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癌变．畸变．突变 2009年第3期21卷 169-172页

作者：张勇燕舒为群曹佳罗教华付文娟第三军医大学军事预防医学院环境卫生学教研室重庆400038 第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室重庆400038

背景与目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)宫内暴露对亲代和F1代孕鼠繁殖能力以及F1和F2代雄性仔鼠生长发育及生殖系统的影响。材料与方法:选择妊娠SD大鼠60只,随机分为溶剂对照组(玉米油)、DBP 50 mg/(kg.d)染毒组和... 详细信息

背景与目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)宫内暴露对亲代和F1代孕鼠繁殖能力以及F1和F2代雄性仔鼠生长发育及生殖系统的影响。材料与方法:选择妊娠SD大鼠60只,随机分为溶剂对照组(玉米油)、DBP 50 mg/(kg.d)染毒组和DBP 250 mg/(kg.d)染毒组,于GD8至GD21每日经口灌胃染毒,连续繁殖两代,观察F0及F1代孕鼠体重、产仔数、产仔性别比等的改变,以及F1和F2代雄性仔鼠体重、肛殖距、精子数目及形态、睾丸及附睾组织病理学改变。结果:与对照组相比,DBP50 mg/(kg.d)组F1代母鼠哺乳期体重的增重增加(P<0.05);F2代雌性仔鼠肛殖距缩短(P<0.05),但经自身体重校正后差异无统计意义(P>0.05)。DBP 250 mg/(kg.d)组F0代母鼠哺乳期体重增重减少(P<0.05);F1代雄性仔鼠肛殖距缩短,用自身体重校正后差异显著(P<0.05);F1代雄鼠精子数目明显减少(P<0.01);F1和F2代雄性仔鼠精子头部畸形率增加(P<0.05)。结论:亲代宫内暴露DBP可影响F0乃至F1代孕鼠的繁殖功能,引起F1代雄性仔鼠生殖系统损伤,可能会延续至F2代。

关键词：邻苯二甲酸二丁酯繁殖发育肛殖距精子畸形

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邻苯二甲酸二丁酯亚慢性染毒对大鼠睾丸Insl3 mRNA表达的影响

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癌变．畸变．突变 2009年第3期21卷 161-164页

作者：赵清舒为群曹佳张亮付文娟第三军医大学军事预防医学院环境卫生学教研室重庆400038 第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室重庆400038

背景与目的:观察邻苯二甲酸二丁酯(DBP)亚慢性染毒对青春期大鼠睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Insl3)mRNA表达水平的影响。材料与方法:青春期健康雄性SD大鼠72只,随机分为3组:溶剂对照组(玉米油),DBP 50 mg/kg和250 mg/kg剂量的... 详细信息

背景与目的:观察邻苯二甲酸二丁酯(DBP)亚慢性染毒对青春期大鼠睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Insl3)mRNA表达水平的影响。材料与方法:青春期健康雄性SD大鼠72只,随机分为3组:溶剂对照组(玉米油),DBP 50 mg/kg和250 mg/kg剂量的染毒组,每组24只。隔日染毒,等体积灌胃,连续染毒90 d。分别于染毒后30、60和90 d各组随机选取8只大鼠处死。取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾称重并计算脏器系数,放免法检测血清睾酮含量,实时荧光定量PCR法检测睾丸Insl3 mRNA表达。结果:DBP 250 mg/kg组染毒90 d肝脏系数显著大于对照组(P<0.05);50 mg/kg组染毒60 d大鼠血清睾酮水平较对照组显著升高(P<0.05),而250 mg/kg组比50 mg/kg组显著下降(P<0.01);各染毒组大鼠睾丸Insl3 mRNA表达水平较对照组显著下调(P<0.01),染毒30 d、60 d时DBP 250 mg/kg剂量组较DBP 50 mg/kg组显著下调(P<0.05),各染毒组睾丸Insl3 mRNA表达水平均随处理时间延长先下调而后上调,60 d较30 d显著降低(P<0.05),90 d较60 d显著升高(P<0.01)。结论:青春期大鼠DBP亚慢性暴露可干扰血清睾酮及睾丸Insl3 mRNA表达水平,对肝脏可能有潜在毒性。

关键词：邻苯二甲酸二丁酯间质细胞胰岛素样因子3 睾酮

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邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘对大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和微管蛋白表达的影响

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癌变．畸变．突变 2009年第3期21卷 165-168页

作者：邱志群舒为群陈济安罗教华杨澜郑有科曹佳第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室重庆400038 第三军医大学军事预防医学院环境卫生学教研室重庆400038

背景与目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)和苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,BaP]单独或联合染毒对大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和α-微管蛋白表达的影响。材料与方法:分离纯化大鼠睾丸支持细胞,以1、10、100μg/ml DBP和0.1... 详细信息

背景与目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)和苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,BaP]单独或联合染毒对大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和α-微管蛋白表达的影响。材料与方法:分离纯化大鼠睾丸支持细胞,以1、10、100μg/ml DBP和0.1、1、10μg/ml BaP单独或依次联合染毒12、24、48 h后,用免疫荧光方法检测细胞中波形蛋白和α-微管蛋白的表达。结果:与DMSO组比较,染毒24 h后,10μg/ml DBP与1μg/ml BaP均可诱导波形蛋白表达水平下降(P<0.05),100μg/ml DBP组和10μg/ml BaP组的波形蛋白下降更为显著(P<0.01),100μg/ml DBP+10μg/ml BaP联合染毒组波形蛋白的表达显著降低(P<0.01)。染毒48 h后,DBP和BaP单独染毒中、高剂量组波形蛋白的表达显著降低(分别为P<0.05和P<0.01);联合染毒各组的波形蛋白表达与DMSO组相比均显著减少(P<0.05或P<0.01),但与DBP和BaP各对应剂量单独作用组并无显著差异(P>0.05)。染毒24 h后,10μg/mlBaP组α-微管蛋白表达明显增加(P<0.05);48 h后,100μg/ml DBP组α-微管蛋白表达显著上升(P<0.05),BaP各组α-微管蛋白表达均显著增加。结论:一定剂量的DBP和/或BaP可诱导大鼠支持细胞内波形蛋白表达降低,微管蛋白表达增加,二者联合作用呈现拮抗效应。

关键词：邻苯二甲酸二TJB 苯并[a]芘睾丸支持细胞波形蛋白 α-微管蛋白

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大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养与鉴定

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癌变．畸变．突变 2009年第3期21卷 234-237页

作者：许川舒为群张亮曹佳周新第三军医大学军事预防医学院环境卫生学教研室重庆400038 第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院烧伤科重庆400038

背景与目的:探讨大鼠卵巢高纯度颗粒细胞培养及鉴定的方法,建立一种简便、稳定的细胞模型。材料与方法:选用SD雌性大鼠(21～25 d),皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG),48 h后用颈椎脱臼法处死,剖取双侧卵巢,采用机械分离方法释放卵巢颗... 详细信息

背景与目的:探讨大鼠卵巢高纯度颗粒细胞培养及鉴定的方法,建立一种简便、稳定的细胞模型。材料与方法:选用SD雌性大鼠(21～25 d),皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG),48 h后用颈椎脱臼法处死,剖取双侧卵巢,采用机械分离方法释放卵巢颗粒细胞,0.25%胰蛋白酶消化结合低速离心分离细胞,用含15%胎牛血清的DMEM/F12培养基,置于37℃,5%CO2培养箱培养。以HE染色和卵泡刺激素受体(FSHR)免疫组化染色对所培养的卵巢颗粒细胞进行鉴定,用MTT法绘制细胞生长曲线,并检测细胞培养液雌二醇(E2)和孕酮(P)的分泌量。结果:分离培养的卵巢颗粒细胞存活率>90%,细胞纯度达到95%以上;体外培养的颗粒细胞对数生长期为48～96 h;颗粒细胞具有正常的分泌雌激素功能,在培养24 h细胞培养液中E2和P的分泌量分别为(10.36±15.89)pg/ml和(77.91±17.24)pg/ml。结论:采用机械分离法结合胰蛋白酶消化及低速离心法分离培养的卵巢颗粒细胞纯度高、活性好,用FSHR表达染色鉴定颗粒细胞是一种简便快速的方法。

关键词：大鼠卵巢颗粒细胞培养鉴定

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乙酰甲胺磷致雄性大鼠生殖毒性作用

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中国公共卫生 2008年第10期24卷 1233-1234页

作者：宁艳花刘秀芳郭凤英薛亚斌关素珍刘桂珠宁夏医学院公共卫生学院环境卫生学与毒理学教研室银川750004

乙酰甲胺磷(acephate)化学名称为O,S-二甲苯-N-乙酰基硫代磷酰酸酯,是一种高毒农药甲胺磷的乙酰基衍生物,以高效、低毒、低残留而优于众多有机磷杀虫剂。可作为替代高毒农药的产品。国外有报道,乙酰甲胺磷对雄性小鼠的生殖系统具有毒性... 详细信息

乙酰甲胺磷(acephate)化学名称为O,S-二甲苯-N-乙酰基硫代磷酰酸酯,是一种高毒农药甲胺磷的乙酰基衍生物,以高效、低毒、低残留而优于众多有机磷杀虫剂。可作为替代高毒农药的产品。国外有报道,乙酰甲胺磷对雄性小鼠的生殖系统具有毒性作用,可致小鼠精子数量减少和精子运动能力下降。本文旨在探讨不同剂量乙酰甲胺磷暴露对雄性大鼠的生殖毒性作用。[第一段]

关键词：生殖毒性作用乙酰甲胺磷雄性大鼠 N-乙酰基有机磷杀虫剂精子运动能力雄性小鼠化学名称

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邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯低剂量暴露对雄性小鼠生殖发育的影响

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环境与健康杂志 2008年第4期25卷 308-310页

作者：李丽萍刘秀芳王桂燕刘桂珠宁夏医学院公共卫生学院环境卫生学与毒理学教研室宁夏银川750001

目的观察邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)低剂量暴露对雄性小鼠的生殖发育毒性作用。方法将清洁级ICR小鼠随机分为4个DEHP染毒组(1/120LD50,1/60LD50,1/30LD50,1/15LD50,即250、500、1000、2000mg/kg组),阳性对照组(环磷酰胺,40mg/kg)和阴性对照组(玉米油);DEHP染毒组和阴性对照组灌胃染毒30d,阳性对照组灌胃5d,每天1次。采用一般生殖毒性试验和显性致死突变试验的方法,研究DEHP低剂量暴露对雄性小鼠生殖细胞的损伤作用和生育能力的影响。结果一般生殖毒性试验结果显示,低剂量DEHP染毒雄性小鼠睾丸、附睾重量降低(r睾丸=-0.578,P<0.01;r附睾=-0.661,P<0.01),精子总数减少(r=-0.608,P<0.01),精子畸形率增高(r=0.836,P<0.01),精子活动度降低(P<0.05)。显性致死突变试验研究结果显示,250mg/kgDEHP染毒组小鼠受孕率降低,但与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);DEHP染毒组子代小鼠平均着床数减少(r=-0.892,P<0.01),与阴性对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);平均早期死亡胚胎数随染毒剂量增加而增加(r=0.996,P<0.01),250mg/kg染毒组与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论DEHP低剂量暴露对雄性小鼠具有生殖毒性作用,可降低小鼠受孕率,使子代小鼠平均着床数减少,平均早期死亡胚胎数增加。

关键词：雌激素类邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯显性致死突变生殖发育毒性

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乙酰甲胺磷对雄性大鼠睾丸组织抗氧化能力的影响

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宁夏医学院学报 2008年第6期30卷 726-728页

作者：宁艳花刘秀芳薛亚斌关素珍刘桂珠宁夏医学院公共卫生学院环境卫生学与毒理学教研室银川750004

目的探讨乙酰甲胺磷对雄性大鼠睾丸组织抗氧化能力的影响。方法24只健康成年SD雄性大鼠,随机分为4组,每组6只。阴性对照组(蒸馏水)和3个不同剂量乙酰甲胺磷染毒组(11.81、23.63、47.25 mg/***),采用经口灌胃染毒方式,共染毒60d。检测睾... 详细信息

目的探讨乙酰甲胺磷对雄性大鼠睾丸组织抗氧化能力的影响。方法24只健康成年SD雄性大鼠,随机分为4组,每组6只。阴性对照组(蒸馏水)和3个不同剂量乙酰甲胺磷染毒组(11.81、23.63、47.25 mg/***),采用经口灌胃染毒方式,共染毒60d。检测睾丸组织氧化损伤指标SOD和GSH-Px活性、GSH和MDA的含量。结果乙酰甲胺磷各染毒组睾丸组织匀浆中SOD和GSH-Px活力均呈现剂量反应关系,其中高剂量染毒组低于阴性对照组(P<0.05)。结论乙酰甲胺磷在47.25 mg/kg剂量下,对雄性大鼠睾丸抗氧化功能有一定的抑制作用。

关键词：乙酰甲胺磷大鼠睾丸抗氧化功能

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乙酰甲胺磷对雌性大鼠氧化损伤及卵巢功能的影响

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癌变．畸变．突变 2008年第6期20卷 463-466页

作者：刘秀芳宁艳花郭凤英关素珍薛亚斌刘桂珠宁夏医学院公共卫生学院环境卫生学与毒理学教研室银川750004

背景与目的:研究乙酰甲胺磷对雌性大鼠氧化损伤及卵巢功能的影响。材料与方法:30只健康成年SD雌性大鼠,随机分为5组,每组6只。实验组设高(47.25mg/kg)、中(23.63mg/kg)、低(11.81mg/kg)3个不同剂量乙酰甲胺磷染毒组、阴性对照组(蒸馏水... 详细信息

背景与目的:研究乙酰甲胺磷对雌性大鼠氧化损伤及卵巢功能的影响。材料与方法:30只健康成年SD雌性大鼠,随机分为5组,每组6只。实验组设高(47.25mg/kg)、中(23.63mg/kg)、低(11.81mg/kg)3个不同剂量乙酰甲胺磷染毒组、阴性对照组(蒸馏水)和阳性对照组(雌二醇,0.1mg/kg)。染毒组和阴性对照组采用经口灌胃,阳性对照组采用腹腔注射染毒。检测大鼠动情周期、血清和卵巢组织中SOD和GST活性、GSH和MDA含量及卵巢组织形态等的改变。结果:与阴性对照组比较,乙酰甲胺磷高剂量染毒组大鼠动情周期延长,血清SOD活力升高,GSH含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量染毒组大鼠血清MDA含量均高于阴性对照组,高剂量染毒组GST活力显著低于阴性对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。各染毒组卵巢组织匀浆中SOD活力均低于阴性对照组,各染毒组GST活力均高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。低剂量染毒组卵巢组织GSH含量低于阴性对照组,高剂量染毒组MDA含量显著高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。高剂量染毒组大鼠卵巢组织的病理改变主要表现为始基卵泡和初级卵泡增多,而次级卵泡和成熟卵泡较少见,且闭锁卵泡增多。结论:乙酰甲胺磷对雌性大鼠具有一定的生殖毒性,在高剂量(47.25mg/kg)染毒下,可引起动情周期的紊乱、卵巢组织的病理学改变,抑制卵巢的抗氧化酶活性,诱导脂质过氧化。

关键词：乙酰甲胺磷雌性大鼠卵巢生殖毒性

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邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘联合染毒对大鼠睾丸支持细胞的影响

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第三军医大学学报 2008年第11期30卷 1002-1005页

作者：邱志群舒为群付文娟曹佳第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室第三军医大学军事预防医学院环境卫生学教研室重庆400038

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘单独或联合染毒对大鼠睾丸支持细胞增殖及乳酸分泌的影响。方法分离纯化大鼠睾丸支持细胞,油红O染色鉴定纯度大于90%后,以0.1、1、10、100、500μg/ml邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)和0.0... 详细信息

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘单独或联合染毒对大鼠睾丸支持细胞增殖及乳酸分泌的影响。方法分离纯化大鼠睾丸支持细胞,油红O染色鉴定纯度大于90%后,以0.1、1、10、100、500μg/ml邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)和0.01、0.1、1、10、100μg/ml苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,BaP]单独或依次联合染毒,用MTT法检测对支持细胞增殖的影响,并测定培养液中的乳酸含量。结果DBP染毒后100μg/ml吸光度值[D(490)]显著高于对照组(P<0.01)。BaP染毒各组的D(490)值与对照组比较,无统计学差异。DBP100μg/ml+BaP10μg/ml联合染毒组D(490)值显著上升(P<0.01),而在500μg/ml DBP+50μg/ml BaP联合染毒组D(490)值下降(P<0.05)。DBP100μg/ml组、100μg/ml DBP+10μg/ml BaP组和500μg/ml DBP+50μg/ml DBP组培养液中的乳酸显著增加(P<0.01),DBP500μg/ml组和BaP50μg/ml组培养液中的乳酸含量也增高(P<0.05)。结论一定剂量DBP可刺激支持细胞增殖并增加乳酸分泌,BaP虽不抑制支持细胞的增殖,但可使乳酸分泌增加。二者联合作用,在一定剂量下以DBP的效应为主,但在高剂量可抑制细胞增殖,呈现一定的协同作用。

关键词：邻苯二甲酸二丁酯苯并[a]芘睾丸支持细胞乳酸

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大鼠睾丸支持细胞的分离、鉴定与培养

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癌变．畸变．突变 2008年第4期20卷 318-321页

作者：邱志群舒为群付文娟曹佳第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室重庆400038 第三军医大学军事预防医学院环境卫生学教研室重庆400038

背景与目的：分离培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞。材料与方法：选用SD雄性大鼠（18—21d），处死取出睾丸，采用0．25％胰蛋白酶、0．05％胶原酶二步酶消化法结合低速离心分离支持细胞，置于35℃，5％CO2培养箱培养，48h后用20mmol／LTf... 详细信息

背景与目的：分离培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞。材料与方法：选用SD雄性大鼠（18—21d），处死取出睾丸，采用0．25％胰蛋白酶、0．05％胶原酶二步酶消化法结合低速离心分离支持细胞，置于35℃，5％CO2培养箱培养，48h后用20mmol／LTfis-HCl低渗处理培养细胞。0．25％胰蛋白酶消化后二次贴壁培养，用油红O染色和透射电镜观察对所培养的支持细胞进行鉴定，并用MTT法绘制细胞生长曲线。结果：分离培养的支持细胞纯度达95％，体外培养的对数生长期为4—9d。结论：采用二步酶消化法与低速离心及低渗处理法分离培养的支持细胞纯度高，用油红O染色鉴定支持细胞是一种简便快速的方法。

关键词：大鼠支持细胞分离鉴定

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