检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学会第九次全国放射医学与防护学术交流会

作者：张恒翟志斌王月英吴红英李德冠王营营孟爱民北京协和医学院中国医学科学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

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人Hexastatin基因的优化、蛋白的表达纯化及初步应用

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国际生物医学工程杂志 2012年第2期35卷 103-107,I0006页

作者：唐晓宋娜玲贺欣王月英刘谦温镭王德芝韩英张恒中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192 天津市第一中心医院泌尿外科 300192

目的优化人Hexastatin基因，并进行表达、纯化及体外的活性实验，为人Hexastatin进一步深入研究提供理论依据。方法优化并合成人Hexastatin基因，然后与pET28a表达载体连接，异丙基-β—D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导表达，并优化诱... 详细信息

目的优化人Hexastatin基因，并进行表达、纯化及体外的活性实验，为人Hexastatin进一步深入研究提供理论依据。方法优化并合成人Hexastatin基因，然后与pET28a表达载体连接，异丙基-β—D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导表达，并优化诱导表达的条件。在超声破碎细菌和包涵体后，用Ni-NTA层析柱纯化蛋白，用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶（SDS—PAGE）和Western Blot分析，通过四甲基偶氮唑盐（MTT）法分析肿瘤的抑制作用。结果得到***表达质粒，在BL21菌体中高效表达，表达的可溶性Hexastatin蛋白占总蛋白量的45．1％，纯化后的人Hexastatin蛋白的纯度可达90％，质量浓度为80μg/ml；Western Blot分析证实表达蛋白为目的蛋白；人Hexastatin蛋白对肿瘤细胞C6、人乳腺腺瘤细胞（MCF．7）以及人血管内皮细胞（HMEC）的生长有明显的抑制作用，抑制率分别为72．9％±3．6％、48．8％±2．9％、52．7％±2．5％。结论成功地表达了优化的人Hexastatin蛋白，证实人Hexastatin蛋白对肿瘤细胞的抑制作用，为肿瘤的抗血管疗法提供了新途径。

关键词： Hexastatin蛋白表达纯化 MTT活性检测

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E838对小鼠骨髓细胞染色体的辐射防护作用

E838对小鼠骨髓细胞染色体的辐射防护作用

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2012环境健康与药物安全性全国学术年会

作者：王月英吴红英叶翔李德冠王小春张恒路璐孟爱民中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津 3001921 天津迈达医学科技有限公司

目的：探讨E838对γ射线照射小鼠骨髓细胞染色体损伤的防护作用。　　方法：将615小鼠,随机分为对照组,照组组,E838组、炔雌三醇(EE3)组.连续3d腹腔注射E838、EE3,第3次给药24小时后进行剂量为1.5Gy137Csγ射线全身照射,观察其骨髓细胞... 详细信息

目的：探讨E838对γ射线照射小鼠骨髓细胞染色体损伤的防护作用。
　　方法：将615小鼠,随机分为对照组,照组组,E838组、炔雌三醇(EE3)组.连续3d腹腔注射E838、EE3,第3次给药24小时后进行剂量为1.5Gy137Csγ射线全身照射,观察其骨髓细胞染色体畸变率。
　　结果：E838组、EE3组骨髓细胞染色体畸变与照射组比较差异有统计学意义(P＜0.01),E838组畸变细胞与EE3组比较差异有统计学意义(P＜0.05).
　　结论：E838可降低辐射诱发的骨髓细胞染色畸变细胞数,对骨髓细胞染色体具有一定的辐射防护作用。

关键词： E838防护剂 γ射线骨髓细胞染色体畸变辐射防护

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白细胞介素21基因联合不同剂量γ射线照射对乳腺癌细胞生长的影响

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国际放射医学核医学杂志 2012年第2期36卷 94-96页

作者：王芹刘晓秋李进荣庆林宋力刘强张恒樊飞跃北京协和医学院中国医学科学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室 300192 天津医科大学第二医院放疗科 300211

目的研究人白细胞介素21基因重组腺病毒载体（Ad—IL-21）联合不同剂量叮射线照射对人乳腺癌细胞体外生长的抑制作用。方法采用随机数字表法设立空白对照组、β-半乳糖苷酶基因重组腺病毒载体（Ad—LacZ）对照组、***．21组、γ射线照... 详细信息

目的研究人白细胞介素21基因重组腺病毒载体（Ad—IL-21）联合不同剂量叮射线照射对人乳腺癌细胞体外生长的抑制作用。方法采用随机数字表法设立空白对照组、β-半乳糖苷酶基因重组腺病毒载体（Ad—LacZ）对照组、***．21组、γ射线照射组和Ad—IL-21联合γ射线照射组（联合照射组），将Ad—IL-21于体外转染人乳腺癌MCF-7细胞，转染6h后进行0～10GymCs1射线照射，用噻唑蓝法检测MCF-7细胞的生长抑制率。结果Ad—IL-21转染MCF-γ细胞后，MCF-γ细胞生长受到的抑制效应显著高于Ad—lacZ组（F=26．34，P〈0．05），单独照射组和联合照射组的抑制率均显著高于Ad—IL-21组（F=23．51，F=27．55，P均〈0．05），随着照射剂量的增大，细胞抑制率逐渐增高。同一照射剂量中，联合照射组对MCF-γ细胞的抑制作用均显著高于γ射线照射组，联合照射组抑制率最高，与Ad—IL-21组和γ射线照射组比较，差异具有统计学意义（F=35．68，F=38．67，P均〈0．05）。结论IL-21基因联合吖射线照射对乳腺癌细胞的抑瘤作用具有协同效应，有效地抑制肿瘤细胞的生长。

关键词：乳腺肿瘤基因白细胞介素21 放射疗法基因疗法

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电离辐射对MC3T3细胞增殖和Notch1、Jagged1基因表达的影响

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辐射研究与辐射工艺学报 2012年第6期30卷 374-377页

作者：唐泉杨冰仲蕾蕾杨福军张晓东尚杰王芹韩英樊体强樊飞跃孙元明北京协和医学院&中国医学科学院放射医学研究所天津分子核医学重点实验室天津300192 天津医科大学总医院药剂科天津300052

揭示了电离辐射对成骨细胞系MC3T3细胞的增殖及其对Notch1和Jagged1基因表达的影响。成骨细胞系MC3T3细胞,经过0、2和4Gy ^(137)Csγ射线照射,运用MTT、实时定量PCR技术,检测电离辐射对与MC3T3细胞的增殖和增殖分化相关基因Notch1和Jagg... 详细信息

揭示了电离辐射对成骨细胞系MC3T3细胞的增殖及其对Notch1和Jagged1基因表达的影响。成骨细胞系MC3T3细胞,经过0、2和4Gy ^(137)Csγ射线照射,运用MTT、实时定量PCR技术,检测电离辐射对与MC3T3细胞的增殖和增殖分化相关基因Notch1和Jagged1表达的影响。照射剂量为2和4 Gy时,细胞的增殖下降(p<0.05,p<0.01);照射剂量为2Gy时,Notch1基因表达量降低(p<0.05);照射剂量为2和4Gy时,Jagged1基因的表达量均降低(p<0.01,p<0.05)。电离辐射损伤使成骨细胞系MC3T3的增殖能力下降,同时诱发Notch1基因和Jagged1的低表达。

关键词：电离辐射成骨细胞 MC3T3 Notch1 Jagged1

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抗人纤维蛋白噬菌体单链抗体库的构建和鉴定

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生物医学工程与临床 2012年第3期16卷 287-291页

作者：王沂张春明王洋郝建秀宋娜玲刘金剑贺欣刘鉴峰闫玉军王德芝中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192 河北联合大学生命科学学院河北唐山063000

目的应用噬菌体展示技术构建抗人纤维蛋白单链抗体(scFv)文库,筛选高亲和力抗人纤维蛋白scFv并进行鉴定。方法利用人纤维蛋白免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸聚合酶链反应(PCR)将VH和VL基因拼接成scFv基因,SfiⅠ/NotⅠ双酶... 详细信息

目的应用噬菌体展示技术构建抗人纤维蛋白单链抗体(scFv)文库,筛选高亲和力抗人纤维蛋白scFv并进行鉴定。方法利用人纤维蛋白免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸聚合酶链反应(PCR)将VH和VL基因拼接成scFv基因,SfiⅠ/NotⅠ双酶切克隆入pCANTAB 5E噬菌粒载体,转化*** TG1构建成库,采用人纤维蛋白原对抗体库进行负筛选,人纤维蛋白进行正筛选,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测阳性克隆的抗原特异性并进行测序分析。结果构建了库容为8.7×106的抗人纤维蛋白scFv库,ELISA测定显示scFv具有较高的抗原特异性;抗人纤维蛋白scFv基因序列长732 bp,编码244个氨基酸,VH和VL基因均有明确的3个互补决定区和4个骨架区。结论成功构建了抗人纤维蛋白scFv文库,并筛选到高亲和力的抗人纤维蛋白scFv,为新型血栓显像剂的开发奠定了实验基础。

关键词：纤维蛋白噬菌体抗体库单链抗体人

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Serglycin及其与肿瘤相关性的研究进展

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山东医药 2012年第31期52卷 92-94页

作者：刘光明王海峰马洪顺王小春孙光天津市第一中心医院天津300192 北京协和医学院中国医学科学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津医科大学第二医院

蛋白聚糖是一类非常复杂的大分子糖复合物。主要由糖胺聚糖（GAG）共价连接于核心蛋白所组成。丝甘蛋白聚糖（Serglycin）属于小分子蛋白聚糖家族，由SRGN基因编码的核心蛋白和丝甘氨酸重复序列和各种GAG链修组成。其主要生理功能涉及... 详细信息

蛋白聚糖是一类非常复杂的大分子糖复合物。主要由糖胺聚糖（GAG）共价连接于核心蛋白所组成。丝甘蛋白聚糖（Serglycin）属于小分子蛋白聚糖家族，由SRGN基因编码的核心蛋白和丝甘氨酸重复序列和各种GAG链修组成。其主要生理功能涉及肽水解酶、炎症趋化因子类或者其他的细胞因子的储存和释放。近年来发现Serglycin和一些人类肿瘤相关，本文就serglycin和肿瘤关系的研究进展综述如下。

关键词：丝甘蛋白聚糖肿瘤

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Serglyein及其与肿瘤相关性的研究进展

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山东医药 2012年第31期52卷 92-94页

关键词：丝甘蛋白聚糖肿瘤

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短端粒小鼠与正常小鼠间充质干细胞的分离培养比较

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中国比较医学杂志 2012年第1期22卷 18-21页

作者：宋舸张俊伶鞠振宇中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国医学科学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

目的建立从小鼠微粒骨中获取间充质干细胞(MSC)方法,并观察比较野生型小鼠(WT鼠)和端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-鼠)MSC生物学特性的差异。方法采用体外细胞培养技术,从小鼠自体微骨片中分离纯化WT鼠和Terc-/-鼠的间充质干细胞,通过培养... 详细信息

目的建立从小鼠微粒骨中获取间充质干细胞(MSC)方法,并观察比较野生型小鼠(WT鼠)和端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-鼠)MSC生物学特性的差异。方法采用体外细胞培养技术,从小鼠自体微骨片中分离纯化WT鼠和Terc-/-鼠的间充质干细胞,通过培养和传代,研究其增殖及生长特征。结果原代培养及传代培养显示,WT鼠自体骨间充质干细胞比Terc-/-鼠具有活跃的增殖倍增能力。结论从鼠的微骨片获取MSC的方法重复性好,细胞纯度和细胞数量优于以往从骨髓获取MSC的方法,Terc-/-鼠MSC生长增殖能力明显弱于WT鼠,其机制的研究有待深入。

关键词：间充质干细胞端粒细胞培养

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表达小鼠Notch1胞内段基因慢病毒载体的构建及鉴定

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国际生物医学工程杂志 2012年第3期35卷 133-136,I0002页

作者：唐泉杨冰周慧杨福军段蓉樊体强韩英张晓东孙元明中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津分子核医学重点实验室天津300192 天津医科大学药学院 300070 天津医科大学总医院药剂科 300052

目的 Notch信号通路在进化中高度保守,在细胞的生长和分化方面起重要作用.构建小鼠Notch胞内段（NICD）慢病毒载体,为Notch信号通路的研究奠定了基础.方法从C57BL/6J小鼠脊髓组织提取总RNA,逆转录合成cDNA,用PCR方法获取NICD的基因序列... 详细信息

目的 Notch信号通路在进化中高度保守,在细胞的生长和分化方面起重要作用.构建小鼠Notch胞内段（NICD）慢病毒载体,为Notch信号通路的研究奠定了基础.方法从C57BL/6J小鼠脊髓组织提取总RNA,逆转录合成cDNA,用PCR方法获取NICD的基因序列,构建慢病毒表达NICD载体,感染HEK293T细胞,实时定量PCR和Western blot分析NICD基因在靶细胞的表达.结果NICD基因在靶细胞的表达水平升高.结论成功构建表达小鼠NICD基因的慢病毒载体,为今后相关实验研究奠定了基础.

关键词：慢病毒 Notch胞内段 Notch1

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