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血清miR-17-5p联合HCAR检测对急性肾损伤患者预后的预测价值研究

中国处方药 2024年第12期22卷 174-177页

作者：胡晓彤朱建福齐素华徐州医科大学国家级基础医学实验教学示范中心江苏徐州221004 徐州市九七医院普外科江苏徐州221006 徐州医科大学临床微生物与免疫技术教研室江苏徐州221004

目的研究血清微小核糖核酸(miR)-17-5p、超敏C反应蛋白与白蛋白比值(HCAR)联合检测对急性肾损伤(AKI)患者预后的预测价值。方法纳入2022年3月~2024年3月收治的268例AKI患者进行分析,根据入院治疗28 d后的疾病转归情况将患者分为生存组(n... 详细信息

目的研究血清微小核糖核酸(miR)-17-5p、超敏C反应蛋白与白蛋白比值(HCAR)联合检测对急性肾损伤(AKI)患者预后的预测价值。方法纳入2022年3月~2024年3月收治的268例AKI患者进行分析,根据入院治疗28 d后的疾病转归情况将患者分为生存组(n=226)与死亡组(n=42),比较两组临床相关资料、血清miR-17-5p表达以及HCAR,采用多因素Logistic分析血清miR-17-5p、HCAR与AKI患者预后不良的关系,并以受试者工作特性曲线(ROC)分析血清miR-17-5p、HCAR对AKI患者预后不良的预测效能。结果两组患者血管活性药物使用情况、血清miR-17-5p表达以及HCAR比较,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素回归分析显示,使用血管活性药物,血清miR-17-5p表达上调,HCAR增大均为AKI患者预后不良的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线显示,血清miR-17-5p、HCAR以及二者联合检测AKI患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.725、0.759以及0.830,且联合检测的预测价值最佳(P<0.05)。结论血清miR-17-5p及HCAR异常增加均是AKI患者预后不良的独立危险因素,且二者联合检测对AKI患者预后不良的预测效能较高。

关键词：微小核糖核酸-17-5p 急性肾损伤预后超敏C反应蛋白与白蛋白比值

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一种新型抗体替代品——亲和体的研究进展

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国际生物制品学杂志 2022年第5期45卷 272-276页

作者：杨佳周璐琪(综述) 张丽芳朱珊丽(审校) 温州医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室温州325000

作为抗体的一种新型替代品,亲和体不仅以高亲和力与靶蛋白特异性结合,同时又具备相对分子质量小(~6500)、穿透性强、免疫原性弱和制备过程简单等诸多特性。因此,亲和体在肿瘤靶向治疗、体内成像诊断和生物技术应用等方面具有更突出的优... 详细信息

作为抗体的一种新型替代品,亲和体不仅以高亲和力与靶蛋白特异性结合,同时又具备相对分子质量小(~6500)、穿透性强、免疫原性弱和制备过程简单等诸多特性。因此,亲和体在肿瘤靶向治疗、体内成像诊断和生物技术应用等方面具有更突出的优势和可行性。此文对其特性和应用研究进展做一综述。

关键词：亲和体靶向治疗成像诊断生物技术

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snx8a基因在早期斑马鱼胚胎中空间和时间特异性表达

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贵州医科大学学报 2025年第1期50卷 18-23页

作者：张乙进杨雁竹罗红莫大双舒莉萍江滟贵州医科大学医学检验学院临床微生物与免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室&细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室&贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学实验动物中心贵州贵阳550025 贵州医科大学附属医院临床检验中心微生物免疫科贵州贵阳550004

目的探索snx8a基因在斑马鱼早期胚胎中的表达情况。方法使用Snap Gene 6.0.2软件对由NCBI数据库上拷贝的人类SNX8、斑马鱼Snx8a和Snx8b氨基酸序列进行氨基酸序列比对,利用转化连接、TA克隆等分子生物学方法构建原位杂交探针质粒;通过收... 详细信息

目的探索snx8a基因在斑马鱼早期胚胎中的表达情况。方法使用Snap Gene 6.0.2软件对由NCBI数据库上拷贝的人类SNX8、斑马鱼Snx8a和Snx8b氨基酸序列进行氨基酸序列比对,利用转化连接、TA克隆等分子生物学方法构建原位杂交探针质粒;通过收集不同发育时相的野生斑马鱼胚胎进行全胚胎原位杂交,观察斑马鱼早期胚胎中snx8a的空间表达情况、使用RT-qPCR检测斑马鱼早期发育不同时期snx8a基因的表达情况。结果氨基酸序列比对结果显示斑马鱼Snx8a较Snx8b与人的SNX8同源性更高;对构建的原位杂交探针质粒双酶切鉴定及测序结果显示,构建的探针质粒序列正确、质粒可用;全胚胎原位杂交结果显示,斑马鱼snx8a基因在胚胎一细胞期就开始表达,之后特异表达于斑马鱼头部及尾部造血区;RT-qPCR结果显示,snx8a基因表达逐渐升高,在胚胎12 hpf时达到峰值(P<0.05)。结论斑马鱼snx8a基因为母源性基因,其可能与斑马鱼神经发育和造血发育相关。

关键词：斑马鱼 snx8a基因生物信息学分析全胚胎原位杂交胚胎发育

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肠道病毒71型感染C57BL/6J小鼠原代神经元模型建立

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中国组织化学与细胞化学杂志 2025年第1期34卷 39-45页

作者：王倩云汤仁树刘雪娟方伟朱彬彬张文艳芦宝静安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 合肥市疾病预防控制中心微生物检验科合肥230091 嘉兴市疾病预防控制中心嘉兴314001

目的本研究旨在探讨C57BL/6J小鼠原代神经元的分离培养方法,并建立肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染原代神经元的模型。方法采用新生24 h C57BL/6J小鼠,通过断头取脑,结合物理剪切与胰酶消化的方式分离神经元。通过光学显微镜观... 详细信息

目的本研究旨在探讨C57BL/6J小鼠原代神经元的分离培养方法,并建立肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染原代神经元的模型。方法采用新生24 h C57BL/6J小鼠,通过断头取脑,结合物理剪切与胰酶消化的方式分离神经元。通过光学显微镜观察不同培养时间点神经元的形态变化,并使用免疫荧光法鉴定细胞类型。在EV71感染原代神经元48 h后,观察细胞病变现象。利用共聚焦显微镜,通过免疫荧光法观察VP1蛋白与β-Ⅲtubulin的共定位,从而确认病毒感染情况。此外,采用不同感染时间点收集细胞上清液,检测半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective doses,TCID_(50)),以确定EV71感染原代神经元的增殖动力学。结果第6 d培养的原代神经元在显微镜下能够清晰地观察到细胞胞体及轴突,且神经元形成相互连接的网络结构;EV71感染48 h后,神经元出现典型的细胞病变效应(cytopathic effects,CPE),VP1与β-Ⅲtubulin显示出明显的共标现象。感染过程中,EV71病毒滴度呈现先升高后降低的趋势。结论通过物理剪切与胰酶消化联合方法成功分离并培养了原代神经元,成功建立了EV71感染原代神经元模型。该模型为后续研究EV71致病机制提供了新的平台和研究方法。

关键词：肠道病毒71型原代神经元细胞培养感染模型

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大肠埃希菌血流感染产ESBLs株分子流行机制

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分子诊断与治疗杂志 2024年第3期16卷 573-577页

作者：刘伟阳王燕邱淑妍朱丛杨小兰赵毅广东医科大学基础医学院微生物与免疫学教研室广东东莞523808 惠州市第三人民医院检验科广东惠州516002

目的调查分析大肠埃希菌血流感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株分子流行机制,阐明不同耐药基因介导的耐药情况。方法收集惠州市第三人民医院2019年1月至2022年12月期间血流感染住院患者中分离的ESBLs阳性大肠埃希菌株50例,通过聚合酶... 详细信息

目的调查分析大肠埃希菌血流感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株分子流行机制,阐明不同耐药基因介导的耐药情况。方法收集惠州市第三人民医院2019年1月至2022年12月期间血流感染住院患者中分离的ESBLs阳性大肠埃希菌株50例,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增法检测菌株耐药基因表达情况,并选取部分扩增阳性产物外送测序,分析其基因亚型及对应耐药性。结果 50株ESBLs阳性大肠埃希菌株中有45株菌携带有blaCTX-M基因,占比90.00%(45/50),30株菌携带有blaTEM基因,占60.00%(30/50);CTX-M基因中16株为CTX-M-1亚群,占35.56%(16/45),29株为CTX-M-9亚群,占64.4%(29/45)。未检出blaSHV基因。经测序,CTX-M-1亚群以CTX-M-15为主,CTX-M-9亚群以CTX-M-14亚型为主。CTX-M-9组菌株头孢他啶及头孢吡肟耐药率低于CTX-M-1组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论惠州地区ESBLss阳性大肠埃希菌株耐药基因以CTX-M型为主,且以CTX-M-9亚群为主要类型,而CTX-M-9亚群以CTX-M-14亚型为主,CTX-M-14亚型对头孢他啶和头孢吡肟耐药率低于CTX-M-1亚群及CTX-M-15亚型。

关键词：大肠埃希菌血流感染耐药性分析耐药基因分型

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慕课教学法在医学专业基础化学教学中的探索

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中文科技期刊数据库（文摘版）教育 2022年第5期 100-102页

作者：李燕赵永龙安建雄何彬贵州医科大学基础医学院化学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学药学院微生物与生化药教研室贵州贵阳550025

将大规模开放在线课程(Massive Open Online Course,MOOC)即慕课教学法应用到医学专业基础化学课程教学中,根据培养方案和教学大纲,合理选择和准备相关教学材料,围绕知识点录制特定时长的视频,调动学生学习兴趣,通过线上线下作业题,评... 详细信息

将大规模开放在线课程(Massive Open Online Course,MOOC)即慕课教学法应用到医学专业基础化学课程教学中,根据培养方案和教学大纲,合理选择和准备相关教学材料,围绕知识点录制特定时长的视频,调动学生学习兴趣,通过线上线下作业题,评估课程质量和学习效果。提高了学生学习基础化学的积极性,以促进教师能够在慕课教学中发挥更好的作用。

关键词：慕课医学专业基础化学教学

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临床宏基因组学应用现状及存在问题分析

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中国微生态学杂志 2021年第5期33卷 594-598页

作者：邱薇钟民涛伦永志莆田学院药学与医学技术学院医学微生态学福建省高校重点实验室福建莆田351100 大连医科大学基础医学院微生物学教研室

众所周知,宏基因组学是一种通过提取样品中微生物的总DNA,构建宏基因组文库,研究环境中全部微生物的遗传组成及其菌落功能的方法。而宏基因组新一代测序(metagenome next-generation sequencing, mNGS)是在宏基因组学基础上进一步发展... 详细信息

众所周知,宏基因组学是一种通过提取样品中微生物的总DNA,构建宏基因组文库,研究环境中全部微生物的遗传组成及其菌落功能的方法。而宏基因组新一代测序(metagenome next-generation sequencing, mNGS)是在宏基因组学基础上进一步发展起来的新一代测序技术,无需对患者标本进行培养,直接分析标本中的微生物DNA或RNA。本文介绍了宏基因组学在临床上的应用,包括传染病的诊断、疾病和健康状态下的微生物组分析、人类宿主反应分析和肿瘤相关病毒及其基因组鉴定,并简要探讨了临床宏基因组学研究中所遇到的挑战及解决方法。

关键词：临床微生物学宏基因组学传染病诊断生物信息学

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PLB1基因在白假丝酵母二相性中的表达

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中华医院感染学杂志 2023年第16期33卷 2427-2431页

作者：罗红梅苑天红杨怀贵阳市妇幼保健院新生儿科贵州贵阳550003 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550004 贵州省人民医院医院感染管理科贵州贵阳550002

目的通过对编码白假丝酵母磷脂酶B1(PLB1)基因在该菌酵母相和菌丝相中的mRNA和DNA表达水平的比较,从分子生物学角度探讨编码白假丝酵母侵袭性酶的重要毒力基因在该菌二相性中的表达差异,为进一步研究白假丝酵母的遗传变异、致病性与防... 详细信息

目的通过对编码白假丝酵母磷脂酶B1(PLB1)基因在该菌酵母相和菌丝相中的mRNA和DNA表达水平的比较,从分子生物学角度探讨编码白假丝酵母侵袭性酶的重要毒力基因在该菌二相性中的表达差异,为进一步研究白假丝酵母的遗传变异、致病性与防治提供初步实验依据。方法采用RNAiso Plus试剂联合玻璃珠破壁方法,分别提取白假丝酵母酵母相和菌丝相的总RNA;应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,比较PLB1基因在白假丝酵母酵母相和菌丝相中mRNA水平的表达差异;分别提取白假丝酵母酵母相与菌丝相的总DNA,应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术,比较PLB1基因在白假丝酵母酵母相与菌丝相中DNA水平的表达差异。结果提取的白假丝酵母酵母相及菌丝相总RNA电泳结果均可见较为清晰的28S、18S、5S三条带;运用半定量RT-PCR技术,得出PLB1基因在酵母相和菌丝相内mRNA的相对表达量分别为(0.90±0.04,1.00±0.01),两者比较有统计学差异(P<0.05);提取的白假丝酵母酵母相和菌丝相总DNA,应用PCR-SSCP技术,得到的SSCP图谱显示:PLB1基因在二相中的电泳带型无统计学差异。结论采用RNAiso Plus试剂联合玻璃珠破壁方法提取的白假丝酵母酵母相和菌丝相总RNA的浓度和纯度较高、完整性好;PLB1基因在白假丝酵母菌丝相mRNA表达水平明显高于酵母相;应用PCR-SSCP技术得到的SSCP图谱显示,所扩增的PLB1基因在酵母相和菌丝相的DNA表达水平上无统计学差异。

关键词：白假丝酵母二相性磷脂酶B1 mRNA表达 DNA表达

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消炎药药渣堆放过程中真菌多样性分析

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菌物学报 2022年第10期41卷 1585-1596页

作者：程敏郭鑫瑶王梅竹季晶焱李小兵康颖倩贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物与人类健康关系研究人才基地贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵州省赤水河畔酱酒研究中心贵州贵阳550003 贵州省烟草科学研究院贵州贵阳550009

中药药渣的处理是中药制药的难题,本研究利用Pac Bio Sequel高通量测序对堆放2年与5年的消炎药药渣进行理化性质及真菌多样性研究,为重要药渣的利用提供依据。分别对堆放2年(New 1–New 3)及5年(Old 1–Old 3)各3个消炎药渣高通量测序,... 详细信息

中药药渣的处理是中药制药的难题,本研究利用Pac Bio Sequel高通量测序对堆放2年与5年的消炎药药渣进行理化性质及真菌多样性研究,为重要药渣的利用提供依据。分别对堆放2年(New 1–New 3)及5年(Old 1–Old 3)各3个消炎药渣高通量测序,共检测到43753条有效序列,堆放2年的药渣中共检测到4个门、86个属、126个种,节担菌纲、小丛壳目、曲霉属为优势类群。堆放5年的药渣中检测到3个门、49个属、59个种,Chaetomium novozelandicum及小囊菌科为优势类群。消炎药药渣功能组成分析发现,堆放2年的药渣中腐生型真菌占比67.7%、致病真菌占比32.3%;堆放5年的药渣中腐生型真菌占比96.8%,仅检测到极少数其他型真菌。堆放2年的药渣p H为4.9±0.2,含水量为49.2%;堆放5年的药渣p H为3.6±0.1,含水量为20.8%。结果表明,随着堆放时间的增加,药渣p H及含水量下降,真菌营养类型由腐生、致病与共生三者丰度相当转变为单一的腐生型,说明随着堆放时间的增加,腐生真菌丰度增加,药渣降解加快,研究结果为药渣的利用提供了一定依据。

关键词：特殊生物质消炎中草药渣真菌多样性高通量测序

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抗生物降解药渣中高效水解木质素的菌株筛选

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贵州医科大学学报 2025年第1期50卷 24-30页

作者：程敏王海洁黄劲赵亮王迪廖万清康颖倩贵州医科大学附属医院医院感染管理科贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物与人类健康关系研究人才基地&贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550025 海军军医大学长征医院皮肤科上海200003 上海市医学真菌分子生物学重点实验室上海200003

目的从抗生物降解药渣中筛选对木质素水解能力强的真菌菌株。方法通过分离鉴定、纯培养及以木质素为唯一碳源液体发酵后测定木质素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)与漆酶(laccase,Lac)酶活筛选堆放药渣中高效水解木质素的真菌。结果... 详细信息

目的从抗生物降解药渣中筛选对木质素水解能力强的真菌菌株。方法通过分离鉴定、纯培养及以木质素为唯一碳源液体发酵后测定木质素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)与漆酶(laccase,Lac)酶活筛选堆放药渣中高效水解木质素的真菌。结果从药渣中分离出42株真菌,经过木质素碳源平板筛选进一步发现了8株水解效果较好的丝状真菌,其中ZYJHYZ246、ZYJHYZ257、ZYJHYZ280在平板上脱色效果最明显;将以上8株真菌进行分子鉴定及LiP及Lac酶活检测发现多数菌株在发酵第5~7天时达峰值,其中阳性对照NDM3-2在第7天时产LiP酶最高,为223.59 U/L,其次是ZYJHYZ268,生长第3天时达峰值(176.85 U/L);Lac酶活结果表明,ZYJHYZ268是产酶最高的一株菌,在第5天时达到250.83 U/L,是阳性对照最高产酶时期的1.8倍。结论筛选出的ZYJHYZ268经鉴定为Piloderma sp.,其能产较高水平LiP与Lac,具有良好的水解木质素的能力,为降解木质素菌株提供了更多选择。

关键词：木质素中草药渣丝状真菌水解酶活

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