检索结果-内蒙古大学图书馆

复旦学报(自然科学版) 2025年第2期64卷 180-185页

作者：滕永端李潇洪尚宇孙璘复旦大学遗传工程国家重点实验室上海200438 复旦大学生命科学学院上海200438 复旦大学发育生物学研究所上海200438

生酮饮食(Ketogenic Diet,KD)是一种低碳水,适当蛋白质和高脂肪占比的特殊饮食模式,在女性中多用于治疗多囊卵巢综合征等疾病。妊娠期是女性生命周期中的一个特殊时期,妊娠期间的营养状况对子代发育至关重要。目前,很少有研究报道女性... 详细信息

生酮饮食(Ketogenic Diet,KD)是一种低碳水,适当蛋白质和高脂肪占比的特殊饮食模式,在女性中多用于治疗多囊卵巢综合征等疾病。妊娠期是女性生命周期中的一个特殊时期,妊娠期间的营养状况对子代发育至关重要。目前,很少有研究报道女性使用生酮饮食后对其子代糖脂代谢的影响。因此,本研究中我们通过对雌性小鼠饲喂生酮饮食,并对其子代哺乳期和成年后的体重、血脂、肝脏和脂肪组织占比等进行研究,以探究母鼠生酮饮食干预对其子代糖脂代谢的影响。研究结果表明,母鼠生酮饮食干预导致其雌性子代成年时的血清甘油三脂水平降低,对其雄性子代的血脂水平无显著影响,对其雌性和雄性子代的体重、肝脏和脂肪组织占比无显著影响。

关键词：生酮饮食女性妊娠子代发育代谢

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Sp100与HIV-1整合酶互作并抑制其介导的病毒整合(英文)

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生物化学与生物物理进展 2013年第3期40卷 240-248页

作者：林云李智慧王然李文娟王晶晶季朝能薛京伦陈金中复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433

Sp100是核颗粒ND10的组成蛋白,在哺乳动物细胞中广泛存在.Sp100参与多种细胞生理病理过程,如转录调控、细胞内抗病毒免疫等.利用酵母双杂交系统,我们发现了Sp100的互作蛋白HIV-1整合酶,免疫共沉淀实验进一步证实了Sp100与HIV-1整合酶的... 详细信息

Sp100是核颗粒ND10的组成蛋白,在哺乳动物细胞中广泛存在.Sp100参与多种细胞生理病理过程,如转录调控、细胞内抗病毒免疫等.利用酵母双杂交系统,我们发现了Sp100的互作蛋白HIV-1整合酶,免疫共沉淀实验进一步证实了Sp100与HIV-1整合酶的互作,细胞内荧光共定位实验也证实了二者在细胞内部分共定位.此外,突变体实验表明,Sp100的C端300～480氨基酸和HIV-1的催化结构域是两个蛋白质的互作区域.利用siRNA降低细胞内Sp100的表达量,可以增加HIV-1整合酶介导的病毒的整合,反之,细胞内过表达Sp100则会降低HIV-1整合酶介导的病毒的整合.这是首次发现Sp100可以和HIV-1整合酶发生相互作用,并进而抑制病毒的整合.我们发现了Sp100作为HIV-1整合酶互作蛋白的新功能,并扩展了细胞防御病毒感染的相关研究.

关键词： Sp100 HIV-1整合酶慢病毒整合

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循环逆转录反应方法及应用条件研究

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生物化学与生物物理进展 2001年第4期28卷 560-562页

作者：陈燃金詟伍迪唐榕毛裕民复旦大学生命科学学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433

建立了循环逆转录反应方法 (repeatedreversetranscriptionreaction ,RRTR) .其原理是通过控制高温变性低温退火延伸的循环过程 ,反复利用起始RNA模板进行逆转录反应 .RNA杂交的结果证明在RRTR过程中 ,RNA模板是保持稳定的 ;点杂交结... 详细信息

建立了循环逆转录反应方法 (repeatedreversetranscriptionreaction ,RRTR) .其原理是通过控制高温变性低温退火延伸的循环过程 ,反复利用起始RNA模板进行逆转录反应 .RNA杂交的结果证明在RRTR过程中 ,RNA模板是保持稳定的 ;点杂交结果表明cDNA产物量得到了增加 ;定量PCR的结果表明RRTR是cDNA线性增长过程 .结果提示 ,RRTR可有效地提高RNA检测灵敏度。

关键词：循环逆转录反应 RNA 定量分析应用

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点突变Pro229Ser和Glu243Gly对耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶性质的影响

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Acta Genetica Sinica 2001年第3期28卷 278-284页

作者：姜涛季朝能盛小禹毛裕民复旦大学生命科学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433

采用ＰＣＲ随机诱变方法，研究氨基酸置换对耐热邻苯二酚２，３－双加氧酶性质的影响。比较分析了突变体Ｐｒｏ２２９Ｓｅｒ和Ｇｌｕ２４３Ｇｌｙ与野生型酶的酶学性质。结果显示点突变Ｐｒｏ２２９→Ｓｅｒ或Ｇｌｕ２４３→Ｇｌｙ并... 详细信息

采用ＰＣＲ随机诱变方法，研究氨基酸置换对耐热邻苯二酚２，３－双加氧酶性质的影响。比较分析了突变体Ｐｒｏ２２９Ｓｅｒ和Ｇｌｕ２４３Ｇｌｙ与野生型酶的酶学性质。结果显示点突变Ｐｒｏ２２９→Ｓｅｒ或Ｇｌｕ２４３→Ｇｌｙ并未改变酶的最适反应温度（均为６０℃）；突变体Ｐｒｏ２２９Ｓｅｒ（Ｋｃａｔ／Ｋｍ＝４．８９ ± ０．０１ × １０６ｍｏｌ－１ｓ－１）以及突变体Ｇｌｕ２４３Ｇｌｙ（Ｋｃａｔ／Ｋｍ＝５．８８±０．０１× １０６ｍｏｌ－１ｓ－１）的催化能力与野生型酶（Ｋｃａｔ／Ｋｍ＝６．９７±０．０１× １０６ｍｏｌ－１ｓ－１）相比有所下降；点突变Ｐｒｏ２２９→Ｓｅｒ大幅度降低了酶的热稳定性（△Ｔｍ≈ １０．２℃），而点突变Ｇｌｕ２４３－Ｇｌｙ对酶的热稳定性影响较小（△Ｔｍ≈１．５℃）。推测Ｐｒｏ２２９对耐热邻苯二酚２，３－双加氧酶的热稳定性有重要贡献。

关键词：随机诱变热稳定性耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶蛋白质

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人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因第3内含子的克隆和分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第4期32卷 359-363页

作者： SAID A.Saleh,孙建龙,陈昭,黄建生,张伯生,任大明复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室!上海200433 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验

从端粒酶活性呈阳性的永生细胞株人肺腺癌细胞SPC A 1中分离了总RNA ,以此为模板 ,结合RT PCR技术和长模板PCR技术 ,用hTERT基因特异性引物扩增到一长约 2 .2kb的cDNA片段。将该片段纯化后克隆到通用测序载体T easyvector上得到重组质... 详细信息

从端粒酶活性呈阳性的永生细胞株人肺腺癌细胞SPC A 1中分离了总RNA ,以此为模板 ,结合RT PCR技术和长模板PCR技术 ,用hTERT基因特异性引物扩增到一长约 2 .2kb的cDNA片段。将该片段纯化后克隆到通用测序载体T easyvector上得到重组质粒。用测序引物SP6和T7对该片段进行部分双向测序。经序列分析和同源比较推测该片段包含了hTERT基因的第 3内含子。该结果提示了RT PCR技术和长模板PCR技术用于真核生物基因内含子克隆的可行性。进一步的分析表明 ,该片段在不同细胞的RT PCR产物中的产量不同 ,提示hTERT基因前体mRNA中的第 3内含子可能在不同细胞中有不同的剪接效率。

关键词： hTERT RTPCR 内含子

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耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶突变型Pro229Ser的表达、纯化和初步晶体学分析(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第5期33卷 569-572页

作者：姜涛季朝能盛小禹毛裕民复旦大学生命科学学院遗传学研究所、遗传工程国家重点实验室!上海200433

表达和纯化了耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的突变型Pro2 2 9Ser。酶学性质分析表明该突变型的热稳定性低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶 ,相应于 5 0 %酶活性的温度下降了 10 .2℃ ,其动力学参数kcat/Km 值 (4 .89× 10 6mol-1&... 详细信息

表达和纯化了耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的突变型Pro2 2 9Ser。酶学性质分析表明该突变型的热稳定性低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶 ,相应于 5 0 %酶活性的温度下降了 10 .2℃ ,其动力学参数kcat/Km 值 (4 .89× 10 6mol-1·s-1)略低于野生型耐热邻苯二酚 2 ,3 双加氧酶的kcat/Km 值 (6 .97× 10 6mol-1·s-1)。以PEG40 0为沉淀剂 ,采用气相悬滴扩散法在4℃条件下培养出Pro2 2 9Ser的蛋白质晶体 ,并收集和分析了该晶体的X射线衍射数据 ,衍射分辨率达 0 .2 4nm。Pro2 2 9Ser晶体的空间群属于I2 2 2 正交晶系 ,晶胞参数分别为a =7.0 5 9nm ,b =7.415nm ,c =13.311nm。推测该晶体每个不对称单位中含有两个Pro2 2 9Ser分子 ,其Matthews参数 (Vm)为 2 .49× 10 -3 nm3·D-1,溶剂含量为 5 1%。Pro2 2 9Ser晶体结构的解析工作正在进行之中

关键词：耐热酶 X射线衍射分析热稳定性耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶

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酵母模式生物研究表观遗传调控基因组稳定性的进展

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遗传 2010年第8期32卷 799-807页

作者：冯碧薇陈建强雷秉坤潘贤吕红复旦大学生命科学学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433

基因组的遗传稳定性是维持正常的细胞复制、增殖和分化的关键。外源因素和内源因素造成的DNA损伤及其修复失败,是各种遗传疾病发生的根本原因。表观遗传调控(包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA)在DNA损伤修复和细胞周期调控方面发... 详细信息

基因组的遗传稳定性是维持正常的细胞复制、增殖和分化的关键。外源因素和内源因素造成的DNA损伤及其修复失败,是各种遗传疾病发生的根本原因。表观遗传调控(包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA)在DNA损伤修复和细胞周期调控方面发挥着重要的作用,也是维持基因组稳定性的基础。酵母作为单细胞真核生物,是最早开展表观遗传学研究的物种之一,特别是在DNA损伤修复和异染色质形成等方面的研究,为揭示遗传稳定性的本质提供了理论依据。国际上前期以酵母为模式生物研究表观遗传学的报道主要集中于组蛋白修饰领域;近期利用裂殖酵母作为模式生物研究RNAi指导的组蛋白修饰也有了一定的进展。文章以酵母作为模式生物,论述了表观遗传修饰在维持基因组遗传稳定性中的研究进展、作用机制和今后的发展趋势。

关键词：酵母表观遗传调控基因组稳定性组蛋白修饰 RNAi

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雄激素受体(AR)靶miRNA转录过程中转录复合体的形成初探

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复旦学报（医学版） 2014年第3期41卷 291-297,303页

作者：张聪哲吴海李瑶复旦大学生命科学学院遗传所-遗传工程国家重点实验室上海200433

目的探讨雄激素受体(androgen receptor,AR)调控的靶miRNA在转录过程中受到AR以及一系列蛋白辅助因子形成的转录复合体影响的过程。方法通过染色质免疫沉淀(ChIP)和实时荧光定量PCR(qPCR)方法,用相应辅助蛋白因子的抗体研究蛋白质和DNA... 详细信息

目的探讨雄激素受体(androgen receptor,AR)调控的靶miRNA在转录过程中受到AR以及一系列蛋白辅助因子形成的转录复合体影响的过程。方法通过染色质免疫沉淀(ChIP)和实时荧光定量PCR(qPCR)方法,用相应辅助蛋白因子的抗体研究蛋白质和DNA的相互作用,qPCR研究蛋白质和DNA结合的增强或者减弱。通过Western blot实验在不同细胞系中初步研究8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)和前列腺癌恶化的相关性。结果在LNCaP前列腺癌细胞系中,进行双氢睾酮(DHT)刺激后,在AR靶miRNA的雄激素受体调控元件(androgen response element,ARE)位置发现了赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1),OGG1,脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(Apel).RNA聚合酶Ⅱ及拓扑异构酶Ⅱ等辅助蛋白因子结合量上升。通过AR和LSD1的siRNA干扰实验,证明是由AR招募了LSD1,LSD1进而招募其余辅助蛋白因子。结论这些转录因子AR以及LSD1、OGG1、Apel、RNA聚合醇Ⅱ和拓扑异物酶Ⅱ等一系列蛋白因子形成的转录复合物,促进了AR调控的靶miRNA转录的发生,且该转录复合物的形成由AR的招募作用发起。

关键词：前列腺癌雄激素受体(AR) miRNA 转录复合物

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遗传检测综述

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生物工程学报 2006年第2期22卷 338-343页

作者：谢毅吴茂青复旦大学生命科学学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433

目前,遗传检测正在更多的国家、更广泛的范围内被采用。然而,在中国人们还不大熟悉遗传检测的原理、类型、技术、对社会的益处以及国内或国际是如何对它进行管理的。随着遗传检测的广泛使用,正确的监督显得相当必要。对近年来遗传检测... 详细信息

目前,遗传检测正在更多的国家、更广泛的范围内被采用。然而,在中国人们还不大熟悉遗传检测的原理、类型、技术、对社会的益处以及国内或国际是如何对它进行管理的。随着遗传检测的广泛使用,正确的监督显得相当必要。对近年来遗传检测所取得的进展进行了粗略的回顾,这将帮助我们对人类遗传学和分子医学革命的新时代有更多的了解。

关键词：遗传检测药物遗传学单核苷酸多态性(SNP) 遗传咨询

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携带人内皮一氧化氮合酶基因的AAV重组表达载体的构建(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第7期24卷 15-18+102页

作者：贺晨霞缪朝玉姚纪花陈浩明卢大儒苏定冯薛京伦复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海 200433 中国第二军医大学基础部药理学教研室

目的:构建一个新型的携带有人内皮一氧化氮合酶(eNOS)cDNA的质粒载体并研究其体外表达,以用于基因治疗。方法:eNOS cDNA插入到腺相关病毒质粒pSNAV-1的EcoR Ⅰ位点。该质粒的启动子为CMV启动子,并携带有腺相关病毒的末端重复序列。构建... 详细信息

目的:构建一个新型的携带有人内皮一氧化氮合酶(eNOS)cDNA的质粒载体并研究其体外表达,以用于基因治疗。方法:eNOS cDNA插入到腺相关病毒质粒pSNAV-1的EcoR Ⅰ位点。该质粒的启动子为CMV启动子,并携带有腺相关病毒的末端重复序列。构建好的质粒转染到两种哺乳动物细胞BHK和C2C12细胞中,通过PCR和RT-PCR分别检测eNOS cDNA和mRNA。结果:限制性内切酶分析证明,eNOS cDNA以正确的方向插入到pSNAV-1质粒中。PCR检测表明pSNAV-eNOS被转入BHK和C2C12细胞中。RT-PCR检测表明转染有pSNAV-eNOS的细胞可表达eNOS mRNA。结论:成功构建的pSNAV-eNOS可在体外培养的哺乳动物细胞中表达人eNOS mRNA。

关键词：一氧化氮一氧化氮合酶质粒基因治疗腺相关病毒

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