检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2012年第10期52卷 1219-1227页

作者：王志明潘元龙吴俊朱宝利中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

【目的】对卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)美国株(BCG Tice)进行基因组补缺口(补洞)工作,以得到它的基因组完整序列。【方法】首先对BCG Tice进行高通量测序,使用SOAPdenovo软件对得到的数据进行拼接。由于在高通量测序的过程中... 详细信息

【目的】对卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)美国株(BCG Tice)进行基因组补缺口(补洞)工作,以得到它的基因组完整序列。【方法】首先对BCG Tice进行高通量测序,使用SOAPdenovo软件对得到的数据进行拼接。由于在高通量测序的过程中基因组某些区域测序覆盖度低,测序质量差会使测序结果经拼接后形成众多的重叠群(contig),相邻的位置关系确定的contig形成一个scaffold,contig之间未测到的区域为缺口序列(gap),在contig末端设计引物进行PCR扩增,得到连接相邻contig的PCR产物,对PCR产物进行测序。通过优化PCR引物设计策略,尝试不同的聚合酶进行聚合反应,调整PCR反应条件并结合PCR产物构建克隆测序等方法,补齐contig之间的缺口序列。【结果】完成了BCG Tice的全基因组测序,得到了它的基因组完整序列,序列已提交到美国国立生物技术信息中心(NCBI)的GenBank数据库。【结论】BCG属于高GC含量的革兰氏阳性细菌,其基因组GC含量高达65.65%。本文以BCG Tice基因组补洞为例,对高GC含量基因组补缺口过程中遇到的问题与采取的策略给予概述,望给相关高GC含量基因组的物种全基因组测序补缺口工作提供一些借鉴。

关键词：卡介苗高GC 补缺口序列分析

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Gp96蛋白的免疫学及其临床应用研究进展

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生物工程学报 2011年第5期27卷 704-711页

作者：陈才伟贾晓娟孟颂东刘文军中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

热休克蛋白Gp96属于HSP90家族,是内质网中最丰富的蛋白质之一,在细胞内发挥着分子伴侣的作用。在天然免疫中,Gp96则通过与Toll样受体等相互作用刺激抗原呈递细胞(如DC等)产生各种细胞因子激活免疫系统;而在获得性免疫中,Gp96-抗原肽复... 详细信息

热休克蛋白Gp96属于HSP90家族,是内质网中最丰富的蛋白质之一,在细胞内发挥着分子伴侣的作用。在天然免疫中,Gp96则通过与Toll样受体等相互作用刺激抗原呈递细胞(如DC等)产生各种细胞因子激活免疫系统;而在获得性免疫中,Gp96-抗原肽复合物通过抗原交叉将抗原肽呈递给MHC-Ⅰ类分子,诱发机体抗原特异性细胞毒T细胞免疫应答,清除病原物感染和肿瘤;近年来的研究还发现Gp96具有免疫佐剂的功能。以下从Gp96的生物学特性、免疫学机制以及其在抗病原感染和抗肿瘤免疫中的应用等方面做一小结,为设计以Gp96-抗原肽为新一代疫苗的临床研究提供理论基础。

关键词：热休克蛋白 Gp96 免疫佐剂抗原交叉呈递

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泛素系统在结核分枝杆菌与宿主相互作用中的调控机制研究进展

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中国免疫学杂志 2017年第2期33卷 161-169页

作者：柴琪瑶刘翠华中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)是一种极其成功的胞内病原菌,可通过多种策略实现免疫逃逸,从而在宿主巨噬细胞中长期存活。在对抗病原菌的防御过程中,泛素系统(Ubiquitin system)在激活宿主炎症免疫反应、细胞自噬、吞... 详细信息

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)是一种极其成功的胞内病原菌,可通过多种策略实现免疫逃逸,从而在宿主巨噬细胞中长期存活。在对抗病原菌的防御过程中,泛素系统(Ubiquitin system)在激活宿主炎症免疫反应、细胞自噬、吞噬体成熟和细胞死亡等天然免疫功能及相关信号通路中发挥了重要的调控作用。而另一方面,近年的研究表明Mtb等胞内病原菌可通过分泌效应蛋白(Effector proteins)挟持并利用宿主泛素系统进而抑制宿主的免疫功能,这些病原-宿主互作的界面有望成为抗结核药物研发的新靶点。

关键词：泛素系统结核分枝杆菌巨噬细胞天然免疫信号通路效应蛋白

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埃博拉病毒病主要研究进展及援非实验室检测

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中华流行病学杂志 2015年第9期36卷 1023-1025页

作者：刘玮房彤宇曹务春病原微生物和生物安全国家重点实验室北京100071 中国援助塞拉利昂移动实验室检测队

埃博拉病毒病是由埃博拉病毒感染引起的急性、出血性人兽共患传染病，是人类目前已知最为危险的传染病之一。该病病死率最高可达90％，由于其对人类危害极大，《国际禁止生物武器公约》已将埃博拉病毒列为潜在的致死性生物战剂。2014年... 详细信息

埃博拉病毒病是由埃博拉病毒感染引起的急性、出血性人兽共患传染病，是人类目前已知最为危险的传染病之一。该病病死率最高可达90％，由于其对人类危害极大，《国际禁止生物武器公约》已将埃博拉病毒列为潜在的致死性生物战剂。2014年暴发的埃博拉疫情至今仍未平息，被定性为“埃博拉病毒史最致命性暴发”。WHO发出警告，同时呼吁全球各国积极投身到疫情的应对中。为加深对该病的科学认识，提高科学防控水平，现就埃博拉病毒病的流行病学、临床表现和诊断等方面的近期研究进展和我国应急检测队赴塞拉利昂进行国际救援活动情况进行介绍。

关键词：埃博拉病毒病流行病学应急检测

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弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白调控TAF15对THP-1细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年

作者：殷荷马磊党甜甜李佳铭赵志军宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏医学检验临床医学研究中心

目的探究弓形虫Ⅰ（RH株）、Ⅲ（VEG株）型棒状体蛋白16 （ROP16）通过调控TATA结合蛋白相关因子15 （TAF15）对人单核细胞白血病细胞（THP-1）增殖、凋亡的影响及作用机制。方法将Ⅰ、Ⅲ型ROP16重组过表达慢病毒转染至THP-1细胞，构... 详细信息

目的探究弓形虫Ⅰ（RH株）、Ⅲ（VEG株）型棒状体蛋白16 （ROP16）通过调控TATA结合蛋白相关因子15 （TAF15）对人单核细胞白血病细胞（THP-1）增殖、凋亡的影响及作用机制。方法将Ⅰ、Ⅲ型ROP16重组过表达慢病毒转染至THP-1细胞，构建稳定表达ROP16的单克隆细胞株（THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ），以转染空载体慢病毒的细胞为空载体对照组（THP-1-Venus），无转染细胞为对照组（THP-1），通过RT-qPCR和Western blotting验证过表达效果。利用IP-MS在THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ细胞稳转株中预测ROP16的互作蛋白，并通过RT-qPCR和Western blotting检测细胞中互作蛋白TAF15的表达。将合成的TAF15 siRNA分别转染至THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ细胞稳转株，分为THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+TAF15 siRNA 1215/825/288组，同时设空载体对照组（THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+TAF15 siRNA NC）和无转染对照组（THP-1），并利用Western blotting验证TAF15沉默效果。通过CCK-8与流式细胞术检测各组细胞增殖及凋亡情况，Western blotting检测p21、周期素依赖性激酶6 （CDK6）、G1/S特异性周期蛋白（CyclinD1）、 B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白（Bcl-2）、 Bcl-2相关X蛋白（Bax）、裂解型半胱氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、半胱氨酸蛋白酶-9 （Caspase-9）及信号转导和转录激活因子3 （STAT3）、磷酸化STAT3 （PSTAT3）蛋白的表达。结果 RT-qPCR和Western blotting结果显示，THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组ROP16 mRNA的相对转录水平为2 679.427±250.600、 2 395.410±325.700，均高于THP-1-Venus组（1.036±0.102）(F=153.3, P <0.001),THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组ROP16蛋白的相对表达水平为4.526±0.020、5.457±0.250，均高于THP-1-Venus组（1.688±0.653）(F=76.4, P <0.001)。IP-MS分析提示TAF15为Ⅰ、Ⅲ型ROP16的互作蛋白，且RT-qPCR及Western blotting验证结果显示，THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组TAF15 mRNA的相对转录水平为6.027±0.313、5.567±0.088，均高于THP-1-Venus组（0.985±0.027）(F=869.4,P <0.001),THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组TAF15蛋白的相对表达水平为1.789±0.145、1.593±0.029，均高于THP-1-Venus组（1.010±0.365）(F=50.6,P <0.01)。TAF15 siRNA转染48 h后，Western blotting结果显示，THP-1-ROP16Ⅰ+TAF15 siRNA 1215/825/288组TAF15蛋白的相对表达水平分别为0.384±0.047、0.246±0.072、0.125±0.026，均低于THP-1-Venus组（1.007±0.019）(F=313.1,P <0.001),THP-1-ROP16Ⅲ+siRNA 1215/825/288组细胞TAF15蛋白的相对表达水平分别为0.186±0.020、 0.180±0.015、0.112±0.019，均低于THP-1-Venus组（0.995±0.052）(F=3046.0,P <0.001)。CCK-8实验结果显示，THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC组细胞A450值分别为0.803±0.015、0.813±0.011，低于THP-1-Venus组（0.997±0.010、0.995±0.016）(t=19.2、24.0,P <0.001)。THP-1-ROP16Ⅰ+siRNA 825/288组细胞A450值分别为0.986±0.010、0.983±0.004，与THP-1-Venus组比较差异无统计学意义（F=3.5,P> 0.05）,THP-1-ROP16Ⅲ+siRNA 825/288组细胞A450值分别为0.980±0.006、0.984±0.010，与THP-1-Venus组比较差异无统计学意义（F=2.9,P> 0.05）。流式细胞术检测结果显示，THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC组细胞细胞凋亡率分别为（38.19±0.45）%、（38.06±0.84）%，高于THP-1-Venus组(（28.41±0.69）%、（28.95±

关键词：刚地弓形虫 ROP16蛋白 TAF15 THP-1细胞

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犬咬伤后罕见病原菌致伤口感染1例

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中国感染与化疗杂志 2020年第1期20卷 89-91页

作者：郭睿周晓燕赵梅殷国民贾伟李刚宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏病原微生物重点实验室

犬咬伤可导致软组织损伤,由于犬口腔内细菌含量较高,咬伤后易引起伤口化脓性感染,形成蜂窝织炎,致皮下、筋膜下和肌间等处的疏松结缔组织的弥漫性化脓性炎症,严重者可危及生命[1]。本院微生物实验室于2019年2月6日从犬咬伤患者伤口分泌... 详细信息

犬咬伤可导致软组织损伤,由于犬口腔内细菌含量较高,咬伤后易引起伤口化脓性感染,形成蜂窝织炎,致皮下、筋膜下和肌间等处的疏松结缔组织的弥漫性化脓性炎症,严重者可危及生命[1]。本院微生物实验室于2019年2月6日从犬咬伤患者伤口分泌物中同时分离出动物溃疡伯杰菌、羊链球菌和口腔巴斯德菌3种临床罕见菌株,并对目前国内外以上3种菌株感染案例报道进行汇总,以提高对3种菌株及其感染特征的认识,为临床诊断及治疗提供参考。

关键词：犬动物咬伤动物溃疡伯杰菌口腔巴斯德菌羊链球菌

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生物制品专刊序言

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生物工程学报 2011年第5期27卷 671-674页

作者：刘文军中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

生物制品是一类预防、诊断和治疗疫病的特殊制剂。生物制品的研发是融合微生物学、免疫学、分子生物学、细胞学、基因工程及发酵工艺等学科知识的综合技术体现。生物制品产业是整个生物技术产业的核心和热点。近年来,我国在生物制品研... 详细信息

生物制品是一类预防、诊断和治疗疫病的特殊制剂。生物制品的研发是融合微生物学、免疫学、分子生物学、细胞学、基因工程及发酵工艺等学科知识的综合技术体现。生物制品产业是整个生物技术产业的核心和热点。近年来,我国在生物制品研发方面取得了较大进步,为促进我国生物制品研究的交流,本期"生物制品"专刊集中展现了我国生物制品研究人员在预防生物制品、诊断制品、治疗生物制品领域所取得的最新进展。

关键词：生物制品预防诊断治疗

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黑龙江立克次体感染对小鼠脾脏免疫相关基因转录的影响

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解放军医学杂志 2022年第4期47卷 326-333页

作者：于永慧段长松焦俊赵月峨周冬生温博海欧阳譞熊小路军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的分析黑龙江立克次体感染小鼠脾脏免疫相关基因的转录变化,筛选影响黑龙江立克次体感染致病进程的关键靶标。方法取20只雌性C3H/HeN小鼠,随机分为未感染组(0 hpi)、感染3 h组(3 hpi)、感染3 d组(3 dpi)及感染6 d组(6 dpi),每组5只,... 详细信息

目的分析黑龙江立克次体感染小鼠脾脏免疫相关基因的转录变化,筛选影响黑龙江立克次体感染致病进程的关键靶标。方法取20只雌性C3H/HeN小鼠,随机分为未感染组(0 hpi)、感染3 h组(3 hpi)、感染3 d组(3 dpi)及感染6 d组(6 dpi),每组5只,采用尾静脉注射法感染黑龙江立克次体,在4个时相点解剖小鼠取脾,提取总RNA进行测序,筛选出特异性转录基因并进行GO注释、R语言富集及KEGG可视化功能分析。结果小鼠感染黑龙江立克次体后,脾脏有219930个mRNA发生了特异性转录,通过GO注释及富集筛选出显著性变化的3类基因:(1)35个天然免疫相关基因,其中参与γ干扰素(IFN-γ)信号通路的irg1、gbp10基因转录上调最明显(P<0.05);(2)31个获得性免疫相关基因,其中参与细胞凋亡通路的gzmb基因转录上调最明显(P<0.05);(3)41个炎症反应相关基因,其中参与细胞因子与细胞因子受体信号通路的ccl4基因转录上调最明显(P<0.05)。结论宿主IFN-γ信号通路中的irg1、gbp10基因,细胞凋亡通路中的gzmb基因,细胞因子及细胞因子受体信号通路中的ccl4基因影响黑龙江立克次体感染的致病进程。

关键词：立克次体感染转录,遗传黑龙江立克次体天然免疫获得性免疫炎症反应

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抗禽流感病毒H5N1分泌型IgA在中国仓鼠卵巢细胞中的表达

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生物工程学报 2011年第2期27卷 219-225页

作者：李存张宝中安小平米志强刘大斌姜焕焕潘博王盛陈斌黄芬王娟王晓娜童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

分泌型IgA(SIgA)在机体的粘膜免疫中具有重要作用,在外分泌道中比单体IgA和IgG抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1人-鼠嵌合分泌型IgA抗体,首先以本室先前构建的稳定表达IgA的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系为基础,共转... 详细信息

分泌型IgA(SIgA)在机体的粘膜免疫中具有重要作用,在外分泌道中比单体IgA和IgG抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1人-鼠嵌合分泌型IgA抗体,首先以本室先前构建的稳定表达IgA的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系为基础,共转染分泌片和J链表达质粒,然后用抗生素Zeocin选择阳性克隆细胞,利用倍比稀释的方法筛选分泌SIgA的单克隆细胞,通过Western blotting分析培养上清中SIgA的表达情况。结果表明,在CHO细胞中成功表达了SIgA抗体,上述研究为研制分泌型IgA抗体制剂奠定了良好的基础。

关键词：禽流感病毒H5N1 Western blotting SIgA抗体

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病原菌利用磷脂磷酸酶挟持宿主泛素并抑制细胞焦亡的免疫逃逸机制

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科学通报 2022年第36期67卷 4309-4311页

作者：柴琪瑶刘翠华中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101 中国科学院大学存济医学院北京101408

结核病(tuberculosis)是一种由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)感染引起的古老的传染性疾病,目前依旧严重威胁全球人类健康.据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)报道,2020年全球约有987万结核新发病例,并有149.8... 详细信息

结核病(tuberculosis)是一种由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)感染引起的古老的传染性疾病,目前依旧严重威胁全球人类健康.据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)报道,2020年全球约有987万结核新发病例,并有149.8万人死于结核感染.此外,研究显示,全球敏感结核病治疗成功率为85%,而耐多药/耐利福平药结核(MDR/RR-TB)的治疗成功率仅为57%[1].

关键词：结核病治疗结核感染细胞焦亡耐多药免疫逃逸机制新发病例磷酸酶传染性疾病

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