检索结果-内蒙古大学图书馆

遗传 2025年第4期47卷 476-488页

作者：高舒阳陆厚光王艳花严冬复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200438

N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是mRNA中含量最丰富的化学修饰之一,在动植物发育和各种生理病理过程中发挥关键性的作用。先前的研究已经发现了m^(6)A甲基转移酶复合体、去甲基化酶以及m^(6)A结合蛋白,但作为一条相对... 详细信息

N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是mRNA中含量最丰富的化学修饰之一,在动植物发育和各种生理病理过程中发挥关键性的作用。先前的研究已经发现了m^(6)A甲基转移酶复合体、去甲基化酶以及m^(6)A结合蛋白,但作为一条相对较新的RNA修饰通路,可能还存在新的m^(6)A修饰因子。为了探究m^(6)A修饰对组织和器官的影响,本研究在果蝇(Drosophila melanogaster)眼成虫盘中过表达m^(6)A结合蛋白基因Ythdc1。结果显示,过表达Ythdc1导致雄性异位表达Sxl蛋白,雌雄均出现粗糙眼表型,同时也激活了JNK和细胞凋亡通路。为了利用粗糙眼表型进行m^(6)A修饰因子的筛选,本研究进一步构建了过表达Ythdc1的稳定果蝇品系。通过对1,500多个果蝇RNAi品系的筛选,成功鉴定到多个可能参与m^(6)A修饰的抑制子和增强子。这些基因目前在m^(6)A中的研究较少,因此进一步对它们进行了验证和初步的机制探索。总之,本研究发现了m^(6)A修饰通路的多个潜在因子,丰富了对m^(6)A修饰通路调控网络的认知,为探索m^(6)A修饰通路新的调控机制提供了思路和方向。

关键词：果蝇 N6-甲基腺嘌呤 Ythdc1 Sxl 修饰因子筛选

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线粒体DNA基因组揭示的白马人群的遗传结构

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中国科学:生命科学 2025年第1期55卷 153-167页

作者：毛乙臻王飞刘雨佳陈紫薇张金柠杨亚军郑鸿翔复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室现代人类学教育部重点实验室上海200438

白马人是中国最古老的人群之一,尽管历史和文化等方面的研究提示了白马人与青藏高原相关人群之间的紧密联系,但是遗传学证据仍然缺乏.本研究采集49例白马人样本并进行线粒体DNA基因组测序.同时,本文额外整合95个人群总计5676个亚洲个体... 详细信息

白马人是中国最古老的人群之一,尽管历史和文化等方面的研究提示了白马人与青藏高原相关人群之间的紧密联系,但是遗传学证据仍然缺乏.本研究采集49例白马人样本并进行线粒体DNA基因组测序.同时,本文额外整合95个人群总计5676个亚洲个体的线粒体DNA单倍群数据进行主成分分析,发现白马人与青藏高原相关人群最为接近,提示白马人与青藏高原相关人群相近的遗传关系.随后,本研究对白马人群、青藏高原相关人群和汉族共18个人群进行序列多态性分析,发现白马人群的遗传多样性最低,且远远低于青藏高原相关人群和汉族.同时,本研究挑选出白马人中6个主要的亚单倍群(频率>4%),分别为A21,D4j1a1,D4b2b+T3398C+A390G+A15613G,M9a1a2,M62b1a和D5b1b.本文对这6个单倍群构建进化网络,并估计最近共祖时间.研究发现白马人群的6个主要单倍群中有3个单倍群与青藏高原人群特异支系相关,同时这6个主要单倍群中的4个单倍群都起源于新石器时期及之后时期.综上所述,本文推测白马人群与青藏高原相关人群关系密切,且白马人群的主体形成可能与新石器时期农业发展后青藏高原以及周边区域更为频繁的人群活动相关.

关键词：白马人东亚人群人类进化遗传学线粒体DNA

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母鼠生酮饮食干预对子代糖脂代谢的影响

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复旦学报(自然科学版) 2025年第2期64卷 180-185页

作者：滕永端李潇洪尚宇孙璘复旦大学遗传工程国家重点实验室上海200438 复旦大学生命科学学院上海200438 复旦大学发育生物学研究所上海200438

生酮饮食(Ketogenic Diet,KD)是一种低碳水,适当蛋白质和高脂肪占比的特殊饮食模式,在女性中多用于治疗多囊卵巢综合征等疾病。妊娠期是女性生命周期中的一个特殊时期,妊娠期间的营养状况对子代发育至关重要。目前,很少有研究报道女性... 详细信息

生酮饮食(Ketogenic Diet,KD)是一种低碳水,适当蛋白质和高脂肪占比的特殊饮食模式,在女性中多用于治疗多囊卵巢综合征等疾病。妊娠期是女性生命周期中的一个特殊时期,妊娠期间的营养状况对子代发育至关重要。目前,很少有研究报道女性使用生酮饮食后对其子代糖脂代谢的影响。因此,本研究中我们通过对雌性小鼠饲喂生酮饮食,并对其子代哺乳期和成年后的体重、血脂、肝脏和脂肪组织占比等进行研究,以探究母鼠生酮饮食干预对其子代糖脂代谢的影响。研究结果表明,母鼠生酮饮食干预导致其雌性子代成年时的血清甘油三脂水平降低,对其雄性子代的血脂水平无显著影响,对其雌性和雄性子代的体重、肝脏和脂肪组织占比无显著影响。

关键词：生酮饮食女性妊娠子代发育代谢

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马克斯克鲁维酵母重组蛋白高产突变株的转录组分析

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复旦学报(自然科学版) 2025年第2期64卷 148-159页

作者：吴若男尹安琪余垚周峻岗吕红复旦大学遗传工程国家重点实验室上海200438 复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心上海200438

马克斯克鲁维酵母是一种生长速度快、蛋白质合成能力强的食品级酵母,具有研究价值与工业应用潜力。本研究以豆血红蛋白A(Leghemoglobin A,Lba)为靶蛋白,通过H 2O 2和UV联合诱变筛选获得马克斯克鲁维酵母重组蛋白高产突变株F6-30,其Lba... 详细信息

马克斯克鲁维酵母是一种生长速度快、蛋白质合成能力强的食品级酵母,具有研究价值与工业应用潜力。本研究以豆血红蛋白A(Leghemoglobin A,Lba)为靶蛋白,通过H 2O 2和UV联合诱变筛选获得马克斯克鲁维酵母重组蛋白高产突变株F6-30,其Lba产量提高67%。F6-30表现出高产通用性,表达其他异源蛋白如阿魏酸酯酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶时产量分别提升111%、119%和39.4%。转录组测序分析显示在表达Lba的情况下F6-30与出发菌株相比在发酵24 h和60 h分别有1629个和1841个基因有显著差异,上调基因分别有604个和540个,下调基因分别有1025个和1301个。GO富集分析显示显著差异基因富集在翻译过程、RNA加工以及溶酶体和自噬相关GO条目;KEGG富集分析显示富集通路主要为核糖体生物发生、氨基酸合成代谢、核苷酸代谢等,表明突变株中蛋白质翻译途径显著加强,自噬途径及蛋白酶体途径以及氨基酸合成代谢被削弱。

关键词：马克斯克鲁维酵母转录组重组蛋白表达豆血红蛋白A

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循环逆转录反应方法及应用条件研究

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生物化学与生物物理进展 2001年第4期28卷 560-562页

作者：陈燃金詟伍迪唐榕毛裕民复旦大学生命科学学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433

建立了循环逆转录反应方法 (repeatedreversetranscriptionreaction ,RRTR) .其原理是通过控制高温变性低温退火延伸的循环过程 ,反复利用起始RNA模板进行逆转录反应 .RNA杂交的结果证明在RRTR过程中 ,RNA模板是保持稳定的 ;点杂交结... 详细信息

建立了循环逆转录反应方法 (repeatedreversetranscriptionreaction ,RRTR) .其原理是通过控制高温变性低温退火延伸的循环过程 ,反复利用起始RNA模板进行逆转录反应 .RNA杂交的结果证明在RRTR过程中 ,RNA模板是保持稳定的 ;点杂交结果表明cDNA产物量得到了增加 ;定量PCR的结果表明RRTR是cDNA线性增长过程 .结果提示 ,RRTR可有效地提高RNA检测灵敏度。

关键词：循环逆转录反应 RNA 定量分析应用

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双分子荧光互补技术及其在蛋白质相互作用研究中的应用

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生物化学与生物物理进展 2006年第6期33卷 589-595页

作者：严晶霍克克复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200433

双分子荧光互补(bimolecularfluorescencecomplementation,BiFC)分析技术,是由Hu等在2002年最先报道的一种直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术.该技术巧妙地将荧光蛋白分子的两个互补片段分别与目标蛋白融合表... 详细信息

双分子荧光互补(bimolecularfluorescencecomplementation,BiFC)分析技术,是由Hu等在2002年最先报道的一种直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术.该技术巧妙地将荧光蛋白分子的两个互补片段分别与目标蛋白融合表达,如果荧光蛋白活性恢复则表明两目标蛋白发生了相互作用.其后发展出的多色荧光互补技术(multicolorBiFC),不仅能同时检测到多种蛋白质复合体的形成,还能够对不同蛋白质间产生相互作用的强弱进行比较.目前,该技术已用于转录因子,G蛋白βγ亚基的二聚体形式,不同蛋白质间产生相互作用强弱的比较以及蛋白质泛素化等方面的研究工作上.

关键词：双分子荧光互补(BiFC) 蛋白质相互作用亚细胞定位

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FHC和Bim相互作用抵抗细胞凋亡(英文)

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生物化学与生物物理进展 2011年第9期38卷 859-865页

作者：邹冠玉季朝能沈琪薛京伦陈金中复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200433

FHC和Bim参与细胞铁代谢和由ROS引起的细胞凋亡过程.但是其具体的分子机制还未阐明.用pLexA-Bim L作为诱饵,筛选了一个基于pBD42AD的胎脑cDNA文库,发现FHC是一个新的Bim相互作用蛋白.酵母杂交实验发现Bim的相互作用片段为BH3功能域.上... 详细信息

FHC和Bim参与细胞铁代谢和由ROS引起的细胞凋亡过程.但是其具体的分子机制还未阐明.用pLexA-Bim L作为诱饵,筛选了一个基于pBD42AD的胎脑cDNA文库,发现FHC是一个新的Bim相互作用蛋白.酵母杂交实验发现Bim的相互作用片段为BH3功能域.上述相互作用进一步用免疫共沉淀和荧光共定位得以证实.在HEK293细胞过表达FHC可以减轻由Bim过表达或ROS所引起的细胞凋亡,而用FHC特异性siRNA调低FHC表达,则增加Bim过表达或ROS引起的细胞凋亡.研究首次报道了Bim和FHC的相互作用以及对细胞凋亡和氧化应激的影响,为进一步阐明FHC和Bim参与凋亡和ROS反应提供了新的线索.

关键词：铁蛋白重链FHC Bim 氧化应激细胞凋亡

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Daxx与ΦBT1相互作用并抑制其重组活性(英文)

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生物化学与生物物理进展 2013年第1期40卷 37-42页

作者：王瑧瑧王然李文娟薛京伦陈金中复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200433

噬菌体整合酶ΦBT1因其具有可介导转基因位点特异性整合的能力而成为了基因治疗中一种有效的工具,它丰富了转基因载体的选择,并使得多位点特异性整合成为可能.为了能够更加安全有效地利用ΦBT1整合酶作为基因治疗载体,有必要了解ΦBT1... 详细信息

噬菌体整合酶ΦBT1因其具有可介导转基因位点特异性整合的能力而成为了基因治疗中一种有效的工具,它丰富了转基因载体的选择,并使得多位点特异性整合成为可能.为了能够更加安全有效地利用ΦBT1整合酶作为基因治疗载体,有必要了解ΦBT1整合酶与宿主细胞内蛋白质相互作用的情况.酵母配对实验与免疫共沉淀实验揭示了ΦBT1整合酶中4个氨基酸433RFAL436对整合酶与PML-NBs蛋白Daxx的结合起到了关键作用.通过进一步构建并利用ΦBT1整合酶哺乳动物细胞报告系统,证实过表达Daxx会抑制ΦBT1整合酶在293T细胞中的重组效率.以上结果表明,细胞内的蛋白质可以与ΦBT1整合酶发生相互作用并抑制其重组活性,对于改善ΦBT1整合酶介导的转基因操作以及选择ΦBT1整合酶靶细胞方面具有重要的参考意义.

关键词： ΦBT1整合酶互作蛋白 Daxx

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人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因第3内含子的克隆和分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第4期32卷 359-363页

作者： SAID A.Saleh,孙建龙,陈昭,黄建生,张伯生,任大明复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验

从端粒酶活性呈阳性的永生细胞株人肺腺癌细胞SPC A 1中分离了总RNA ,以此为模板 ,结合RT PCR技术和长模板PCR技术 ,用hTERT基因特异性引物扩增到一长约 2 .2kb的cDNA片段。将该片段纯化后克隆到通用测序载体T easyvector上得到重组质... 详细信息

从端粒酶活性呈阳性的永生细胞株人肺腺癌细胞SPC A 1中分离了总RNA ,以此为模板 ,结合RT PCR技术和长模板PCR技术 ,用hTERT基因特异性引物扩增到一长约 2 .2kb的cDNA片段。将该片段纯化后克隆到通用测序载体T easyvector上得到重组质粒。用测序引物SP6和T7对该片段进行部分双向测序。经序列分析和同源比较推测该片段包含了hTERT基因的第 3内含子。该结果提示了RT PCR技术和长模板PCR技术用于真核生物基因内含子克隆的可行性。进一步的分析表明 ,该片段在不同细胞的RT PCR产物中的产量不同 ,提示hTERT基因前体mRNA中的第 3内含子可能在不同细胞中有不同的剪接效率。

关键词： hTERT RTPCR 内含子

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耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶突变型Pro229Ser的表达、纯化和初步晶体学分析(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第5期33卷 569-572页

作者：姜涛季朝能盛小禹毛裕民复旦大学生命科学学院遗传学研究所、遗传工程国家重点实验室!上海200433

表达和纯化了耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的突变型Pro2 2 9Ser。酶学性质分析表明该突变型的热稳定性低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶 ,相应于 5 0 %酶活性的温度下降了 10 .2℃ ,其动力学参数kcat/Km 值 (4 .89× 10 6mol-1&... 详细信息

表达和纯化了耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的突变型Pro2 2 9Ser。酶学性质分析表明该突变型的热稳定性低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶 ,相应于 5 0 %酶活性的温度下降了 10 .2℃ ,其动力学参数kcat/Km 值 (4 .89× 10 6mol-1·s-1)略低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的kcat/Km 值 (6 .97× 10 6mol-1·s-1)。以PEG40 0为沉淀剂 ,采用气相悬滴扩散法在4℃条件下培养出Pro2 2 9Ser的蛋白质晶体 ,并收集和分析了该晶体的X射线衍射数据 ,衍射分辨率达 0 .2 4nm。Pro2 2 9Ser晶体的空间群属于I2 2 2 正交晶系 ,晶胞参数分别为a =7.0 5 9nm ,b =7.415nm ,c =13.311nm。推测该晶体每个不对称单位中含有两个Pro2 2 9Ser分子 ,其Matthews参数 (Vm)为 2 .49× 10 -3 nm3·D-1,溶剂含量为 5 1%。Pro2 2 9Ser晶体结构的解析工作正在进行之中

关键词：耐热酶 X射线衍射分析热稳定性耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶

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