检索结果-内蒙古大学图书馆

高糖对肾小球系膜细胞BK_(Ca)-Orai1信号复合物表达与功能的影响

中国药理学通报 2018年第6期34卷 846-850页

作者：杜鹃闫德俊杨云云陈硕魏圆沈兵安徽医科大学基础医学院生理学教研室安徽合肥230032

目的探讨在肾小球系膜细胞(GMCs)中,钙库操纵钙内流(SOCE)的主要通道蛋白Orai1与其下游信号分子大电导钙激活钾通道(BK_Ca)的物理性与功能性相互作用,及其在高糖环境下的改变。方法采用免疫共沉淀法(co-IP)检测Orai1与BKCa相互作用... 详细信息

目的探讨在肾小球系膜细胞(GMCs)中,钙库操纵钙内流(SOCE)的主要通道蛋白Orai1与其下游信号分子大电导钙激活钾通道(BK_Ca)的物理性与功能性相互作用,及其在高糖环境下的改变。方法采用免疫共沉淀法(co-IP)检测Orai1与BKCa相互作用;利用钙成像检测SOCE引起的细胞内游离Ca^2+浓度变化;利用DiBAC_4(3)作为荧光指示剂,检测SOCE引起细胞膜电位的改变;免疫蛋白电泳法检测Orai1与BK_Ca的表达水平。结果在GMCs,SOCE的主要通道蛋白Orai1可与其下游信号分子BK_Ca通道蛋白形成信号复合物,引起GMCs膜电位超极化。高糖培养可以明显上调Orai1与BK_Ca蛋白的表达水平,并增强SOCE引起的膜电位超极化水平。结论 GMCs的Orai1可与BK_Ca形成信号复合物,参与调节细胞膜超极化过程,并可能参与高糖培养对细胞膜超极化的影响。

关键词：肾小球系膜细胞高糖大电导钙激活钾通道 Orai1 钙库操纵钙内流膜电位

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荷包牡丹碱对小鼠下丘神经元反应潜伏期的影响

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南方医科大学学报 2009年第5期29卷 918-921页

作者：丛文东肖中举南方医科大学基础医学院生理学教研室广东广州510515

目的观察荷包牡丹碱对下丘神经元声反应潜伏期改变并分析γ-氨基丁酸(GABA)能神经元在下丘信息处理中的作用。方法在13只4～5周龄BALB/c小鼠下丘,观察并记录微电泳GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(bicuculline,methiolide,BMI)对神经元纯频... 详细信息

目的观察荷包牡丹碱对下丘神经元声反应潜伏期改变并分析γ-氨基丁酸(GABA)能神经元在下丘信息处理中的作用。方法在13只4～5周龄BALB/c小鼠下丘,观察并记录微电泳GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(bicuculline,methiolide,BMI)对神经元纯频声反应特性的影响。提取特征频率下潜伏期等特性进行分析。结果共记录到30个单单位神经元,在BMI作用后40%(n=12)的神经元动作电位潜伏期延长,23.3%(n=7)出现特征频率改变,其中潜伏期延长的神经元中有50%(n=6)伴有特征频率改变,阈值改变具有线性趋势。结论小鼠下丘神经元反应潜伏期形成受GABA能抑制作用,并通过侧抑制作用增高神经元频率选择性。推测潜伏期变化能从突触水平反应GABA能神经元的信息整合作用。

关键词：下丘神经元潜伏期荷包牡丹碱

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CBA、BALB/c、C57BL、昆明系小鼠及豚鼠听性脑干反应阈值的检测

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中国应用生理学杂志 2008年第3期24卷 315-318页

作者：于利汤浩中国医科大学基础医学院生理教研室辽宁沈阳110001

目的:比较CBA、BALB/c、C57BL、昆明系小鼠及豚鼠5种啮齿类动物的正常听性脑干反应(ABR)的阈值及其频率特性。方法:采用IHSSmartEP3.91系统对4种小鼠和豚鼠的ABR进行检测和比较,使用短音(Tone-pip)作为刺激声测定其各频率的阈值及其特点... 详细信息

目的:比较CBA、BALB/c、C57BL、昆明系小鼠及豚鼠5种啮齿类动物的正常听性脑干反应(ABR)的阈值及其频率特性。方法:采用IHSSmartEP3.91系统对4种小鼠和豚鼠的ABR进行检测和比较,使用短音(Tone-pip)作为刺激声测定其各频率的阈值及其特点,绘制各自的听觉频率-阈值的关系曲线,找出各自的最佳刺激频率。结果:五种啮齿类动物中,豚鼠的ABR阈值最低,然后依次是昆明系小鼠,CBA小鼠,BALB/c小鼠,C57BL小鼠;其ABR最佳反应阈值均为10kHz,即在10kHz时各自的ABR阈值最低;频率低于10kHz时,其ABR阈值逐渐升高,高于10kHz时,ABR阈值逐渐降低,这是五种被检测动物ABR频率-阈值的关系曲线的共同特点。结论:实验所检测的五种啮齿类动物中,豚鼠的听觉功能最好:在4种小鼠中,昆明系小鼠的听觉功能较其余小鼠的为好;这五种啮齿类动物的听觉最适刺激频率均为10kHz,最适合的测试频率范围是8kHz至24kHz。

关键词：小鼠豚鼠听性脑干反应短音听觉阈值

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病原生物学实验教学中应用多学科整合及虚拟实验的探索

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中国微生态学杂志 2020年第7期32卷 833-835页

作者：刘银辉刘磊张彩华李华军大连医科大学基础医学院微生态学教研室辽宁大连116044 大连医科大学基础医学院病原实验室辽宁大连116044 大连医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁大连116044

病原生物学作为一门实践性很强的学科,其实验教学在其中发挥重要的作用。为了提高病原生物学实验的系统性和可操作性,结合微生态学、医学微生物学及免疫学各自学科特点,进行以"抗生素诱导的肠道菌群失调"为例探讨病原生物学... 详细信息

病原生物学作为一门实践性很强的学科,其实验教学在其中发挥重要的作用。为了提高病原生物学实验的系统性和可操作性,结合微生态学、医学微生物学及免疫学各自学科特点,进行以"抗生素诱导的肠道菌群失调"为例探讨病原生物学整合实验。由于临床标本及实验条件的限制,采用可视化虚拟实验进行消化性溃疡中病原菌分离与鉴定及微生态菌群分析实验。这将为病原生物学实验教学的改革提供相应参考。

关键词：病原生物学整合实验虚拟实验正常菌群

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分枝杆菌细胞壁聚阿拉伯甘露糖脂的结构、合成过程及免疫调节

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第9期30卷 866-870页

作者：李雅琼张文利董旭大连医科大学基础医学院生物化学教研室 116044

自20世纪60年代以来，随着HIV的感染以及抗生素的滥用，结核病的发病率逐年上升。而且传统的抗结核药物又存在严重的耐药问题，致使结核病成为单一感染致死的主要病因。因此，研究结核病的病原体——结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberc... 详细信息

自20世纪60年代以来，随着HIV的感染以及抗生素的滥用，结核病的发病率逐年上升。而且传统的抗结核药物又存在严重的耐药问题，致使结核病成为单一感染致死的主要病因。因此，研究结核病的病原体——结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）的耐药机制，寻找新的高效抗结核药物成为研究的热点。

关键词：结核分枝杆菌甘露糖脂免疫调节合成过程阿拉伯细胞壁抗结核药物结构

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化学遗传学调控高血压大鼠室旁核促肾上腺皮质激素释放因子神经元对前交感神经元兴奋性的影响

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中国药理学通报 2023年第12期39卷 2338-2345页

作者：马宏宇郭鑫淇张荧高璐杜梓硕王浩然马会杰河北医科大学基础医学院生理学教研室河北石家庄050017

目的观察下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin-releasing factor,CRF)神经元对正常血压Wistar Kyoto(WKY)大鼠或自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)前交感神经元兴奋性的影响,阐明交感中枢过度兴奋的可能神经环路机制。方法本研究使用成年雄性WKY和SHR。通过蛋白印迹实验明确WKY与SHR PVN CRF蛋白表达水平。同时,借助免疫荧光实验观察WKY与SHR PVN CRF神经元与前交感神经元。通过将CRF启动子特异性Cre依赖的腺相关病毒(adeno-associated viruses,AAV)与化学遗传学AAV共同注入PVN,使得CRF神经元特异性表达仅由设计性药物激活的设计性受体(designer receptors exclusively activated by designer drugs,DREADDs),即WKY室旁核CRF神经元特异性表达与Gq亚基偶联的人M3毒蕈碱型DREADD(hM3Dq),SHR室旁核CRF神经元特异性表达与Gi亚基偶联的人M4毒蕈碱型DREADD(hM4Di),而叠氮平-N-氧化物(clozapine-N-oxide,CNO)作为配体可结合兴奋性hM3Dq或抑制性hM4Di,进而调控PVN CRF神经元的兴奋性。而后向脊髓中间外侧柱(intermediolateral column,IML)微量注入荧光示踪剂逆行标记室旁核前交感神经元。最后,我们应用全细胞膜片钳记录CNO(10μmol·L^(-1))对室旁核前交感神经元自发兴奋性突触后电流(spontaneous excitatory postsynaptic currents,sEPSCs)和诱发动作电位的影响。结果SHR室旁核CRF蛋白表达水平明显高于WKY大鼠,SHR室旁核CRF神经元活动增强、数量增多。化学遗传学DREADDs可成功表达在PVN CRF神经元,同时,逆行荧光示踪剂可成功标记在向脊髓投射的PVN前交感神经元。用含CNO的人工脑脊液灌流预先在PVN CRF神经元表达hM4Di-mCherry的SHR脑片,可以引起PVN前交感神经元sEPSCs频率明显降低,但不影响其幅度。此外,用含CNO的人工脑脊液灌流预先在PVN CRF神经元表达hM3Dq-eGFP的WKY大鼠脑片,PVN前交感神经元sEPSCs的频率和幅度均无明显差异。PVN CRF神经元表达有hM3Dq-eGFP的WKY大鼠脑片或表达有hM4Di-mCherry的SHR脑片用CNO灌流给药,PVN前交感神经元电流诱发动作电位均无明显变化。结论自发性高血压大鼠PVN CRF神经元活动增强、数量增多,增强前交感神经元sEPSCs,室旁核CRF神经元与前交感神经元之间存在神经调控微环路。

关键词：高血压化学遗传学室旁核 CRF神经元前交感神经元神经微环路

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热应激小鼠肝癌细胞(H_(22))源Exosomes的抗肿瘤免疫机制

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复旦学报（医学版） 2009年第6期36卷 681-686,691页

作者：孙迪杨麟沈宜汪少华向自武重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以E... 详细信息

目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以Exosomes为对照,观察HS-Exo的蛋白组分、产量及其激发宿主抗肝癌免疫应答效应,用Western blot方法检测两者所含有的相关蛋白情况。用MTT法检测免疫小鼠脾细胞增殖和脾淋巴细胞的细胞毒活性。用免疫组化法检测经两者免疫后小鼠肿瘤组织中CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况。结果HS-Exo与Exosomes形态相似,HS-Exo所含的重要免疫蛋白表达增加(P<0.05),用HS-Exo免疫小鼠后比用Exosomes免疫小鼠能更有效地抑制肿瘤生长,更好地诱导淋巴细胞增殖,更显著增强小鼠脾淋巴细胞的细胞毒活性以及更明显的肿瘤治疗作用(P<0.05)。结论热应激制备HS-Exo的方法具有可行性,HS-Exo比Exosomes具有更强的免疫活性和肿瘤治疗作用。

关键词： Exosomes 小鼠肝癌细胞(H22) HS-Exo 肿瘤免疫

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缓激肽对C6胶质瘤细胞IL-1β表达的影响

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中国药理学通报 2007年第9期23卷 1174-1176页

作者：王振华薛一雪中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物教研室辽宁沈阳110001

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶... 详细信息

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶质瘤细胞IL-1β mRNA及细胞培养液中IL-1β的含量。结果RT-PCR结果显示缓激肽作用15min后,IL-1β mRNA的表达水平较对照组升高(P<0.05),然后逐渐下降;放射免疫法结果亦证明了C6胶质瘤细胞在缓激肽作用15min后,其细胞培养液中IL-1β的含量最高。结论缓激肽可刺激大鼠C6胶质瘤细胞中IL-1β的分泌增强,IL-1β的表达上调可能在缓激肽增加血肿瘤屏障通透性的过程中发挥一定作用。

关键词：神经胶质瘤缓激肽白细胞介素-1β 血肿瘤屏障

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BNIP3干扰质粒的构建及鉴定

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南方医科大学学报 2010年第11期30卷 2432-2435页

作者：陈明张兴梅李勃兴孙红宇李晓文高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515 南方医科大学基础医学院生理学教研室广东广州510515

目的构建大鼠Bcl-2/E1B-19K-interacting protein 3(BNIP3)干扰质粒,研究其对BNIP3蛋白表达水平的影响。方法利用Invitrogen公司在线软件设计大鼠BNIP3(NM_053420)干扰片段,合成互补的单链寡核苷酸,蒋退火后形成的双链克隆入pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR表达载体,连接产物转化感受态细胞,增菌,质粒小量提取并测序。将构建的干扰质粒与大鼠BNIP3表达质粒共转染到HEK293细胞中,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测对目的基因的干扰情况。结果构建的2个干扰质粒经测序证实序列正确,与BNIP3表达质粒共转染后显著抑制外源性BNIP3的mRNA和蛋白表达。结论成功构建了大鼠BNIP3干扰质粒,为进一步研究BNIP3的功能打下了基础。

关键词： BNIP3 RNA干扰 HEK293

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二甲双胍可能通过Hippo-YAP通路抑制HER 2阳性乳腺癌细胞的增殖和促进凋亡

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南方医科大学学报 2022年第5期42卷 740-746页

作者：徐钰徐婷熊远锋黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法分别用0、20、40、60、80、100、120μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成... 详细信息

目的观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法分别用0、20、40、60、80、100、120μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成的影响;计算IC50值。以该浓度二甲双胍处理细胞,与空白对照相比,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的改变;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测YAP、TAZ、EGFR、CTGF、CYR61、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及Fibronectin等关键基因的mRNA水平表达;Westernblotting实验检测YAP、TAZ蛋白水平的表达;免疫荧光观察二甲双胍对SKBR3细胞中YAP/TAZ核易位的改变。结果CCK-8和细胞克隆实验显示二甲双胍对SKBR3细胞增殖活力具有明显的抑制作用(P<0.05),呈浓度和时间依赖性。与对照组相比,二甲双胍处理后的SKBR3细胞凋亡明显增加;G1期细胞比例增多,而G2/M期细胞比例减少。Ncadherin、Vimentin和Fibronectin的表达降低,而E-cadherin的表达上调(P<0.05)。qRT-PCR和Westernblotting检测结果显示,二甲双胍处理后YAP、TAZ、EGFR、CTGF和CYR61的表达明显下调(P<0.05)。免疫荧光实验显示:实验组较对照组的YAP或TAZ,其荧光的定位更多地聚集于胞浆,而细胞核中荧光的量明显的减少。结论二甲双胍能抑制HER-2阳性乳腺癌细胞SKBR3的增殖,促进其凋亡和上皮-间质转化,其机制可能与抑制YAP/TAZ的表达和核定位有关。

关键词：二甲双胍 HER-2阳性型乳腺癌 SKBR3细胞 Hippo-YAP通路

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