检索结果-内蒙古大学图书馆

大连海洋大学学报 2021年第4期36卷 612-619页

作者：张旦旦王煜李卓田莹王荦毛俊霞王许波常亚青郝振林大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

为探明香螺Neptunea cumingii遗传多样性水平及其种质资源背景,采用分子生物学技术对中国黄、渤海海域6个不同地理群体香螺COXⅠ和CYTB基因的遗传多样性进行比较分析。结果表明:COXⅠ基因序列长度为1536 bp,多态性位点141个,共定义COX... 详细信息

为探明香螺Neptunea cumingii遗传多样性水平及其种质资源背景,采用分子生物学技术对中国黄、渤海海域6个不同地理群体香螺COXⅠ和CYTB基因的遗传多样性进行比较分析。结果表明:COXⅠ基因序列长度为1536 bp,多态性位点141个,共定义COXⅠ单倍型11个,大连市大连湾群体(DL)的单倍型COXⅠ-10变异位点数最多(115个),群体内遗传多样性分析显示,大连湾群体的平均核苷酸差异数(K)和遗传多样性指数(P i)最高,分别为31.133和0.02121,群体间比较结果显示,烟台市八角港群体(YT)与蓬莱市长岛群体(PL)间的K值最低(2.094),大连湾群体与大连市旅顺盐场群体(LS)间的K值最高(24.971);CYTB基因序列全长为1140 bp,多态性位点34个,共定义单倍型14种,群体内遗传多样性分析显示,大连市獐子岛群体(ZZ)和大连市旅顺盐场群体的K和P i值最高,分别为13.444和0.01236,群体间比较结果显示,烟台市八角港群体与蓬莱市长岛群体间K值最低(1.395),大连湾群体与旅顺盐场群体间的K值最高(11.497);聚类分析结果显示,6个不同群体香螺的线粒体COXⅠ和CYTB基因有显著性差异,分子方差分析(AMOVA)显示,群体内变异远大于群体间差异。研究表明,不同海域香螺未出现明显的群体间差异,且群体内变异远大于群体间差异,不同海域间香螺未达到亚种分化。

关键词：香螺 COXⅠ基因 CYTB基因遗传多样性

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中间球海胆丙酮酸激酶(PK)基因克隆及其对海水酸化的响应

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大连海洋大学学报 2020年第3期35卷 360-367页

作者：尹文露崔东遥李莹莹孙景贤李雯琪常亚青湛垚垚大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

为明确中间球海胆Strongylocentrotus intermedius丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)基因(SiPK)的序列特征、组织表达规律及其对海水酸化胁迫的响应方式,采用cDNA末端快速扩增RACE技术方法获得了SiPK的cDNA全长序列,同时探究了该基因在不... 详细信息

为明确中间球海胆Strongylocentrotus intermedius丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)基因(SiPK)的序列特征、组织表达规律及其对海水酸化胁迫的响应方式,采用cDNA末端快速扩增RACE技术方法获得了SiPK的cDNA全长序列,同时探究了该基因在不同海水酸化[自然海水(对照组)、ΔpH=-0.3(SA1)、ΔpH=-0.4(SA2)、ΔpH=-0.5(SA3),ΔpH表示与自然海水pH的差值]胁迫条件下的响应方式。结果表明:中间球海胆PK序列全长为3616 bp,其中,包含一个编码537个氨基酸的开放阅读框(1614 bp)和两个非编码区片段(5′非编码区长度为91 bp,3′非编码区长度为1911 bp);系统进化分析发现,中间球海胆PK氨基酸序列与紫球海胆Strongylocentrotus purpuratus PK的亲缘关系最近;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)发现,成体中间球海胆PK基因在4种组织中均有表达,其相对表达量依次为性腺>管足>体腔液>肠;总PK酶活性检测显示,中间球海胆4种组织中的总PK酶活性依次为管足>性腺>体腔液>肠;海水酸化胁迫试验显示,与对照组相比,随着海水酸化程度的加重,中间球海胆肠组织中PK基因的相对表达量呈先极显著降低后极显著升高的趋势(P<0.01),但肠组织中总PK酶活性则呈极显著升高的趋势(P<0.01),性腺组织中PK基因的相对表达量随海水pH的降低而极显著降低(P<0.01),但该组织中总PK酶活性却呈现先升高后降低的趋势(P<0.05),管足和体腔液组织中PK基因的相对表达量和总PK酶活性均随海水pH的降低总体呈降低的趋势(P<0.05)。研究表明,中间球海胆可通过调节PK基因的表达及总PK酶活性响应海水酸化胁迫。

关键词：中间球海胆丙酮酸激酶基因克隆酶活性海水酸化

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刺参germ cell-less基因表达分析及转录因子预测

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渔业科学进展 2023年第6期44卷 203-213页

作者：黄孝枭刘炳正孙志惠丛晶晶苏唯一魏金亮大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

不同性别的刺参(Apostichopus japonicus)在生长速度、免疫能力等方面具有显著差异,解析其性别决定和性别分化机制具有重要的理论和经济价值。目前,刺参的性腺发育机制尚不清晰,挖掘性腺发育相关基因是解析其发育机制的重要途径。研究表... 详细信息

不同性别的刺参(Apostichopus japonicus)在生长速度、免疫能力等方面具有显著差异,解析其性别决定和性别分化机制具有重要的理论和经济价值。目前,刺参的性腺发育机制尚不清晰,挖掘性腺发育相关基因是解析其发育机制的重要途径。研究表明,germ cell-less基因在哺乳动物性腺发生中起重要作用,但无脊椎动物中关于germ cell-less基因的研究较少。本研究从刺参基因组中鉴定了germ cell-less (Ajgcl)基因片段,随后通过c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)获得其全长c DNA序列。通过荧光定量PCR (real-time quantitative PCR,RT-q PCR)揭示了Ajgcl在成体组织中呈现泛表达状态,性腺中表达量最高,且雌性性腺中的表达量是雄性性腺中表达量的2.25倍。随着卵子的发生,Ajgcl的表达量呈现先上升后下降的动态表达变化,而在精子发生的过程中其表达量变化不大,意味着其可能在卵子发生过程中发挥重要作用。在整个胚胎发育过程中均能检测到Ajgcl转录本,意味着Ajgcl作为母源因子可能与原始生殖细胞的形成有关。此外,Ajgcl基因启动子中具有Oct-1、FOXD3、PAX-6、CRP、c-Myb和NF-1等转录因子的结合位点。本研究为深入解析germ cell-less基因在刺参等无脊椎动物性腺发育中发挥的功能奠定了基础。

关键词：刺参 germ cell-less 生殖细胞母源因子

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水产动物精原干细胞和胚胎干细胞冷冻保存技术研究进展

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大连海洋大学学报 2020年第5期35卷 748-754页

作者：赵谭军刘丽常亚青湛垚垚大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

生殖细胞及胚胎的低温冷冻保存不仅是水产动物种质资源保存的重要技术手段之一,也是为水产动物优良新品种创制和培育提供基础育种材料的主要途径。精原干细胞和胚胎干细胞冷冻保存技术是近年来水产研究领域新兴的一种低温冷冻保存技术,... 详细信息

生殖细胞及胚胎的低温冷冻保存不仅是水产动物种质资源保存的重要技术手段之一,也是为水产动物优良新品种创制和培育提供基础育种材料的主要途径。精原干细胞和胚胎干细胞冷冻保存技术是近年来水产研究领域新兴的一种低温冷冻保存技术,与传统冷冻保存的精子或胚胎相比,冷冻保存的精原干细胞及胚胎干细胞具有自我更新及多向分化的潜能,同时还具有可以进行体外分化与移植等优势。本文综述了近年来水产动物精原干细胞和胚胎干细胞冷冻保存技术研究及其应用成果,以期进一步丰富和完善水产动物精子和胚胎冷冻及保存技术的资料体系,为充分利用低温冷冻保存技术提高水产经济动物优质种质资源保护和新种创制效率提供参考。

关键词：水产动物精原干细胞胚胎干细胞冷冻保存

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刺参精子冷冻保存方法研究

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大连海洋大学学报 2021年第1期36卷 57-65页

作者：赵谭军尹文露邹炀刘丽宋坚常亚青湛垚垚大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

为获得适宜的刺参Apostichopus japonicus精子冷冻保存技术,综合借鉴现有水产动物精子冷冻保存方法,对刺参精子降温方式、冷冻保存液、精子与冷冻保存液混合比例及复苏温度进行了筛选,在筛选出适宜的刺参精子降温方式基础上,分别以煮沸... 详细信息

为获得适宜的刺参Apostichopus japonicus精子冷冻保存技术,综合借鉴现有水产动物精子冷冻保存方法,对刺参精子降温方式、冷冻保存液、精子与冷冻保存液混合比例及复苏温度进行了筛选,在筛选出适宜的刺参精子降温方式基础上,分别以煮沸消毒海水和超纯水为溶剂,加入葡萄糖、NaCl、KCl、海藻糖、无水CaCl2和冷冻保存剂[二甲基亚砜(DMSO)、甘油(Gly)或1,2-丙二醇(1,2-G)]配制冷冻保存剂终体积分数为5%、10%和15%的冷冻保存液(Aj-1~Aj-27),以体积比为1∶1、1∶2和1∶3的比例混合精子与冷冻保存液进行冷冻保存,冷冻48 h后分别在37℃和30℃水浴条件下进行精子复苏,以精子活率、快速运动时间和精子寿命为指标,综合筛选冷冻保存刺参精子的适宜冷冻保存液、精子与冷冻保存液混合比例及复苏温度。结果表明:将刺参精子与以超纯水为溶剂配制的Aj-20精子冷冻保存液(12 g/L葡萄糖、7 g/L NaCl、0.7 g/L KCl、5 g/L海藻糖、0.1 g/L无水CaCl2和终体积分数为10%的DMSO)以体积比为1∶2的比例混合,以三步法降温方式冷冻保存,并在30℃水浴短时迅速复苏,该技术方法为本研究筛选到的最优刺参精子冷冻保存方法;与本研究中其他冷冻技术方法相比,应用该优选方法冷冻保存的刺参精子在复苏后精子活率最大(19.00±4.00)%、快速运动时间最长(1178.67 s±14.57 s)、寿命最久(2817.33 s±93.76 s);应用该优选方法冷冻保存72、120、408 h的精子复苏后受精率可达70%以上(精子与卵子数量比为1×106∶1),受精的卵囊孵化率可达到50%。研究表明,本研究中筛选获得的冷冻保存液配方及其冷冻保存方法比较适宜刺参精子的长期冷冻保存,具有应用于生产实践的潜力。

关键词：刺参精子低温冷冻保存孵化率

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棘皮动物弧菌诱导中间球海胆免疫致敏现象分析

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大连海洋大学学报 2024年第2期39卷 266-274页

作者：殷维骏刘岩松田文卓欧凡江刘雷丁君张伟杰常亚青大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

为探究中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)是否存在免疫致敏现象,使用棘皮动物弧菌(Vibrio echinoideorum)对中间球海胆进行重复感染(首次、二次菌浓度分别为10^(3)、10^(4) CFU/mL),检测并比较了两次注射感染后不同时间点中... 详细信息

为探究中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)是否存在免疫致敏现象,使用棘皮动物弧菌(Vibrio echinoideorum)对中间球海胆进行重复感染(首次、二次菌浓度分别为10^(3)、10^(4) CFU/mL),检测并比较了两次注射感染后不同时间点中间球海胆体腔细胞密度、吞噬能力、酸性磷酸酶(ACP)活力、活性氧(ROS)含量、总抗氧化能力(T-AOC)等相关免疫指标的变化,以及二次感染后免疫致敏组和对照组间成活率的差异。结果表明:与首次感染相比,二次感染时诱导致敏组的体腔细胞总密度、吞噬细胞密度、ACP、ROS和T-AOC等均出现显著上升(P<0.05),且响应时间明显缩短,达到峰值的时间分别提前了36、36、84、12、36 h,且各指标的峰值均显著高于首次感染(P<0.05);二次感染后,诱导致敏组在6 h时的吞噬率(45.41%±6.39%)显著高于对照组(33.17%±1.94%);经过棘皮动物弧菌低浓度诱导后,诱导致敏组存活率(43.33%±10.00%)显著高于未经诱导的阳性对照组(7.78%±10.71%)(P<0.05)。研究表明,低浓度棘皮动物弧菌能诱导中间球海胆产生免疫致敏现象,此结果可为中间球海胆的疾病防控提供新思路。

关键词：中间球海胆棘皮动物弧菌免疫致敏免疫指标

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饲料中添加不同海藻对刺参幼参生长、免疫、消化及营养组成的影响

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大连海洋大学学报 2020年第2期35卷 169-176页

作者：白伟吴香莹左然涛常亚青大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

为缓解刺参Apostichopus japonicus饲料原料供给不足,降低养殖饲料成本,试验配制分别添加30%的马尾藻Sargassum、浒苔Enteromorpha、石莼Ulva及产于越南、印尼、菲律宾的大叶菜Sargassum fusiforme 6种配合饲料,每种饲料分别投喂3组初... 详细信息

为缓解刺参Apostichopus japonicus饲料原料供给不足,降低养殖饲料成本,试验配制分别添加30%的马尾藻Sargassum、浒苔Enteromorpha、石莼Ulva及产于越南、印尼、菲律宾的大叶菜Sargassum fusiforme 6种配合饲料,每种饲料分别投喂3组初始体质量为(1.0±0.2)g的幼参,养殖周期为60 d,试验结束后比较不同藻类饲料对幼参生长、免疫、消化和营养组成的影响。结果表明:马尾藻组幼参终末体质量和增重率最高,其次是越南大叶菜组,两组幼参终末体质量和增重率均显著高于浒苔组(P<0.05);越南大叶菜组幼参脏壁比最高且显著高于石莼组和浒苔组(P<0.05);越南大叶菜组幼参体壁粗脂肪含量最高(9.59%)且显著高于其他组(P<0.05);幼参体壁中含量较多的氨基酸包括谷氨酸、甘氨酸、天冬氨酸和精氨酸,越南大叶菜组总氨基酸含量最高,菲律宾大叶菜组最低,两者有显著性差异(P<0.05),其余各组无显著性差异(P>0.05);总必需基酸和药效氨基酸在各组中无显著性差异(P>0.05),越南大叶菜组的呈味氨基酸最高(190.22 mg/g)且显著高于菲律宾大叶菜组(178.64 mg/g)、浒苔组(178.95 mg/g)(P<0.05)。研究表明,越南大叶菜可替代部分马尾藻,提高幼参增重率,增加幼参体壁粗脂肪、总必需氨基酸和呈味氨基酸含量,提升刺参体壁的营养价值,同时也为幼参的饲料配制提供更加广泛的原料资源。

关键词：刺参饲料增重率氨基酸海藻

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母源因子boule在光棘球海胆性腺中的表达与定位

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大连海洋大学学报 2021年第2期36卷 214-221页

作者：韩亚伦魏金亮崔洲平张健张伟杰温斌常亚青孙志惠大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

为鉴定光棘球海胆Mesocentrotus nudus生殖细胞标记基因,通过基因克隆、荧光定量PCR及切片原位杂交等技术分析了光棘球海胆(湿体质量为76.8 g±10.0 g)母源因子(boule)基因的分子特征及动态表达模式。结果表明:光棘球海胆boule cDN... 详细信息

为鉴定光棘球海胆Mesocentrotus nudus生殖细胞标记基因,通过基因克隆、荧光定量PCR及切片原位杂交等技术分析了光棘球海胆(湿体质量为76.8 g±10.0 g)母源因子(boule)基因的分子特征及动态表达模式。结果表明:光棘球海胆boule cDNA序列全长为1788 bp,其中,3′非编码区为601 bp,5′非编码区为146 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)为1041 bp,共编码346个氨基酸,包含一个保守的RRM结构域;荧光定量PCR结果显示,boule为母源因子,在整个胚胎发育时期均有表达;boule基因在处于生长期(stageⅡ)光棘球海胆的肠、管足、体腔液和性腺中均有表达,其中,boule基因在精巢表达量最高(P<0.05);在卵巢中表达量随卵母细胞的成熟而逐渐升高,在成熟期(stageⅣ)卵巢中达到最高,精巢中表达量仅在生长期(stageⅡ)及成熟前期(stageⅢ)有较高表达;切片原位杂交显示,boule基因在光棘球海胆精巢的生殖细胞中特异表达,卵巢中未检测到阳性细胞信号。研究表明,光棘球海胆boule基因是雄性生殖细胞标记基因,本研究结果可为海胆雄性生殖细胞发育相关研究提供数据资料。

关键词：光棘球海胆母源因子 boule基因生殖细胞精子发生

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大连海域底栖海藻种类组成及其与环境因子的相关性

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大连海洋大学学报 2024年第4期39卷 648-656页

作者：郑雪曹淑青申元刘高李纯诚李晓丽大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

为了解大连海域底栖海藻群落组成与分布现状,于2019—2023年对大连黄海、渤海海域共15个站位的大型底栖海藻开展调查,并对海水环境因子进行监测与影响效应分析。结果表明:大连海域底栖海藻共计4门165种,其中,蓝藻门(Cyanophyta)2种、红... 详细信息

为了解大连海域底栖海藻群落组成与分布现状,于2019—2023年对大连黄海、渤海海域共15个站位的大型底栖海藻开展调查,并对海水环境因子进行监测与影响效应分析。结果表明:大连海域底栖海藻共计4门165种,其中,蓝藻门(Cyanophyta)2种、红藻门(Rhodophyta)84种、褐藻门(Phaeophyta)42种、绿藻门(Chlorophyta)37种,外来种共计11种,除裙带菜(Undaria pinnatifida)、海带(Laminaria japonica)外,其余9种为外来入侵物种;底栖海藻Shannon-Wiener多样性指数(H′)为2.96~4.86,平均值为4.28;Pielou均匀度指数(J)为0.74~0.95,平均值为0.89;Simpson优势度指数(C)为0.86~0.98,平均值为0.96;底栖海藻的种类及生物量季节变化呈现出春季>夏季>冬季>秋季的特征,海藻种类空间变化呈现出低潮带>中潮带>潮下带>高潮带的特征;RDA分析结果显示,溶解氧(DO)、盐度(SAL)和pH是显著影响大连海域海藻生长与分布的主要环境因子(P<0.05)。研究表明,相对于大连黄海、渤海海域北部边界,大连中部、南部海域的海藻多样性明显提高,海藻入侵种也明显增多。本调查结果可为大连海域海藻的资源保护、开发利用及外来入侵种防范管理提供科学参考。

关键词：大连海域海藻资源生物多样性保护

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中间球海胆黑嘴病病原菌的分离与鉴定

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大连海洋大学学报 2022年第5期37卷 793-801页

作者：刘岩松张伟杰王中殷维骏欧凡江田文卓刘雷常亚青大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

为确定中间球海胆Strongylocentrotus intermedius黑嘴病的病原,从患黑嘴病中间球海胆体腔液中分离出一株优势菌(记为D1),通过人工回感试验确定致病性后,对该致病菌进行电镜观察、革兰氏染色、生理生化鉴定和16S rRNA序列比对以鉴定其... 详细信息

为确定中间球海胆Strongylocentrotus intermedius黑嘴病的病原,从患黑嘴病中间球海胆体腔液中分离出一株优势菌(记为D1),通过人工回感试验确定致病性后,对该致病菌进行电镜观察、革兰氏染色、生理生化鉴定和16S rRNA序列比对以鉴定其分类地位,并测定了D1菌株对30种抗生素的敏感性。结果表明:中间球海胆经D1菌株回感后,发病症状与自然状态下患黑嘴病海胆症状相同,并在回感海胆体腔液中分离出相同菌株;D1菌株长×宽为(2.10±0.31)μm×(0.68±0.08)μm,为革兰氏阴性菌;16S rRNA序列比对结果显示,D1菌株与棘皮动物弧菌Vibrio echinoideorum的一致性高达99.04%;生化鉴定结果显示,D1菌株与蔗糖、6%NaCl胨水和氧化酶反应均呈阳性;根据生理生化试验和16S rRNA分子生物学鉴定结果,确定该病原菌为棘皮动物弧菌;药敏试验显示,该菌株对氧氟沙星、多黏霉素B、复方新诺明、氨苄西林和羧苄西林等16种抗菌药物敏感,对麦迪霉素、庆大霉素等11种抗菌药物耐药。研究表明,中间球海胆黑嘴病的病原菌为棘皮动物弧菌,且该菌株对部分抗菌药物不敏感,具有一定的耐药性。

关键词：中间球海胆黑嘴病病原鉴定

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