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第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议

作者：朱剑虹谢嵘陈露萍沈亦雯毛颖周良辅复旦大学附属华山医院神经外科复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心复旦大学附属华山医院神经外科复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心复旦大学附属华山医院神经外科复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心复旦大学附属华山医院神经外科复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心复旦大学附属华山医院神经外科复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心复旦大学附属华山医院神经外科复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心

＜正＞Objective: To better understand the cell origin and pathogenetic step of central nervous system he-mangioblastomas （CNS HB）. Methods: 14 VHL-associ-ated CNS HB, 21 none VHL-associated CNS HB and 15 normal brain tissues were collected and all the specimens were sectioned and subjected to routine histology and im-munohistochemistry analysis. Avidin-biotin-complex immunoperoxidase was used to evaluate the expression of CD31, CD34, CD117, CD133, Nestin, erythropoietin （EPO） in CNS HB. Another three mixed samples collected from 5 VHL-associated CNS HB, 7 none VHL-asociated CNS HB and 7 normal brain tissues were analyzed by using Oligo cDNA microarray to screen the stem cells markers, of which the gene expression levels had distinct differences among VHL associated HB, none VHL associated HB and normal brain tissues. RT-PCR and Western blot was used to confirm the validity of the results. Results: After inunu-nochemistry analysis, all CNS HB pathological sections were observed to express stem cells markers including CD31, CD34, CD117, CD133, Nestin. The results of cDNA microarray showed higher gene expression levels of several important stem cells markers including ABCG2, AXIN1, BMP2, CD3, CD4, etc of CNS HB than those of normal brain tissues and no expression difference of the markers was found between VHL and none VHL-associated HB. Both immunochemistry and cDNA microarray suggested that EPO was highly expressed in CNS HB but the expression level of VHL-associated HB was higher than that of none VHL-associated HB. Conclusions: The study suggests that CNS HB can express markers of mes- enchymal stem cells and may have an origin of mesenchy-mal stem cells. The expression of EPO may be a critical pathogenetic step as a cell proliferation stimulus but has different contributions in VHL and none VHL-associated HB.

关键词：血管母细胞瘤干细胞发病学 VHL EPO

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中枢神经系统血管母细胞瘤蛋白质组学研究(英文)

中枢神经系统血管母细胞瘤蛋白质组学研究(英文)

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第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议

作者：谢嵘朱剑虹复旦大学附属华山医院神经外科复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心复旦大学附属华山医院神经外科复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心

Obejctive: To establish detailed protein expression maps of central nervous system bemangioblastomas (CNS HB) and identify discrepant proteins between HB and normal brain tissues by using proteomics analysis so as to better understand the histological origin of CNS ***: Ten individual brain regions with five HB tissues (HB group) and five normal cerebellar tissues (control group) were *** proteins were extracted from the samples and process of two dimensional gel *** excision,in- gel digestion, MALDI - TOF MS and bioinformatics analysis were carried out. Results: After 2 - DE, high - resolution maps containing about 600 protein spots of HB and normal brain tissues were *** 2 - DE maps show a satisfactory homology between HB and normal brain tissues. By using the ImageMaster 2D software, 115 discrepant protein spots between HB and normal brain tissues could be selected and 87 of them were successfully identified by MALDI - TOF MS. Among them,46 proteins expressions were up - regulated while 41 were down - regulated. According to their functional role,the identified proteins could be divided into several groups including transport,protein metabolism and folding,glycolysis and stem cell proteins,et *** results of immunohistochemistry staining of EPO, Vimentin and 14-3-3 proteins could authenticate the validity of the proteomics analysis in this study. Conclusions: The process of CNS HB occurring is an intricate, multicomponent, multifactorial and multi-step process which is mediated by a variety of *** HB as a kind of tumors may come from normal brain mesenchymal *** proteins such as EPO、Vimentin and 14-3-3 may play an important role in the occurring of HB.

关键词： CNS hemangioblastomas,stem cells,pathogenetics,VHL,EPO

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褪黑素对经H2O2刺激大鼠肝星状细胞激活状态的抑制作用

褪黑素对经H2O2刺激大鼠肝星状细胞激活状态的抑制作用

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中华医学会病理学分会2006年学术年会

作者：顾靖庄丽黄光存复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院病理学系复旦大学上海医学院病理学系

目的研究褪黑素对经H2O2刺激的大鼠肝星状细胞(HSCs)激活状态的影响及其作用机制。方法分离、培养正常大鼠HSCs。观察1μM褪黑素预处理对经100μM H2O2刺激的 HSCs Ⅰ型胶原合成的影响,并对细胞培养上清中的TGF-β1和细胞内C／EBP-α基... 详细信息

目的研究褪黑素对经H2O2刺激的大鼠肝星状细胞(HSCs)激活状态的影响及其作用机制。方法分离、培养正常大鼠HSCs。观察1μM褪黑素预处理对经100μM H2O2刺激的 HSCs Ⅰ型胶原合成的影响,并对细胞培养上清中的TGF-β1和细胞内C／EBP-α基因的表达情况进行检测。结果预先给予褪黑素不仅可以抑制 H2O2促进HSCs合成Ⅰ型胶原的作用,还可以降低HSCs自分泌TGF-β1,并导致细胞内C／EBP-α基因表达水平(mRNA、蛋白)的升高。结论褪黑素可以通过调节HSCs自分泌TGF-β1以及 C／EBP-α基因的表达而抑制Ⅰ型胶原的合成。

关键词： C/EBP-α H2O2 TGF-β1 肝星状细胞褪黑素

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迷走神经运动背核内心迷走神经元的GABA能突触前支配受谷氨酸能紧张性调控(英文)

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生理学报 2005年第6期57卷 761-765页

作者：王继江陈咏华李克勇孙凤艳复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海 200032 复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

谷氨酸能和GABA能支配是心迷走节前神经元(cardiac vagal neuron,CVN)的主要兴奋性和抑制性突触传入。在CVN 的活动调节中,这两种支配是否有相互作用、以及如何相互作用目前尚不清楚。本研究用神经元逆行荧光染料标记法和电压膜片钳方... 详细信息

谷氨酸能和GABA能支配是心迷走节前神经元(cardiac vagal neuron,CVN)的主要兴奋性和抑制性突触传入。在CVN 的活动调节中,这两种支配是否有相互作用、以及如何相互作用目前尚不清楚。本研究用神经元逆行荧光染料标记法和电压膜片钳方法证明,谷氨酸NMDA型和非NMDA型受体拈抗剂AP5和CNQX在全脑片应用条件下,对疑核(nucleus ambiguus, NA)内CVN的GABA能突触前活动无明显影响,而对迷走神经运动背核(dorsal motor nucleus of the vagus,DMNX)内CVN的 GABA能突触前活动有显著的抑制作用。这些观察结果提示:支配迷走神经运动背核内CVN的GABA能神经元可能接受紧张性谷氨酸能支配,而支配疑核内CVN的GABA能神经元则没有这种紧张性谷氨酸能支配。疑核内和迷走神经运动背核内 CVN的这种调节差异,是两个核团的CVN在心率和心功能调节中功能分工的可能机制之一。

关键词：疑核心脏迷走神经节前神经突触

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共聚焦激光扫描显微镜技术在研究大鼠海马神经元胞内钙超载中的应用

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复旦学报（医学版） 2005年第1期32卷 98-100,104,F003页

作者：黄娅林赵鹏程介士复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海200032

目的观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时扫描,动态显示海马神经元二维图像... 详细信息

目的观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时扫描,动态显示海马神经元二维图像,以计算机相应软件对胞内钙的荧光强度变化进行分析统计。结果在 0.5 mmol／L谷氨酸作用下,胞内钙荧光强度迅速升高(P<0.001);0.5 mmol／L谷氨酸与3 mmol／L牛磺酸共同作用于海马神经元时,胞内钙荧光强度明显降低(P<0.001);灌流液中去除牛磺酸后,胞内钙荧光强度上升(P <0.001)。结论抑制性氨基酸牛磺酸可抑制由兴奋性氨基酸谷氨酸所致神经元的胞内钙超载;CLSM以其独特的优势,在高清晰度地显示海马神经元形态的同时,也可动态地观察活细胞在不同环境下胞内钙的快速变化以及定量分析。该技术在动态观察和二维图像的高分辨率上比传统测钙方法有更大的优越性。

关键词：钙超载海马神经元共聚焦激光扫描显微镜牛磺酸谷氨酸 CLSM 大鼠海马荧光强度活细胞 Fluo-3/AM

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心脏副交感节前神经元的研究进展

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生理科学进展 2005年第1期36卷 45-48页

作者：陈咏华王继江复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室上海200032

近年来 ,应用逆行荧光标记技术和膜片钳技术 ,对心脏副交感节前神经元 (PCPNs)的研究取得很大进展。PCPNs不具有自主发放特性 ,其活动完全依赖于其突触前支配。PCPNs主要受胆碱能、兴奋性氨基酸能、GABA能及甘氨酸能支配 ;这些递质传递... 详细信息

近年来 ,应用逆行荧光标记技术和膜片钳技术 ,对心脏副交感节前神经元 (PCPNs)的研究取得很大进展。PCPNs不具有自主发放特性 ,其活动完全依赖于其突触前支配。PCPNs主要受胆碱能、兴奋性氨基酸能、GABA能及甘氨酸能支配 ;这些递质传递之间除相互作用外 ,还受多种神经肽及药物的影响。胆碱能递质对GABA能及甘氨酸能突触前支配的易化作用 ,参与生理性呼吸性窦性心律不齐的产生。

关键词：心脏副交感神经节前神经元神经递质

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神经干细胞和人脑再生医学

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中华医学杂志 2005年第36期85卷 2527-2529页

作者：朱剑虹复旦大学附属华山医院神经外科医学神经生物学国家重点实验室上海市神经外科临床医学中心 200040

近年来研究发现,神经再生是成年哺乳动物大脑中的生理现象.由成年神经干细胞生成的神经元不论是体外培养还是在体内都具有相应的电生理功能,并能够在损伤后进行神经再生修复[1-3].而且基因修饰干细胞还可用于神经系统疾病的基因治疗,表... 详细信息

近年来研究发现,神经再生是成年哺乳动物大脑中的生理现象.由成年神经干细胞生成的神经元不论是体外培养还是在体内都具有相应的电生理功能,并能够在损伤后进行神经再生修复[1-3].而且基因修饰干细胞还可用于神经系统疾病的基因治疗,表达外源性的神经递质、神经营养因子及代谢性酶,为许多难治性神经系统疾病提供了新的治疗途径。

关键词：神经干细胞再生医学神经再生修复神经系统疾病人脑神经营养因子基因治疗电生理功能研究发现

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神经甾体硫化孕烯醇酮通过激活α1肾上腺素能受体和σ1受体增强前额叶皮层内侧区突触前谷氨酸释放

神经甾体硫化孕烯醇酮通过激活α1肾上腺素能受体和σ1受体增强前...

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：董毅傅迎美郑平复旦大学医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学医学院医学神经生物学国家重点实验室

＜正＞硫化孕烯醇酮（PREGS）是神经甾体家族中含量最丰富、活性最强的一员。它有可能成为脑内新的重要信号分子。已有研究表明PREGS可通过加强GABAA受体的作用而增强抑制性突触传递, 但目前对PREGS促进突触前兴奋性递质谷氨酸释放作用... 详细信息

＜正＞硫化孕烯醇酮（PREGS）是神经甾体家族中含量最丰富、活性最强的一员。它有可能成为脑内新的重要信号分子。已有研究表明PREGS可通过加强GABAA受体的作用而增强抑制性突触传递, 但目前对PREGS促进突触前兴奋性递质谷氨酸释放作用的研究还仪限于海马,尚不清楚PREGS 的这类作用是否有脑区差异。本实验采用全细胞膜片钳技术,通过记录前额叶皮层内侧区□-□层锥体细胞微小兴奋性突触后电流（mEPSCs）研究了PREGS对前额叶皮层内侧区兴奋性突触传递的作用和对海马和纹状体神经元的作用,以及PREGS的药理学特性及其作用机制。结果表明PREGS

关键词：神经甾体硫化孕烯醇酮PREGS 前额叶皮层海马纹状体兴奋性突触传递全细胞膜片钳 α1肾上腺素能受体

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视网膜下移植睫状神经营养因子编码基因修饰的细胞保护SD大鼠视神经横断伤后视网膜节细胞变性

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中华眼科杂志 2005年第2期41卷 119-122页

作者：李惠明陆世铎夏欣徐萍王丰黄倩上海交通大学附属第一人民医院中心实验室 200080 复旦大学医学院神经生物学国家重点实验室上海交通大学附属第一人民医院眼科 200080

目的探讨移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的细胞对SD大鼠视神经横断伤后视网膜节细胞的保护作用。方法通过脂质体将CNTF表达质粒转移至人胚肺成纤维细胞,建立稳定、高水平表达CNTF的细胞株。采用双侧背外侧膝状体及上丘核团注射3%荧光... 详细信息

目的探讨移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的细胞对SD大鼠视神经横断伤后视网膜节细胞的保护作用。方法通过脂质体将CNTF表达质粒转移至人胚肺成纤维细胞,建立稳定、高水平表达CNTF的细胞株。采用双侧背外侧膝状体及上丘核团注射3%荧光金逆行标记视网膜节细胞。将标记后的大鼠分为两组,于标记后7d手术切断眶内段视神经其中一组左眼不做手术作为正常对照组,右眼切断视神经作为手术对照组;另一组双眼均手术切断视神经,左眼注射PBS作为治疗对照组,右眼视网膜下移植表达CNTF的细胞作为实验组。术后5、14、17、21及28d取出眼球,铺片后荧光显微镜观察并计数视网膜内存活的节细胞。结果手术切断眶内段视神经后2周,视网膜内节细胞数减少6744%,视网膜下移植表达CNTF的细胞后第5、17、21d视网膜内存活的节细胞数明显多于治疗对照组(P<005)。结论视网膜下移植高水平表达CNTF的细胞对视网膜节细胞有保护作用。

关键词：睫状神经营养因子视网膜神经节细胞视神经损伤视网膜下移植表达CNTF

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褪黑素对MPTP和MPP+引起的线粒体DNA损伤的保护作用及其机制

褪黑素对MPTP和MPP+引起的线粒体DNA损伤的保护作用及其机制

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：沈迪晗陈留记黄娅琳孙凤艳复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室

＜正＞目的:本实验主要研究了褪黑素对MPTP/MPP+引起的线粒体DNA氧化损伤的保护作用及其机制。结果:小鼠皮下注射MPTP（24 mg/kg）可以快速引起大脑黑质致密部神经元胞质内DNA 氧化损伤标志物8-羟基鸟苷（8-oxoG）含量增加。腹腔注射褪... 详细信息

＜正＞目的:本实验主要研究了褪黑素对MPTP/MPP+引起的线粒体DNA氧化损伤的保护作用及其机制。结果:小鼠皮下注射MPTP（24 mg/kg）可以快速引起大脑黑质致密部神经元胞质内DNA 氧化损伤标志物8-羟基鸟苷（8-oxoG）含量增加。腹腔注射褪黑素（7.5,15,or 30 mg/kg）可以剂量依赖性地降低MPTP引起的DNA氧化损伤。在人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株上,MPP+ （1 mmol/L）增加8-oxoG含量,并呈时间依赖地诱导增加细胞内不同区域的DNA氧化损伤。MPP+ 处理1h后损伤的DNA主要位于线粒体,3h后则主要位于细胞核,提示线粒体DNA更容易受到氧化损伤。MPP+时间依赖性地增加线粒体氧自由基的累积（1-24 h）,并逐渐降低线粒体膜电位（18-36 h）。在MPP+处理72h后有约49%的细胞死亡。如用褪黑素预孵育,则可以减少MPP+引

关键词：褪黑素 MPTP DNA氧化损伤线粒体膜电位氧自由基

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