检索结果-内蒙古大学图书馆

中国老年学杂志 2018年第23期38卷 5798-5800页

作者：梁曦张成华房明丽王书君王澍赵海东张乐大连医科大学附属第二医院乳腺外科吉林省肿瘤医院内镜科吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林大学中日联谊医院乳腺外科

目的探讨不同临床分期乳腺癌组织细胞质中高迁移率族蛋白(HMGB) 1及其信号通路HMGB1/Toll样受体(TLR) 4的表达及临床意义。方法利用Western印迹法及其实时定量PCR(qRT-PCR)检测HMGB1、糖基化终末产物(RAGE)和TLR4在52例不同分期乳腺癌... 详细信息

目的探讨不同临床分期乳腺癌组织细胞质中高迁移率族蛋白(HMGB) 1及其信号通路HMGB1/Toll样受体(TLR) 4的表达及临床意义。方法利用Western印迹法及其实时定量PCR(qRT-PCR)检测HMGB1、糖基化终末产物(RAGE)和TLR4在52例不同分期乳腺癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达。结果Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ+Ⅳ期乳腺癌组织中HMGB1和RAGE的mRNA水平明显高于癌旁组织(均P<0. 05)。与癌旁组织相比,Ⅰ期和Ⅱ期乳腺癌组织细胞质中的HMGB1蛋白的水平明显增高(均P<0. 05),而Ⅲ+Ⅳ期的乳腺癌组织HMGB1蛋白水平差异无统计学意义(P>0. 05)。结论乳腺癌早期HMGB1蛋白位于细胞质中,乳腺癌组织细胞质中HMGB1基因的表达对于乳腺癌早期诊断和预后分析有重要的指导意义。

关键词：乳腺癌高迁移率族蛋白肿瘤微环境

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N糖基化骨桥蛋白OPN与头颈部鳞癌发生的分子机制研究

N糖基化骨桥蛋白OPN与头颈部鳞癌发生的分子机制研究

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第八届泛环渤海生物化学与分子生物学会2018年学术交流会

作者：于新新董明李真孙倩男隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

研究目的:骨桥蛋白(Osteopontion,OPN)属于小整合素结合配体N-连接糖蛋白,广泛的分布于多种组织和细胞中,能够参与组织修复,自身代谢等功能。近年研究证实OPN在肿瘤发生、发展各个阶段以及增殖、侵袭和转移等生物学行为中都有重要作用,... 详细信息

研究目的:骨桥蛋白(Osteopontion,OPN)属于小整合素结合配体N-连接糖蛋白,广泛的分布于多种组织和细胞中,能够参与组织修复,自身代谢等功能。近年研究证实OPN在肿瘤发生、发展各个阶段以及增殖、侵袭和转移等生物学行为中都有重要作用,被认为是一种肿瘤标志物。头颈部癌(Hand Neck Cancer,HNC)是常见恶性肿瘤,包括起源于鼻窦、鼻腔、口腔、咽、喉等部位的上皮性恶性肿瘤,全球每年新发病约50万,占性恶性肿瘤6%,病理类型几乎为鳞癌。p38MAPK信号转导通路是MAPK通路分支之一,通过转录因子磷酸化而改变基因表达水平,参与多种胞内信息传递,能对广泛细胞外刺激发生反应。为明确头颈部鳞癌(HNSCC)中OPN的表达及作用,本研究利用临床头颈部鳞状细胞癌样本及头颈部鳞癌细胞系,检测OPN表达差异,分析OPN与头颈部鳞癌细胞增殖、侵袭的关系,并分析参与调控细胞增殖的信号通路。实验方法:利用Real-time PCR及Western-blot检测临床样本头颈部鳞癌组织及相邻癌旁组织OPN表达情况。选取口腔鳞癌细胞(UM-SCC6)及鼻咽癌细胞(CNE-2),以OPN-siR NA、Over-OPN分别下调和上调OPN的表达,通过CCK8实验和克隆形成实验检测OPN对细胞增殖的影响;通过Transwell实验检测OPN对细胞侵袭的影响,Western-blot实验检测侵袭相关标志因子MMP2、MMP9表达情况。将UM-SCC6及CNE-2分为空白组及p38抑制剂组(SB203580),每组分为Mock亚组、OPN-siRNA亚组、Over-OPN亚组,采用Western-blot检测p38及p-p38表达情况,并通过免疫荧光实验检测各组p38、p-p38核内外表达情况。实验结果:Western-blot及Real-time PCR实验结果显示头颈部鳞癌组织中的OPN表达高于癌旁组织,结果有统计学差异。在UM-SCC6细胞及CNE-2细胞中转染Over-OPN载体,CCK8实验、克隆形成实验及Transwell实验结果显示,与对照组相比Over-OPN组增殖及侵袭能力显著提高,Western-blot结果显示OPN-over组MMP2及MMP9表达升高;在UM-SCC6细胞及CNE-2细胞中转染OPN-siR NA,CCK8实验、克隆形成实验及Transwell实验结果显示,与对照组相比OPN-siRNA组增殖及侵袭能力显著降低,Western-blot结果显示OPN-siRNA组MMP2及MMP9表达降低。在加入p-38抑制剂(SB203580)后,Western-blot结果显示,与空白组相比,OPN-siRNA亚组、SB203580亚组、OPN-siRNA+SB203580亚组p-p38表达降低;Over-OPN亚组p-p38表达升高;细胞免疫荧光结果显示,与空白组相比,OPN-siRNA亚组、SB203580亚组、OPN-siRNA+SB203580亚组细胞核内p-p38表达降低,Over-OPN亚组细胞核内p-p38表达升高。实验结论:OPN在头颈部鳞癌中表达水平升高,上调OPN的表达能够促进头颈部鳞癌细胞(UM-SCC6、CNE-2)的增殖及侵袭,下调OPN的表达能够抑制头颈部鳞癌细胞(UM-SCC6、CNE-2)的增殖及侵袭。OPN可能是通过激活p38信号通路调控不同HNSCC细胞系的增殖、侵袭能力。

关键词：骨桥蛋白头颈部鳞癌 p38

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调控骨桥蛋白糖基化修饰对子宫内膜接受状态的影响

调控骨桥蛋白糖基化修饰对子宫内膜接受状态的影响

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第八届泛环渤海生物化学与分子生物学会2018年学术交流会

作者：陈万方齐佳刘欢孙倩男隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

研究背景:蛋白质的糖基化修饰是一种常见的蛋白质翻译后修饰方式,蛋白质组学和基因组学的研究表明,哺乳动物中50%的蛋白质发生糖基化修饰。骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)是一种N-结合糖蛋白家族的分泌型磷酸化糖蛋白,结构中包含N-糖基化位... 详细信息

研究背景:蛋白质的糖基化修饰是一种常见的蛋白质翻译后修饰方式,蛋白质组学和基因组学的研究表明,哺乳动物中50%的蛋白质发生糖基化修饰。骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)是一种N-结合糖蛋白家族的分泌型磷酸化糖蛋白,结构中包含N-糖基化位点和O-糖基化位点。OPN通过与细胞表面的整合素受体相互作用可调节细胞之间的黏附、细胞迁移、细胞基质间相互作用,参与机体发育及某些病理过程,与肿瘤细胞的增殖及迁移侵袭密切相关,而这些功能在很大程度上依赖于蛋白的翻译后修饰过程。实验方法:本研究选择人子宫内膜癌细胞系(RL95-2细胞、HEC-1A细胞)分别模拟高低接受状态的子宫内膜,以绒毛膜肿瘤的细胞系(Jar细胞)模拟侵入性胚胎,作为稳定的体外着床模型系统。用衣霉素处理RL95-2细胞、HEC-1A细胞,模拟去N糖基化修饰模型,用质谱的方法确定OPN上包含的N糖基化位点数目及位置,构建OPN-N糖基化突变质粒后转染上述两种子宫内膜癌细胞系,通过细胞免疫荧光及western blot实验,确定N糖基化修饰对蛋白定位及本身性质的影响;通过CCK-8实验、克隆形成实验、细胞划痕实验和Transwell小室实验检测N糖基化修饰对细胞的增殖、迁移及侵袭能力的影响;通过与Jar细胞共培养,检测N糖基化修饰对细胞黏附能力的影响。通过RT-PCR及western blot实验进一步研究OPN-N糖基化修饰对子宫内膜接受状态调控的分子机制。实验结果:用衣霉素处理RL95-2细胞、HEC-1A细胞,检测RL95-2、HEC-1A细胞的迁移及侵袭能力发生了改变;发生N糖基化修饰后,OPN分子量发生改变。N糖基化修饰促进RL95-2细胞、HEC-1A细胞的迁移能力及侵袭能力,并且对高接受状态的RL95-2细胞的促进作用比低接受状态的HEC-1A细胞明显。将转染后RL95-2细胞、HEC-1A细胞分别与Jar细胞共培养,发现N糖基化修饰能分别促进RL95-2、HEC-1A细胞与Jar细胞的黏附能力;应用免疫沉淀纯化技术纯化RL95-2细胞、HEC-1A细胞中的OPN蛋白,采用凝集素印迹方法分析比较OPN在高低接受状态的子宫内膜的聚糖结构变化,初步结果显示,高接受态RL95-2细胞对伴刀豆蛋白A(Con A)的亲和能力明显高于低接受态HEC-1A细胞,提示OPN-N糖基化修饰可调控子宫内膜容受性。Western结果显示,发生N糖基化修饰后,细胞内ERK、p38、AKT的活化增强,MMP2,MMP9的表达水平上升,采用特异性抑制剂来抑制AKT和ERK的表达,结果 OPN糖基化修饰对MMP2、MMP9、N-cadherin、Vimentin、E-cadherin的调控作用受到不同程度的抑制。因此,OPNN-糖基化修饰可能通过AKT和ERK的活化来调节MMP2、MMP9、N-cadherin、Vimentin、E-cadherin蛋白表达,进而影响肿瘤细胞的侵袭及转移。由于胚胎着床过程与肿瘤侵袭转移过程的相似性,所以参与肿瘤侵袭转移的分子机制在胚胎着床过程中也可能发挥重要作用。

关键词： OPN 子宫内膜糖基转移酶侵袭迁移

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2015-2016年贵州省手足口病非EV71、非CVA16肠道病毒型别鉴定和分析

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现代预防医学 2018年第9期45卷 1684-1687页

作者：李俞亭杨兴林王芳胜迟茜文郭楚娴魏洪贵州医科大学基础医学院微生物学教研室感染与免疫学实验室贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵阳市公共卫生防治中心检验科

目的探讨2015-2016年贵州省手足口病非EV71(Enterovirus 71,EV 71)、非CVA16(Coxsackievirus A16,CVA16)肠道病毒株的病原构成及优势型别。方法共收集2015-2016年贵州省儿童手足口病疑似患者肛拭子350例标本,应用实时荧光定量PCR法筛选... 详细信息

目的探讨2015-2016年贵州省手足口病非EV71(Enterovirus 71,EV 71)、非CVA16(Coxsackievirus A16,CVA16)肠道病毒株的病原构成及优势型别。方法共收集2015-2016年贵州省儿童手足口病疑似患者肛拭子350例标本,应用实时荧光定量PCR法筛选出非EV71、非CVA16型肠道病毒,采用RT-PCR法扩增病毒VP1区序列,PCR阳性扩增产物进行测序,对测得序列进行型别鉴定并与国内外各型代表株进行核苷酸同源性分析,构建系统进化树。结果从收集到的手足口病疑似患者肛拭子标本中,共分离到21株其他肠道病毒,分别为:CVA5、CVA7、CVA9、CVB3(Coxsackievirus B3,CVB3)、CVB4、E11(Echovirus11,ECHO11)、E17各1株,CVA10、CVB1各2株,CVB5、E7各5株。通过系统发育树揭示,分离到的同型别毒株之间具有同源性,而非同型别的毒株与国内外各代表株之间具有同源性。结论贵州省引起手足口病的非EV71、非CVA16型肠道病毒型别分布较广,包括CVB组,CVA组和ECHO病毒,其中CVB5、E7为非EV71、非CVA16型肠道病毒主要病原体。

关键词：手足口病肠道病毒型别鉴定

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弓形虫Ⅰ、Ⅱ型虫株ROP16基因重组表达载体的构建及其对A549细胞STAT3/6磷酸化水平的影响

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中国病原生物学杂志 2018年第3期13卷 239-243页

作者：赵志军董辉苏雅静钟利王云杰汪涛宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学研究生学院宁夏银川750004 九江学院基础医学院病原生物学教研室江西九江332000

目的探索弓形虫Ⅰ、Ⅱ型虫株ROP16在A549细胞中的功能。方法提取弓形虫Ⅰ(RH)、Ⅱ(ME49)型虫株总RNA,PCR扩增ROP16基因全长序列后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,转染A549细胞,采用Western blot方法检测细胞中STAT3/6磷酸水平,采用实时荧... 详细信息

目的探索弓形虫Ⅰ、Ⅱ型虫株ROP16在A549细胞中的功能。方法提取弓形虫Ⅰ(RH)、Ⅱ(ME49)型虫株总RNA,PCR扩增ROP16基因全长序列后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,转染A549细胞,采用Western blot方法检测细胞中STAT3/6磷酸水平,采用实时荧光定量PCR检测IL-12、iNOS、ARG1mRNA表达水平。结果 PCR扩增Ⅰ、Ⅱ型虫株ROP16基因全长为2148bp。双酶切和测序验证重组载体构建正确,pEGFP-N1-RH ROP16和pEGFP-N1-ME49ROP16过表达载体转染A549细胞后ROP16mRNA表达水平较未转染组上调(P<0.05,F=824.184,270.904),pEGFP-N1-ME49ROP16转染A549细胞p-STAT3/6表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05,F=1.051,1.203),IL-12、iNOS mRNA与对照组表比呈高表达(P<0.01,F=157.705,173.623)。pEGFP-N1-RH ROP16转染组相比A549细胞对照组p-STAT3/6表达水平上调(P<0.05,F=121.227,68.324),IL-12mRNA表达下调(P<0.01,F=186.397),ARG1mRNA表达上调(P<0.01,F=126.236)。结论弓形虫Ⅰ型RH株ROP16蛋白具有激活p-STAT3/6作用,且能使ARG1 mRNA的表达上调,IL-12 mRNA的表达下调,而弓形虫Ⅱ型ME49虫株ROP16蛋白则无激活p-STAT3/6作用,但能使IL-12mRNA和iNOS mRNA的表达上调。

关键词：弓形虫 ROP16 A549人肺腺癌细胞重组质粒

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基于创新实践能力培养的基础医学教学改革探讨

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基础医学教育 2018年第5期20卷 383-385页

作者：蔡红艳田继华祁金顺山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室太原030001 山西医科大学生理学系

医学是一门创新和实践的学科,基础医学教育是医学教育的重要环节。文章针对基础医学教学所存在的主要问题,结合山西医科大学基础医学教学改革实践,探讨如何培养学生的创新精神和实践能力。

关键词：基础医学实验教学创新精神实践能力

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NS2激活TLR7抑制RSV感染肺泡上皮细胞中IFN的表达

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安徽医科大学学报 2017年第11期52卷 1632-1637页

作者：汪旻旻孙涛袁晓玲黄升海安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

目的探讨非结构蛋白NS2在呼吸道合胞病毒(RSV)感染人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)活化TLR7信号转导过程中的可能作用。方法以RSV感染体外培养的A549细胞,设立正常对照组、RSV感染组、RSV NS2小干扰RNA沉默组(NS2 siRNA+RSV组)及TLR7激动剂组(... 详细信息

目的探讨非结构蛋白NS2在呼吸道合胞病毒(RSV)感染人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)活化TLR7信号转导过程中的可能作用。方法以RSV感染体外培养的A549细胞,设立正常对照组、RSV感染组、RSV NS2小干扰RNA沉默组(NS2 siRNA+RSV组)及TLR7激动剂组(R848+RSV组)。各组分别于病毒感染后的4、12、24、48 h收集细胞和培养上清液。Western blot法检测各组不同时间点TRIF、TRAF6及p-IκB-α蛋白表达;ELISA法检测各组细胞培养上清液中I型干扰素α(IFN-α)、IFN-β含量的变化。结果正常对照组中TRIF、TRAF6、p-IκB-α蛋白的表达量较低,经RSV感染之后,随感染时间增加,表达量升高;在NS2siRNA+RSV组三者表达量较正常对照组上调,但相对于RSV感染组,表达下降,表明RSV NS2可以活化TRIF、TRAF6及p-IκB-α蛋白的表达。RSV感染组及NS2 siRNA+RSV组、IFN-α、IFN-β含量随感染时间增加逐渐升高,4 h开始升高,差异有统计学意义(P<0.01);R848+RSV组IFN-α和IFN-β呈时间依赖性增加,感染4 h升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NS2在病毒感染A549细胞过程中激活TLR7,抑制了IFN-α和IFN-β的表达。

关键词： A549细胞 NS2 呼吸道合胞病毒 Toll样受体 siR-NA

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广东汉族人群 RXRG rs1467664位点与2型糖尿病遗传易感性的关联研究

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国际遗传学杂志 2018年第6期41卷 439-444页

作者：于海兵王姝胡维何小艺闫妍潘海燕何玉清孔丹莉林子牛王燕丁元林东莞广东医科大学流行病与卫生统计学教研室东莞广东医科大学系统生物研究所 518000 深圳中迈数字医疗技术有限公司东莞广东医科大学基础医学院微生物与免疫学教研室

目的对维甲酸X受体γ(retinoid X receptor gamma, RXRG)基因rs1467664位点的单核苷酸多态性与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)遗传易感性的关联性进行研究。方法采用病例-对照研究, 利用SNPscan?分型技术检测1092例2型糖尿... 详细信息

目的对维甲酸X受体γ(retinoid X receptor gamma, RXRG)基因rs1467664位点的单核苷酸多态性与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)遗传易感性的关联性进行研究。方法采用病例-对照研究, 利用SNPscan?分型技术检测1092例2型糖尿病患者和1092名正常对照者RXRG rs1467664位点的基因型, 运用SPSS 20.0软件对该位点基因型及等位基因频率在两组中的分布进行分析。结果 RXRG rs1467664位点基因型和等位基因在两组间的分布差异无统计学意义。在调整年龄、体质指数(body mass index, BMI)、性别前后, 两组间rs1467664位点的各遗传模型差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 RXRG rs1467664位点单核苷酸多态性与广东地区汉族人群2型糖尿病患者遗传易感性不存在明显相关性。

关键词： 2型糖尿病单核苷酸多态性 RXRG基因

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鲍曼不动杆菌在不同年龄感染人群中的耐药率差异

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中国药物与临床 2018年第9期18卷 1610-1611页

作者：苏婕王艳红山西医科大学基础医学院微生物免疫教研室太原030001 山西医学科学院山西大医院检验科

鲍曼不动杆菌（acinetobacter baumannii,Ab）为革兰阴性非发酵杆菌。Ab对湿热、紫外线、消毒剂有较强的抵抗力,可广泛存在于自然界的水、土壤、医院环境中,同时也存在于人体皮肤、呼吸道和消化道等中,当机体免疫力低下或缺陷时易引起... 详细信息

鲍曼不动杆菌（acinetobacter baumannii,Ab）为革兰阴性非发酵杆菌。Ab对湿热、紫外线、消毒剂有较强的抵抗力,可广泛存在于自然界的水、土壤、医院环境中,同时也存在于人体皮肤、呼吸道和消化道等中,当机体免疫力低下或缺陷时易引起呼吸道感染、泌尿系感染、伤口感染和败血症等。

关键词：鲍曼不动杆菌感染人群呼吸道感染率差耐药年龄免疫力低下泌尿系感染

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H6N1亚型禽流感病毒跨种属传播研究进展

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中国人兽共患病学报 2017年第3期33卷 236-240页

作者：孙增辉朱银川王熹婧蒙远雁张增峰广西医科大学微生物学教研室南宁530021 广西医科大学基础医学院南宁530021

禽流感病毒H6N1亚型广泛存在于水禽和陆禽,是最常分离到的甲型流感病毒亚型,遗传分析表明该病毒可能是高致病禽流感病毒H5N1的前体。随着病毒基因的持续进化,H6N1可跨种间屏障传播至哺乳动物,其对于哺乳动物小鼠、猪和雪貂已经具有较强... 详细信息

禽流感病毒H6N1亚型广泛存在于水禽和陆禽,是最常分离到的甲型流感病毒亚型,遗传分析表明该病毒可能是高致病禽流感病毒H5N1的前体。随着病毒基因的持续进化,H6N1可跨种间屏障传播至哺乳动物,其对于哺乳动物小鼠、猪和雪貂已经具有较强感染能力。血清流行病学调查结果显示少数人H6禽流感病毒抗体阳性,2013年5月,我国台湾出现全球首例人类感染H6N1亚型流感病毒。因此,H6N1病毒宿主范围不断扩大,在这些宿主内可发生病毒基因突变、基因重配,进而演变为具有感染人类潜能的新变异株的可能。本文从病原学、流行病学、病毒感染哺乳动物和人类等方面对H6N1亚型禽流感病毒的研究进展进行综述,以期为H6N1禽流感病毒的防控提供参考。

关键词：甲型流感病毒 H6N1亚型流行病学调查感染哺乳动物人

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