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复旦学报（医学版） 2009年第6期36卷 681-686,691页

作者：孙迪杨麟沈宜汪少华向自武重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以E... 详细信息

目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以Exosomes为对照,观察HS-Exo的蛋白组分、产量及其激发宿主抗肝癌免疫应答效应,用Western blot方法检测两者所含有的相关蛋白情况。用MTT法检测免疫小鼠脾细胞增殖和脾淋巴细胞的细胞毒活性。用免疫组化法检测经两者免疫后小鼠肿瘤组织中CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况。结果HS-Exo与Exosomes形态相似,HS-Exo所含的重要免疫蛋白表达增加(P<0.05),用HS-Exo免疫小鼠后比用Exosomes免疫小鼠能更有效地抑制肿瘤生长,更好地诱导淋巴细胞增殖,更显著增强小鼠脾淋巴细胞的细胞毒活性以及更明显的肿瘤治疗作用(P<0.05)。结论热应激制备HS-Exo的方法具有可行性,HS-Exo比Exosomes具有更强的免疫活性和肿瘤治疗作用。

关键词： Exosomes 小鼠肝癌细胞(H22) HS-Exo 肿瘤免疫

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二甲双胍可能通过Hippo-YAP通路抑制HER 2阳性乳腺癌细胞的增殖和促进凋亡

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南方医科大学学报 2022年第5期42卷 740-746页

作者：徐钰徐婷熊远锋黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法分别用0、20、40、60、80、100、120μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成... 详细信息

目的观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法分别用0、20、40、60、80、100、120μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成的影响;计算IC50值。以该浓度二甲双胍处理细胞,与空白对照相比,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的改变;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测YAP、TAZ、EGFR、CTGF、CYR61、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及Fibronectin等关键基因的mRNA水平表达;Westernblotting实验检测YAP、TAZ蛋白水平的表达;免疫荧光观察二甲双胍对SKBR3细胞中YAP/TAZ核易位的改变。结果CCK-8和细胞克隆实验显示二甲双胍对SKBR3细胞增殖活力具有明显的抑制作用(P<0.05),呈浓度和时间依赖性。与对照组相比,二甲双胍处理后的SKBR3细胞凋亡明显增加;G1期细胞比例增多,而G2/M期细胞比例减少。Ncadherin、Vimentin和Fibronectin的表达降低,而E-cadherin的表达上调(P<0.05)。qRT-PCR和Westernblotting检测结果显示,二甲双胍处理后YAP、TAZ、EGFR、CTGF和CYR61的表达明显下调(P<0.05)。免疫荧光实验显示:实验组较对照组的YAP或TAZ,其荧光的定位更多地聚集于胞浆,而细胞核中荧光的量明显的减少。结论二甲双胍能抑制HER-2阳性乳腺癌细胞SKBR3的增殖,促进其凋亡和上皮-间质转化,其机制可能与抑制YAP/TAZ的表达和核定位有关。

关键词：二甲双胍 HER-2阳性型乳腺癌 SKBR3细胞 Hippo-YAP通路

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缓激肽对C6胶质瘤细胞IL-1β表达的影响

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中国药理学通报 2007年第9期23卷 1174-1176页

作者：王振华薛一雪中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物教研室辽宁沈阳110001

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶... 详细信息

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶质瘤细胞IL-1β mRNA及细胞培养液中IL-1β的含量。结果RT-PCR结果显示缓激肽作用15min后,IL-1β mRNA的表达水平较对照组升高(P<0.05),然后逐渐下降;放射免疫法结果亦证明了C6胶质瘤细胞在缓激肽作用15min后,其细胞培养液中IL-1β的含量最高。结论缓激肽可刺激大鼠C6胶质瘤细胞中IL-1β的分泌增强,IL-1β的表达上调可能在缓激肽增加血肿瘤屏障通透性的过程中发挥一定作用。

关键词：神经胶质瘤缓激肽白细胞介素-1β 血肿瘤屏障

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乙醛脱氢酶2过表达减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤焦亡发生

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齐齐哈尔医学院学报 2025年第9期 801-806页

作者：张蔚屏方典高琴蚌埠医科大学基础医学院生理学教研室蚌埠医科大学心脑血管基础与临床重点实验室上海海军军医大学第二附属医院

目的探讨ALDH2过表达是否可减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤(I/R)引起的脑细胞焦亡的发生，并分析线粒体氧化应激在其中的可能作用。方法雄性SD大鼠随机分为4组：Sham组、I/R组、ALDH2腺相关病毒过表达组(AAV9-ALDH2+I/R)、AAV9-ALDH2+I/R... 详细信息

目的探讨ALDH2过表达是否可减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤(I/R)引起的脑细胞焦亡的发生，并分析线粒体氧化应激在其中的可能作用。方法雄性SD大鼠随机分为4组：Sham组、I/R组、ALDH2腺相关病毒过表达组(AAV9-ALDH2+I/R)、AAV9-ALDH2+I/R+线粒体复合物1的抑制剂Rotenone组(AAV9-ALDH2+I/R+Rotenone组)。HE染色观察海马区细胞的形态学改变，免疫组化检测海马CA1区脑细胞中ALDH2、NLRP3表达情况，Western Blot检测ALDH2、4-HNE及焦亡关键蛋白GSDMD蛋白表达。结果与I/R组相比，AAV9-ALDH2过表达组海马CA1区细胞存活率增加(P<0.01),ALDH2蛋白表达增加(P<0.01),NLRP3、GSDMD、4-HNE表达下降(P<0.01)。与AAV9-ALDH2+I/R组相比，Rotenone促进线粒体氧化应激未减轻AAV9-ALDH2的保护作用。结论大鼠全脑缺血再灌注损伤模型中，ALDH2过表达通过降低炎症小体关键蛋白生成抑制焦亡发挥保护作用，抑制线粒体氧化应激损伤未取消ALDH2过表达的保护作用。

关键词：脑缺血再灌注损伤焦亡细胞死亡氧化应激线粒体乙醛脱氢酶2

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Ca^(2+)离子对PLA_2结构和功能的影响

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应用化学 2009年第3期26卷 257-262页

作者：刘淑清孙明忠赵宝昌大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室大连116044 大连医科大学基础医学院生物技术系大连116044

摘要从旅顺产白眉蝮蛇(Glyodius blomhoffi Brevicaudaus,GBB)蛇毒(GBBSV)中首次纯化得到了电泳纯和质谱纯磷脂酶A2(GBB-PLA2)。采用电泳、质谱、等离子体发射光谱、紫外、荧光光谱测试技术对GBB-PLA2进行了系统表征。HPLC-ESI-MS法测... 详细信息

摘要从旅顺产白眉蝮蛇(Glyodius blomhoffi Brevicaudaus,GBB)蛇毒(GBBSV)中首次纯化得到了电泳纯和质谱纯磷脂酶A2(GBB-PLA2)。采用电泳、质谱、等离子体发射光谱、紫外、荧光光谱测试技术对GBB-PLA2进行了系统表征。HPLC-ESI-MS法测得的精确分子量为13 965·07 amu,HPLC-ESI-MS/MS法鉴定GBB-PLA2为江浙蝮蛇和尖吻蝮蛇蛇毒PLA2的同源性蛋白,分别得到4个和1个同源性肽段。凝胶过滤、质谱和SDS-PAGE测试技术结果表明,GBB-PLA2以稳定的单体形式存在。电感耦合等离子体发射光谱分析法(ICP-AES)测得每1个磷脂酶A2含有1个Ca2+离子,Ca2+是PLA2活性所必需的。Ca2+的除去使PLA2活性降低90%,外加Ca2+明显加速PLA2水解底物DPPC的速度。Ca2+起稳定PLA2结构的作用,可使GBB-PLA2的热变性温度提高3℃。

关键词：磷脂酶A2 Ca2+离子结构功能

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硫化氢在糖尿病血管内皮细胞功能障碍中的作用及机制

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中国生物化学与分子生物学报 2020年第11期36卷 1281-1287页

作者：常贵全武韧李鸿珠哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室哈尔滨150081

糖尿病的患病率逐年增加,给病人带来巨大的痛苦和经济负担。糖尿病的主要危害在于其并发症,尤其是心血管并发症,是导致死亡的主要原因。内皮细胞功能障碍是发生糖尿病血管并发症的重要因素之一。硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)是继一氧化... 详细信息

糖尿病的患病率逐年增加,给病人带来巨大的痛苦和经济负担。糖尿病的主要危害在于其并发症,尤其是心血管并发症,是导致死亡的主要原因。内皮细胞功能障碍是发生糖尿病血管并发症的重要因素之一。硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)是继一氧化氮(nitric oxide,NO)和一氧化碳(carbon monoxide,CO)之后的第3种气体信号分子,发挥重要的生理与病理生理学效应。目前研究发现,H2S在糖尿病及糖尿病并发症中发挥着重要的保护作用,这已成为国内外研究的热点。H2S的生物利用障碍被认为是内皮细胞炎症及其相关的内皮功能障碍的新机制。H2S通过抑制内皮依赖性舒张反应受损、炎症反应、氧化应激、细胞凋亡、细胞自噬等减轻糖尿病血管内皮细胞功能障碍。本篇综述就H2S在糖尿病血管内皮细胞功能障碍中的作用及机制研究进展进行阐述。

关键词：硫化氢血管内皮细胞糖尿病

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IgA肾病的发病机制研究进展

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大连医科大学学报 2011年第5期33卷 503-506页

作者：曾小艳李芳大连医科大学基础医学院免疫教研室辽宁大连116044

IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是以IgA或IgA为主的免疫球蛋白弥漫沉积在肾小球系膜区及毛细血管袢,临床表现和病理改变各异的临床-病理综合征。目前认为在广泛应用肾活检技术的国家,本病是最常见的慢性肾小球疾病,也是引起终末期肾病(e... 详细信息

IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是以IgA或IgA为主的免疫球蛋白弥漫沉积在肾小球系膜区及毛细血管袢,临床表现和病理改变各异的临床-病理综合征。目前认为在广泛应用肾活检技术的国家,本病是最常见的慢性肾小球疾病,也是引起终末期肾病(end-stage renaldisease,ESRD)的主要病因之一。迄今为止,IgA肾病的发病机制尚不十分清楚。本文就目前IgA肾病发病的现代医学研究的进展进行综述。

关键词： IgA肾病发病机制 IgA IgA1

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ATP敏感性钾通道和线粒体通透转换孔参与白藜芦醇苷的心肌保护作用(英文)

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中国药理学与毒理学杂志 2009年第2期23卷 81-88页

作者：张利萍杨长瑛王莹萍关玥徐瑛张翼河北医科大学基础医学院生理学教研室河北石家庄050017

目的探讨白藜芦醇苷(Poly)对大鼠缺血再灌注(I-R)心肌损伤的保护作用及其机制。方法应用Langendorff室技术制备离体大鼠心脏I-R损伤模型。雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、Poly(25, 50和75μmol.L-1)组、格列本脲(Gli) +Poly组、5-... 详细信息

目的探讨白藜芦醇苷(Poly)对大鼠缺血再灌注(I-R)心肌损伤的保护作用及其机制。方法应用Langendorff室技术制备离体大鼠心脏I-R损伤模型。雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、Poly(25, 50和75μmol.L-1)组、格列本脲(Gli) +Poly组、5-羟基癸酸(5-HD) +Poly组和苍术苷(Atr) +Poly组。对照组心脏由K-H液灌流110 min;模型组由K-H液灌流20 min后,停灌30 min,复灌60min;Poly组在I-R处理前用含不同浓度Poly的K-H液灌流10 min;Gli +Poly和5-HD+Poly组在I-R前分别用含Gli (10μmol.L-1)和5-HD(100μmol.L-1)的K-H液灌流5 min,再加入Poly (50μmol.L-1)灌流10 min;Atr +Poly组用含Poly(50μmol.L-1)K-H液灌流10 min及停灌30 min后,先用含Atr(20μmol.L-1)的K-H液灌流15 min,然后改用K-H液灌流。分别记录各组停灌前、停灌30 min和复灌60 min内的左心室舒张末压(LVEDP)、左心室舒张压(LVDP)、左心室等容期压力最大变化速率(±dp/dtmax)和冠脉流量(CF)等心功能指标。心脏复灌60 min后,用氯化三苯基四氮唑染色法测定心肌梗死面积,透射电镜下检测心肌超微结构变化。结果缺血前各组心功能参数无明显变化。与模型组相比,Poly可浓度依赖性地促进大鼠I-R后心功能的恢复,预防I-R损伤。复灌60 min后,Poly组大鼠心脏LVDP,±dp/dtmax和CF明显高于模型组;LVEDP则低于模型组;缺血前给予Poly(50μmol.L-1)10 min可明显减小I-R后心肌梗死面积,并改善心肌超微结构。Gli, 5-HD和Atr可阻断Poly对I-R心脏心功能参数和心肌梗死面积等的保护作用。结论 Poly具有明显的抗心肌I-R损伤作用,其心脏保护作用可能与其增加细胞膜和线粒体膜ATP敏感性钾通道开放和抑制线粒体通透转换孔开放有关。

关键词：白藜芦醇苷钾通道线粒体通透转换孔心肌再灌注损伤

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亚砷酸钠对PC12细胞增殖、凋亡及Hippo-YAP通路的影响

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中国药理学通报 2022年第11期38卷 1705-1710页

作者：朱卫李成刘宇吴松彭博刘晓红王宏健王东艳杨莉潘艳伶潘际刚贵州医科大学基础医学院生理学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学临床医学院中医学教研室贵州贵阳550025

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对PC12细胞增殖、凋亡及Hippo-YAP信号通路的影响。方法以PC12细胞为研究对象,分别设立对照组、不同浓度(20、40、60μmol·L^(-1))NaAsO_(2)处理组。流式细胞术、Western blot法来检测NaAsO_(2)对PC12... 详细信息

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对PC12细胞增殖、凋亡及Hippo-YAP信号通路的影响。方法以PC12细胞为研究对象,分别设立对照组、不同浓度(20、40、60μmol·L^(-1))NaAsO_(2)处理组。流式细胞术、Western blot法来检测NaAsO_(2)对PC12细胞周期、细胞凋亡率、细胞凋亡相关蛋白(p53、BAX、BCL-2)以及Hippo-YAP信号通路相关蛋白(MST1、p-MST1、LATS1、p-LATS1、YAP和p-YAP)的影响。结果与对照组相比,40μmol·L^(-1) NaAsO_(2)处理24 h后,PC12细胞中G_(0)/G_(1)期比例明显降低(P<0.01),而S期比例明显增加(P<0.05),60μmol·L^(-1) NaAsO_(2)明显降低G_(0)/G_(1)期、G_(2)/M期比例(P<0.05),而增加S期比例(P<0.01);细胞凋亡率及凋亡相关蛋白BAX和p53的表达被40μmol·L^(-1) NaAsO_(2)明显增加(P<0.05),而BCL-2蛋白表达被明显降低(P<0.01);60μmol·L^(-1) NaAsO_(2)明显降低MST1、LATS1、YAP蛋白表达(P<0.05);不同浓度的NaAsO_(2)则明显上调p-MST1、p-LATS1、p-YAP蛋白表达(P<0.05)。结论NaAsO_(2)可干扰PC12细胞周期、诱导PC12细胞凋亡、激活Hippo-YAP信号通路。

关键词：亚砷酸钠 PC12细胞增殖细胞周期细胞凋亡 Hippo-YAP通路

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月见草素B通过调控P53抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移

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中国中药杂志 2023年第14期48卷 3904-3912页

作者：罗茂红何娅李红陈腾祥雷珊张金娟王璐贵州医科大学基础医学院生理学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院机能学实验中心贵州贵阳550025

通过体外细胞培养、网络药理学和分子对接,研究月见草素B(oenothein B,OEB)对乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。体外细胞实验发现OEB抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成能力,并促进乳腺癌细胞的凋亡... 详细信息

通过体外细胞培养、网络药理学和分子对接,研究月见草素B(oenothein B,OEB)对乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。体外细胞实验发现OEB抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成能力,并促进乳腺癌细胞的凋亡和凋亡小体的形成,同时OEB抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移。利用SwissTargetPrediction数据库获得OEB的靶点,在GeneCards数据库获得乳腺癌作用靶点,在Venny 2.1软件中分别录入OEB与乳腺癌的作用靶点,获得OEB与乳腺癌的共同作用靶点韦恩图。在STRING数据库中,输入OEB与乳腺癌共同靶点,构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,将PPI网络录入Cytoscape 3.7.2软件进行网络拓扑结构分析,根据蛋白关联强度筛选关键靶点,并对关键靶点进行KEGG通路富集分析;使用AutoDock软件对OEB和筛选的关键靶点进行分子对接验证,发现OEB与P53的活性口袋稳定结合,同时OEB促进P53蛋白的表达;沉默P53后MCF-7、MDA-MB-231细胞活力和迁移能力增加,加入OEB处理后逆转了这种变化。因此该研究表明OEB可抑制乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞凋亡,这可能与靶向调控P53有关。

关键词：乳腺癌细胞月见草素B 增殖凋亡迁移

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