检索结果-内蒙古大学图书馆

中国水产科学 2011年第1期18卷 222-229页

作者：丁君孙巍常亚青大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室辽宁大连116023

应用Gubler-Hoffman cDNA文库技术,构建虾夷马粪海胆（Strongylocentrotus intermedius）性腺cDNA文库。测试结果表明,其库容量为2.10×106 PFU/mL,长度范围在0.5~4.2 kb,插入片段平均长度为1.4 kb,达到建库要求。对虾夷马粪海胆cDN... 详细信息

应用Gubler-Hoffman cDNA文库技术,构建虾夷马粪海胆（Strongylocentrotus intermedius）性腺cDNA文库。测试结果表明,其库容量为2.10×106 PFU/mL,长度范围在0.5~4.2 kb,插入片段平均长度为1.4 kb,达到建库要求。对虾夷马粪海胆cDNA克隆测序,将获得的819条EST序列与NCBI数据库进行BLAST比对,获得了65个有研究价值的EST序列和cDNA克隆,其EST序列已提交到GenBank,序列号分别为GO448010–GO448016、GR410172–GR410229,虾夷马粪海胆性腺cDNA文库的成功构建,使短期内获得大量调控海胆性腺生长和营养性状的关键基因表达信息成为可能,为进一步开发海胆的生物资源提供参考。

关键词：虾夷马粪海胆 cDNA 表达序列标签

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灿烂弧菌的疏水性和生物被膜形成能力

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中国水产科学 2011年第5期18卷 1084-1091页

作者：李华王扬李强乔帼大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室辽宁大连116023

以仿刺参"化皮"病病原菌—灿烂弧菌(Vibrio splendidus)AP622为试验菌株,研究了培养材料、培养时间、培养基、葡萄糖浓度对菌株生物被膜形成能力的影响,证实鞭毛和菌毛介导的运动性,同时比较了浮游细菌与形成生物被膜的细菌... 详细信息

以仿刺参"化皮"病病原菌—灿烂弧菌(Vibrio splendidus)AP622为试验菌株,研究了培养材料、培养时间、培养基、葡萄糖浓度对菌株生物被膜形成能力的影响,证实鞭毛和菌毛介导的运动性,同时比较了浮游细菌与形成生物被膜的细菌对抗生素的敏感性,并研究了菌株的疏水性。结果表明,菌株AP622为高疏水性和高生物被膜形成菌株,在聚氯乙烯为培养材料、含葡萄糖浓度为0.5%、LB培养基中形成的生物被膜最多,生物被膜形成周期为24 h。菌株AP622明显表现出鞭毛介导的群集性和Ⅳ型菌毛介导的颤搐等运动力。生物被膜中的菌株AP622对抗生素的抵抗力明显强于浮游细菌,其最小抑菌浓度(MIC)是浮游细菌的32倍。综上所述,菌株AP622具有很强的疏水性和高生物被膜形成能力,判断其具有很强的黏附力,同时具有明显的抗药性。

关键词：仿刺参灿烂弧菌生物被膜运动性疏水性

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仿刺参体壁再生形态学和组织学的研究

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大连海洋大学学报 2011年第4期26卷 287-290页

作者：李霞周海燕秦艳杰郭娜孙毅大连海洋大学农业部海水增养殖学重点开放实验室辽宁大连116023

用手术刀片切掉仿刺参体壁表皮层和结缔组织层,深度至体腔膜。术后将仿刺参放入正常海水中饲养,用肉眼和光学显微镜观察仿刺参体壁再生的外部形态和组织学变化,并通过免疫荧光方法检测小鼠抗人角蛋白19(CK19)的表达。形态学观察表明:术... 详细信息

用手术刀片切掉仿刺参体壁表皮层和结缔组织层,深度至体腔膜。术后将仿刺参放入正常海水中饲养,用肉眼和光学显微镜观察仿刺参体壁再生的外部形态和组织学变化,并通过免疫荧光方法检测小鼠抗人角蛋白19(CK19)的表达。形态学观察表明:术后1 d,伤口呈凹陷状,体腔膜上增生出一薄层乳白色结缔组织;术后7 d伤口表面出现色素;术后11 d凹陷基本变平;术后21 d,伤口处体壁形态与颜色恢复至术前。组织学观察表明:术后1 d,疏松结缔组织直接暴露,创伤面附近有成纤维细胞和胶原纤维聚集;术后3 d,结缔组织外层有上皮细胞聚集;术后4 d,结缔组织间可见一条带状间隙;术后7 d,表皮外层出现角质层;术后11 d,上皮层厚度接近正常组织,但结缔组织较松散;术后21 d,上皮细胞数量、排列以及结缔组织的排列同正常组织。免疫荧光检测结果表明:CK19在正常的仿刺参体壁中表达得比较分散;术后3 d,CK19在创伤面附近集中表达。

关键词：仿刺参体壁再生形态学组织学

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刺参管足SMART cDNA文库构建及EST分析

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生物技术通报 2011年第9期27卷 193-198页

作者：李栋常亚青王玉丹丁君大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室大连116023

以大连广鹿岛野生刺参的管足mRNA为材料,利用SMART cDNA Construction Kit构建了表达型cDNA文库。初始文库的滴度为1.3×106PFU/mL,蓝白斑估测重组率合格。扩增后获得96 mL文库,滴度为1.8×1010PFU/mL,从扩增文库中随机挑取200... 详细信息

以大连广鹿岛野生刺参的管足mRNA为材料,利用SMART cDNA Construction Kit构建了表达型cDNA文库。初始文库的滴度为1.3×106PFU/mL,蓝白斑估测重组率合格。扩增后获得96 mL文库,滴度为1.8×1010PFU/mL,从扩增文库中随机挑取200个噬菌斑进行PCR检测,电泳检测结果表明重组率大于90%,片段大小在0.25-2.0 kb之间的插入片段占80.4%,文库构建成功。随机选择122个噬菌斑转化为质粒pTriplEx2并测序,测序成功率83.6%,软件处理后100 bp以上的clean ESTs有72条,测通的为65条,占成功测序样品的63.7%。72条序列经SeqMan软件拼接,获得48条contig/singletons,在线Blast比对发现其中26条具有同源序列并获得注释,另外20条可能为新基因,其功能和结构有待进一步利用生物信息学的方法进行分析和研究。

关键词：刺参管足 cDNA文库 EST分析

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仿刺参超氧化物歧化酶基因cDNA全序列的克隆及其特征分析

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渔业科学进展 2011年第5期32卷 97-107页

作者：田燚马增艳常亚青大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室 116023

以仿刺参Apostichopus japonicus为材料,利用cDNA末端快速扩增(RACE)方法首次得到仿刺参MnSOD的全长cDNA。该全长cDNA大小为955bp,其中5′端非编码区67bp,3′端非编码区216bp,开放阅读框(ORF)672bp,在3′端有多聚腺苷酸信号序列ATTTA,并... 详细信息

以仿刺参Apostichopus japonicus为材料,利用cDNA末端快速扩增(RACE)方法首次得到仿刺参MnSOD的全长cDNA。该全长cDNA大小为955bp,其中5′端非编码区67bp,3′端非编码区216bp,开放阅读框(ORF)672bp,在3′端有多聚腺苷酸信号序列ATTTA,并有polyA加尾,符合有效翻译的基因全长cDNA的特征。MnSOD全长cDNA可编码223个氨基酸的前体蛋白,预测蛋白分子质量为24.64kD,理论等电点是6.66,为亲水性蛋白。该蛋白序列没有信号肽和跨膜结构,仅有一段线粒体导肽。其二级结构主要以α-螺旋为主,无规则卷曲和延伸链构成了蛋白中量最大的结构元件,不含β-折叠。仿刺参SOD的氨基酸序列与目前已报道的其他物种如人、牛、斑马鱼、原鸡、非洲爪蟾、中国对虾、皱纹盘鲍、海湾扇贝、果蝇等的MnSOD氨基酸序列进行序列比对的结果表明,相似性均在61%～69%之间,说明该基因在各物种间具有一定的保守性。该段氨基酸序列无N-糖基化位点,含有3个蛋白激酶C磷酸化位点,1个酪氨酸蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,5个肉豆蔻酰基化位点,还发现了1个SOD家族的特征肽段DVWEHAYY。对磷酸化位点分析发现,有1个丝氨酸Ser,3个苏氨酸Tyr可能成为蛋白激酶磷酸化位点。二硫键分析表明,SOD含有3个半胱氨酸Cys,形成1个二硫键,连接着第17位和第107位的Cys。仿刺参MnSOD全长cDNA的克隆为更好地理解生物体内防御系统的催化O2-发生歧化反应、消除活性氧、维持机体活性氧代谢的平衡提供了理论基础。

关键词：仿刺参 MnSOD 基因克隆序列分析

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糖萜素对海参生产性能和消化酶活性的影响

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饲料研究 2011年第3期34卷 62-65页

作者：包鹏云丁鉴锋常亚青邢殿楼大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室

以海参为研究对象,研究不同质量浓度糖萜素对海参生产性能和消化酶活性的影响。试验分为对照组和试验组,对照组海参饲喂基础饲料,试验组在基础饲料中添加不同质量浓度的糖萜素(1.5、3和4.5 g/kg),每组设4个重复,试验用海参初始平均体质... 详细信息

以海参为研究对象,研究不同质量浓度糖萜素对海参生产性能和消化酶活性的影响。试验分为对照组和试验组,对照组海参饲喂基础饲料,试验组在基础饲料中添加不同质量浓度的糖萜素(1.5、3和4.5 g/kg),每组设4个重复,试验用海参初始平均体质量为55 g,试验期为36 d,试验结果表明:添加糖萜素的饲料均可促进海参生长,糖萜素4.5 g/kg试验组与对照组比较,海参的增质量显著,脂肪酶活性显著提高,其淀粉酶和蛋白酶与对照组比较差异极显著,结果表明:糖萜素能促进海参生长,提高增质量,同时糖萜素也能提高海参消化酶的活性。

关键词：海参糖萜素生产性能消化酶活性

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虾夷扇贝不同壳色间的遗传结构及微卫星标记与生长性状相关分析

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中国农学通报 2011年第26期27卷 83-91页

作者：张婧常亚青丁君王晓燕徐铭键大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室辽宁大连116023

实验材料系大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室培育的虾夷扇贝"象牙白"家系和普通褐色虾夷扇贝家系,并与大连獐子岛海区养成的F2代9月龄个体各60枚。用22个具较高多态性的虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)... 详细信息

实验材料系大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室培育的虾夷扇贝"象牙白"家系和普通褐色虾夷扇贝家系,并与大连獐子岛海区养成的F2代9月龄个体各60枚。用22个具较高多态性的虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)微卫星引物对其进行SSR扩增并分析。结果显示,不同多态位点的期望杂合度(He)、等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、PIC平均值等指标表明普通褐、白贝的遗传多样性水平较高且没有显著差异。实验中发现座位8在普通褐贝大部分个体中能获得特异条带A,但在白贝所有个体中均未见,推断特异条带A为白贝特异阴性条带。对22个微卫星标记与虾夷扇贝生长性状相关性进行了方差分析和多重比较,结果表明,座位HLJX109、HLJX178和HLJX139与体重呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)相关,座位8、HLJX191和HLJX139与壳长和壳高呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)相关。笔者分析了微卫星分子标记与虾夷扇贝壳色和生长性状的相关性,为虾夷扇贝的相关性状进一步QTL定位提供参考数据,并为虾夷扇贝的养殖和选育提供理论指导。

关键词：虾夷扇贝壳色微卫星生长性状相关分析

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Costaria costata常温人工育苗的研究

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大连海洋大学学报 2011年第1期26卷 17-22页

作者：由学策曹淑青王含茹张泽宇李晓丽大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室辽宁大连116023

以浮筏栽培的Costaria costata成熟种藻为材料,采用阴干刺激方法获得大量孢子并采集在维尼纶绳苗帘上,研究了孢子萌发、配子体生长发育和幼孢子体生长与水温的关系。结果表明:胚孢子在水温16℃下24 h后开始萌发形成配子体;16～22℃是配... 详细信息

以浮筏栽培的Costaria costata成熟种藻为材料,采用阴干刺激方法获得大量孢子并采集在维尼纶绳苗帘上,研究了孢子萌发、配子体生长发育和幼孢子体生长与水温的关系。结果表明:胚孢子在水温16℃下24 h后开始萌发形成配子体;16～22℃是配子体生长的适宜温度,经过近1个月培育,雌雄配子体藻团直径分别可达50μm和45μm;雌雄配子体在水温达到22℃后生长速度明显减慢,超过23℃后生长停止进入休眠期;当水温降至23℃以下时配子体恢复生长,22℃时雌雄配子体开始发育,形成卵囊和精子囊,21.5～20.5℃是雌雄配子体成熟高峰期,其间雌雄配子体大量排出卵和放出精子,其卵囊和精子囊形成率分别达到70%和62%;卵受精后形成的幼孢子体在21.5～20℃间生长很快,受精20 d时测定藻体长度达到200μm以上,经过1个月海区暂养培育成藻体长度为0.3 cm的幼苗,经海区栽培后生长成为长为3 m、宽为35 cm的***成体。

关键词： Costaria costata 采孢子人工育苗海区暂养浮筏栽培

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复方中草药对仿刺参免疫力和抗病力的影响

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大连海洋大学学报 2011年第4期26卷 338-343页

作者：吴亚楠柳鹏李强姜传俊李华大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室辽宁大连116023

将以黄芪、党参为主药并加入另外5味中草药所配伍的复方中草药粉碎制剂,以质量分数分别为0%(对照组)、0.5%、1.5%和2.5%的剂量添加于基础饲料中,连续投喂仿刺参Apostichopus japonicus37d,在试验开始后第1、2、3、4周采样,测定仿刺参的... 详细信息

将以黄芪、党参为主药并加入另外5味中草药所配伍的复方中草药粉碎制剂,以质量分数分别为0%(对照组)、0.5%、1.5%和2.5%的剂量添加于基础饲料中,连续投喂仿刺参Apostichopus japonicus37d,在试验开始后第1、2、3、4周采样,测定仿刺参的肠、触手、体壁、肌肉和体腔液中的抗菌活力及体腔细胞的吞噬活性;于试验开始后第4周,用仿刺参"化皮病"病原菌黄海希瓦氏菌Shewanella marisflavi以3.7×108个/mL的浓度在每头仿刺参背部注射0.1 mL的菌悬液,每天观察记录死亡个体症状,统计死亡率,计算相对保护率(共观察记录7 d)。结果显示:各组的抗菌活力均随着用药时间的延长、用药浓度的加大而升高,总体趋势表现为2.5%添加组>1.5%添加组>0.5%添加组>对照组;各用药组仿刺参的体腔细胞吞噬能力均随着用药时间的延长呈现先升高后降低的趋势,第2、3周达峰值,总体趋势表现为1.5%添加组>2.5%添加组>0.5%添加组>对照组;攻毒试验结果显示,对照组仿刺参3 d后全部死亡,第7天各用药组相对保护率依次为1.5%添加组>0.5%添加组>2.5%添加组,分别为30.0%、20.0%和10.0%。由此表明,该复方中草药可以显著提高仿刺参的免疫力和抗病力,以1.5%添加剂量组的效果最佳。

关键词：复方中草药仿刺参吞噬作用抗菌活力相对保护率

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刺参苗种越冬期水环境因子变化及对刺参急性效应的研究

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渔业现代化 2011年第2期38卷 6-9,16页

作者：邢殿楼李强曲健凤李华大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室辽宁大连116023

对刺参（Apostichopus japonicus）苗种越冬期室内正常池和发病池的水环境因子变化进行了跟踪监测和比较。结果表明：正常池和发病池水环境中总氨氮和亚硝酸氮含量差异显著（P〈0.05）,发病池明显高于正常池。并进行了水环境因子变化对... 详细信息

对刺参（Apostichopus japonicus）苗种越冬期室内正常池和发病池的水环境因子变化进行了跟踪监测和比较。结果表明：正常池和发病池水环境中总氨氮和亚硝酸氮含量差异显著（P〈0.05）,发病池明显高于正常池。并进行了水环境因子变化对刺参急性效应的研究。结果表明：在水温为（11.0±1.0）℃、pH 8.0±0.2条件下,氨氮（NH3-N）对刺参幼参（3 cm左右）48 h、72 h和96 h的半致死浓度（LC50）分别为6.09 mg/L、3.29 mg/L和1.75 mg/L;水温为（13.0±0.5）℃,刺参幼参96 h能够耐受的pH范围为7~9,能耐受的盐度范围为16~42。

关键词：刺参苗种培育水环境水质指标急性效应越冬

来源：评论

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