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2 篇 哲学
- 2 篇 哲学
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8 篇 细胞增殖
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机构

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42 篇 大连医科大学附属...
37 篇 大连医科大学附属...
22 篇 山西医科大学
19 篇 新疆医科大学
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10 篇 大连大学附属中山...
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8 篇 中国协和医科大学
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作者

55 篇 孔英
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27 篇 李芳
25 篇 韩笑
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20 篇 黄敏
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19 篇 李霞
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15 篇 董明
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14 篇 李传刚
14 篇 李墨林
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语言

819 篇 中文

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miR-196b-5p影响人绒毛膜癌中的作用及分子机制研究

miR-196b-5p影响人绒毛膜癌中的作用及分子机制研究

引用

中国生理学会生殖科学专业委员会、中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会

作者：郭珍珍韩笑刘欢孙倩男隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

目的：miR-196b-5p 在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用,如子宫颈癌、胃癌、结肠癌、口腔癌,本研究拟探讨mir-196b-5p在人绒毛膜癌细胞中的作用及分子机制。材料与方法：选取人绒毛膜癌细胞JAR、BEWO细胞系为研究模型,用脂质体转染上调/...

目的：miR-196b-5p 在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用,如子宫颈癌、胃癌、结肠癌、口腔癌,本研究拟探讨mir-196b-5p在人绒毛膜癌细胞中的作用及分子机制。材料与方法：选取人绒毛膜癌细胞JAR、BEWO细胞系为研究模型,用脂质体转染上调/下调JAR、BEWO细胞miR-196b-5p,Real-Time PCR检测miR-196b-5p达水平的变化,CCK8实验检测调控miR-196b-5p对JAR、BEWO细胞增殖能力的影响;用流式细胞术检测调控miR-196b-5p对JAR、BEWO细胞凋亡及细胞周期的影响;Tra nswell实验及细胞划痕实验检测调控miR-196b-5p对JAR、BEWO细胞侵袭及迁移能力的影响;Western-blot、双荧光素酶报告基因检测miR-196b-5p与靶基因MAP3K1 的靶向关系;Western-blot检测MAP3K1-caspase3-JNK信号通路的变化。实验结果：在人绒毛膜癌细胞JAR、BEWO细胞中过表达miR-196b-5p将抑制细胞增殖、促进实验结果：在人绒毛膜癌细胞JAR、BEWO 细胞中过表达miR-196b-5p 将抑制细胞增殖凋亡,并将其阻断在G0/S 期;miR-196b-5p 过表达抑制JAR、BEWO 细胞的迁移、侵袭;Western-blot、双荧光素酶报告基因验证miR-196b-5p直接靶向MAP3K1 基因;Western-blot检测上调JAR、BEWO细胞中miR-196b-5p将上调MAP3K1及MAPK信号通路中的caspase3、JNK表达。结论：Hsa-miR-196b-5p通过靶向MAP3K1 及MAPK 信号通路来影响人绒毛膜癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力。

关键词：

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调控子宫内膜癌细胞miR-21-5p表达对增殖、迁移、侵袭的影响

调控子宫内膜癌细胞miR-21-5p表达对增殖、迁移、侵袭的影响

引用

2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会

作者：马艳妮张漫陈万方韩笑谢云鹏隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

目的:探讨miR-21-5p在不同子宫内膜癌细胞Ishikawa及HEC-1A中的表达差异,上调或下调miR-21-5p对细胞增殖、迁移及侵袭的影响。探寻miR-21-5p的直接靶标分子,为子宫内膜癌的诊断及治疗提供新的靶点。方法:Real-time PCR检测不同子宫内膜... 详细信息

目的:探讨miR-21-5p在不同子宫内膜癌细胞Ishikawa及HEC-1A中的表达差异,上调或下调miR-21-5p对细胞增殖、迁移及侵袭的影响。探寻miR-21-5p的直接靶标分子,为子宫内膜癌的诊断及治疗提供新的靶点。方法:Real-time PCR检测不同子宫内膜癌细胞Ishikawa及HEC-1A中miR-21-5p的表达差异;在Ishikawa及HEC-1A细胞利用脂质体转染法分别转染miR-21-5p mimics(上调miR-21-5p)及其对照(Negative control)或miR-21-5p inhibitor(下调miR-21-5p)及其对照(Inhibitor NC),Real-time PCR检测miR-21-5p表达变化,CCK8、Transwell及细胞划痕实验分别检测上调/下调miR-21-5p对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;利用靶基因预测软件筛选与侵袭转移相关的miR-21-5p靶基因;上调Ishikawa和HEC-1A细胞中miR-21-5p表达检测靶基因mRNA及蛋白表达变化;构建miR-21-5p靶基因3'UTR野生型克隆载体和双荧光素酶重组载体分析miR-21-5p与预测基因的靶向关系。结果:miR-21-5p在HEC-IA细胞中的表达高于Ishikawa细胞;miR-21-5p mimics上调Ishikawa及HEC-1A细胞miR-21-5p表达能够促进细胞的增殖、迁移及侵袭能力能力;miR-21-5pinhibitor下调Ishikawa及HEC-1A细胞miR-21-5p的表达下降能抑制细胞的迁移及侵袭能力;TargetscanHuman7.1预测显示miR-21-5p"种子"区"UAUUCGA",筛选出与侵袭转移相关的miR-21-5p的靶基因PITX2、VCL、JAG1和FBXO11;上调HEC-1A细胞miR-21-5p表达靶基因PTTX2、VCL、JAG1和FBXO11mRNA与对照组相比呈显著降低趋势,PITX2及VCL蛋白的表达降低;下调miR-21-5p表达可促进PITX2和VCL蛋白表达;靶基因3'UTR区克隆载体、野生型及突变型重组载体测序结果与预想一致;双荧光素酶结果显示,PITX2、VCL、JAG1和FBXO17是miR-21-5p的直接靶基因。

关键词： miR-21-5p 子宫内膜癌增殖迁移侵袭

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ST6Gal-Ⅰ介导细胞表面N-聚糖唾液酸化在肝癌免疫逃逸中的作用及分子机制研究

ST6Gal-Ⅰ介导细胞表面N-聚糖唾液酸化在肝癌免疫逃逸中的作用及...

引用

中国生物工程学会第十一届学术年会暨2017年全国生物技术大会

作者：王立萍张嘉宁汪淑晶大连医科大学基础医学院生化教研室

ST6Gal-Ⅰ是20种唾液酸转移酶之一,是催化α2-6连接的唾液酸化,其在不同肿瘤中有不同的作用。本实验室前期研究发现,ST6Gal-Ⅰ在人肝癌组织或肝癌细胞中表达均增加,且在肝癌的发生发展中发挥重要作用。然而,ST6Gal-Ⅰ在肝癌免疫逃逸中... 详细信息

ST6Gal-Ⅰ是20种唾液酸转移酶之一,是催化α2-6连接的唾液酸化,其在不同肿瘤中有不同的作用。本实验室前期研究发现,ST6Gal-Ⅰ在人肝癌组织或肝癌细胞中表达均增加,且在肝癌的发生发展中发挥重要作用。然而,ST6Gal-Ⅰ在肝癌免疫逃逸中的作用尚不清楚。因此,本研究以人肝癌细胞系HepG2为模型,探讨过表达ST6Gal-Ⅰ在人肝癌免疫逃逸中的作用及参与肿瘤免疫调节的分子机制,同时初步探索过表达ST6Gal-Ⅰ在肝癌微环境中对T细胞功能的影响。通过CCK8、Transwell以及TUNEL的结果显示,过表达ST6Gal-Ⅰ可增强HepG2细胞的增殖及迁移能力,抑制免疫细胞引起的凋亡。Western-blot结果显示,过表达ST6Gal-Ⅰ使CD147及Fas蛋白表面α2,6连接的唾液酸增多,与CD8T细胞（Jurkat）共孵育后,过表达ST6Gal-Ⅰ组CD147、MMP2/7/9、抗凋亡蛋白Bcl-2及FasL的表达明显增加,而促凋亡蛋白Bax和Bad表达明显减弱。基于细胞共孵育系统,我们发现肿瘤源性的ST6Gal-Ⅰ可抑制T细胞的增殖并促进其凋亡;同时Western-blot结果显示,ST6Gal-Ⅰ上调使Jurkat细胞内Fas、p-GSK-3β、Bax、Bad、cytochrome c、caspase9和caspase3表达明显增加,而PI3K、p-Akt、NF-κB（p65）和Bcl-2表达明显降低,但FasL、Akt和GSK-3β的表达无明显差异。鉴于肿瘤源性的ST6Gal-Ⅰ对T细胞凋亡的影响,我们从C57BL/6J小鼠脾脏提取CD8T细胞与不同ST6Gal-Ⅰ表达水平的小鼠肝癌细胞共孵育,ELISA的结果显示,ST6Gal-Ⅰ表达上调增加了共孵育微环境中免疫抑制因子如TGF-β、IL-10的含量,降低了细胞因子如TNF-α、IFN-γ、IL-2等的含量;与对照组相比,过表达ST6Gal-Ⅰ的肝癌细胞在小鼠体内的肿瘤体积更大,同时过表达ST6Gal-Ⅰ的瘤体组织内CD8T细胞的浸润以及瘤内IFN-γ和TNF-α的分泌均明显减少,并且发现肝癌细胞上调ST6Gal-Ⅰ的表达可减弱CD+T细胞增殖能力并抑制CD4T细胞分泌IL-2。综上,本研究经体内外实验系统的阐述了ST6Gal-Ⅰ介导肝癌免疫逃逸的分子机制（促进肝癌细胞内CD147/MMPs信号通路,抑制免疫细胞内PI3K/Akt/NF-κB信号通路,影响细胞因子分泌）,从糖基化角度揭示了唾液酸化修饰在肿瘤免疫逃逸中的作用,为加深肿瘤免疫逃逸的认识提供新思路。

关键词： ST6Gal-I 肝癌免疫逃逸 T细胞

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OPN糖基化修饰对子宫内膜接受状态的影响

OPN糖基化修饰对子宫内膜接受状态的影响

引用

中国生理学会生殖科学专业委员会—中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会暨“生殖科学专业委员会第二次学术交流会”和“生殖生物学分会第十六次学术年会”

作者：陈万方韩笑赵文杰李奥赢隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是N-结合糖蛋白家族中细胞外基质磷酸化糖蛋白,其结构中存在N-糖基化位点及O-糖基化位点。OPN通过与细胞表面的整合素受体相互作用可调节细胞之间的黏附、细胞迁移、细胞基质间相互作用,参与机体发育及某些病... 详细信息

骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是N-结合糖蛋白家族中细胞外基质磷酸化糖蛋白,其结构中存在N-糖基化位点及O-糖基化位点。OPN通过与细胞表面的整合素受体相互作用可调节细胞之间的黏附、细胞迁移、细胞基质间相互作用,参与机体发育及某些病理过程,与肿瘤细胞的生长增殖和侵袭转移密切相关,被认为是一种新的肿瘤标志物。方法:选取人子宫内膜癌细胞系(RL-952细胞、HEC-1A细胞)分别模拟高低接受状态的子宫内膜,以绒毛膜肿瘤的细胞系(Jar细胞)模拟侵入性胚胎,作为稳定的体外着床模型系统。实验以Real-Time PCR、Westen-blot技术从mRNA和蛋白水平检测OPN在不同接受状态人子宫内膜癌RL-952、HEC-1A细胞中的表达,结果显示,OPN在高接受态子宫内膜癌RL-952细胞的表达明显高于低接受状态子宫内膜癌HEC-1A细胞(p<0.05);以不同浓度的人重组骨桥蛋白rhOPN(0ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、300ng/ml、400ng/ml)分别处理HEC-1A细胞24h,CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell小室实验检测对细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力的影响。结果:随着rhOPN浓度增加,HEC-1A细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力增加,在rhOPN为300ng/ml时,HEC-1A细胞的增殖、迁移能力和侵袭能力最强;以rhOPN 300ng/ml加入HEC-1A细胞与Jar细胞共培养,与对照组相比,Jar细胞在HEC-1A细胞上的黏附能力增加;应用免疫沉淀技术纯化RL-952细胞、HEC-1A细胞中的OPN蛋白,采用凝集素印迹方法比较分析OPN在高低接受状态的子宫内膜的聚糖结构变化,初步结果显示,与高接受态RL-952细胞相比,HEC-1A细胞中OPN对朝鲜槐(MAL)、伴刀豆球蛋白A(ConA)等凝集素的亲和力明显减弱(p<0.05),提示,OPN的α2,3-唾液酸和高甘露糖型等糖基化修饰的降低可能与子宫内膜接受态相关。

关键词： OPN 子宫内膜,糖基化修饰

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OPN调控骨破坏相关CathepsinK及MMP9表达及信号通路分析

OPN调控骨破坏相关CathepsinK及MMP9表达及信号通路分析

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中国生理学会生殖科学专业委员会、中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会

作者：董明于新新刘超关莹隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

根尖周炎是口腔中的病原刺激物引起的细菌感染性进行性疾病,其慢性期的主要表现为根尖区牙骨质和牙槽骨发生不同程度的吸收,被炎症性肉芽组织所取代.机体组织细胞受到致病菌的侵袭后,将引发一系列炎症反应.免疫炎症反应长期持续性作用...

根尖周炎是口腔中的病原刺激物引起的细菌感染性进行性疾病,其慢性期的主要表现为根尖区牙骨质和牙槽骨发生不同程度的吸收,被炎症性肉芽组织所取代.机体组织细胞受到致病菌的侵袭后,将引发一系列炎症反应.免疫炎症反应长期持续性作用于机体,会引发骨代谢相关信号传导通路的变化,使骨改建的平衡失调,造成根尖周软硬组织的损伤和丧失.骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是由成及破骨细胞分泌的一种高度磷酸化的糖蛋白,可以沉积到骨基质中促进破骨细胞黏附或者类骨质矿化,主要作为非胶原性的细胞外基质蛋白分布在矿物组织中.本研究选取MC3T3-E1(前成骨细胞)及RAW264.7(前破骨细胞),分为空白对照组及NF-κB抑制剂组每组再分为Mock亚组、OPN-siRNA亚组、Over-OPN亚组,采用免疫荧光技术检测各组NF-κB核内外的表达情况;采用Western blot检测骨破坏经典标志物CathepsinK及MMP9的蛋白表达情况;采用RT-PCR检测肿瘤经典标志物CathepsinK及MMP9的基因表达情况;采用CCK8实验及ALP验检测OPN是否是通过NF-kb信号通路调控不同成骨细胞及破骨细胞的增殖、分化能力.结果：OPN 可上调成骨及破骨细胞中骨破坏经典因子的表达.OPN可加速成骨及破骨细胞NF-kb核内移,上调NF-kb的表达.OPN激活NF-kb信号通路,上调CathepsinK及MMP9蛋白及基因的表达.OPN激活NF-kb信号通路调控成骨细胞破骨及细胞的增殖、分化能力.

关键词：

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miR-21-5p影响子宫内膜癌细胞增殖、迁移及侵袭机制的研究

miR-21-5p影响子宫内膜癌细胞增殖、迁移及侵袭机制的研究

引用

中国生理学会生殖科学专业委员会、中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会

作者：马艳妮张漫郭珍珍刘超谢云鹏隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

目的：探讨miR-21-5p 在不同子宫内膜癌细胞lshikawa 及HEC-1A 中的表达差异,上调或下调miR-21-5p 对细胞增殖、迁移及侵袭的影响.探寻miR-21-5p 的直接靶标分子,为子宫内膜癌的诊断及治疗提供新的靶点.方法：Real-time PCR 检测不同子...

目的：探讨miR-21-5p 在不同子宫内膜癌细胞lshikawa 及HEC-1A 中的表达差异,上调或下调miR-21-5p 对细胞增殖、迁移及侵袭的影响.探寻miR-21-5p 的直接靶标分子,为子宫内膜癌的诊断及治疗提供新的靶点.方法：Real-time PCR 检测不同子宫内膜癌细胞Ishikawa 及HEC-1A 中miR-21-5p 的表达差异;在Ishikawa 及HEC-1A 细胞利用脂质体转染法分别转染miR-21-5p mimics(上调miR-21-5p)及其对照(Negative control)或miR-21-5p inhibitor(下调miR-21-5p)及其对照(Inhibitor NC),I Real-time PCR 检测miR-21-5p 表达变化,CCK8、Transwell 及细胞划痕实验分别检测上调/下调miR-21-5p 对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;利用靶基因预测软件筛选与侵袭转移相关的miR-21-5p 靶基因;上调lshikawa 和HEC-1A 细胞中miR-21-5p 表达检测靶基因mRNA 及蛋白表达变化;构建miR-21-5p 靶基因3'UTR 野生型克隆载体和双荧光素酶重组载体分析miR-21-5p与预测基因的靶向关系.结果：***-21-5p 在HEC-1A 细胞中的表达高于Ishikawa 细胞;miR-21-5p mimics 上调Ishikawa及HEC-1A 细胞miR-21-5p 表达能够促进细胞的增殖、迁移及侵袭能力能力;miR-21-5pinhibitor下调lshikawa 及HEC-1A 细胞miR-21-5p 的表达下降能抑制细胞的迁移及侵袭能力;TargetscanHuman7.1 预测显示miR-21-5p"种子"区"UAUUCGA",筛选出与侵袭转移相关的miR-21-5p 的靶基因PITX2、VCL、JAG1 和FBXO11;上调HEC-1A细胞miR-21-5p表达靶基因PITX2、VCL、JAG1 和FBXO11mRNA 与对照组相比呈显著降低趋势,PITX2 及VCL 蛋白的表达降低;下调miR-21-5p 表达可促进PITX2 和VCL 蛋白表达;靶基因3'UTR 区克隆载体、野生型及突变型重组载体测序结果与预想一致;双荧光素酶结果显示,PITX2、VCL、JAG1 和FBXO11 是miR-21-5p的直接靶基因.

关键词：

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OPN调控骨破坏相关CathepsinK及MMP9表达及信号通路分析

OPN调控骨破坏相关CathepsinK及MMP9表达及信号通路分析

引用

2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会

作者：董明于新新刘超关莹隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

根尖周炎是口腔中的病原刺激物引起的细菌感染性进行性疾病,其慢性期的主要表现为根尖区牙骨质和牙槽骨发生不同程度的吸收,被炎症性肉芽组织所取代。机体组织细胞受到致病菌的侵袭后,将引发一系列炎症反应。免疫炎症反应长期持续性作... 详细信息

根尖周炎是口腔中的病原刺激物引起的细菌感染性进行性疾病,其慢性期的主要表现为根尖区牙骨质和牙槽骨发生不同程度的吸收,被炎症性肉芽组织所取代。机体组织细胞受到致病菌的侵袭后,将引发一系列炎症反应。免疫炎症反应长期持续性作用于机体,会引发骨代谢相关信号传导通路的变化,使骨改建的平衡失调,造成根尖周软硬组织的损伤和丧失。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是由成及破骨细胞分泌的一种高度磷酸化的糖蛋白,可以沉积到骨基质中促进破骨细胞黏附或者类骨质矿化,主要作为非胶原性的细胞外基质蛋白分布在矿物组织中。本研究选取MC3T3-E1(前成骨细胞)及RAW264.7(前破骨细胞),分为空白对照组及NF-κB抑制剂组每组再分为Mock亚组、OPN-siRNA亚组、Over-OPN亚组,采用免疫荧光技术检测各组NF-κB核内外的表达情况;采用Western blot检测骨破坏经典标志物CathepsinK及MMP9的蛋白表达情况;采用RT-PCR检测肿瘤经典标志物CathepsinK及MMP9的基因表达情况;采用CCK8实验及ALP验检测OPN是否是通过NF-kb信号通路调控不同成骨细胞及破骨细胞的增殖、分化能力。结果:OPN可上调成骨及破骨细胞中骨破坏经典因子的表达。OPN可加速成骨及破骨细胞NF-kb核内移,上调NF-kb的表达。OPN激活NF-kb信号通路,上调CathepsinK及MMP9蛋白及基因的表达。OPN激活NF-kb信号通路调控成骨细胞破骨及细胞的增殖、分化能力。

关键词： OPN CathepsinK MMP9 NF-kb

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骨桥蛋白OPN在头颈部鳞癌的表达及分子机制研究

骨桥蛋白OPN在头颈部鳞癌的表达及分子机制研究

引用

中国生物工程学会第十一届学术年会暨2017年全国生物技术大会

作者：于新新董明陈万方关莹隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)属于多功能分泌型磷酸糖蛋白,OPN在肿瘤中高表达与乳腺癌、肺癌、甲状腺癌、胃癌、肝癌、直肠癌的发生发展和侵袭转移密切相关,能够反映肿瘤恶性程度及转移侵袭能力。头颈部癌(Hand Neck Cancer,HNC)包括起源... 详细信息

骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)属于多功能分泌型磷酸糖蛋白,OPN在肿瘤中高表达与乳腺癌、肺癌、甲状腺癌、胃癌、肝癌、直肠癌的发生发展和侵袭转移密切相关,能够反映肿瘤恶性程度及转移侵袭能力。头颈部癌(Hand Neck Cancer,HNC)包括起源于鼻窦、鼻腔、口腔、咽、喉等部位的上皮性恶性肿瘤,病理类型几乎均为鳞癌。为明确骨桥蛋白OPN在头颈部鳞癌(HNSCC)的表达及分子机制,本研究利用RT-PCR及Westen-blot检测了临床头颈部鳞癌组织及相邻癌旁组织OPN表达情况;选取头颈部鳞癌细胞UM-SCC6(高分化)及CNE-2(低分化),分析OPN基因及蛋白在不同头颈部鳞癌细胞株的表达水平;利用划痕实验检测不同表达水平的OPN对高、低分化头颈部鳞癌细胞侵袭能力的影响;以CCK8实验检测不同表达水平的OPN对HNSCC细胞株增殖力的影响。以OPN-siRNA、Over-OPN调控HNSCC细胞OPN表达,检测肿瘤经典标志物CD44及Stat1基因、蛋白表达变化;CCK8、细胞划痕实验检测对细胞增殖、侵袭能力的影响;免疫荧光技术检测各组P38核内外的表达情况。结果:头颈部鳞癌组中的OPN表达高于癌旁组织,OPN在UM-SCC6细胞(高分化)的表达低于CNE-2细胞(低分化),结果有统计学差异。过表达OPN可以提高UM-SCC6细胞及CNE-2细胞的增殖能力及侵袭能力,干扰OPN后UM-SCC6细胞及CNE-2细胞的增殖能力及侵袭能力降低。OPN可上调头颈部鳞癌细胞中CD44及Stat1表达。OPN可加速头颈部鳞癌细胞P38核内移,上调P38的表达。OPN激活P38信号通路,上调CD44及Stat1蛋白及基因的表达及HNSCC细胞的增殖、侵袭能力。

关键词： OPN HNC UM-SCC6细胞 CNE-2细胞

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Mir223调控靶基因E2F1对子宫内膜癌细胞的影响及机制研究

Mir223调控靶基因E2F1对子宫内膜癌细胞的影响及机制研究

引用

2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会

作者：韩笑朱晨阳董明陈万方韩笑隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

子宫内膜癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,且近年来发病率有逐年升高的趋势,其发病机制尚未完全阐明。MicroRNAs(miRNA)是一类保守的、长度约22nt的内源性单链非编码小分子RNA,其参与细胞分化、凋亡、增殖,并与肿瘤发生密切相关... 详细信息

子宫内膜癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,且近年来发病率有逐年升高的趋势,其发病机制尚未完全阐明。MicroRNAs(miRNA)是一类保守的、长度约22nt的内源性单链非编码小分子RNA,其参与细胞分化、凋亡、增殖,并与肿瘤发生密切相关。细胞周期相关转录因子E2F1的活化可将信号传至核内,推动细胞周期由G1期进入到S期,调控细胞周期进程。近年研究发现,E2F1也参与肿瘤细胞代谢重编程,在肿瘤的发生、发展中起到重要作用。根据文献提示E2F1是mir223的靶点,mir223缺失的小鼠中E2F1蛋白表达上调。本研究以子宫内膜癌临床样本及人子宫内膜癌细胞系,检测mir223的差异表达,分析mir223与子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移的关系。检测mir223与E2F1之间靶向关系,揭示mir223与子宫内膜癌细胞发生的相关性。研究结果显示:应用Real-time检测临床子宫内膜癌手术样本与癌旁组织对比miR-223表达降低且差异表达显著,免疫组化及Real-time检测E2F1在子宫内膜癌中异常高表达。TargetScan5.1获得miR-223的潜在靶基因信息,构建miR-223过表达慢病毒载体,转染人子宫内膜癌细胞RL95-2细胞,应用western blot、RT-PCR、免疫组化加测上调RL95-2上皮细胞系中miR-223,预测靶基因IGF-1R、FOX01、E2F1的mRNA和蛋白表达水平,荧光素酶报告实验明确miR-223在子宫内膜上皮细胞中与IGF-1R、E2F1存在靶向基因关系;CCK8、Transwell及细胞划痕实验检测上调RL95-上皮细胞系中miR-223可抑制子宫内膜癌细胞的增殖能力、迁移及侵袭能力,分子机制进一步研究中。

关键词： miR-223 子宫内膜上皮细胞 E2F1

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OPN调控头颈部鳞癌细胞CD44及Stat1表达及分子机制研究

OPN调控头颈部鳞癌细胞CD44及Stat1表达及分子机制研究

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作者：于新新董明韩笑齐佳隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生化教研室

骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)属于小整合素结合配体N端连接糖蛋白,近年来的研究证实了OPN在肿瘤的发生和发展的各个阶段,以及增殖、侵袭和转移等生物学行为中均有重要作用。头颈部癌(Hand Neck Cancer,HNC)是常见恶性肿瘤,包括起源于鼻窦... 详细信息

骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)属于小整合素结合配体N端连接糖蛋白,近年来的研究证实了OPN在肿瘤的发生和发展的各个阶段,以及增殖、侵袭和转移等生物学行为中均有重要作用。头颈部癌(Hand Neck Cancer,HNC)是常见恶性肿瘤,包括起源于鼻窦、鼻腔、口腔、咽、喉等部位的上皮性恶性肿瘤,全球每年新发病例约50万,占全部恶性肿瘤的6%,病理类型几乎均为鳞癌。p38MAPK信号传导通路是MAPK通路的分支之一,它通过转录因子磷酸化而改变基因的表达水平,参与多种胞内信息传递过程,能对广泛的细胞外刺激发生反应。研究表明,p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路可参与调控细胞增殖。本研究选取二株头颈部鳞癌细胞,UM-SCC6(高分化)及CNE-2(低分化),分为空白对照组及P38抑制剂组每组再分为Mock亚组、OPN-siRNA亚组、Over-OPN亚组,采用免疫荧光技术检测各组P38核内外的表达情况;采用Western blot检测肿瘤经典标志物CD44及Stat1的蛋白表达情况;采用RT-PCR检测肿瘤经典标志物CD44及Stat1的基因表达情况;采用CCK8实验及划痕实验检测OPN是否是通过P38信号通路调控不同HNSCC细胞系的增殖、侵袭能力。结果显示:OPN可上调头颈部鳞癌细胞中头颈部鳞癌细胞CD44及Stat1表达。OPN可加速头颈部鳞癌细胞P38核内移,上调P38的表达。OPN激活P38信号通路,上调CD44及Stat1蛋白及基因的表达。OPN激活P38信号通路调控不同HNSCC细胞系的增殖、侵袭能力。

关键词：骨桥蛋白 P38 CD44 Stat1 头颈部鳞癌

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