检索结果-内蒙古大学图书馆

环境与职业医学 2019年第2期36卷 175-180页

作者：李玲员朋娟德小明李丽萍张亚娟李娅辉伊梦楠张鹏举刘贺荣宁夏医科大学公共卫生与管理学院劳动卫生与环境卫生系生育力保持教育部重点实验室宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室

[目的]探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒致小鼠睾丸间质细胞的凋亡作用及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子4(ATF4)与C/EBP同源蛋白(CHOP)参与的可能机制。[方法]培养小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)并且测... 详细信息

[目的]探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒致小鼠睾丸间质细胞的凋亡作用及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子4(ATF4)与C/EBP同源蛋白(CHOP)参与的可能机制。[方法]培养小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)并且测出细胞生长曲线;用CCK-8法检测细胞在染毒浓度400μmol/L状况下的细胞活性变化;用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用免疫印迹法检测GRP78、ATF4和CHOP含量的变化。单因素方差分析法分析染毒组与对照组之间的关系,2×2析因设计法判断联合染毒的交互作用,当(|MBP+MEHP组指标-对照组指标)|<(|MBP组指标-对照组指标)|+(|MEHP组指标-对照组指标)|,可判定交互作用类型为拮抗作用。[结果]细胞在24～60 h时间段内处于对数生长期,且细胞正常状态下的凋亡数量比较稳定。细胞活性检测结果显示MEHP染毒对细胞的抑制率比MBP的大,并且MBP+MEHP联合染毒且具有交互作用,其作用方式为拮抗作用[24 h:(|53.21±7.68)%|<(|42.99±8.23)%|+(|65.46±8.29)%)|;36 h:(|79.87±3.76)%|<(|53.12±4.33)%|+(|74.80±4.96)%|;48 h:(|85.97±6.07)%|<(|38.98±9.59)%|+(|80.73±4.99)%|],具有统计学意义(P <0.05);细胞凋亡比例也呈现出MEHP组[早期凋亡:(17.44±0.82)%,总凋亡:(44.24±0.89)%]大于MBP染毒组[早期凋亡:(14.58±0.97)%,总凋亡:(29.46±0.58)%],同时出现MEHP+MBP联合染毒组[早期凋亡:(8.58±0.35)%,总凋亡:(32.28±0.41)%]的凋亡比例小于各单独染毒组之和,呈现出拮抗作用;ATF4和GRP78在MEHP染毒组的表达量高于MBP染毒组,MEHP+MBP联合染毒组表达量低于MEHP染毒组但高于MBP染毒组,并且表现出拮抗作用。CHOP的表达量与对照组相比也有变化,MEHP染毒组表达量较MBP染毒组表达量高,在MEHP+MBP联合染毒组表达量低于单独染毒组,并且表现出拮抗作用,但MBP染毒组没有主效应。[结论] MBP、MEHP染毒致TM-3细胞凋亡具有主效应,MBP和MEHP联合染毒致TM-3细胞凋亡具有交互作用,呈现拮抗作用。GRP78-ATF4-CHOP通路可能参与MBP、MEHP染毒致TM-3细胞的凋亡过程。

关键词：邻苯二甲酸单酯睾丸间质细胞凋亡联合染毒 GRP78-ATF4-CHOP

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MBP、MEHP诱导小鼠睾丸间质细胞自噬过程中PTEN的相关研究

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环境与职业医学 2019年第4期36卷 333-338页

作者：伊梦楠李玲德小明李丽萍张亚娟张鹏举员朋娟宁夏医科大学公共卫生与管理学院劳动卫生与环境卫生学系生育力保持教育部重点实验室宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏银川750004

[目的]目前对于邻苯二甲酸酯的研究多集中于其原型,但有学者认为,邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二乙基己基酯的毒性作用可能是其在体内的代谢产物邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)所致。本研究拟探讨MBP和MEHP对小鼠... 详细信息

[目的]目前对于邻苯二甲酸酯的研究多集中于其原型,但有学者认为,邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二乙基己基酯的毒性作用可能是其在体内的代谢产物邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)所致。本研究拟探讨MBP和MEHP对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)自噬的影响以及与第10号染色体缺失的同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)的相关研究。[方法]体外培养TM-3并取其对数生长期,预实验设置毒物浓度梯度为0(对照组)、50、100、200、400、800μmol/L,染毒24 h后,利用改良寇氏法计算MBP、MEHP的半数致死浓度(IC50)后,确定实验染毒浓度为0(对照组)、200、400、800μmol/L。分别采取CCK-8法检测不同毒物剂量和不同染毒时间对细胞存活率的影响;透射电镜观察400μmol/L的MBP、MEHP诱导24 h后具有双层膜状结构的自噬小体;单丹黄酰尸胺(MDC)免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的荧光信号强度;采用Western blot技术检测自噬标志蛋白LC3、p62和自噬调节相关蛋白PTEN的表达水平。[结果] CCK-8结果显示:与对照组相比,随着MBP、MEHP染毒剂量增高,细胞存活率降低(P<0.05)。透射电镜结果显示:400μmol/L MBP、MEHP染毒24 h后细胞内可见具有双层膜状结构的自噬小体。MDC法检测结果显示:与对照组相比,200μmol/L MBP、MEHP染毒组荧光信号强度差异无统计学意义(P>0.05);400、800μmol/L MBP染毒组荧光信号强度分别增加了9.0、16.8倍;400、800μmol/L MEHP染毒组荧光信号强度增加了16.3、26.4倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示:200μmol MBP、MEHP染毒组LC3II/LC3I、PTEN表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);400、800μmol/L MBP染毒组LC3II/LC3I蛋白表达水平分别增加了7.5、13.6倍,PTEN表达水平增加了4.8、15.4倍;400、800μmol/L MEHP染毒组LC3II/LC3I蛋白表达水平增加了4.5、9.8倍,PTEN表达水平增加了5.7、14.4倍(P<0.05);200μmol/L MBP染毒组p62表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),400、800μmol/LMBP染毒组p62蛋白表达水平分别降低了43%、72%;200、400、800μmol/L MEHP染毒组p62蛋白表达水平也分别降低了55%、80%、88%(P<0.01)。[结论]一定剂量的MBP、MEHP可提高TM-3细胞自噬水平,并且PTEN表达水平与细胞自噬水平呈正相关趋势。

关键词：邻苯二甲酸单丁酯邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯小鼠睾丸间质细胞 PTEN 自噬

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邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单乙基己酯联合染毒诱导小鼠睾丸间质细胞自噬与凋亡的关系研究

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环境与健康杂志 2020年第10期37卷 864-868,封2页

目的通过3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预,探讨邻苯二甲酸单丁酯(mono-butyl phthalate,MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(mono-ethylhexyl phthalate,MEHP)联合染毒诱导小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)自噬与凋亡之间的关系.方法取处于对数生长期TM-3... 详细信息

目的通过3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预,探讨邻苯二甲酸单丁酯(mono-butyl phthalate,MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(mono-ethylhexyl phthalate,MEHP)联合染毒诱导小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)自噬与凋亡之间的关系.方法取处于对数生长期TM-3细胞,设置MBP+MEHP(终浓度均分别为0、50、100、200、400、800 μmol/L)染毒组或者3-MA染毒组(终浓度分别为0、0.25、0.5、1、1.25、2.5、5 mmol/L);以及MBP+MEHP染毒组(终浓度均为400 μmol/L)、3-MA干预组[1 mmol/L 3-MA干预1h后,再加入MBP+MEHP(终浓度均为400 μmol/L)联合染毒液],培养24h,采用CCK-8法检测细胞存活率.采用MDC免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的诱导情况;采用Annexin V-FITC/PI法检测细胞早期凋亡率;采用Western blot法检测细胞自噬相关蛋白LC3、p62表达水平和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平.结果与对照组相比,50 μmol/L的MBP+MEHP染毒组TM-3细胞的存活率升高,而100、200、400、800 μmol/L的MBP+MEHP染毒组TM-3细胞的存活率均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着MBP+MEHP染毒剂量的增高,TM-3细胞的存活率呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,0.25、0.5 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率均较高,而1.25、2.5、5 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05);仅1 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率.且随着3-MA染毒剂量的增高,TM-3细胞的存活率呈先上升后下降的趋势.TM-3细胞的存活率依次为对照组＞MBP+MEHP染毒组＞3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光结果显示,荧光信号强度依次为对照组＜3-MA干预组＜MBP+MEHP染毒组.TM-3细胞的早期凋亡率依次为对照组＜MBP+MEHP染毒组＜3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平为对照组＜3-MA干预组＜MBP+MEHP染毒组,p62蛋白表达水平为对照组＞3-MA干预组＞MBP+MEHP染毒组;凋亡相关蛋白Bax表达水平为对照组＜MBP+MEHP染毒组＜3-MA干预组,Bcl-2表达情况为对照组＞MBP+MEHP染毒组＞3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论在本实验浓度下,MBP+MEHP染毒可提高TM-3细胞自噬和凋亡水平;3-MA抑制TM-3细胞自噬水平后,MBP+MEHP染毒提高细胞凋亡水平,说明自噬作为一种保护因素可抑制细胞凋亡.

关键词：邻苯二甲酸单丁酯邻苯二甲酸单乙基己酯小鼠睾丸间质细胞自噬细胞凋亡

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邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单乙基己酯联合染毒对小鼠睾丸间质细胞自噬水平的交互作用

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环境与健康杂志 2020年第3期37卷 201-204,283页

作者：伊梦楠李玲德小明李丽萍张亚娟张鹏举员朋娟翁晓梦宁夏医科大学公共卫生与管理学院劳动卫生与环境卫生学系生育力保持教育部重点实验室宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏银川750004

目的探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒对小鼠睾丸间质细胞的自噬的影响以及MBP+MEHP联合染毒的交互作用分析。方法将处于对数生长期的TM-3细胞分别暴露于0(对照)和400μmol/L的MBP、MEHP及400μmol/L MBP+400... 详细信息

目的探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒对小鼠睾丸间质细胞的自噬的影响以及MBP+MEHP联合染毒的交互作用分析。方法将处于对数生长期的TM-3细胞分别暴露于0(对照)和400μmol/L的MBP、MEHP及400μmol/L MBP+400μmol/L MEHP溶液中;染毒24、36、48 h后,采取CCK-8法检测细胞的存活率;染毒24 h后,采用单丹黄酰尸胺(MDC)免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的荧光信号强度;染毒24 h后,采用Western blot法检测自噬标志蛋白LC3和p62的表达水平。结果与对照组相比,MBP和(或)MEHP染毒TM-3细胞的存活率均下降,自噬囊泡的荧光信号强度均增高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞的存活率、自噬囊泡的荧光信号强度、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p62蛋白表达水平具有交互作用,具体均表现为拮抗作用(P<0.01)。结论MBP和(或)MEHP体外染毒均可诱导TM-3细胞自噬水平升高,MBP和MEHP联合染毒交互作用表现为拮抗作用。

关键词：邻苯二甲酸单丁酯邻苯二甲酸单乙基己酯联合染毒交互作用小鼠睾丸间质细胞自噬作用

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CHOP通路在邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯联合暴露致小鼠睾丸间质细胞凋亡中的作用

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环境与健康杂志 2018年第10期35卷 871-876页

作者：员朋娟李玲德小明李丽萍张亚娟张鹏举刘贺荣李娅辉伊梦楠宁夏医科大学公共卫生与管理学院职业卫生与环境卫生学系生育力保持教育部重点实验室宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏银川750004

目的探讨邻苯二甲酸单丁酯(monobutyl phthalate,MBP)和邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]染毒致体外培养的小鼠睾丸间质细胞(TM-3)凋亡过程中CHOP通路的作用。方法将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于0(对照)、50... 详细信息

目的探讨邻苯二甲酸单丁酯(monobutyl phthalate,MBP)和邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]染毒致体外培养的小鼠睾丸间质细胞(TM-3)凋亡过程中CHOP通路的作用。方法将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于0(对照)、50、100、200、400、800μmol/L的MBP和(或)MEHP溶液24、36、48 h后,采用CCK-8法测定细胞活性。将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于完全培养基(对照)、MBP(400μmol/L)、MEHP(400μmol/L)和MEHP(400μmol/L)+MBP(400μmol/L)溶液24 h后,电镜下观察小鼠睾丸间质细胞内质网超微结构的变化。将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于完全培养基(对照)及200、400、800μmol/L MBP和(或)MEHP溶液24 h,流式细胞术检测细胞早期凋亡情况,免疫印迹法检测内质网应激标志性蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CHOP的表达水平。结果与对照组相比,各浓度MBP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着MBP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈上升趋势。随着MBP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率除100μmol/L组呈上升趋势外,其余浓度组均呈先上升后下降的趋势。与对照组相比,各浓度MEHP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异具有统计学意义(P<0.05);且随着MEHP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈上升趋势。随着MEHP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率在50μmol/L组呈上升趋势,在100μmol/L组呈先下降后上升的趋势,在400μmol/L组呈下降趋势,200μmol/L和800μmol/L组抑制率呈先上升后下降的趋势。与对照组相比,各浓度MBP+MEHP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异具有统计学意义(P<0.05);且随着MBP+MEHP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈现上升趋势。随着MBP+MEHP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率除200、400μmol/L组呈现逐渐上升趋势外,其余浓度组均呈先上升后下降的趋势。与对照组相比,各浓度MBP和(MEHP)染毒组TM-3细胞的早期凋亡细胞比例均较高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着染毒浓度的升高,MBP、MEHP和MBP+MEHP染毒小鼠睾丸间质细胞的早期凋亡细胞比例均呈现上升趋势。在同一染毒浓度下,睾丸间质细胞早期凋亡比例依次为MBP+MEHP

关键词：邻苯二甲酸单酯小鼠睾丸间质细胞细胞凋亡内质网应激 CHOP

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邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单乙基己酯联合染毒对小鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响

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环境与健康杂志 2018年第1期35卷 14-16页

作者：李娅辉李玲李丽萍德小明张亚娟张鹏举刘贺荣贠朋娟宁夏医科大学公共卫生与管理学院劳动卫生与环境卫生系宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏生育力保持教育部重点实验室宁夏银川750004

目的探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)联合染毒对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)睾酮合成的影响。方法将TM-3细胞分为对照(完全培养基)组、MBP(LC50,500μmol/L)单独染毒组、MEHP(LC50,450μmol/L)单独染毒组和MBP(500μ... 详细信息

目的探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)联合染毒对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)睾酮合成的影响。方法将TM-3细胞分为对照(完全培养基)组、MBP(LC50,500μmol/L)单独染毒组、MEHP(LC50,450μmol/L)单独染毒组和MBP(500μmol/L)+MEHP(450μmol/L)联合染毒组,培养24 h后,观察线粒体超微结构,检测细胞线粒体膜电位和上清液中的睾酮水平。结果 MBP、MEHP单独染毒及联合染毒均可引起线粒体结构损伤。与对照组相比,MBP、MEHP单独染毒组和MBP+MEHP联合染毒组TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平均下降,差异有统计学意义(P<0.01);与MBP+MEHP联合染毒组相比,MBP、MEHP单独染毒组TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平均较低,差异有统计学意义(P<0.01),MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平的交互作用均表现为拮抗作用。结论 MBP、MEHP联合染毒对睾酮合成水平的下降呈拮抗作用,可能与线粒体损伤机制有关。

关键词：邻苯二甲酸单酯睾丸间质细胞(TM-3) 联合作用线粒体睾酮

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西维因与氰戊菊酯联合染毒对大鼠肝脏脂质过氧化的影响

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环境与健康杂志 2016年第7期33卷 590-592页

作者：王秀琴李玲德小明张鹏举李丽萍李宏辉张亚娟宁夏疾病预防控制中心食品安全风险监测科宁夏银川750004 宁夏医科大学公共卫生与管理学院劳动卫生与环境卫生学系宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏生育力保持教育部重点实验室

目的探讨西维因与氰戊菊酯联合染毒对大鼠肝脏脂质过氧化作用的影响。方法将80只健康成年清洁级SD大鼠按2×2析因设计随机分为4组,分别为阴性对照(玉米油)组、西维因单独染毒组(1/50 LD_(50),11.2 mg/kg)、氰戊菊酯单独染毒组(1/50 ... 详细信息

目的探讨西维因与氰戊菊酯联合染毒对大鼠肝脏脂质过氧化作用的影响。方法将80只健康成年清洁级SD大鼠按2×2析因设计随机分为4组,分别为阴性对照(玉米油)组、西维因单独染毒组(1/50 LD_(50),11.2 mg/kg)、氰戊菊酯单独染毒组(1/50 LD_(50),9.02 mg/kg)和西维因(11.2 mg/kg)+氰戊菊酯(9.02 mg/kg)染毒组,每组20只,雌雄各半。采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,每周6天,连续染毒8周。末次染毒24 h后,测量大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽S转移酶(GST)活力和还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。结果西维因和氰戊菊酯联合染毒使雄鼠肝脏中SOD活力下降(P<0.05)、MDA含量升高(P<0.05),雌鼠肝脏中GSH含量下降(P<0.05),交互效应均有统计学意义,对SOD、GSH表现为拮抗作用,对MDA表现为协同作用;其它指标交互作用均无统计学意义(P>0.05)。结论西维因和氰戊菊酯联合染毒对大鼠肝脏存在联合毒性作用,可能是通过破坏氧化-抗氧化系统的平衡,产生氧化损伤作用。

关键词：西维因氰戊菊酯联合染毒肝脏

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