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鸡传染性支气管炎病毒SD03株N基因的克隆、序列分析及N蛋白理化性质分析

中国畜牧兽医 2014年第12期41卷 67-73页

作者：邢婧珉陈冰李云霞付立辉张立霞李亚杰郁宏伟杨保收天津瑞普生物技术股份有限公司瑞普研究院生物制品研究中心天津300308 瑞普(天津)生物药业有限公司天津300300

试验旨在确定国内鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)流行毒株核蛋白N与市场上现用疫苗株、近年国内外分离株的差异性。本研究利用自山东某鸡场病鸡肾脏组织分离获得、经PCR鉴定为IBV阳性的毒株(命名为SD03株),参考NCBI上部分IBV毒株N基因... 详细信息

试验旨在确定国内鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)流行毒株核蛋白N与市场上现用疫苗株、近年国内外分离株的差异性。本研究利用自山东某鸡场病鸡肾脏组织分离获得、经PCR鉴定为IBV阳性的毒株(命名为SD03株),参考NCBI上部分IBV毒株N基因的保守区域设计引物,进行RT-PCR扩增,构建重组pMD18-T-N/DH5α菌,测序获得N基因序列。与参考株进行了核苷酸及氨基酸同源性分析,结合DNAStar软件与http://***/网站对该基因编码的蛋白进行理化性质分析。结果显示,SD03株为IBV肾型毒株,与LDT3、partridge/GD/S14/2003毒株(肾型)核苷酸及氨基酸同源性均在99.0%以上。与其他国内外肾型经典毒株Ma5、W93、Gray、Holte株氨基酸同源性为90.0%~94.6%,与国内外呼吸型疫苗株H120、H52、M41氨基酸同源性为89.7%~91.0%。本研究深入分析了当前流行株SD03株N蛋白的理化特性,为N蛋白亚单位疫苗在不同系统中表达及蛋白纯化提供了理论依据,为中国现阶段IBV的防控奠定了一定的理论基础。

关键词：传染性支气管炎病毒 RT-PCR N基因 N蛋白同源性系统发生树 N蛋白理化性质

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鸡肾型传染性支气管炎病毒QD株S1基因的克隆与序列分析

引用

中国畜牧兽医 2014年第3期41卷 87-90页

作者：孙美玉陈冰邢婧珉王寿山吕茂杰何召庆杨保收天津瑞普生物技术股份有限公司、瑞普生物研究院生物制品研究中心天津300308

从某发病鸡场分离获得1株嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒（infectiousbronchitisvirus，IBV），命名为QD株，据GenBank发表的IBVS1基因序列设计1对特异性引物对QD分离株s1基因进行扩增、克隆及序列测定，并将其与国内流行株及参考毒株进行... 详细信息

从某发病鸡场分离获得1株嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒（infectiousbronchitisvirus，IBV），命名为QD株，据GenBank发表的IBVS1基因序列设计1对特异性引物对QD分离株s1基因进行扩增、克隆及序列测定，并将其与国内流行株及参考毒株进行比对。结果显示，IBVQD株S1基因全长为1620bp，S蛋白裂解识别位点为RRFRR。同源性分析结果表明，QD株与国内外疫苗毒株核苷酸同源性为78．8％～82．2％。遗传进化分析结果表明，QD株与国内外主要疫苗株亲缘关系较远，与近几年国内分离的肾型毒株亲缘关系最近。本试验结果表明IBV肾型毒株在中国广为流行，该毒株可作为肾型传染性支气管炎疫苗株的候选毒株。

关键词：传染性支气管炎病毒 S1基因序列分析

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