检索结果-内蒙古大学图书馆

复旦学报(自然科学版) 2025年第2期64卷 180-185页

作者：滕永端李潇洪尚宇孙璘复旦大学遗传工程国家重点实验室上海200438 复旦大学生命科学学院上海200438 复旦大学发育生物学研究所上海200438

生酮饮食(Ketogenic Diet,KD)是一种低碳水,适当蛋白质和高脂肪占比的特殊饮食模式,在女性中多用于治疗多囊卵巢综合征等疾病。妊娠期是女性生命周期中的一个特殊时期,妊娠期间的营养状况对子代发育至关重要。目前,很少有研究报道女性... 详细信息

生酮饮食(Ketogenic Diet,KD)是一种低碳水,适当蛋白质和高脂肪占比的特殊饮食模式,在女性中多用于治疗多囊卵巢综合征等疾病。妊娠期是女性生命周期中的一个特殊时期,妊娠期间的营养状况对子代发育至关重要。目前,很少有研究报道女性使用生酮饮食后对其子代糖脂代谢的影响。因此,本研究中我们通过对雌性小鼠饲喂生酮饮食,并对其子代哺乳期和成年后的体重、血脂、肝脏和脂肪组织占比等进行研究,以探究母鼠生酮饮食干预对其子代糖脂代谢的影响。研究结果表明,母鼠生酮饮食干预导致其雌性子代成年时的血清甘油三脂水平降低,对其雄性子代的血脂水平无显著影响,对其雌性和雄性子代的体重、肝脏和脂肪组织占比无显著影响。

关键词：生酮饮食女性妊娠子代发育代谢

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人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因第3内含子的克隆和分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第4期32卷 359-363页

作者： SAID A.Saleh,孙建龙,陈昭,黄建生,张伯生,任大明复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验

从端粒酶活性呈阳性的永生细胞株人肺腺癌细胞SPC A 1中分离了总RNA ,以此为模板 ,结合RT PCR技术和长模板PCR技术 ,用hTERT基因特异性引物扩增到一长约 2 .2kb的cDNA片段。将该片段纯化后克隆到通用测序载体T easyvector上得到重组质... 详细信息

从端粒酶活性呈阳性的永生细胞株人肺腺癌细胞SPC A 1中分离了总RNA ,以此为模板 ,结合RT PCR技术和长模板PCR技术 ,用hTERT基因特异性引物扩增到一长约 2 .2kb的cDNA片段。将该片段纯化后克隆到通用测序载体T easyvector上得到重组质粒。用测序引物SP6和T7对该片段进行部分双向测序。经序列分析和同源比较推测该片段包含了hTERT基因的第 3内含子。该结果提示了RT PCR技术和长模板PCR技术用于真核生物基因内含子克隆的可行性。进一步的分析表明 ,该片段在不同细胞的RT PCR产物中的产量不同 ,提示hTERT基因前体mRNA中的第 3内含子可能在不同细胞中有不同的剪接效率。

关键词： hTERT RTPCR 内含子

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耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶突变型Pro229Ser的表达、纯化和初步晶体学分析(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第5期33卷 569-572页

作者：姜涛季朝能盛小禹毛裕民复旦大学生命科学学院遗传学研究所、遗传工程国家重点实验室!上海200433

表达和纯化了耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的突变型Pro2 2 9Ser。酶学性质分析表明该突变型的热稳定性低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶 ,相应于 5 0 %酶活性的温度下降了 10 .2℃ ,其动力学参数kcat/Km 值 (4 .89× 10 6mol-1&... 详细信息

表达和纯化了耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的突变型Pro2 2 9Ser。酶学性质分析表明该突变型的热稳定性低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶 ,相应于 5 0 %酶活性的温度下降了 10 .2℃ ,其动力学参数kcat/Km 值 (4 .89× 10 6mol-1·s-1)略低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的kcat/Km 值 (6 .97× 10 6mol-1·s-1)。以PEG40 0为沉淀剂 ,采用气相悬滴扩散法在4℃条件下培养出Pro2 2 9Ser的蛋白质晶体 ,并收集和分析了该晶体的X射线衍射数据 ,衍射分辨率达 0 .2 4nm。Pro2 2 9Ser晶体的空间群属于I2 2 2 正交晶系 ,晶胞参数分别为a =7.0 5 9nm ,b =7.415nm ,c =13.311nm。推测该晶体每个不对称单位中含有两个Pro2 2 9Ser分子 ,其Matthews参数 (Vm)为 2 .49× 10 -3 nm3·D-1,溶剂含量为 5 1%。Pro2 2 9Ser晶体结构的解析工作正在进行之中

关键词：耐热酶 X射线衍射分析热稳定性耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶

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携带人内皮一氧化氮合酶基因的AAV重组表达载体的构建(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第7期24卷 15-18+102页

作者：贺晨霞缪朝玉姚纪花陈浩明卢大儒苏定冯薛京伦复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海 200433 中国第二军医大学基础部药理学教研室

目的:构建一个新型的携带有人内皮一氧化氮合酶(eNOS)cDNA的质粒载体并研究其体外表达,以用于基因治疗。方法:eNOS cDNA插入到腺相关病毒质粒pSNAV-1的EcoR Ⅰ位点。该质粒的启动子为CMV启动子,并携带有腺相关病毒的末端重复序列。构建... 详细信息

目的:构建一个新型的携带有人内皮一氧化氮合酶(eNOS)cDNA的质粒载体并研究其体外表达,以用于基因治疗。方法:eNOS cDNA插入到腺相关病毒质粒pSNAV-1的EcoR Ⅰ位点。该质粒的启动子为CMV启动子,并携带有腺相关病毒的末端重复序列。构建好的质粒转染到两种哺乳动物细胞BHK和C2C12细胞中,通过PCR和RT-PCR分别检测eNOS cDNA和mRNA。结果:限制性内切酶分析证明,eNOS cDNA以正确的方向插入到pSNAV-1质粒中。PCR检测表明pSNAV-eNOS被转入BHK和C2C12细胞中。RT-PCR检测表明转染有pSNAV-eNOS的细胞可表达eNOS mRNA。结论:成功构建的pSNAV-eNOS可在体外培养的哺乳动物细胞中表达人eNOS mRNA。

关键词：一氧化氮一氧化氮合酶质粒基因治疗腺相关病毒

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以减毒沙门氏菌为载体的口服胞嘧啶脱氨酶基因治疗小鼠肿瘤

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生物化学与生物物理学报 2001年第2期33卷 233-237页

作者：李玉华解咏梅郭坤元陈慧韦毅黄建生任大明第一军医大学附属珠江医院血液科!广州510282 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所!遗传工程国家重点实验室

通过电转化法将真核表达载体EGFPN1和pLCDSN导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL32 6 1中 ,经由胃管饲于C5 7BL/ 6和BALB/c小鼠。6周后接种Lewis和 4T1肿瘤细胞 ,待肿瘤增至直径为 10mm左右 ,辅以腹腔注射 5 氟胞嘧啶治疗。通过流式细胞仪、共聚... 详细信息

通过电转化法将真核表达载体EGFPN1和pLCDSN导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL32 6 1中 ,经由胃管饲于C5 7BL/ 6和BALB/c小鼠。6周后接种Lewis和 4T1肿瘤细胞 ,待肿瘤增至直径为 10mm左右 ,辅以腹腔注射 5 氟胞嘧啶治疗。通过流式细胞仪、共聚焦显微镜和PCR等方法 ,在小鼠的肝脏、脾脏、小肠、肾脏、肿瘤等组织器官中均可检测到胞嘧啶脱氨酶基因的整合 ,绿色荧光蛋白在小鼠的脾脏和肿瘤中表达最强 ,其他组织表达甚弱。利用胞嘧啶脱氨酶 / 5 氟胞嘧啶系统进行治疗的小鼠肿瘤生长较其他组显著受抑 (P <0 .0 1) ,小鼠的生存期明显延长 (P <0 .0 1) ,未观察到明显的毒副作用

关键词：胞嘧啶脱氨酶减毒沙门氏菌口服肿瘤

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一种用于基因芯片可靠的RNA线性扩增技术

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第5期35卷 441-448页

作者：李涛李瑶韩志勇陈沁裘敏燕倪胜姜振铃谢毅毛裕民上海博星基因芯片有限责任公司联合基因科技集团有限公司复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200092

基因芯片是大规模表达谱分析的有力工具 ,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标。但常规方法需要大量RNA ,每张芯片需要 5 0～ 2 0 0 μg总RNA ,2～ 5 μgmRNA。许多珍贵难得样本都不能满足这一要求 ,成为限制芯片广泛应用... 详细信息

基因芯片是大规模表达谱分析的有力工具 ,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标。但常规方法需要大量RNA ,每张芯片需要 5 0～ 2 0 0 μg总RNA ,2～ 5 μgmRNA。许多珍贵难得样本都不能满足这一要求 ,成为限制芯片广泛应用的瓶颈。结合模板转移效应 ,优化了基于T7的RNA线性扩增技术 ,可从 3μg以下总RNA得到足量的反义RNA ,克服了这一难题。同一RNA样本的自身比较试验结果显示反义RNA标记的芯片与总RNA、mRNA标记的芯片假阳性率相似。同一对RNA样本的表达谱分析也显示反义RNA标记的芯片与总RNA、mRNA标记的芯片无明显差异。

关键词：基因芯片 RNA线性扩增

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p27^(kip1)过表达对肝细胞癌细胞株细胞周期的影响

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复旦学报（医学版） 2007年第3期34卷 323-328页

作者：吴洁桑瑛颖陶静王英明吴超群邓可京乔守怡复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433

目的探讨肿瘤抑制基因p27kip1编码的P27蛋白过表达与HCC细胞株细胞周期的关系。方法本研究从野生型p27kip1基因真核表达质粒pEYFP-P27(WT)出发,采用定点诱变技术构建了突变型p27kip1基因表达载体pEYFP-P27(S10A)、pEYFP-P27(T157A)和pEY... 详细信息

目的探讨肿瘤抑制基因p27kip1编码的P27蛋白过表达与HCC细胞株细胞周期的关系。方法本研究从野生型p27kip1基因真核表达质粒pEYFP-P27(WT)出发,采用定点诱变技术构建了突变型p27kip1基因表达载体pEYFP-P27(S10A)、pEYFP-P27(T157A)和pEYFP-P27(T187A),然后用脂质体法将上述质粒转染HCC细胞株HepG2和Hep3B,Western Blotting检测内源和转入的P27蛋白表达,流式细胞仪检测P27蛋白过表达对HCC细胞株细胞周期的影响。结果野生型和3种突变型的P27融合蛋白在HepG2和Hep3B中的过表达都能增强G0／G1期阻抑;同时,对HepG2细胞,核定位位点突变体P27(T157A)比野生型P27蛋白及其他两个突变体具有更强的细胞周期阻抑活性,而对Hep3B细胞,3个突变体和野生型p27蛋白对细胞周期的影响无明显差异。结论P27蛋白过表达能够显著增强HCC细胞株的G0／G1期阻抑。

关键词： P27蛋白细胞周期肝细胞癌细胞株

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载体重靶向与肿瘤基因治疗

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癌症 2009年第1期28卷 107-112页

作者：韦炜薛京伦田聆复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433

病毒载体的靶向性问题是肿瘤基因治疗中的重要研究热点,靶向病毒载体是提高肿瘤基因治疗安全性和有效性的重要途径。载体的靶向策略很多,载体重靶向就是其中重要的一种。本文就近年来在肿瘤基因治疗领域中关于载体重靶向问题的研究进展... 详细信息

病毒载体的靶向性问题是肿瘤基因治疗中的重要研究热点,靶向病毒载体是提高肿瘤基因治疗安全性和有效性的重要途径。载体的靶向策略很多,载体重靶向就是其中重要的一种。本文就近年来在肿瘤基因治疗领域中关于载体重靶向问题的研究进展进行综述,并试图对载体重靶向的途径和研究策略进行归纳和总结。

关键词：肿瘤载体重靶向病毒修饰基因治疗

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异烟肼耐药结核分枝杆菌感染人源巨噬细胞的蛋白质组学研究

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生物化学与生物物理进展 2004年第4期31卷 361-367页

作者：刘丽蓉乐军王洪海复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 上海市肺科医院上海200433

利用双向电泳技术 ,对人源巨噬细胞U937感染异烟肼耐药结核分枝杆菌前后的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析 ,发现其中产生差异的有 32个蛋白质斑点 ,利用基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱技术 ,对其中 5个表达明显上调的蛋白... 详细信息

利用双向电泳技术 ,对人源巨噬细胞U937感染异烟肼耐药结核分枝杆菌前后的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析 ,发现其中产生差异的有 32个蛋白质斑点 ,利用基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱技术 ,对其中 5个表达明显上调的蛋白质斑点进行分析鉴定 ,获得 5个明确的肽质量指纹图谱 ,通过在数据库中进行检索分析 ,确定这 5个蛋白质分别为热休克蛋白 10 5 β、凋亡抑制蛋白 1、磷酸甘油酸变位酶 1、组织蛋白酶B、桥粒胶蛋白 3.上述发现有助于了解耐药结核分枝杆菌入侵早期导致的巨噬细胞蛋白质组表达变化 ,为深入研究耐药结核分枝杆菌宿主相互作用提供了探索方向 .

关键词：结核分枝杆菌异烟肼蛋白质组巨噬细胞U937 人

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非小细胞肺癌中PTCH1-3’-UTR调控的lncRNAs的ceRNA网络（英文）

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复旦学报（医学版） 2018年第3期45卷 305-315页

作者：赵琛万学超伊传友秦睿孔哲黄燕复旦大学遗传工程国家重点实验室-生命科学学院遗传学研究所上海200438

目的研究PTCH1-3’-UTR对lnc RNAs表达水平的影响,通过调控网络的分析,提示PTCH1-3’-UTR的功能。方法通过芯片筛选非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中调控PTCH1-3’-UTR的lnc RNAs,并对部分结果进行荧光定量PCR验证。通... 详细信息

目的研究PTCH1-3’-UTR对lnc RNAs表达水平的影响,通过调控网络的分析,提示PTCH1-3’-UTR的功能。方法通过芯片筛选非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中调控PTCH1-3’-UTR的lnc RNAs,并对部分结果进行荧光定量PCR验证。通过GO和KEGG通路分析调控PTCH1-3’-UTR的lnc RNAs可能的生物学功能。通过TCGA数据分析调控PTCH1-3’-UTR的lnc RNAs与NSCLC患者生存率的直接关系。结果荧光定量PCR验证了PTCH1-3’-UTR上调表达的lnc RNAs(LOC100507547,FAM41C,DOCK4-AS1,AC009305.1,KLF7-IT1,RP11-749H20.1,LINC01511)。GO和KEGG通路分析结果显示,调控PTCH1-3’-UTR的lnc RNAs与一系列的生物过程,包括基因转录、信号转导、蛋白质转运、翻译延伸以及钙信号通路、Jak-STAT信号通路、p53信号通路、胰岛素信号通路有关。TCGA数据分析的结果表明,调控PTCH1-3’-UTR的lnc RNAs中,NSCLC患者中高表达lnc RNA-CDKN2BAS或FAM66D者预后较差,而高表达lnc RNA-LINC00240、LOC400027、ABCC6P2或FLJ10038者可能预示高存活率。结论本研究结果提示了PTCH1-3’-UTR的功能,调控PTCH1-3’-UTR的lnc RNA可作为NSCLC预后标志物。

关键词：长链非编码RNA PTCH1-3’-UTR 内源竞争性RNA网络表达谱非小细胞肺癌

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