2-ΔsarA质粒转入金黄色葡萄球菌30临床分离株中,把含重组质粒的金黄色葡萄球菌30临床分离株在42℃条件下振摇培养,筛选金黄色葡萄球菌30菌株的sarA基因缺失可疑突变株(SA30-ΔarlS);对重组到SA30染色体基因组的相应序列进行PCR扩增及DNA测序。结果:成功构建pBT2-ΔsarA质粒,pBT2-ΔsarA质粒被转入金黄色葡萄球菌30后,筛选到可疑突变株,经PCR及DNA测序证实金黄色葡萄球菌30sarA基因被ermB基因置换。结论:利用同源重组技术成功敲除金黄色葡萄球菌30临床分离株sarA基因。

关键词：葡萄球菌金黄色同源重组 sarA基因

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“XDR”结核病——人类面临的新挑战

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中华结核和呼吸杂志 2008年第2期31卷 147-149页

作者：梅建沈鑫高谦上海市疾病预防控制中心结核病防治科 200336 复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

2007年5月29日，美国疾病预防控制中心（CDC）宣布强制隔离治疗1例息结核病的美国公民，这是44年来美国CDC首次发出“联邦隔离令”。原因是这名被确诊患有“XDR”结核病（extensively drug—resistant tuberculosis，简称XDR-TB，中文... 详细信息

2007年5月29日，美国疾病预防控制中心（CDC）宣布强制隔离治疗1例息结核病的美国公民，这是44年来美国CDC首次发出“联邦隔离令”。原因是这名被确诊患有“XDR”结核病（extensively drug—resistant tuberculosis，简称XDR-TB，中文直译为“广泛耐药结核病”，一般称“严重耐多药结核病”）的男子于5月中下旬在美国、欧洲与加拿大之间旅行，导致同机旅客暴露于这种结核菌的危险之下。

关键词：耐药结核病美国疾病预防控制中心 tuberculosis 人类耐多药结核病美国CDC 隔离治疗 drug

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金黄色葡萄球菌临床分离株生物膜及ica操纵子检测

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中华检验医学杂志 2008年第6期31卷 682-684页

作者：余方友刘存丽黄金伟胡龙华王薇薇陈增强陈占国陈晓东张雪青朱涛瞿涤温州医学院附属第一医院检验科 325000 浙江省丽水市中心医院检验科南昌大学第二附属医院检验科复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

近年来，随着多种插管、透析技术及生物材料的广泛应用，以及人口老龄化及免疫力低下人群增加，形成生物膜的细菌感染迅速增加。金黄色葡萄球菌是临床上分离的常见细菌，可造成多种感染，既可引起社区感染又可造成医院感染，是医院感染... 详细信息

近年来，随着多种插管、透析技术及生物材料的广泛应用，以及人口老龄化及免疫力低下人群增加，形成生物膜的细菌感染迅速增加。金黄色葡萄球菌是临床上分离的常见细菌，可造成多种感染，既可引起社区感染又可造成医院感染，是医院感染的主要病原菌。由于金黄色葡萄球菌可产生多种毒素，其致病性较强，形成生物膜后，致病性进一步增强。

关键词：金黄色葡萄球菌临床分离株 ica操纵子生物膜检测细菌感染医院感染免疫力低下

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"XDR"结核病——人类面临的新挑战

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中华结核和呼吸杂志 2008年第2期

2007年5月29日,美国疾病预防控制中心(CDC)宣布强制隔离治疗1例患结核病的美国公民,这是44年来美国CDC首次发出"联邦隔离令"。

关键词：

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从分子机制入手研究HBsAg持续存在的临床意义

从分子机制入手研究HBsAg持续存在的临床意义

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传染病诊治高峰论坛暨2007年浙江省感染病学、肝病学学术年会

作者：闻玉梅复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

乙肝病毒感染者血清中所存在大量的 NBsAg 圆形的颗粒,其中并无病毒核酸。HBsAg 颗粒数可多达病毒颗粒数百倍甚至数千倍。这一独特现象从未在其他病毒中发现。为研究其分子机理,建立了可比的持续分泌 HBsAg 阳性转基因鼠模型及对照,并... 详细信息

乙肝病毒感染者血清中所存在大量的 NBsAg 圆形的颗粒,其中并无病毒核酸。HBsAg 颗粒数可多达病毒颗粒数百倍甚至数千倍。这一独特现象从未在其他病毒中发现。为研究其分子机理,建立了可比的持续分泌 HBsAg 阳性转基因鼠模型及对照,并用基因谱表达芯片研究了 HBsAg 阳性转基因鼠肝、肾内各种基因表达谱。结果发现在小鼠肝内43个基因表达≥2倍上调,104个基因下调。用荧光定量 RT-PCR 检测了其中10个基因表达趋势,基本符合。结合蛋白组学研究,发现 HBsAg 阳性主要影响肝组织代谢,而肾则主要表现为对炎症反应基因的影响。肝组织中表达显著降低的蛋白 CyclophilinA,(CyPA)为免疫抑制剂 Cyclosporin 的配体。在细胞模型中发现细胞内 CyPA 的下降,而细胞外 CyPA 则增加。CyPA 为一新型的化学趋向因子在应激情况下分泌。这一发现在乙肝患者中的意义在研究中。

关键词： HBsAg 分子机制临床意义

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从分子机制入手研究HBsAg持续存在的临床意义

从分子机制入手研究HBsAg持续存在的临床意义

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2007年传染病诊治高峰论坛暨浙江省感染病学、肝病学学术年会

作者：闻玉梅复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室 200433

本文从分子机制入手，研究了HBsAg持续存在的临床意义。建立了可比的持续分泌HBsAg阳性转基因鼠模型及对照，并用基因谱表达芯片研究了HBsAg阳性转基因鼠肝、肾内各种基因表达谱。结果发现在小鼠肝内43个基因表达=2倍上调，104个基因下... 详细信息

本文从分子机制入手，研究了HBsAg持续存在的临床意义。建立了可比的持续分泌HBsAg阳性转基因鼠模型及对照，并用基因谱表达芯片研究了HBsAg阳性转基因鼠肝、肾内各种基因表达谱。结果发现在小鼠肝内43个基因表达=2倍上调，104个基因下调。用荧光定量RT-PCR检测了其中10个基因表达趋势，基本符合。结合蛋白组学研究，发现HBsAg阳性主要影响肝组织代谢，而肾则主要表现为对炎症反应基因的影响。肝组织中表达显著降低的蛋白CyclophilinA，(CyPA)为免疫抑制剂Cyclosporin的配体。在细胞模型中发现细胞内CyPA的下降，而细胞外CyPA则增加。CyPA为一新型的化学趋向因子在应激情况下分泌。

关键词：乙型肝炎乙肝病毒病毒核酸基因表达

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金黄色葡萄球菌临床分离株生物膜形成的检测及与ica操纵子相关性研究

金黄色葡萄球菌临床分离株生物膜形成的检测及与ica操纵子相关性...

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第七次全国临床微生物学术年会暨第三届两岸三地临床微生物与感染病学术论坛

作者：余方友瞿涤刘存丽黄金伟林晓梅王薇薇陈增强陈占国张雪青朱涛温州医学院附属第一医院检验科温州 325000 复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室浙江省丽水市中心医院检验科

目的:研究金黄色葡萄球菌临床分离株生物膜形成能力及与ica操纵子的相关性。方法:收集80株分离自我院2004年1月至2007年3月间从临床标本分离的金黄色葡萄球菌,导管、血液、痰液及脓液标本各20株,以及体表分离株20株。用半定量微量... 详细信息

目的:研究金黄色葡萄球菌临床分离株生物膜形成能力及与ica操纵子的相关性。方法:收集80株分离自我院2004年1月至2007年3月间从临床标本分离的金黄色葡萄球菌,导管、血液、痰液及脓液标本各20株,以及体表分离株20株。用半定量微量板法检测金黄色葡萄球菌生物膜,用PCR法扩增icaA基因。结果:80株临床分离株有61株生物膜形成阳性,阳性率为76.3％(61/80)。20株体表分离株只有1株形成生物膜,阳性率为5％。经X<'2>检验,差异具有统计学意义(P<0.01)。80株临床分离株有58株icaA基因阳性,阳性率为72.5％(58/80)。20株体表分离株只有1株icaA基因阳性,且为生物膜形成阳性株,阳性率为5％(1/20)。经X2检验,差异具有统计学意义(P<0.01)。62株形成生物膜的金葡菌有57株icaA基因阳性,基因阳性率为92％(57/62),38株未能形成生物膜的菌株只有2株icaA基因阳性,阳性率为5.3％(2/38)。金葡菌生物膜形成表型与icaA基因密切相关(P<0.01)。MRSA和MSSA生物膜形成的阳性率为68.8％(33/48)和87.5％(28/32),icaA基因阳性率为62.5％(30/48)和87.5％(28/32),经X2检验,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:生物膜形成是金黄色葡萄球菌临床分离株的一个重要毒力因素,与ica操纵子密切相关。

关键词：金黄色葡萄球菌生物膜操纵子临床分离株

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异氟醚对肝脏部分切除术病人肺泡巨噬细胞促炎性细胞因子mRNA表达的影响

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中华麻醉学杂志 2002年第8期22卷 459-461页

作者：张光明蒋豪薛张纲方浩王文逸瞿涤复旦大学附属中山医院麻醉科 200032 复旦大学教育部医学分子病毒学重点实验室 200032

目的观察异氟醚麻醉中人肺泡巨噬细胞IL-8、IL-1β基因表达的变化,以探讨异氟醚对肺炎性反应的影响。方法24例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚全麻观察组（n=12）和硬膜外+全麻对照组（n=12）。两组病人均快速诱导,气管内插管,麻... 详细信息

目的观察异氟醚麻醉中人肺泡巨噬细胞IL-8、IL-1β基因表达的变化,以探讨异氟醚对肺炎性反应的影响。方法24例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚全麻观察组（n=12）和硬膜外+全麻对照组（n=12）。两组病人均快速诱导,气管内插管,麻醉维持用药均包括异丙酚4～6mg·kg-1·h-1、芬太尼和维库溴铵。观察组吸入异氟醚,使呼气末异氟醚浓度保持在1.0％,对照组在诱导后经硬膜外注入1.0％利多卡因+0.2％丁卡因混合液5ml/h。在气管插管后即刻和4h用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗,从灌洗液中收获肺泡巨噬细胞提取RNA,逆转录合成cDNA,PCR后电泳扫描求积,检测肺泡巨噬细胞IL-8、IL-1βmRNA的表达。结果麻醉维持4h后比气管插管后即刻IL8-、IL-1βmRNA的表达增加,观察组比对照组IL-8、IL-1βmRNA的表达更强（P<0.05）。结论异氟醚能增强肝脏部分切除病人肺泡巨噬细胞促炎性细胞因子mRNA的表达,即在转录水平上,异氟醚能增强肺部的炎性反应。

关键词：异氟烷肺泡巨噬细胞肝切除术白细胞介素8 白细胞介素1 基因表达麻醉

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复合麻醉对人外周血淋巴细胞促炎性细胞因子mRNA表达的影响

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临床麻醉学杂志 2002年第2期18卷 65-67页

作者：张光明蒋豪薛张纲方浩王文逸瞿涤复旦大学附属中山医院麻醉科上海市200032 复旦大学教育部医学分子病毒学重点实验室

目的　研究复合麻醉中人外周血淋巴细胞IL 8、IL 1 β、TNF α基因表达 ,探讨异氟醚吸入和硬膜外阻滞对外周血炎性反应的影响。方法　 2 4例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚组(n =1 2 )和硬膜外组 (n =1 2 ) ,在麻醉诱导后即刻和 4... 详细信息

目的　研究复合麻醉中人外周血淋巴细胞IL 8、IL 1 β、TNF α基因表达 ,探讨异氟醚吸入和硬膜外阻滞对外周血炎性反应的影响。方法　 2 4例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚组(n =1 2 )和硬膜外组 (n =1 2 ) ,在麻醉诱导后即刻和 4小时分别取静脉血 2 0ml用外周血淋巴细胞分离液 (Ficoll)进行梯度离心 ,从获得的淋巴细胞中提取RNA ,逆转录合成cDNA ,PCR后电泳扫描求积 ,检测淋巴细胞IL 8、IL 1 β和TNF α的mRNA表达。结果　异氟醚组麻醉维持 4小时比麻醉诱导后即刻IL 8、IL 1 β的表达增加 (P <0 0 5) ,硬膜外组麻醉维持 4小时与麻醉诱导后即刻IL 8、IL 1 β的表达无明显变化 (P >0 0 5)。两组均未检出TNF α基因表达。结论　复合麻醉中吸入异氟醚能增强肝脏部分切除病人外周血淋巴细胞促炎性细胞因子mRNA表达 ,即在转录水平上 ,异氟醚能增强外周血炎性反应 ;

关键词：复合麻醉促炎性细胞因子逆转录-聚合酶链反应硬膜外阻滞外周血淋巴结巴

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