检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2021年第10期16卷 1158-1162页

作者：乾莲陈红玲孟媛媛陈晓婷孙士正武有聪大理大学基础医学院病原生物学综合实验室云南大理671000 大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室

目的对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础。方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃... 详细信息

目的对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础。方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达。重组蛋白His;-VraR经Western blot鉴定后采用Ni-NTA柱纯化。采用DNAMAN、SMART、Megalign等软件对VraSR系统进行生物信息学分析。结果成功构建重组表达质粒pET28a-vraR,在22℃、0.5 mmol/L IPTG诱导12 h高效表达重组蛋白His;-VraR。分析重组His;-VraR序列,与金黄色葡萄球菌VraS/VraR核苷酸同源性皆为82%,氨基酸同源性分别为92%/94%,氨基酸组成差异主要存在VraS的胞外区和VraR的CheY结构域。结论成功表达并纯化表皮葡萄球菌VraR蛋白,生物信息学分析表皮葡萄球菌VraSR的功能,可能不同于金黄色葡萄球菌。

关键词：表皮葡萄球菌 VraSR 生物信息原核表达

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大理地区结核分枝杆菌MIRU-VNTR位点的多态性分析

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中国病原生物学杂志 2014年第4期9卷 312-315页

作者：董毅吴利先大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的了解大理地区结核分枝杆菌基因组中的数目可变串联重复序列(variable number tandem repeat,VNTR)即MIRU(mycobacterium interspersed repetitive unit)基因多态性,探讨MIRU-VNTR位点多态性的应用价值。方法采用PCR和琼脂糖凝胶电泳检测大理地区临床分离的60株结核分枝杆菌7个VNTR位点,采用MIRU-VNTR技术进行分型,利用Hunter-Gaston指数(HGI)对各MIRU进行分辨力评价,并应用Quantity one软件和BioNumerics6.6软件进行数字化和聚类分析。结果 60株结核分枝杆菌分为5个基因群(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ群)52个基因型。Ⅰ群占56.77%,含有29个基因型;Ⅱ群占25.00%,含有13个基因型;Ⅲ群占8.33%,含有5个基因型;Ⅳ群占6.67%,含有3个基因型;Ⅴ群占3.33%,含有2个基因型。7位点组合总分辨力为0.900,最高ETR-E位点0.735,最低ETR-C位点0.455。结论大理地区分离株结核分枝杆菌存在基因多态性,7位点MIRU-VNTR分型简便快速,分辨力高,适合用于大理地区结核分枝杆菌的基因分型检测。

关键词：结核分枝杆菌基因分型多位点可变串联重复序列多态性 Hunter-Gaston指数

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结核分枝杆菌特异性蛋白抗原研究进展及其应用策略探讨

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中国病原生物学杂志 2014年第2期9卷 180-182,187页

作者：聂恒吴利先大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。本文概述了38ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16ku蛋... 详细信息

结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。本文概述了38ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16ku蛋白、MTB81、MTB84和U1蛋白等9种结核分枝杆菌重要抗原的研究进展,并对其应用策略进行了探讨。

关键词：结核分枝杆菌蛋白抗原诊断综述

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乙肝病毒Pre-S2基因的研究新进展

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中国病原生物学杂志 2013年第5期8卷 465-468页

作者：张义申元英大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

Pre-S2作为HBV表面外膜蛋白重要的蛋白之一,在其基因表达、HBV感染复制、免疫逃逸等方面起重要作用,且与慢性肝炎、重型肝炎及HCC的发病机制密切相关。其免疫学研究尤其是Pre-S2核酸疫苗、单克隆抗体的制备为HBV预防感染提供了有力依据... 详细信息

Pre-S2作为HBV表面外膜蛋白重要的蛋白之一,在其基因表达、HBV感染复制、免疫逃逸等方面起重要作用,且与慢性肝炎、重型肝炎及HCC的发病机制密切相关。其免疫学研究尤其是Pre-S2核酸疫苗、单克隆抗体的制备为HBV预防感染提供了有力依据。本文对上述几个方面Pre-S2的研究进展进行了概述。

关键词：乙肝病毒 Pre-S2 综述

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合并HIV感染肺结核患者Mtb的MLVA与PFGE法基因分型对比研究

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中国病原生物学杂志 2015年第12期10卷 1082-1085,1096页

作者：王旭东聂恒吴利先大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的对比PFGE和MLVA两种不同分型方法用于大理地区合并HIV感染肺结核患者Mtb临床分离株基因分型的优劣。方法选取大理地区27株合并HIV感染肺结核患者Mtb临床分离株,采用PFGE和MLVA两种方法进行基因分型,应用BioNumerics(6.6)软件进行聚... 详细信息

目的对比PFGE和MLVA两种不同分型方法用于大理地区合并HIV感染肺结核患者Mtb临床分离株基因分型的优劣。方法选取大理地区27株合并HIV感染肺结核患者Mtb临床分离株,采用PFGE和MLVA两种方法进行基因分型,应用BioNumerics(6.6)软件进行聚类分析。结果 PFGE法将27株Mtb分为5个基因群,其中主要优势基因群为A群(15株)包括H37Rv,D=0.698;MLVA法将27株Mtb分为4个基因群,其中主要优势基因群为Ⅰ群(8株,包括H37Rv减毒株)和Ⅱ群(9株)。D=0.999;对比分析显示MLVA法分辨力高于PFGE法。结论 MLVA法与PFGE法相比更适合于大理地区合并HIV感染肺结核患者Mtb的基因分型。

关键词：结核分枝杆菌基因分型 MLVA PFGE 双重感染

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鼠疫菌纤溶酶原激活因子的分离纯化

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中国地方病学杂志 2009年第4期28卷 365-368页

作者：石丽媛于国林白丽杨光璨董珊珊云南省地方病防治所中心实验室大理671000 大理学院基础医学院微生物学及免疫学教研室

目的建立从人工培养的鼠疫菌中分离和纯化纤溶酶原激活因子（Plasminogen activator，Pla）的方法。方法分别用超声破碎、尿素提取与硫酸铵盐析相结合的方法（简称超声法、尿素法）提取Pla，并分别用离子交换、凝胶过滤两步层析相结合... 详细信息

目的建立从人工培养的鼠疫菌中分离和纯化纤溶酶原激活因子（Plasminogen activator，Pla）的方法。方法分别用超声破碎、尿素提取与硫酸铵盐析相结合的方法（简称超声法、尿素法）提取Pla，并分别用离子交换、凝胶过滤两步层析相结合的高效液相色谱和制备电泳纯化Pla，对提取、纯化的Pla进行纤溶酶原激活剂活性检测。结果鼠疫菌超声破碎上清50％～60％饱和硫酸铵沉淀和尿素浸渍菌粉上清0～10％饱和硫酸铵沉淀，均获得了3条蛋白带[相对分子质量（Mr）约31×10^3、35×10^3、37×10^3]。纤溶酶原激活剂活性检测两种方法获得蛋白的溶圈直径分别为6．5、7．2mm。用高效液相色谱纯化的Pla主要由Mr约31×10^3、35×10^3、37×10^3的3条蛋白带组成，纤溶酶原激活剂活性检测溶圈直径为5．0mm。制备电泳纯化的Pla主要由Mr约31×10^3、35×10^3、37×10^3的3条蛋白带组成，条带所在位置还有其他一些低浓度蛋白存在，纤溶酶原激活剂活性检测无溶圈出现。结论超声法和尿素法可以提取到Pla，后者经高效液相色谱和制备电泳可以达到基本纯化。

关键词：耶尔森菌鼠疫纤溶酶原激活剂分离和提纯

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人类免疫缺陷病毒与乙型肝炎病毒双重感染的研究进展

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新医学 2008年第6期39卷 420-420,F0003页

作者：沈茹申元英云南大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室 671000

HIV与HBV双重感染会增加患者的病死率,这主要与2种病毒双重感染加重了患者的肝损害有关。其相互作用的致病机制未明,该文阐述了2种病毒双重感染后导致机体损伤的可能机制和治疗原则,为该类患者的临床治疗提供参考。

关键词：人类免疫缺陷病毒获得性免疫缺陷综合征乙型肝炎病毒感染

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巢氏PCR-RFLP和多重PCR检测HBV基因型、基因亚型方法的比较

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军医进修学院学报 2008年第4期29卷 280-282页

作者：张烜榕李威申元英任来峰李强沈茹赵海平大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000 山西大学汾阳医学院微生物学与免疫学教研室山西汾阳032200

目的:建立HBV基因型和亚型的分型方法,并分析相关的两种方法特异性和敏感性。方法:采用型特异性引物的巢氏PCR-RFLP和六种主要的HBV型特异性引物和亚型特异性引物的多重PCR方法,分别检测了100例患者标本。结果:两法不一致率为50%(27/54... 详细信息

目的:建立HBV基因型和亚型的分型方法,并分析相关的两种方法特异性和敏感性。方法:采用型特异性引物的巢氏PCR-RFLP和六种主要的HBV型特异性引物和亚型特异性引物的多重PCR方法,分别检测了100例患者标本。结果:两法不一致率为50%(27/54)。型特异性引物巢氏PCR-RFLP法检测出B基因型41例(41%),C基因型25例(25%),B+C基因型34例(34%),B j亚型3例(7.3%),Ba亚型为38例(92.7%),Cs亚型为21例(84%),Ce亚型为3例(12%),1例C型未分出亚型(4%)。多重PCR法检出B型18例(33.3%),C型7例(13%),B+C混和型5例(9.3%),B2亚型2例(11%),C1亚型2例(28.5%)。巢氏PCR-RFLP法型检出率100%亚型检出率98.5%,多重PCR法型检出率55.6%,亚型检出率仅为16%,前者高于后者(P<0.05)。结论:巢氏PCR-RFLP鉴定HBV基因型、基因亚型较多重PCR敏感性高,重复性好,但耗时长,费用高。

关键词：聚合酶链反应多态性限制性片段长度肝炎病毒乙型基因型

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大学生口腔念珠菌分离株药物敏感性分析

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中国公共卫生 2010年第2期26卷 137-138页

作者：武有聪陈兆芳郭利军王涛白丽大理学院基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000 云南大理卫生学校病药微教研室

目的探讨在校大学生口腔念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性。方法选取云南省某高校在校学生1 179名,采集其口腔咽拭子,分离疑似念株菌84株。采用微量液基稀释法,测定念珠菌对氟康唑、酮康唑、氟胞嘧啶和两性霉素B等4种常用抗真菌药物的敏... 详细信息

目的探讨在校大学生口腔念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性。方法选取云南省某高校在校学生1 179名,采集其口腔咽拭子,分离疑似念株菌84株。采用微量液基稀释法,测定念珠菌对氟康唑、酮康唑、氟胞嘧啶和两性霉素B等4种常用抗真菌药物的敏感性,以最低抑菌浓度(M IC值)进行判定。结果84株念珠菌对上述4种药物敏感性的几何均数分别为3.175,0.070,0.272和0.43 mg/L;耐药率分别为8.3%,9.5%,7.1%和8.3%;非白色念珠菌对酮康唑和两性霉素B的耐药率均高于白色念珠菌(P<0.05);有3株念株菌对2种或2种以上药物同时耐药。结论在校大学生口腔念珠菌中存在一定程度的耐药株和交叉耐药现象,尤其是非白色念珠菌。

关键词：药物敏感性念珠菌属口腔大学生

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葡萄球菌万古霉素耐药相关双组分系统VraSR研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第2期39卷 150-156页

作者：陈红玲孟媛媛武有聪白丽瞿涤大理大学基础医学院病原生物学综合实验室 671000 大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室 671000 复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室 200032

葡萄球菌万古霉素耐药相关(vancomycin-resistance associated sensor/regulator,VraSR)双组分系统能感应细胞壁的损伤,并将此信号传至胞内,调控下游相关基因的转录,以应对外界环境压力的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌VraSR通过调控... 详细信息

葡萄球菌万古霉素耐药相关(vancomycin-resistance associated sensor/regulator,VraSR)双组分系统能感应细胞壁的损伤,并将此信号传至胞内,调控下游相关基因的转录,以应对外界环境压力的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌VraSR通过调控一系列与肽聚糖合成相关基因的转录引起耐药性增加。表皮葡萄球菌中也存在类似的双组分系统,而且与金黄色葡萄球菌VraSR具有较高同源性,但是目前尚不清楚两者在耐药性及致病性上有什么异同。本文结合课题组研究工作,简要综述葡萄球菌VraSR双组分系统的调控机制。

关键词：双组分系统 VraSR 葡萄球菌

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