检索结果-内蒙古大学图书馆

南方医科大学学报 2022年第7期42卷 976-987页

作者：库尔班乃木·卡合曼赵健锋穆凯代斯·艾合买提王汉铭朱稷蔚潘文涛卡思木江·阿西木江新疆医科大学第一附属医院康复医学科新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第五临床医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第二临床医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院物生化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830017

目的探讨屎肠球菌QH06对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道菌群与肠道免疫的影响及其机制。方法36只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、UC模型组和屎肠球菌组(12只/组)。除正常对照组外,其余2组以5%TNBS/乙醇灌肠法建立UC模型。造模成功... 详细信息

目的探讨屎肠球菌QH06对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道菌群与肠道免疫的影响及其机制。方法36只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、UC模型组和屎肠球菌组(12只/组)。除正常对照组外,其余2组以5%TNBS/乙醇灌肠法建立UC模型。造模成功后屎肠球菌组用屎肠球菌QH06灌胃干预,剂量为0.21 g/kg,正常对照组和UC组用等体积的蒸馏水灌胃干预。干预14 d后用HE染色法观察各组大鼠结肠病理改变并评分,用RT-qPCR和ELISA法检测细胞因子IL-4、IL-10、IL-12和IFN-γ的mRNA和蛋白表达水平,用免疫组化和ELISA法检测TLR2蛋白表达量。利用Illumina Miseq平台对各组大鼠肠道菌群测序同时进行生物信息学分析。最后肠道菌群和TLR2蛋白表达量、细胞因子等指标进行相关性分析。结果与正常对照组相比,UC组大鼠体质量下降(P<0.01),结肠组织损伤严重,病理学评分显著升高(P<0.01);ELISA和RT-qPCR结果显示,IFN-γ(P<0.01),IL-12(P<0.01),TLR2(P<0.01)的蛋白表达水平和IFN-γ(P<0.05),IL-12(P<0.05),IL-10(P<0.05)的mRNA表达水平上调。Illumina Miseq测序和分析显示,UC组大鼠肠道菌群多样性Shannon指数(P<0.05)、Ace指数(P<0.01)和Chao指数(P<0.05)降低。Enterobacteriaceae(P<0.01)增多,Burkholderiaceae(P<0.05)减少。与UC组相比,屎肠球菌组大鼠体质量增加(P<0.05),损伤减轻,病理学评分下降(P<0.05),结肠组织中IFN-γ(P<0.01),IL-12(P<0.05)、TLR2蛋白表达量(P<0.01)下调,IL-4蛋白表达量上调(P<0.05),IFN-γ(P<0.05)、IL-12(P<0.05)的mRNA表达量下调,肠道菌群多样性Shannon指数(P<0.05)、Ace指数(P<0.05)和Chao指数(P<0.05)升高。Enterobacteriaceae(P<0.05)减少,Burkholderiaceae(P<0.05)和Rikenellaceae(P<0.01)增多;肠道菌群、细胞因子含量和TLR2蛋白表达量相关性分析结果显示,IFN-γ与Enterobacteriaceae呈正相关、而与Prevotellaceae,Desulfovibrionaceae、norank_o__Mollicutes_RF39,Clostridiales_vadinBB60_group呈负相关;TLR2表达水平与Clostridiales_vadinBB60_group,norank_o__Mollicutes_RF39和Prevotellaceae呈负相关。结论屎肠球菌QH06能减轻TNBS诱导的UC大鼠的结肠黏膜损伤,其机制可能与普氏菌科等短链脂肪酸产生菌丰度的升高,TLR2介导的异常免疫反应的抑制有关。

关键词：屎肠球菌溃疡性结肠炎肠道菌群 TLR2 细胞因子

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分枝杆菌膜蛋白相关抗结核药物靶标的研究进展

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生命的化学 2023年第9期43卷 1389-1396页

作者：赵一澍沙珊珊安冬贾海英马郁芳徐立铭大连医科大学附属第二医院科研中心大连116023 大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室大连116044 大连医科大学基础医学院微生物学教研室大连116044

结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病。当前结核病耐药等问题愈加严重,基于新靶点的抗结核新药研发也变得尤为重要。分枝杆菌膜蛋白是镶嵌于细胞膜磷脂双层或与脂双层结合的一类蛋白,参与细胞结构合成、物质跨膜转运、催化等重要的... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病。当前结核病耐药等问题愈加严重,基于新靶点的抗结核新药研发也变得尤为重要。分枝杆菌膜蛋白是镶嵌于细胞膜磷脂双层或与脂双层结合的一类蛋白,参与细胞结构合成、物质跨膜转运、催化等重要的生物学功能,并在宿主感染中参与免疫识别、免疫逃逸、毒力因子释放等致病机制。另一方面,膜蛋白具有特定的拓扑结构和细胞定位,药物靶标可及性强,因此膜蛋白是抗结核药物作用的理想靶标。本文就分枝杆菌膜蛋白在细胞壁合成、物质跨膜转运、细菌休眠、细菌与宿主互作及分泌系统相关研究进展进行综述,旨在为抗结核药物研发提供新思路。

关键词：分枝杆菌膜蛋白抗结核药物靶标

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米曲霉FleA基因的原核表达及纯化

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中国微生态学杂志 2021年第9期33卷 1005-1008页

作者：孙钰涵李志王萌萌李明李文哲大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁大连116044 大连市中心医院检验科

目的研究米曲霉FleA基因克隆菌株的构建及米曲霉凝集素(Aspergillus oryzae lectin, AOL)蛋白表达。方法培养米曲霉RIB40,TRIzol法提取米曲霉RNA,用反转录试剂盒合成FleA全基因,设计引物扩增FleA基因,并将此片段与PJET克隆质粒连接构建... 详细信息

目的研究米曲霉FleA基因克隆菌株的构建及米曲霉凝集素(Aspergillus oryzae lectin, AOL)蛋白表达。方法培养米曲霉RIB40,TRIzol法提取米曲霉RNA,用反转录试剂盒合成FleA全基因,设计引物扩增FleA基因,并将此片段与PJET克隆质粒连接构建克隆菌株,经双酶切筛选出阳性克隆菌株送去测序,将序列正确的克隆菌与表达载体pET-28a(+)分别经过双酶切后连接,转化到宿主菌*** BL21,IPTG诱导AOL目的蛋白表达,SDS-PAGE检测分析。结果 PCR成功扩增获得FleA基因,大小约950 bp,成功连接至PJET克隆载体后,经双酶切回收后又与pET-28a(+)成功连接,经过IPTG诱导后SDS-PAGE检测结果显示目的基因成功表达。结论该研究成功构建了米曲霉FleA基因,获得了表达蛋白,为今后结构和功能研究奠定了一定的基础。

关键词：米曲霉凝集素 FleA基因原核表达

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CRKⅡ对慢性粒细胞白血病K562细胞恶性行为的影响

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生命的化学 2021年第8期41卷 1837-1844页

作者：郭春梅张秋玲张芙蓉刘淑清孙明忠大连医科大学基础医学院生物技术系大连116044 大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室大连116044 大连市友谊医院皮肤科大连116001

作为信号接头蛋白CRK家族成员之一,CRKⅡ参与细胞的增殖、存活、黏附、迁移、分化,但CRKⅡ与白血病的关系及作用机制尚不清楚。采用qRT-PCR(quantitative real-timePCR)检测CRKⅡ在正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本、慢性粒... 详细信息

作为信号接头蛋白CRK家族成员之一,CRKⅡ参与细胞的增殖、存活、黏附、迁移、分化,但CRKⅡ与白血病的关系及作用机制尚不清楚。采用qRT-PCR(quantitative real-timePCR)检测CRKⅡ在正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本、慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)初发患者骨髓样本、CML完全缓解(complete remission,CR)患者骨髓样本中的表达情况;CRKⅡ小干扰序列瞬时转染K562细胞,获得CRKⅡ表达下调的K562细胞株,Western blot和qRT-PCR检测CRKⅡ干扰效率;CCK8检测CRKⅡ下调对K562细胞增殖能力的影响;Transwell小室检测CRKⅡ下调对K562细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测CRKⅡ下调对K562细胞中信号通路关键分子p130Cas、Rac1表达水平的影响。与正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本相比,CRKⅡ在CML初发患者骨髓样本中表达水平升高,同时在4对CML初发-CR配对样本中,患者完全缓解后CRKⅡ表达水平降低;在K562细胞中CRKⅡ表达被有效沉默;CRKⅡ下调抑制K562细胞的增殖、迁移、侵袭能力。初步分子机制研究发现,CRKⅡ通过激活p130Cas/DOCK180/Rac1通路调节K562细胞的恶性行为。CRKⅡ在CML发生、发展中起着重要的作用,作为肿瘤促进剂影响CML细胞的恶性行为,可作为CML诊断、治疗的新靶点。

关键词：慢性粒细胞白血病 CRKⅡ p130Cas/DOCK180/Rac1通路

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稀土氮杂环配合物的合成、结构及抑菌活性

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高等学校化学学报 2019年第4期40卷 632-638页

作者：李冰王学敏白凤英刘淑清辽宁师范大学化学化工学院大连116029 大连医科大学基础医学院生物化学教研室大连116044

采用溶液合成法,在室温下合成了一系列稀土配合[Ln(IAA)_2(phen)_2]·(NO_3)[Ln=Ce(1),Gd(2),Tb(3),Dy(4),Ho(5),HIAA=吲哚乙酸,phen=1,10-菲咯啉],并通过元素分析、红外光谱、热重分析、X射线单晶衍射、X射线粉末衍射等方法对配合... 详细信息

采用溶液合成法,在室温下合成了一系列稀土配合[Ln(IAA)_2(phen)_2]·(NO_3)[Ln=Ce(1),Gd(2),Tb(3),Dy(4),Ho(5),HIAA=吲哚乙酸,phen=1,10-菲咯啉],并通过元素分析、红外光谱、热重分析、X射线单晶衍射、X射线粉末衍射等方法对配合物进行了表征.结果表明,配合物1～5具有相同的结构,对配合物2的单晶结构分析表明,配合物2为超分子网络结构,通过分子间氢键形成2D网络,中心金属Gd(Ⅲ)为九配位,具有单帽四方反棱柱几何构型.此外,对该系列配合物进行了抑菌活性的研究,得到了抑菌活性与配合物组成的构效关系.

关键词：稀土配合物吲哚乙酸 1,10-菲咯啉晶体结构抑菌活性

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N-岩藻糖基转移酶Ⅶ(FUT7)在子痫前期过程中的作用及机制研究

N-岩藻糖基转移酶Ⅶ(FUT7)在子痫前期过程中的作用及机制研究

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2020年糖科学青年科技论坛

作者：陈天红李雅琪崔馨元刘帅燕秋大连医科大学基础医学院生化教研室

子痫前期是指妊娠妇女20周以后,出现血压升高和蛋白尿,以及头痛、眼花、恶心、呕吐、上腹不适等症状,其并发症可导致肺水肿、胎盘早剥、胎儿生长受限、死胎及死产等。糖基化是蛋白质翻译后修饰的一种重要方式,蛋白质的糖基化参与调节多... 详细信息

子痫前期是指妊娠妇女20周以后,出现血压升高和蛋白尿,以及头痛、眼花、恶心、呕吐、上腹不适等症状,其并发症可导致肺水肿、胎盘早剥、胎儿生长受限、死胎及死产等。糖基化是蛋白质翻译后修饰的一种重要方式,蛋白质的糖基化参与调节多种生理过程,糖基化异常则会导致某些疾病如肿瘤、不孕和免疫功能障碍等。含有岩藻糖修饰的路易斯系列抗原(Lewis antigen)是细胞表面糖链的常见结构单元,其在许多生理和病理过程中均发挥着至关重要的作用。Lewis系列抗原的生物合成涉及多个岩藻糖基转移酶,N-岩藻糖基转移酶Ⅶ(FUT7)具有高底物专一性,只能合成唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原(sialy Lewis-X,sLeX)。sLeX抗原是表达在胚胎组织及肿瘤细胞表面糖脂和糖蛋白上的寡糖抗原。有研究表明异常糖基化的发生与子痫前期的发生有关,而sLeX、FUT7的糖基化修饰与子痫前期发生发展的关系未见报导。本实验对子痫前期和正常妊娠妇女的胎盘组织进行凝集素芯片分析;通过免疫组化和Western-blot检测FUT7及其产物sLeX;上调FUT7的表达后,应用细胞免疫荧光、Real-time PCR和Western-blot等方法检测FUT7、sLeX在人绒毛膜滋养层细胞中的定位和表达情况;通过CCK-8和Transwell等方法检测FUT7对人绒毛膜滋养细胞增殖、迁移和侵袭的影响。通过Western-blot等方法检测FUT7对MAPK/Erk信号通路相关蛋白表达的影响。结果显示,通过凝集素芯片分析发现α1,3-岩藻糖在子痫前期较正常妊娠妇女胎盘组织中的表达下调;通过免疫组化和Western-blot发现子痫前期患者中的FUT7、sLex的表达较正常组织明显降低;过表达FUT7后,细胞免疫荧光、Real-time PCR和Western-blot中FUT7、sLeX的表达量升高;过表达FUT7后人绒毛膜滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力也明显增强。通过Western-blot检测发现过表达FUT7后MAPK/Erk信号通路被激活。上述结果表明FUT7在子痫前期胎盘绒毛中的表达较正常妊娠妇女下调,FUT7通过促进MAPK/Erk信号通路的相关分子促进人绒毛膜滋养细胞生长、增殖及迁移侵袭能力。

关键词：子痫前期胎盘 FUT7 sLeX

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肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响

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微生物学免疫学进展 2020年第2期48卷 8-15页

作者：贾丽秋王静刘洋杨淑凤黄玉昆张飞万延民马郁芳大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁大连116044 复旦大学附属华山医院感染科上海200040 大连医科大学基础医学院微生物学教研室辽宁大连116044 佳木斯大学基础医学院免疫学教研室黑龙江佳木斯154007

目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响。方法利用过表达Rv1096基因的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)Rv1096,通过差速离心及胰蛋白酶消化试验... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响。方法利用过表达Rv1096基因的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)Rv1096,通过差速离心及胰蛋白酶消化试验,确定Rv1096蛋白的亚细胞定位;通过氨基酸定点突变联合伴刀豆凝集素A(Concanavalin A, ConA)免疫印迹确定Rv1096的O-甘露糖基化位点;运用刃天青显色法检测MSRv1096对溶菌酶的抵抗力;通过巨噬细胞感染试验,分析了Rv1096对耻垢分枝杆菌细胞内存活能力和宿主细胞炎症应答的影响。结果确定了Rv1096在重组耻垢分枝杆菌MSRv1096中的亚细胞定位在细胞壁;发现Rv1096蛋白含有三个O-甘露糖基修饰位点(265Thr,266Ser,267Ser);细胞外测试结果表明,Rv1096能增强耻垢分枝杆菌对溶菌酶的抵抗能力,最低抑菌质量浓度从1.5 mg/mL升至2.5 mg/mL,而细胞感染显示其并不能显著增强耻垢分枝杆菌在人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)内的存活能力;定量PCR检测结果显示,过表达Rv1096的耻垢分枝杆菌刺激THP-1细胞分泌炎症因子(TNF-α,IL-6和IL-1β)的能力显著下降。通过平行对比证明若删除O-甘露糖基化位点(265Thr,266Ser,267Ser),对Rv1096基因功能无显著影响。结论 Rv1096是一个细胞壁相关蛋白,具有三个O-甘露糖基化位点。过表达Rv1096对耻垢杆菌在宿主细胞内的存活能力无显著影响,但能够降低宿主细胞对耻垢分枝杆菌的炎症因子应答,且上述功能不受O-甘露糖基化修饰影响。

关键词：结核分枝杆菌肽聚糖脱乙酰酶 O-甘露糖基化蛋白溶菌酶抵抗巨噬细胞

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基于电喷雾-四极杆-飞行时间质谱的高聚合度人乳寡糖异构体结构解析

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分析化学 2019年第7期47卷 1106-1113页

作者：李欣李佳齐金高娃于龙郭志谋梁鑫淼刘帅闫竞宇大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室

人乳寡糖是一类存在于人乳中的天然益生元,在促进婴儿肠道菌群生长、完善免疫系统功能和抵抗病原体侵染过程中发挥着不可替代的作用。人乳寡糖的功能与其结构密切相关,但其结构组成复杂、连接方式多样,存在大量的同分异构体,且随着寡糖... 详细信息

人乳寡糖是一类存在于人乳中的天然益生元,在促进婴儿肠道菌群生长、完善免疫系统功能和抵抗病原体侵染过程中发挥着不可替代的作用。人乳寡糖的功能与其结构密切相关,但其结构组成复杂、连接方式多样,存在大量的同分异构体,且随着寡糖聚合度的升高,同分异构体的数目和复杂性都急剧增加。因此,高聚合度的寡糖异构体的结构解析是人乳寡糖研究的难点之一,对寡糖的生物功能研究具有重要意义。本研究采用电喷雾-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q/TOF-MS),在负离子模式下对分离获得的18个高聚合度人乳寡糖(其中3个为首次报道)进行了结构解析,探讨了同组异构体之间碎片离子的差异,并详细总结了寡糖异构体的裂解规律,为复杂的高聚合度人乳寡糖异构体的结构解析及新型糖结构的发现提供了科学依据。

关键词：人乳寡糖同分异构体结构解析电喷雾-四极杆-飞行时间质谱

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O-GlcNAc修饰增加子宫内膜癌细胞干性和恶性能力

O-GlcNAc修饰增加子宫内膜癌细胞干性和恶性能力

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第九届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术年会

作者：李真张宏硕齐佳郭金秋孔英大连医科大学基础医学院生物化学教研室

子宫内膜癌是妇科癌症中常见的恶性肿瘤,世界范围内发病率呈逐年上升。O连接N-乙酰葡糖胺修饰(O-GlcNAcylation)是以来自机体糖代谢己糖胺合成途径(HBP)的N-乙酰氨基葡萄糖胺(UDP-GlcNAc)为底物,将O-GlcNAc基团连接到蛋白质的丝氨酸或... 详细信息

子宫内膜癌是妇科癌症中常见的恶性肿瘤,世界范围内发病率呈逐年上升。O连接N-乙酰葡糖胺修饰(O-GlcNAcylation)是以来自机体糖代谢己糖胺合成途径(HBP)的N-乙酰氨基葡萄糖胺(UDP-GlcNAc)为底物,将O-GlcNAc基团连接到蛋白质的丝氨酸或苏氨酸上的一种蛋白质翻译后修饰方式。在哺乳动物O-GlcNAc转移酶(OGT)催化O-GlcNAc的添加、O-GlcNA水解酶(OGA)使O-GlcNAc水解去除。O-GlcNAcylation调节多种细胞过程,例如营养感应、细胞周期进程、转录、翻译、表观遗传学调控和蛋白质-蛋白质相互作用等。肿瘤细胞具有维持增殖信号、逃避生长抑制因子、逃避免疫监视、诱导血管生成等干细胞样潜能。我们的研究显示:OGT在子宫内膜组织腺上皮细胞基底侧表达。选取子宫内膜癌细胞Ishikawa和RL95-2细胞,下调OGA的表达,检测子宫内膜癌细胞Ishikawa和RL95-2细胞的干性标志因子OCT4、SOX2表达均增高,细胞功能研究显示细胞的迁移、侵袭能力增强;而下调OGT的表达,干性标志因子OCT4、SOX2表达降低,细胞的迁移、侵袭能力降低。有研究表明与正常组织相比,SOX2和OCT4在子宫内膜癌症组织中均过表达。我们研究旨在探讨O-GlcNAc修饰对子宫内膜癌细胞干性样潜能和恶性能力的影响机制,以求寻找治疗子宫内膜癌的新思路。

关键词：子宫内膜癌 O-GlcNAc修饰肿瘤干性迁移侵袭

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GATA6参与调节内皮细胞功能及其分子机制

GATA6参与调节内皮细胞功能及其分子机制

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第九届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术年会

作者：刘欢李晓雪廖杨优李真隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生物化学教研室

转录因子GATA是一个高度保守的锌指蛋白家族,介导组织特异性基因的表达,GATA6在胚胎发育过程中对心血管系统、消化系统和其他组织的增殖、分化和发育至关重要。肿瘤发生与胚胎期的基因激活密切相关,GATA6的过表达增强了肿瘤的成瘤性;血... 详细信息

转录因子GATA是一个高度保守的锌指蛋白家族,介导组织特异性基因的表达,GATA6在胚胎发育过程中对心血管系统、消化系统和其他组织的增殖、分化和发育至关重要。肿瘤发生与胚胎期的基因激活密切相关,GATA6的过表达增强了肿瘤的成瘤性;血管生成是胚胎发育、组织生长和伤口愈合的关键过程,异常血管生成可促进炎症、创伤愈合异常、血管疾病、复发性流产等妊娠相关疾病和肿瘤的发生发展;妇产科常见妊娠相关疾病子痫前期是一种由于血管生成和抗血管生成失衡引起的疾病,其发病机制可能涉及胎盘功能异常及其引起的内皮功能障碍,血管生成因子生成减少,抗血管生成因子生成增多是其特征之一。本研究结果表明:GATA6在子痫前期胎盘中的表达量随着子痫前期的进展而逐渐下降;对HUVEC细胞瞬时转染过表达GATA6质粒及GATA6 siRNA,通过Transwell小室、细胞划痕实验、CCK8实验、集落形成实验等实验发现,过表达GATA6可增强HUVEC细胞的增殖、迁移和侵袭能力。干扰GATA6,抑制HUVEC细胞的增殖、迁移及侵袭。表明GATA 6对内皮细胞的功能和存活起着至关重要的作用。提取细胞总蛋白,通过Western blotting发现GATA6主要通过PI3K-AKT、ERK信号通路调控内皮细胞功能。细胞增殖相关标志分子CyclinD1、Bcl2、FOXM1等随着GATA6的瞬时上调或下调,表达相应增加或减少;侵袭相关标志分子MMP2、MMP9等随着GATA6的瞬时上调或下调,表达量相应增加或减少;在HUVEC细胞中过表达GATA6,血管生成因子VEGF表达增多,干扰GATA6,VEGF表达量减少,表明GATA6可能参与调节血管生成的生理过程。

关键词： GATA6 血管生成 VEGF 子痫前期

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