检索结果-内蒙古大学图书馆

西安交通大学学报（医学版） 2016年第1期37卷 54-58,67页

作者：马会明张永芳王蒙蒙李昕王永峰田洪成裴秀英王燕蓉宁夏医科大学/生育力保持教育部重点实验室/宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室/宁夏医科大学总医院生殖医学中心/人体解剖与组织胚胎学系宁夏银川750004

目的探讨α-硫辛酸对小鼠颗粒细胞培养过程中抗氧化水平和抗凋亡水平的影响。方法收集经PMSG处理的小鼠卵巢颗粒细胞,经原代培养24h后,添加终浓度为100μmol/L的α-硫辛酸继续培养24h,测定氧化水平SOD、MDA和GSH-Px参数,评价抗氧化能力... 详细信息

目的探讨α-硫辛酸对小鼠颗粒细胞培养过程中抗氧化水平和抗凋亡水平的影响。方法收集经PMSG处理的小鼠卵巢颗粒细胞,经原代培养24h后,添加终浓度为100μmol/L的α-硫辛酸继续培养24h,测定氧化水平SOD、MDA和GSH-Px参数,评价抗氧化能力,采用Trizol法提取各组细胞的RNA,进行RT-PCR法检测α-硫辛酸对caspase-3和caspase-9基因的表达情况的影响,同时利用细胞免疫荧光和ELISA法检测caspase-3和caspase-9蛋白表达,并分析α-硫辛酸降低细胞凋亡的作用。结果分离培养的小鼠卵巢颗粒细胞α-硫辛酸添加后,SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P<0.05);经过RT-PCR扩增技术获得长度为180bp的特异性caspase-3产物,获得长度为152bp的特异性caspase-9产物,α-硫辛酸添加可显著性降低caspase-3和caspase-9mRNA的表达(P<0.05);免疫荧光细胞化学染色显示颗粒细胞caspase-3和caspase-9蛋白阳性染色定位于细胞胞质,分别呈现绿色荧光和红色荧光,细胞核呈蓝色荧光;ELISA结果显示α-硫辛酸添加后caspase-3和caspase-9酶活性显著下调(P<0.05)。结论小鼠颗粒细胞培养过程中添加α-硫辛酸可明显改变细胞抗氧化能力,对卵巢颗粒细胞培养过程中的氧化应激诱导的细胞凋亡起到一定的保护作用。

关键词： α-硫辛酸氧化应激细胞凋亡卵巢颗粒细胞小鼠

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二甲双胍通过抑制核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6)调节体外人颗粒细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达

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生殖与避孕 2015年第3期35卷 146-153页

作者：张永芳王蒙蒙李昕王永峰裴秀英王燕蓉马会明徐仙宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室/宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏医科大学总医院生殖医学中心人体解剖与组织胚胎学系银川753600

目的:探讨二甲双胍对核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k)及胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白及其ser307位点磷酸化表达的影响。方法:利用0.1 mmol/L二甲双胍体外连续作用多囊卵巢综合症(PCOS)患者黄素化颗粒细胞24 h为实验组,设未加二甲双... 详细信息

目的:探讨二甲双胍对核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k)及胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白及其ser307位点磷酸化表达的影响。方法:利用0.1 mmol/L二甲双胍体外连续作用多囊卵巢综合症(PCOS)患者黄素化颗粒细胞24 h为实验组,设未加二甲双胍培养的颗粒细胞为对照组。通过RT-PCR和Real-time PCR检测P70S6k和IRS-1的表达,细胞免疫荧光化学和Western blotting的方法检测P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白的表达。结果:Real-time PCR结果显示实验组P70S6k和IRS-1m RNA水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫荧光化学检测IRS-1和p-ser307-IRS-1蛋白在颗粒细胞胞质表达,P70S6k和p-thr389-P70S6k蛋白在细胞核表达。Western blotting法结果显示二甲双胍作用24 h前、后卵巢颗粒细胞P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达有统计学差异(P<0.05),灰度值分析显示添加二甲双胍组P70S6k、p-thr389-P70S6k蛋白表达显著升高,IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:二甲双胍可抑制人颗粒细胞P70S6k的表达,并通过Akt/P70S6k/IRS途径调节IRS-1的表达,从而增加颗粒细胞胰岛素的敏感性。

关键词：二甲双胍核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k) 胰岛素受体底物-1(IRS-1) 人颗粒细胞

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生长分化因子-9下调对小鼠卵巢颗粒细胞增殖能力的影响

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安徽医科大学学报 2016年第1期51卷 51-55页

作者：马会明张永芳王蒙蒙李昀伽蒲静于佳王燕蓉裴秀英徐仙宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室、宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室、人体解剖与组织胚胎学系宁夏医科大学总医院生殖医学中心银川750004

目的探讨生长分化因子-9(GDF9)对小鼠卵巢颗粒细胞增殖能力基因周期蛋白A(cyclin A)、周期蛋白D1(cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶抑制因子27(p27kip1)表达的影响。方法利用CCK-8检测法检测细胞的增殖能力;使用流式细胞术、Real-time PC... 详细信息

目的探讨生长分化因子-9(GDF9)对小鼠卵巢颗粒细胞增殖能力基因周期蛋白A(cyclin A)、周期蛋白D1(cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶抑制因子27(p27kip1)表达的影响。方法利用CCK-8检测法检测细胞的增殖能力;使用流式细胞术、Real-time PCR和Western blot法验证GDF9 siRNA的干扰效率;采用Real-time PCR和Western blot法检测细胞增殖cyclin A、cyclin D1和p27kip1 mRNA和蛋白表达情况。结果 GDF9 siRNA显著抑制颗粒细胞增殖活力,其中72 h抑制最明显(P<0.05);Real-time PCR和Western blot法检测结果显示GDF9 siRNA显著下调小鼠卵巢颗粒细胞中GDF9 mRNA及蛋白的表达(P<0.01);Realtime PCR法检测结果显示,细胞cyclin A、cyclin D1 mRNA表达降低,p27kip1 mRNA表达增强;Western blot法结果显示,GDF9 siRNA可促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1的表达,同时下调G2/M期调控蛋白cyclin A、cyclin D1的表达。结论靶向抑制小鼠卵巢颗粒细胞中GDF9的表达,下调细胞cyclin A、cyclin D1的表达,上调P27 kip1的表达,显著抑制细胞的增殖。

关键词： GDF9 siRNA 细胞增殖细胞周期卵巢颗粒细胞小鼠

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雌激素对卵巢颗粒细胞雌激素受体-β和转录因子叉头蛋白3表达的影响

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山东大学学报（医学版） 2016年第5期54卷 50-55页

作者：马会明张永芳王蒙蒙李昕王永峰田洪成胡蓉王燕蓉裴秀英徐仙宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室&宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学人体解剖与组织胚胎学系组织胚胎学教研室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院生殖医学中心宁夏银川750004

目的探讨雌激素(E2)对雌激素受体-β(ER-β)与转录因子叉头蛋白3(FoxO3)的表达及其对卵巢颗粒细胞增殖与凋亡的影响。方法利用添加1μmol/L的E2或100 nmol/L ICI182.780的TCM199培养基体外培养卵巢颗粒细胞;采用WST比色法检测不同培养... 详细信息

目的探讨雌激素(E2)对雌激素受体-β(ER-β)与转录因子叉头蛋白3(FoxO3)的表达及其对卵巢颗粒细胞增殖与凋亡的影响。方法利用添加1μmol/L的E2或100 nmol/L ICI182.780的TCM199培养基体外培养卵巢颗粒细胞;采用WST比色法检测不同培养条件下卵巢颗粒细胞的增殖;RT-PCR和Real-time PCR检测ER-β与FoxO3 mRNA的表达,采用细胞免疫荧光和Western blotting检测ER-β与FoxO3的表达。结果 E2能促进卵巢颗粒细胞增殖,而ICI182.780抑制卵巢颗粒细胞增殖;RT-PCR扩增结果与理论值符合,Real-time PCR结果显示,ICI182.780与E2比较,ER-βmRNA表达下调,FoxO3 mRNA表达上调(P<0.05);Western blotting法结果显示,ER-β和FoxO3蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),灰度值分析显示添加E2中ER-β蛋白表达升高,FoxO3蛋白下降(P<0.05),添加ICI182.780中的ER-β表达下调,FoxO3表达上调,与E2比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 E2可提高ER-β的表达,降低FoxO3的表达,影响卵巢颗粒细胞的增殖与凋亡。

关键词：雌激素雌激素受体-β 转录因子叉头蛋白3 卵巢颗粒细胞

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月见草油抵抗多囊卵巢综合征大鼠卵巢氧化应激

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山东大学学报（医学版） 2022年第5期60卷 22-30页

作者：虎娜孙苗邢莎莎许丹霞海小明马玲杨丽勉昱琛何瑞陈冬梅马会明宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室/宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学实验动物中心宁夏银川750004

目的探讨月见草油(EPO)对高脂饮食联合来曲唑所致多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠激素水平、代谢水平、氧化水平以及卵巢组织中NAD-依赖性去乙酰化酶Sirtuin-1(SIRT1)/转录因子叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路表达的影响。方法72只大鼠共分为... 详细信息

目的探讨月见草油(EPO)对高脂饮食联合来曲唑所致多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠激素水平、代谢水平、氧化水平以及卵巢组织中NAD-依赖性去乙酰化酶Sirtuin-1(SIRT1)/转录因子叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路表达的影响。方法72只大鼠共分为6组,12只为正常对照,其余60只大鼠喂食高脂饲料(40%脂肪)8周,并在喂食方案的最后3周,联合浓度为1 mg/(kg·d)的来曲唑灌胃21 d,制备PCOS大鼠模型。模型制备结束后经尾部血清激素水平分析,每组剔除偏差较大的模型大鼠2只,并把正常对照组和模型制备成功的大鼠分为6组,每组10只,分别为正常对照组、PCOS模型组、二甲双胍组、EPO小剂量组、EPO中剂量组、EPO大剂量组。ELISA方法和生化酶法检测各组血清空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、睾酮(T)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA),苏木精-伊红(HE)染色观察各组卵巢形态,免疫组织化学和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测卵巢组织SIRT1/FoxO1通路和相关抗氧化因子SOD1和谷胱甘肽转移酶(GST)以及衰老因子SIRT1和FoxO1的定位与相对表达水平。结果与正常对照组相比,PCOS模型组体质量、FPG、FINS、T、LH和FSH水平均升高(P<0.001);SOD和T-AOC水平下降(P<0.001),MDA水平升高(P<0.001)。ELISA结果显示,EPO和二甲双胍治疗后,体质量、FPG、FINS水平较PCOS模型组均呈下降趋势且有统计学意义(P<0.001),各组SOD水平与PCOS模型组相比升高(P<0.001),MDA水平下降(P<0.05),二甲双胍组、EPO中剂量组和大剂量组T-AOC水平较PCOS模型组升高(P<0.001);二甲双胍组和EPO中剂量组、大剂量组T和LH水平较PCOS模型组下降(P<0.001);二甲双胍组和EPO治疗大剂量组FSH水平较PCOS模型组下降(P<0.001)。免疫组化结果显示,SOD1、GST和SIRT1蛋白在颗粒细胞、间质细胞、原始卵泡和黄体均有阳性表达;Western blotting结果显示,与正常对照组相比,PCOS模型组卵巢组织SIRT1(P<0.001)、FoxO1、P-FoxO1、P-FoxO1/FoxO1(P=0.003)、SOD1(P=0.003)和GST蛋白表达量均增加(P<0.001);EPO大剂量组SOD1(P=0.003)、GST(P=0.007)和P-FoxO1蛋白表达较PCOS模型组下降(P=0.003),EPO中剂量组SIRT1(P=0.011)和FoxO1(P=0.353)蛋白表达下降。结论EPO改善PCOS模型大鼠血清中氧化因子和激素水平,且抑制SIRT1/FoxO1信号通路因子表达,提高卵巢组织的抗氧化能力并改善其氧化应激。

关键词：月见草油 SIRT1/FoxO1信号通路氧化应激多囊卵巢综合征大鼠

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