检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2025年第05期 730-740页

作者：冯淑琪金国荣薛群航贺敏王泽航要嘉欣陈龙王玉姣张安秀何生周冰蕊解军山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室出生缺陷与细胞再生山西省重点实验室煤炭环境致病与预防教育部重点实验室山西省临床细胞治疗转化试点基地

糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN）是糖尿病最严重的并发症之一，是终末期肾病的主要原因。DN患者的病理机制与长期血糖控制不佳密切相关，持续高血糖状态通过诱导肾内氧化应激反应，引发足细胞损伤及肾小管间质炎症浸润，进而导... 详细信息

糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN）是糖尿病最严重的并发症之一，是终末期肾病的主要原因。DN患者的病理机制与长期血糖控制不佳密切相关，持续高血糖状态通过诱导肾内氧化应激反应，引发足细胞损伤及肾小管间质炎症浸润，进而导致蛋白尿、肾小球硬化和纤维化等不可逆肾损伤。人脐带间充质干细胞（human umbilical cord derived mesenchymal stem cells, hUC-MSCs）因其良好的抗氧化应激作用有望为DN提供新的解决方案。本研究建立了DN小鼠模型，通过尾静脉注射hUC-MSCs (1×106/只)来达到治疗DN的目的。空腹血糖和腹腔注射葡萄糖耐量实验（intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT）数据显示，hUC-MSCs能显著降低DN小鼠的空腹血糖水平（22.5±3.0 vs 14.7±1.1,P<0.01）并提高其血糖调节能力（P<0.05）。同时，DN小鼠经hUC-MSCs治疗后肾功能得到改善并且氧化应激产物水平下降，例如尿素氮（blood urea nitrogen, BUN）、尿肌酐（urinary creatinine, Ucr）、尿蛋白（urinary protein, PRO）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）和丙二醛（malondialdehyde, MDA）的水平均显著降低（P<0.05）。通过苏木素-伊红（hematoxylin-eosin staining, H&E）染色、糖原（periodic acid-schiff stain, PAS）染色和天狼星红染色对肾组织形态学进行分析，经hUC-MSCs治疗后DN小鼠的肾小球间质增生、肾小球肥大和肾小管炎性间质浸润等病理状态均得到减轻。免疫组化、Real-time RT-PCR和免疫印迹等结果显示，hUC-MSCs治疗可降低氧化应激主要相关蛋白酶NADPH氧化酶4（NADPH oxidase 4,NOX4）和硫氧还蛋白相互作用蛋白（thioredoxin interacting protein, TXNIP）的表达（P<0.05）,减少活性氧（reactive oxygen species, ROS）的产生。同时，在体外实验中选择人肾皮质近曲小管上皮细胞（human renal proximal tubular epithelial cells, HK-2 cells）进行验证，使用高糖处理，采用hUC-MSCs的条件培养基（mesenchymal stem cell-conditioned medium, MSC-CM）进行处理，免疫印迹结果显示，NOX4和TXNIP的表达都得到抑制（P<0.05）,ROS表达降低。综上，hUC-MSCs治疗可以降低DN小鼠的血糖水平，改善肾功能下降以及病理损伤，其作用可能与下调NOX 4的表达从而抑制TXNIP介导的氧化应激有关。

关键词：糖尿病肾病人脐带间充质干细胞氧化应激 NADPH氧化酶4 硫氧还蛋白相互作用蛋白

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重组肌肉抑制素功能分析及其对鸡肌肉发育的抑制作用

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生物化学与生物物理学报 2003年第11期35卷 1016-1022页

作者：杨威王琨陈岩张勇黄波朱大海哈尔滨工业大学分子与细胞发育生物学实验室中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室哈尔滨150001 北京100005

肌肉抑制素 (myostatin)为TGF β超家族成员 ,具有典型的TGF β家族成员特有的分子结构与功能。为了深入阐明肌肉抑制素的作用机制 ,研究了重组肌肉抑制素蛋白对鸡胚成肌细胞和小鼠C2 C1 2 成肌细胞增殖与分化的作用 ,同时制备了肌肉抑... 详细信息

肌肉抑制素 (myostatin)为TGF β超家族成员 ,具有典型的TGF β家族成员特有的分子结构与功能。为了深入阐明肌肉抑制素的作用机制 ,研究了重组肌肉抑制素蛋白对鸡胚成肌细胞和小鼠C2 C1 2 成肌细胞增殖与分化的作用 ,同时制备了肌肉抑制素特异性抗体。实验结果表明 ,重组肌肉抑制素对于成肌细胞的增殖过程具有极强的抑制作用 ,主要表现为抑制细胞周期由G1 期向S期的过渡 ,细胞生长速度显著变慢 ;同时重组肌肉抑制素也抑制成肌细胞分化为多核的融合肌管细胞 ,抑制肌肉分化标志myogenin和MHC的表达。由重组蛋白质制备的抗体能够特异性地识别人、小鼠、大鼠和鸡肌肉组织的内源肌肉抑制素。此外 ,通过免疫荧光技术还证实 ,肌肉抑制素主要定位于胞液中

关键词：肌肉抑制素细胞增殖分化抗体制备细胞定位

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急性胰腺炎肺损伤大鼠肺组织中Cav-1与水通道蛋白1、5的表达及清胰汤的治疗作用

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中华医学杂志 2010年第36期90卷 2564-2569页

作者：王钢陈海龙任凤李雅琼李洁大连医科大学第一附属医院普外科 116011 国家医学考试中心大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学实验室

目的观察窖蛋白（Cav）1和水通道蛋白（AQP）1、5在急性胰腺炎肺损伤大鼠肺组织中的表达及定位,探讨其在急性胰腺炎肺损伤发病过程中的作用及清胰汤的可能作用机制.方法将40只Wistar大鼠分为假手术组、模型组、地塞米松治疗组、清胰... 详细信息

目的观察窖蛋白（Cav）1和水通道蛋白（AQP）1、5在急性胰腺炎肺损伤大鼠肺组织中的表达及定位,探讨其在急性胰腺炎肺损伤发病过程中的作用及清胰汤的可能作用机制.方法将40只Wistar大鼠分为假手术组、模型组、地塞米松治疗组、清胰汤治疗组.经胰胆管逆行注射脱氧胆酸钠建立大鼠急性胰腺炎肺损伤模型.24 h后采血和肺组织,检测血清淀粉酶、肺湿/干重比值和肺组织病理切片判定损伤程度 RT-PCR检测肺组织中Cav-1和AQP1、AQP5的mRNA表达提取脂筏,Western印迹检测Cav-1和AQP1、AQP5在脂筏内外的定位与表达.结果模型组大鼠血清淀粉酶[（6152±502）U/L]、肺湿/干重比值（7.98±0.41）和肺组织病理损伤程度均明显升高.肺组织Cav-1和AQP1、AQP5均有表达,但在模型组mRNA表达水平均下调.Cav-1在脂筏内外均有表达,以脂筏内为主,AQP1完全定位在脂筏上,而AQP5则定位在脂筏外,三者在脂筏内外的分布状态没有改变,但表达量在模型组均明显下降.与模型组相比,地塞米松和清胰汤治疗组大鼠血清淀粉酶、肺湿/干重比值和肺组织病理损伤程度均下降肺组织Cav-1和AQP1、AQP5的mRNA表达上调,在脂筏内外的表达水平有不同程度的恢复.结论 Cav-1和AQP1定位在脂筏,而AQP5定位在脂筏外,三者的表达下调与急性胰腺炎肺损伤密切相关.地塞米松和清胰汤都能够明显上调Cav-1和AQP1、AQP5的表达,有效减轻肺损伤程度.

关键词：胰腺炎,急性坏死性呼吸窘迫综合征,成人型 Caveolin-1 水通道蛋白

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调控红细胞生成的转录因子及其作用

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中华血液学杂志 2001年第5期22卷 275-277页

作者：陈渝萍刘德培薛社普中国协和医科大学基础医学院细胞生物室国家医学分子生物学重点实验室

目的研究血瘦素水平对儿童青春期发育的作用.方法单纯性肥胖和健康学生各300名,调查男生首次遗精和女生月经初潮时间,测定血瘦素、性激素、生长激素和胰岛素水平.结果随年龄增长,瘦素在男生呈低→高→低变化,肥胖组:(1.04±0.21) nm... 详细信息

目的研究血瘦素水平对儿童青春期发育的作用.方法单纯性肥胖和健康学生各300名,调查男生首次遗精和女生月经初潮时间,测定血瘦素、性激素、生长激素和胰岛素水平.结果随年龄增长,瘦素在男生呈低→高→低变化,肥胖组:(1.04±0.21) nmol/L→(1.20±0.27) nmol/L→(0.66±0.10) nmol/L,对照组:(0.31±0.06) nmol/L→(0.45±0.10) nmol/L→(0.19±0.04) nmol/L;在女生呈增高趋势,肥胖组从(0.89±0.15) nmol/L增至(1.39±0.23) nmol/L,对照组从(0.46±0.08) nmol/L增至(0.88±0.18) nmol/L.各组性激素呈增高趋势.生长激素呈某一年龄突增,且男女不同(男生14～15岁,女生13～14岁).各年龄肥胖组瘦素和胰岛素高于对照组;男生各年龄肥胖组生长激素低于对照组.男女肥胖组血瘦素水平高于对照组,男:(0.71±0.17) nmol/L与(0.30±0.04) nmol/L,女:(1.11±0.21) nmol/L与(0.70±0.18) nmol/L;其初潮/首次遗精时间提前,男:(12.5±1.2)岁与(13.2±1.2)岁,女:(11.6±0.8)岁与(12.8±0.9)岁.女生瘦素水平高于男生,其初潮时间早于男生首次遗精时间.肥胖组男生的睾酮与瘦素呈负相关,女生的雌二醇与瘦素呈正相关,男生的生长激素与瘦素呈负相关,女生的生长激素与瘦素呈正相关;对照组女生的胰岛素与瘦素呈正相关.结论瘦素对青春期的启动可能有重要作用,对女性可能比男性更为重要;瘦素与生长激素相关关系的两性差异可能是造成男女生长突增时间不同的原因之一;瘦素与性激素相关关系的两性差异可能是造成男女首次遗精/初潮时间不同的原因之一.

关键词：红细胞生长转录因子调控作用红系早期分化

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鸡基因组计划及在遗传学研究中的应用

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遗传 2006年第8期28卷 1002-1008页

作者：赵心怡杨威张勇朱大海哈尔滨工业大学生命科学与工程系分子与细胞发育生物学实验室哈尔滨150001 中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

鸡,以其独特的生物学特性,成为研究许多生物学问题的重要模式生物。而在长期选育中形成的肉鸡和蛋鸡两大品系/种则是研究许多遗传性状的分子机制的理想模型。鸡基因组计划的完成,极大推动了以鸡作为模式生物的研究与利用。文章重点介绍... 详细信息

鸡,以其独特的生物学特性,成为研究许多生物学问题的重要模式生物。而在长期选育中形成的肉鸡和蛋鸡两大品系/种则是研究许多遗传性状的分子机制的理想模型。鸡基因组计划的完成,极大推动了以鸡作为模式生物的研究与利用。文章重点介绍了鸡基因组学的研究进展,和利用基因组相关信息对鸡的不同品种数量性状进行遗传学研究的方法策略;并阐明了以鸡作为模式生物,利用基因组学的信息进行发育和遗传学研究的广阔前景。

关键词：鸡基因组肉鸡和蛋鸡基因组作图

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基于16S rRNA基因扩增子测序技术研究云南野生小型哺乳动物肠道菌群多样性

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北京大学学报（自然科学版） 2022年第2期58卷 326-336页

作者：苏佳何锴连春盎张雪余珂北京大学深圳研究生院环境与能源学院深圳518055 南方医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室广东省单细胞技术与应用重点实验室广州510515

以生活在同一生境,但具有不同进化关系和不同食性的野生哺乳类动物(鼠科、猬科和鼩鼱科)为研究对象,通过16S rRNA基因扩增子测序,分析和比较其肠道菌群。共识别出5378个操作分类单位(OTUs),主要隶属Firmicutes(40.55%),Proteobacteria(3... 详细信息

以生活在同一生境,但具有不同进化关系和不同食性的野生哺乳类动物(鼠科、猬科和鼩鼱科)为研究对象,通过16S rRNA基因扩增子测序,分析和比较其肠道菌群。共识别出5378个操作分类单位(OTUs),主要隶属Firmicutes(40.55%),Proteobacteria(34.60%)和Bacteroidetes(13.67%)。Firmicutes和Bacteroidetes是鼠科的优势菌门,Proteobacteria是猬科和鼩鼱科的优势菌门。多样性分析表明,鼠科、猬科与鼩鼱科的肠道微生物多样性及群落结构具有显著性差异;LEfSe分析表明,鼠科中存在更多与复杂碳水化合物发酵相关的细菌,猬科和鼩鼱科中含较多氨基酸发酵菌;益生菌(如Lactobacillus和Lactococcus等)共存于这3类野生小型哺乳类动物中,起调控宿主健康的作用。研究结果揭示,宿主食性与进化关系影响着野生小型哺乳动物肠道菌群结构,而肠道菌群可能在多种方面对宿主起益生作用。

关键词：野生小型哺乳动物肠道菌群 16S rRNA基因扩增子测序宿主饮食

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基于电喷雾-四极杆-飞行时间质谱的高聚合度人乳寡糖异构体结构解析

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分析化学 2019年第7期47卷 1106-1113页

作者：李欣李佳齐金高娃于龙郭志谋梁鑫淼刘帅闫竞宇大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室

人乳寡糖是一类存在于人乳中的天然益生元,在促进婴儿肠道菌群生长、完善免疫系统功能和抵抗病原体侵染过程中发挥着不可替代的作用。人乳寡糖的功能与其结构密切相关,但其结构组成复杂、连接方式多样,存在大量的同分异构体,且随着寡糖... 详细信息

人乳寡糖是一类存在于人乳中的天然益生元,在促进婴儿肠道菌群生长、完善免疫系统功能和抵抗病原体侵染过程中发挥着不可替代的作用。人乳寡糖的功能与其结构密切相关,但其结构组成复杂、连接方式多样,存在大量的同分异构体,且随着寡糖聚合度的升高,同分异构体的数目和复杂性都急剧增加。因此,高聚合度的寡糖异构体的结构解析是人乳寡糖研究的难点之一,对寡糖的生物功能研究具有重要意义。本研究采用电喷雾-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q/TOF-MS),在负离子模式下对分离获得的18个高聚合度人乳寡糖(其中3个为首次报道)进行了结构解析,探讨了同组异构体之间碎片离子的差异,并详细总结了寡糖异构体的裂解规律,为复杂的高聚合度人乳寡糖异构体的结构解析及新型糖结构的发现提供了科学依据。

关键词：人乳寡糖同分异构体结构解析电喷雾-四极杆-飞行时间质谱

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急性胰腺炎肺损伤大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体-1与窖蛋白-1的表达及清胰汤的治疗作用

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中华实验外科杂志 2010年第10期27卷 1485-1488页

作者：王钢陈海龙唐颖任凤李洁姜妙娜大连医科大学附属第一医院普外科 116011 大连医科大学附属第二医院病理科大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学实验室大连医科大学基础医学院病理生理学教研室

目的观察肿瘤坏死因子受体-1（TNFR-1）和窖蛋白-1（Cav-1）在急性胰腺炎肺损伤大鼠肺组织的表达及功能,探讨清胰汤的可能作用机制.方法 Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松治疗组、清胰汤治疗组.经胰胆管逆行注射脱氧胆酸... 详细信息

目的观察肿瘤坏死因子受体-1（TNFR-1）和窖蛋白-1（Cav-1）在急性胰腺炎肺损伤大鼠肺组织的表达及功能,探讨清胰汤的可能作用机制.方法 Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松治疗组、清胰汤治疗组.经胰胆管逆行注射脱氧胆酸钠建立大鼠急性胰腺炎肺损伤模型.24 h后采血和肺组织,检测血清淀粉酶、肺湿/干重比值和肺组织病理切片判定损伤程度放免法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot分别检测肺组织中TNFR-1和Cav-1的mRNA及蛋白表达.结果模型组血清淀粉酶、肺湿/干重比值、血清TNF-α（4.82±0.14比2.96±0.30,P＜0.01）和肺组织病理损伤程度均明显升高肺组织TNFR-1的mRNA表达上调（1.29±0.15比0.43±0.05,P＜0.01）,而Cav-1的mRNA表达则下调（1.14±0.10比2.00±0.10,P＜0.01）脂筏内外表达的TNFR-1均升高,尤以脂筏内升高明显,而Cav-1则表达下降.与模型组比较,地塞米松和清胰汤组的血清淀粉酶、肺湿/干重比值、血清TNF-α（地塞米松组：3.79±0.11,清胰汤组：3.66±0.10,模型组：4.82±0.14,P＜0.01）和肺组织病理损伤程度均下降肺组织TNFR-1的mRNA表达下降（地塞米松组：0.48±0.01,清胰汤组：0.49±0.02,模型组：1.29±0.15,P＜0.01）,而Cav-1的mRNA则表达升高（地塞米松组：1.66±0.06,清胰汤组：1.52±0.04,模型组：1.14±0.10,P＜0.01）脂筏内外表达的TNFR-1均下降,而Cav-1则上升.结论 TNF-α/TNFR-1的表达增加和Cav-1表达的下降与急性胰腺炎肺损伤密切相关.地塞米松和清胰汤都能够明显降低TNFR-1的表达并上调Cav-1的表达,有效减轻肺损伤程度,这可能是清胰汤治疗急性胰腺炎肺损伤的作用机制之一.

关键词：急性胰腺炎急性肺损伤 TNFR-1 Caveolin-1

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基因前定点敲入FLAG标签表达的FLAG-SND1蛋白参与胞内应激颗粒的形成

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中国生物化学与分子生物学报 2019年第12期35卷 1400-1408页

作者：张楠崔晓腾赵春妍苏超任媛媛杨洁高星杰天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系教育部免疫微环境与疾病重点实验室天津市细胞与分子免疫学重点实验室天津300070

CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-Cas9 nuclease)基因编辑技术是近年来新兴的一种可以实现基因特异性敲除和敲入的技术。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑系统,将3×FLAG标签定点敲入HeLa细胞SND1基因前方,使细胞内源性表达的SND1蛋白带有3×FLAG标签,并观察SND1与应激颗粒及加工体的定位情况。设计针对SND1基因起始密码子ATG附近的sgRNA,以px459为表达载体,构建出重组真核表达质粒。设计含有3×FLAG及待插入位置上下游150 bp同源臂的序列,经公司合成获得重组质粒。将2个质粒共同转染HeLa细胞,使用嘌呤霉素筛选阳性细胞,挑取单克隆后培养。Western印迹表明,细胞表达3×FLAGSND1融合蛋白质。提取细胞基因组DNA进行测序。测序无误获得稳定株后,用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,发现与WT细胞相比无显著性差异。同时,使用05 mmol/L亚砷酸钠处理,细胞发生氧化应激,eIF2α蛋白磷酸化增加,胞浆中出现应激颗粒,SND1与应激颗粒标志蛋白TIAR存在共定位现象,但不存在与加工体蛋白DCP1α的共定位。

关键词： SND1 CRISPR/Cas9基因编辑系统 HeLa细胞基因敲入应激颗粒

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人α1,3-岩藻糖基转移酶VII荧光真核表达载体的构建及鉴定

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生殖与避孕 2006年第12期26卷 727-730,744页

作者：张媛媛王忠山刘帅燕秋大连医科大学生化与分子生物学教研室辽宁省糖生物学与糖生物工程重点实验室大连116027 吉林大学基础医学院细胞生物学教研室长春130021

目的:构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pIRES2-EGFP-FUT7真核表达载体。方法:采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶VII(FUT7)全长基因,克隆至pMD18-TSimple载体后,将FUT7亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体并进行鉴定。通过脂质体转染... 详细信息

目的:构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pIRES2-EGFP-FUT7真核表达载体。方法:采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶VII(FUT7)全长基因,克隆至pMD18-TSimple载体后,将FUT7亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体并进行鉴定。通过脂质体转染到子宫内膜RL95-2细胞中,荧光显微镜下观察并经RT-PCR检测FUT7的表达。结果:测序及酶切鉴定证明获得人全长FUT7基因,FUT7基因正确插入pIRES2-EGFP中,在荧光显微镜下观察到了绿色荧光蛋白在RL95-2细胞中的表达,半定量RT-PCR检测结果显示FUT7的表达明显增加。结论:成功构建了绿色荧光蛋白为报告基因的FUT7真核表达载体,并检测到在RL95-2细胞中的表达,为研究FUT7及其合成的糖抗原sLex在胚胎着床中的作用奠定了基础。

关键词： α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(FUT7) 绿色荧光蛋白基因克隆基因表达

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