检索结果-内蒙古大学图书馆

高校化学工程学报 2016年第3期30卷 633-640页

作者：宋克东杨延飞武爽李丽颖闫新宇刘天庆精细化工国家重点实验室大连理工大学干细胞与组织工程研究室辽宁大连116024

贴壁型种子细胞的培养和收获,常在二维静态的培养环境下进行,而后采用酶解法或机械刮刀法来进行收获,但是其存在着一定的弊端,细胞扩增数量有限且在收获时细胞易受到损伤,同时也会失去一定的干性。论文研究整合了具有较大比表面积和三... 详细信息

贴壁型种子细胞的培养和收获,常在二维静态的培养环境下进行,而后采用酶解法或机械刮刀法来进行收获,但是其存在着一定的弊端,细胞扩增数量有限且在收获时细胞易受到损伤,同时也会失去一定的干性。论文研究整合了具有较大比表面积和三维立体环境的微载体,及温敏性材料无损收获细胞的优点,采用表面自由基共聚合方法,用3-丙基三甲氧基硅烷甲基丙烯酸TMSPM为偶联剂,在微载体表面接枝上N-异丙基丙烯酰胺NIPAAm(N-isopropylacrylamide)及甲基丙烯酸羟基丙基酯(Hydroxypropyl methacrylate,HPM),制备出P(NIPAAm-co-HPM)-g-TMSPM-g-微载体。其次,将骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)接种在制备的温敏性玻璃微载体上,通过细胞的培养与降温收获考察制备的温敏性微载体是否适宜细胞的降温脱附及其细胞相容性。扫描电镜及能谱分析表明温敏材料NIPAAm可成功地接枝到含硅羟基的玻璃微载体表面。BMMSCs的粘附和生长曲线测定结果证明材料具有较好的生物相容性,降温收获后细胞的活性对比及再培养实验表明细胞可很好的从载体上脱附,并保持良好的生长活性。

关键词： N-异丙基丙烯酰胺温敏性玻璃微载体表面自由基共聚合骨髓间充质干细胞降温脱附

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脐带血来源间充质干细胞体外分离培养条件的优化

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生物化学与生物物理进展 2008年第8期35卷 905-913页

作者：范秀波刘天庆郝永杰刘洋马学虎崔占峰大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研究室大连116023 Department of Engineering Science University of OxfordOxford OX13PJUK

脐带血间充质干细胞(umbilical cord blood mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)不仅可以作为滋养层细胞支持造血干细胞在体外的大规模扩增,在造血移植过程中还能够降低并发症的发生率以及加速造血重建功能的恢复.但是,目前UCB-MSCs的原... 详细信息

脐带血间充质干细胞(umbilical cord blood mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)不仅可以作为滋养层细胞支持造血干细胞在体外的大规模扩增,在造血移植过程中还能够降低并发症的发生率以及加速造血重建功能的恢复.但是,目前UCB-MSCs的原代分离培养成功率一般只有30%左右,为进一步提高该成功率,利用正交实验方法对UCB-MSCs体外培养的主要影响因素:细胞的接种密度、细胞因子的组合及用量、是否添加血清和滋养层细胞,进行逐层筛选,并对培养出的间充质干细胞进行了流式细胞分析和向成骨、软骨及脂肪方向的诱导分化检测,以期获得UCB-MSCs培养的最佳方法.实验结果表明,细胞的接种密度是UCB-MSCs培养最显著的影响因素(P<0.1),接种密度越大,MSCs越容易生长,能够培养出MSCs的几率就越大,其次为细胞因子,添加细胞因子能有效地刺激MSCs的生长.在高接种密度的基础上,添加细胞因子IL-3(15μg/L)和GM-CSF(5μg/L),可大大提高UCB-MSCs体外原代培养的成功率,从30%左右提高到90%以上.流式细胞检测结果显示,所分离培养的细胞表达间充质干细胞的抗原(CD13+、CD29+、CD44+、CD105+、CD166+),不表达造血细胞的抗原(CD34-、CD45-、HLA-DR-),并能够向成骨、软骨及脂肪方向分化,这与源于骨髓的间充质干细胞相一致.所建立的培养方法能够为UCB-MSCs的临床应用提供大量优质的种子细胞.

关键词：正交设计脐带血间充质干细胞培养条件优化细胞因子

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新型旋转壁式生物反应器内三维组织工程骨的构建

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生物化学与生物物理进展 2004年第11期31卷 996-1005页

作者：宋克东刘天庆李香琴崔占峰葛丹孙相玉马学虎大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研究室大连116024 Department of Engineering Science Oxford UniversityParks RoadOxford OX1 3PJUK

利用微载体悬浮培养法将成骨细胞在旋转壁式生物反应器内进行大规模扩增 ,并检测细胞的组织形态和生物功能 .然后以此作为种子细胞 ,分别以 2× 10 6个 /ml和 1× 10 6个 /ml两种密度接种到支架材料上 ,于旋转壁式生物反应器 (R... 详细信息

利用微载体悬浮培养法将成骨细胞在旋转壁式生物反应器内进行大规模扩增 ,并检测细胞的组织形态和生物功能 .然后以此作为种子细胞 ,分别以 2× 10 6个 /ml和 1× 10 6个 /ml两种密度接种到支架材料上 ,于旋转壁式生物反应器 (RWV)内进行三维组织工程骨的构建 .并将所构建的骨组织分别进行倒置显微镜 (invertedmicroscope)、扫描电镜 (SEM )、碱性磷酸酶 (ALP)、矿化结构和AO/EB双重荧光染色等生物学性能检测 ,以及对培养过程的营养物质代谢情况进行监控和分析 .结果表明 ,在RWV中培养的骨组织生长良好 ,分泌大量胶原纤维 ,并有矿化基质和新骨样组织形成 .由上述结果可断定 ,通过RWV内部流体对流所产生的应力刺激 ,可提高成骨细胞碱性磷酸酶的活性表达 ,并加速矿化结节的形成 ,从而完成成骨细胞的快速增殖与分化以及工程化组织的三维构建 .

关键词：组织工程骨成骨细胞生物反应器支架材料细胞培养

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体外构建壳聚糖/β-甘油磷酸钠/明胶仿生梯度支架

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高校化学工程学报 2019年第5期33卷 1133-1140页

作者：胡雪岩宋克东卢延国李文芳李丽颖郑双双刘天庆大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研究室辽宁大连116024 郑州中科新兴产业技术研究院河南郑州450000

针对软骨特定结构缺损后不能自我修复的特点,通过调控单层原料质量比,构建具有复杂分层结构的壳聚糖/β-甘油磷酸钠/明胶(chitosan/β-sodium glycerophosphates/gelatin,Cs/GP/Gel)仿生复合梯度支架。通过对比物理性能优选适宜比例的... 详细信息

针对软骨特定结构缺损后不能自我修复的特点,通过调控单层原料质量比,构建具有复杂分层结构的壳聚糖/β-甘油磷酸钠/明胶(chitosan/β-sodium glycerophosphates/gelatin,Cs/GP/Gel)仿生复合梯度支架。通过对比物理性能优选适宜比例的支架材料,并将骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)接种到梯度支架上考察其生物相容性。结果表明,Cs/GP/Gel复合梯度支架具有良好的吸水性能[(584.24±3.79)%^(677.47±1.70)%]、孔隙率[(86.34±5.10)%^(95.20±2.86)%]和降解性能[(86.09±2.46)%^(92.48±3.86)%]。扫描电镜(SEM)结果表明,支架材料在纵向维度呈现出明显的生理分层结构和孔径梯度渐进性,可有效模拟真实软骨的天然生理分层结构。比例为9:1:5的Cs/GP/Gel复合梯度支架适于作为骨软骨的支撑材料。对BMSCs-支架复合物Live/Dead染色后发现,细胞在梯度支架材料上存活、分布及伸展良好。该仿生梯度支架为开发新型生物医用材料提供了重要依据。

关键词：仿生梯度支架壳聚糖/β-甘油磷酸钠/明胶骨髓间充质干细胞骨/软骨组织工程

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ADSCs-壳聚糖/明胶水凝胶工程化软骨的三维动态构建

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功能材料 2015年第15期46卷 15021-15030页

作者：宋克东杨延飞李文芳李丽颖朱艳霞刘天庆大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研究室辽宁大连116024 深圳大学医学部深圳抗衰老与再生医学重点实验室广东深圳518060

组织工程软骨的体外构建被认为是一种有希望治疗关节软骨缺损的有效途径。为评估载脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)壳聚糖/明胶水凝胶支架,在体外动态构建组织工程软骨相对传统静态培养的优势,本研究用壳聚糖/明胶制备了... 详细信息

组织工程软骨的体外构建被认为是一种有希望治疗关节软骨缺损的有效途径。为评估载脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)壳聚糖/明胶水凝胶支架,在体外动态构建组织工程软骨相对传统静态培养的优势,本研究用壳聚糖/明胶制备了软骨仿生支架,并检测其物理性质。在制备的水凝胶支架上以1×107cells/m L密度接种ADSCs后,分别置于转瓶及T-瓶的软骨诱导基中培养两周,通过试剂染色、代谢检测和电镜观察,考察了细胞的软骨分化能力、活性、生长分布、渗透深度、增殖及胞外基质分泌情况。结果表明,壳聚糖/明胶支架的平均孔径为118.25±19.51μm,孔隙率为82.60±2.34%,吸水率为361.28±0.47%,弹性模量为61.2±0.16 k Pa,具有良好生物相容性。ADSCs生长状态良好,可向软骨细胞分化,适于作为组织工程软骨构建的种子细胞。表征结果显示,转瓶内水凝胶支架中细胞蛋白多糖的表达更显著,细胞生长分布更加均匀,细胞外基质分泌基本填满整个支架。因此,转瓶载壳聚糖/明胶支架所提供的三维动态环境,是体外构建组织工程软骨的良好方法。

关键词：转瓶组织工程软骨脂肪干细胞壳聚糖/明胶水凝胶细胞培养

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低氧条件下微囊化成骨细胞调控造血干／祖细胞扩增的研究

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高校化学工程学报 2009年第4期23卷 623-631页

作者：赵国峰宋克东刘天庆马学虎崔占峰大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研发中心辽宁大连116024 Department of Engineering Science Oxford University Parks Road Oxford OX1 3PJ UK

成骨细胞是造血干/祖细胞生态位区的重要组成部分,而较低的氧分压则是这一区域的另一特点。本研究在体外模拟造血生态位区,考察成骨细胞在低氧环境中对造血干/祖细胞特性维持和数量扩增的调控作用。采用聚电解质络合法将成骨细胞包埋,... 详细信息

成骨细胞是造血干/祖细胞生态位区的重要组成部分,而较低的氧分压则是这一区域的另一特点。本研究在体外模拟造血生态位区,考察成骨细胞在低氧环境中对造血干/祖细胞特性维持和数量扩增的调控作用。采用聚电解质络合法将成骨细胞包埋,随后与人脐带血单个核细胞(CB-MNCs)分别在低氧(5%氧分压)和常氧(20%氧分压)培养箱中共培养,设置非共培养组作对照,培养7d。每天取样计细胞数,检测体系葡萄糖、乳酸浓度,并做CFU-Cs集落和CD34+含量检测。结果表明:经过7d的培养,低氧下与载成骨细胞GAC微珠共培养的CB-MNCs扩增了18.7±1.6倍;CD34+细胞含量由培养前的2.0%上升到2.5%,细胞数扩增了23.4±2.0倍;CFU-Cs产率为培养前的11.6±0.9倍。扩增效果显著优于常氧共培养和非共培养体系。析因方差分析结果表明,成骨细胞对造血干/祖细胞扩增有非常显著的作用,而低氧条件只在成骨细胞存在时才有明显促进作用。本实验结果为进一步了解成骨细胞对造血干/祖细胞生长调节的作用机制以及造血干/祖细胞的体外大规模扩增培养提供了新思路。

关键词：低氧造血干/祖细胞微胶囊成骨细胞共培养

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海藻酸钙/明胶微胶珠的制备、检测及神经干细胞相容性分析

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高校化学工程学报 2015年第5期29卷 1145-1153页

作者：宋克东虞泽李瑞鹏刘朋 Lim Mayasari 刘天庆精细化工国家重点实验室大连理工大学干细胞与组织工程研究室辽宁大连116024 南洋理工大学化学工程与生物医学工程学院生物工程系新加坡637457

研究制备了海藻酸钙/明胶微胶珠,并探讨了此种微胶珠的机械和渗透性能及作为细胞载体用于神经干细胞体外培养的可行性。使用自制穿刺力测试仪检测不同浓度的海藻酸钠、明胶和Ca Cl2对微胶珠机械强度的影响;采用DMEM(Dulbecco's Modi... 详细信息

研究制备了海藻酸钙/明胶微胶珠,并探讨了此种微胶珠的机械和渗透性能及作为细胞载体用于神经干细胞体外培养的可行性。使用自制穿刺力测试仪检测不同浓度的海藻酸钠、明胶和Ca Cl2对微胶珠机械强度的影响;采用DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Media)培养基浸泡法测试微胶珠的耐浸泡能力;试验以微胶珠为对象建立扩散模型以研究葡萄糖和牛血清蛋白(Bovine serum albumin BSA)在微胶珠中的扩散情况,并模拟得扩散系数与物质浓度之间的关系,此后,通过包埋培养昆明小鼠神经干细胞探索微胶珠用于神经干细胞体外培养的可行性。通过综合分析强度和扩散性能以及培养细胞的状况等,得出海藻酸钙/明胶微胶珠的最佳制备参数:海藻酸钠1.5%(wt)、明胶0.5%(wt)、Ca Cl24%(wt),并发现所研究制备的海藻酸钙/明胶微胶珠具有良好的细胞相容性,适于作为细胞载体用于神经干细胞的体外培养。

关键词：神经干细胞微胶珠制备参数机械强度扩散性能

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具有X-射线自显影功能的碘代聚氨酯栓塞剂材料的研究

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高分子学报 2014年第1期24卷 31-39页

作者：桑琳魏志勇刘克亮宋克东王健张万喜齐民大连理工大学材料科学与工程学院大连116024 大连理工大学汽车工程学院大连116024 大连理工大学精细化工国家重点实验室大连干细胞和组织工程研究中心大连116024 大连友谊医院放射科大连116100

设计合成四碘代双酚A(IBPA)作为扩链剂,以聚丁二酸丁二醇酯(PBS-OH)为软段、异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)和IBPA为硬段,通过偶联反应获得一种新型X-射线聚氨酯显影材料.红外光谱和核磁共振氢谱确定所合成碘代聚氨酯(I-PUs)的结构与组成,并... 详细信息

设计合成四碘代双酚A(IBPA)作为扩链剂,以聚丁二酸丁二醇酯(PBS-OH)为软段、异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)和IBPA为硬段,通过偶联反应获得一种新型X-射线聚氨酯显影材料.红外光谱和核磁共振氢谱确定所合成碘代聚氨酯(I-PUs)的结构与组成,并用示差扫描量热法,热重分析,X-射线衍射仪和临床X-射线仪评价不同IBPA含量的碘代聚氨酯的热性能、结晶性和显影效果.结果表明,碘代扩链剂IBPA较高含量的引入对聚合物的热稳定性有一定的影响,并促使聚氨酯由结晶态向非晶态转变.引入IBPA对聚氨酯的显影效果有很好的促进增强作用,聚氨酯材料及微球均具有较好的X光显影效果.噻唑蓝比色法(MTT)评价细胞毒性证实制备的较高碘含量的聚氨酯材料均无细胞毒性,是一种很好的血管栓塞剂材料.

关键词：聚氨酯碘代双酚A,X-射线自显影栓塞剂

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基于壳聚糖/黄原胶互穿网络的导电水凝胶支架制备及性能研究

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材料导报 2023年第18期37卷 213-220页

作者：周鑫关水孙长凯大连理工大学化工学院精细化工国家重点实验室辽宁大连116024 大连理工大学大连市干细胞与组织工程研发中心辽宁大连116024 大连理工大学生物医学工程学院精准转化医学控制工程研究与教育中心(R-ECCE-TPM)辽宁大连116024

导电支架应用于神经组织工程,有利于细胞增殖生长,但支架内部的导电聚合物通常会带来细胞毒性以及疏水基团引起的细胞粘附问题。本研究通过黄原胶(XG)与壳聚糖(CS)相结合,引入透明质酸掺杂的聚3,4-乙撑二氧噻吩(PEDOT-HA)导电纳米颗粒,... 详细信息

导电支架应用于神经组织工程,有利于细胞增殖生长,但支架内部的导电聚合物通常会带来细胞毒性以及疏水基团引起的细胞粘附问题。本研究通过黄原胶(XG)与壳聚糖(CS)相结合,引入透明质酸掺杂的聚3,4-乙撑二氧噻吩(PEDOT-HA)导电纳米颗粒,成功制备了一种生物相容性良好的新型PEDOT-HA/CS/XG互穿网络导电水凝胶支架。实验采用葡萄糖酸内酯(GDL)溶解CS,实现CS与XG的结合,通过优化GDL含量缩短成胶时间。引入PEDOT-HA导电纳米颗粒赋予支架材料导电性,测定PEDOT-HA含量对支架材料孔隙率、电导率、吸水率的影响,考察支架的降解性、流变性、热稳定性与力学性能。结果显示,PEDOT-HA的引入提高了水凝胶的孔隙率、电导率、弹性和机械强度,PEDOT-HA/CS/XG导电水凝胶支架吸水率为2575%~3866%,同时具有适宜的降解性与热稳定性。细胞粘附率检测及扫描电镜(SEM)观察结果表明,PEDOT-HA的引入有利于PC12细胞的粘附生长,并形成交错网状结构。细胞活力检测与荧光染色结果显示,PC12细胞在导电水凝胶支架上保持了良好的增殖活性,培养5 d后,10%PEDOT-HA/CS/XG支架上的细胞活力最高可达到对照组的120.42%,证明PEDOT-HA/CS/XG导电水凝胶支架具有良好的生物相容性,展现出应用于神经组织工程的潜力。

关键词：导电水凝胶支架聚3,4-乙撑二氧噻吩黄原胶壳聚糖组织工程

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用于ADSCs增殖分化的海藻酸钙/骨粉微胶珠的制备与检测

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功能材料 2015年第20期46卷 20117-20122页

作者：宋克东闫新宇宋飞杨延飞李士晓朱艳霞刘天庆大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研究室辽宁大连116024 大连医科大学第二附属医院神经外科辽宁大连116027 深圳大学医学部深圳抗衰老与再生医学重点实验室广东深圳518060

海藻酸钙微胶珠具有良好的生物相容性、可降解、机械强度高、韧性好等优点,已被广泛应用于组织工程研究。骨粉中含有大量的羟基磷灰石及BMP等生长因子,具有良好的骨诱导活性。结合上述两种材料的优点,制备了一种复合海藻酸钙/骨粉微胶珠... 详细信息

海藻酸钙微胶珠具有良好的生物相容性、可降解、机械强度高、韧性好等优点,已被广泛应用于组织工程研究。骨粉中含有大量的羟基磷灰石及BMP等生长因子,具有良好的骨诱导活性。结合上述两种材料的优点,制备了一种复合海藻酸钙/骨粉微胶珠,并系统研究了人源脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在其中的最佳包埋密度。通过正交实验综合考虑海藻酸钠溶液浓度、氯化钙溶液浓度和骨粉密度对海藻酸钙/骨粉微胶珠机械强度及传质性能的影响,并采用液滴法制备了最优化的用于ADSCs体外增殖分化的微胶珠。结果表明,海藻酸钠溶液的浓度对微胶珠传质能力和机械强度的影响最大,CaCl2溶液浓度其次,骨粉密度的影响最小。当海藻酸钠溶液浓度、CaCl2溶液浓度和骨粉密度分别为2.5%,4.5%和5.0mg/mL时,微胶珠的性能最好。对细胞扩增倍数的比较和死活染色等检测表明,当ADSCs的初始包埋密度为5×106 cells/mL时,更适于ADSCs的扩增与分化。

关键词：海藻酸钙微胶珠脂肪干细胞骨粉骨组织工程细胞载体

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