检索结果-内蒙古大学图书馆

实用医学杂志 2025年第3期41卷 313-321页

作者：翟俊杰温少莹李心如孙睿祁宁张启凡杨力黄晖马凌桔郝银菊姜怡邓李桂忠马胜超国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院老年与特需医学科宁夏银川750004 宁夏医科大学检验学院宁夏银川750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004

目的探讨Toll样受体4在调控同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导巨噬细胞铁死亡中的作用。方法培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,设置对照组(Control)、同型半胱氨酸干预组(Hcy)和同型半胱氨酸+铁死亡抑制剂组(Hcy+Fer-1);巨噬细胞转染干扰片... 详细信息

目的探讨Toll样受体4在调控同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导巨噬细胞铁死亡中的作用。方法培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,设置对照组(Control)、同型半胱氨酸干预组(Hcy)和同型半胱氨酸+铁死亡抑制剂组(Hcy+Fer-1);巨噬细胞转染干扰片段后予同型半胱氨酸干预,设置对照组(Control)、同型半胱氨酸干预组(Hcy)、TLR4干扰阴性对照+同型半胱氨酸干预组(si-NC+Hcy)、TLR4干扰+同型半胱氨酸干预组(si-TLR4+Hcy);巨噬细胞转染过表达慢病毒后予同型半胱氨酸干预,对照组(Control)、同型半胱氨酸干预组(Hcy)、TLR4过表达阴性对照+同型半胱氨酸干预组(OE-NC+Hcy)、TLR4过表达+同型半胱氨酸干预组(OE-TLR4+Hcy);干预细胞48 h后,实时荧光定量PCR和Western blot检测Hcy干预的巨噬细胞中TLR4表达水平;Western blot检测巨噬细胞中铁死亡相关蛋白ACSL4、GPX4及FTH1表达水平;采用铁离子试剂盒检测巨噬细胞内Fe^(2+)浓度;采用ROS试剂盒及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧的含量。结果与Control组相比,Hcy组促铁死亡相关蛋白ACSL4的表达水平升高(P<0.05),抗铁死亡相关蛋白GPX4与FTH1的表达水平降低(P<0.05),Fe^(2+)浓度升高(P<0.05),ROS含量增多,同时Hcy组中TLR4蛋白及mRNA表达水平均升高(P<0.05);巨噬细胞转染TLR4干扰片段后,与si-NC+Hcy组相比,si-TLR4+Hcy组中GPX4与FTH1表达水平增高(P<0.05),ACSL4表达水平降低(P<0.05),Fe^(2+)浓度降低(P<0.05),ROS含量减少;巨噬细胞转染TLR4过表达慢病毒后,与OE-NC+Hcy组相比,OE-TLR4+Hcy组中GPX4与FTH1表达水平降低(P<0.05),ACSL4表达水平升高(P<0.05)。结论Hcy诱导巨噬细胞铁死亡的发生,而Toll样受体4对Hcy诱导的巨噬细胞铁死亡有正向调控作用。

关键词： TLR4 巨噬细胞同型半胱氨酸铁死亡

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转录因子SP1调控lncRNA NKILA对增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的影响

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中国皮肤性病学杂志 2025年第3期39卷 250-257页

作者：刘虹麟马芳夏童童张岐郝银菊张慧萍吴凯李桂忠沈江涌姜怡邓宁夏医科大学检验学院宁夏银川750004 国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 湖南省妇幼保健院医学遗传科湖南长沙410008 宁夏医科大学总医院烧伤科宁夏银川750004

目的探讨转录因子特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)在NF-κB相关性长链非编码RNA(NF-κB interacting long non-coding RNA,NKILA)影响增生性瘢痕成纤维细胞凋亡中的作用。方法提取并培养增生性瘢痕组织及其瘢痕旁邻近的正常皮... 详细信息

目的探讨转录因子特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)在NF-κB相关性长链非编码RNA(NF-κB interacting long non-coding RNA,NKILA)影响增生性瘢痕成纤维细胞凋亡中的作用。方法提取并培养增生性瘢痕组织及其瘢痕旁邻近的正常皮肤组织中人皮肤成纤维细胞作为实验细胞系,免疫荧光鉴定成纤维细胞;qRT-PCR检测人瘢痕旁正常皮肤组织来源的成纤维细胞(NSFBs)和增生性瘢痕组织来源的成纤维细胞(HSFBs)中NKILA mRNA的表达水平;构建NKILA的干扰片段,实验分组为:空白对照组、si-NC组、si-NKILA 1组、si-NKILA 2组、si-NKILA 3组,qRT-PCR检测si-NKILA干扰效率;Western blot检测空白对照组、si-NC组、si-NKILA组HSFBs中凋亡指标Bcl-2和Bax的表达水平,流式细胞术检测各组HSFBs凋亡率;构建SP1的干扰片段,实验分组为:空白对照组、si-NC组、si-SP11组、si-SP12组、si-SP13组,qRT-PCR检测si-SP1的干扰效率;qRT-PCR检测干扰转录因子SP1后HSFBs中NKILA mRNA的表达水平。结果与NSFBs相比,NKILA在HSFBs中表达明显升高(P<0.001)。干扰NKILA表达后,Bax蛋白表达水平与Bcl-2蛋白表达水平比值显著增加(P<0.001),HSFBs凋亡率明显增加(P<0.001);干扰转录因子SP1表达后,HSFBs中NKILA的表达下降(P<0.01)。结论lncRNA NKILA抑制增生性瘢痕成纤维细胞凋亡,且受转录因子SP1调控。

关键词：增生性瘢痕成纤维细胞长链非编码RNA 凋亡特异性蛋白1

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RNA pull-down联合质谱分析lncRNA HSFAS在增生性瘢痕中的作用及机制

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中国组织工程研究 2025年第12期29卷 2492-2499页

作者：夏童童马芳孙浩原刘虹麟张正皓杨佳琪张慧萍吴凯沈江涌姜怡邓李桂忠国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学检验学院宁夏回族自治区银川市750004 湖南省妇幼保健院医学遗传科湖南省长沙市410008 宁夏医科大学总医院烧伤科宁夏回族自治区银川市750004

背景:课题组前期研究发现,增生性瘢痕特异性长链非编码RNA HSFAS是一种可用于增生性瘢痕诊断的新型生物标志物,但其如何在增生性瘢痕中发挥作用尚不清楚。目的:探讨长链非编码RNA HSFAS在增生性瘢痕中的作用及机制。方法:临床收集3例行... 详细信息

背景:课题组前期研究发现,增生性瘢痕特异性长链非编码RNA HSFAS是一种可用于增生性瘢痕诊断的新型生物标志物,但其如何在增生性瘢痕中发挥作用尚不清楚。目的:探讨长链非编码RNA HSFAS在增生性瘢痕中的作用及机制。方法:临床收集3例行增生性瘢痕组织切除手术患者的新鲜增生性瘢痕皮肤组织和增生性瘢痕旁正常皮肤组织标本,应用免疫荧光技术检测两种皮肤组织冰冻切片中长链非编码RNA HSFAS的表达。应用酶消化法体外分离增生性瘢痕皮肤组织与正常皮肤组织原代成纤维细胞,采用qRT-PCR检测细胞中长链非编码RNA HSFAS mRNA表达,通过RNA pull-down联合质谱技术检测与长链非编码RNA HSFAS相互结合的蛋白,利用GO和KEGG分析长链非编码RNA HSFAS参与增生性瘢痕进展的主要功能和通路,通过catRAPID和RPISeq网站分析确定长链非编码RNA HSFAS与蛋白的靶向结合。结果与结论:①与正常皮肤组织相比,增生性瘢痕组织中的长链非编码RNA HSFAS表达升高(P<0.05);与正常皮肤组织来源成纤维细胞相比,增生性瘢痕组织来源成纤维细胞中长链非编码RNA HSFAS mRNA表达升高(P<0.05);②RNA pull-down联合质谱技术明确与长链非编码RNA HSFAS相互结合的蛋白有510个;GO和KEGG分析结果显示:这些蛋白主要涉及RNA剪接和加工、染色体合成和分离、细胞周期等过程,其中涉及RNA剪接和加工的蛋白有支架附着因子B2和DICER1,并且与长链非编码RNA HSFAS的结合分数较高;生物信息学技术分析验证结果显示,长链非编码RNA HSFAS与支架附着因子B2和DICER1蛋白存在相互结合;③结果显示,长链非编码RNA HSFAS可能通过与支架附着因子B2和DICER1蛋白相互结合调控RNA剪接和加工修饰影响基因表达,从而促进增生性瘢痕的发生发展。

关键词：增生性瘢痕 lncRNA HSFAS 成纤维细胞 RNA pull-down 质谱分析

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亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1参与血管平滑肌细胞钙化

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中国组织工程研究 2025年第32期29卷 6836-6842页

作者：王凯茹付士哲李家辉燕茹马玉茹师波冶从燕闫瑞丛广志贾绍斌宁夏医科大学总医院医学科学研究院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学第一临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学血管损伤与修复研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院心内科宁夏回族自治区银川市750004

背景:多胺在组织钙化中发挥重要作用。亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1作为调控细胞内多胺代谢的关键限速酶,其异常表达与多种病理过程相关,但在血管钙化中的作用尚未明确。目的:探讨亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1在大鼠血管平滑肌细胞钙化中的... 详细信息

背景:多胺在组织钙化中发挥重要作用。亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1作为调控细胞内多胺代谢的关键限速酶,其异常表达与多种病理过程相关,但在血管钙化中的作用尚未明确。目的:探讨亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1在大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用。方法:①生物信息学分析:通过GEO数据集分析亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1在人颈动脉粥样硬化斑块及其周围健康颈动脉组织中的表达差异;通过PanglaoDB公共基因表达数据库单细胞测序观察亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1细胞群的表达丰度和定位。②将大鼠血管平滑肌细胞分为3组,对照组用DMEM培养基培养,钙化组用含10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠和3 mmol/L氯化钙的DMEM培养基诱导细胞钙化,50,100μmol/L二乙酰胺三氮脒组在钙化培养基的基础上,用50,100μmol/L亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1抑制剂二乙酰胺三氮脒处理细胞。培养7-10 d,进行茜素红S染色以及细胞钙含量和碱性磷酸酶活性检测,Western blot检测Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、α-平滑肌肌动蛋白和亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1的蛋白表达,免疫荧光染色检测Runt相关转录因子2和亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1的表达。结果与结论:①生物信息学分析显示,与健康颈动脉组织相比,颈动脉粥样硬化斑块中亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1和Runt相关转录因子2的表达显著上调(P<0.05);单细胞测序数据库分析证实了亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1在血管平滑肌细胞中表达;②与对照组比较,钙化组Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1、钙含量和碱性磷酸酶活性明显增加,而α-平滑肌肌动蛋白表达明显减少(均P<0.05);与钙化组比较,50,100μmol/L二乙酰胺三氮脒组Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、钙含量和碱性磷酸酶活性明显降低,而α-平滑肌肌动蛋白表达明显增加(均P<0.05);③免疫荧光实验显示,与钙化组比较,50,100μmol/L二乙酰胺三氮脒组Runt相关转录因子2的表达强度明显降低。结果证实,亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1可能通过上调Runt相关转录因子2的表达,促进血管平滑肌细胞钙化。

关键词：大鼠血管平滑肌细胞亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1(SAT1) Runt相关转录因子2 血管钙化生物信息学平滑肌肌动蛋白

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FoxO1/p38 MAPK信号通路在LPS致急性肺损伤中的作用研究

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中国药理学通报 2023年第1期39卷 36-42页

作者：杨亚丽田荣袁茵王艳佳杨晓玲宁夏医科大学基础医学院国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川750004

目的探讨叉头状转录因子O1(forkhead transcription factors of O class1,FoxO1)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用及其调控机制。方法采用LPS模拟诱导ALI模型。HE染色法观察肺组织的病理变化;ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的含量;免疫组化染色观察FoxO1在小鼠肺组织的表达;Western blot检测FoxO1、DNA甲基转移酶和p38 MAPK的磷酸化水平;qRT-PCR检测FoxO1、IL-6、TNF-α和DNA甲基转移酶的mRNA水平;巢式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测肺组织中FoxO1启动子区DNA甲基化的水平变化;培养肺血管内皮细胞(pulmonary vascular endothelial cells,PVECs)并转染FoxO1 siRNA,Western blot检测p38 MAPK的磷酸化水平;采用Pearson方法分析FoxO1甲基化水平与炎症因子的相关性。结果与Control组相比,LPS组小鼠肺泡炎性细胞明显增多,肺组织水肿、充血明显;TNF-α和IL-6的水平分别升高52.2%和150.4%(P<0.05);p38 MAPK磷酸化水平及FoxO1表达分别增加134.1%和61.8%(P<0.05),而FoxO1启动子区DNA甲基化水平降低17.2%(P<0.05),体外转染FoxO1 siRNA后,p38磷酸化水平降低,Pearson分析显示,FoxO1甲基化水平与炎症因子成负相关。结论FoxO1启动子区低甲基化调控FoxO1/p38 MAPK信号通路是LPS诱导急性肺损伤的重要机制。

关键词： FoxO1 LPS 急性肺损伤 DNA甲基化 p38 MAPK信号通路肺血管内皮细胞

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铁死亡在煤尘诱导小鼠煤工尘肺形成中的作用

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环境与职业医学 2021年第11期38卷 1258-1262页

作者：刘太阳孙岳宝瑞郝玮王秋实刘耀阳王梦畅思容李媛媛刘志宏宁夏医科大学公共卫生与管理学院/国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004

[背景]煤工尘肺(CWP)是一种危害严重的职业病,铁死亡是一种细胞程序性死亡方式,它是否参与了煤尘诱导CWP的形成须进一步探讨。[目的]阐明铁死亡在煤尘诱导小鼠CWP形成中的作用。[方法]C57BL/6J小鼠被随机分为生理盐水组和CWP模型组,每组... 详细信息

[背景]煤工尘肺(CWP)是一种危害严重的职业病,铁死亡是一种细胞程序性死亡方式,它是否参与了煤尘诱导CWP的形成须进一步探讨。[目的]阐明铁死亡在煤尘诱导小鼠CWP形成中的作用。[方法]C57BL/6J小鼠被随机分为生理盐水组和CWP模型组,每组8只。采用气管滴注法造模,分别予以0.1 mL生理盐水或煤尘悬液0.1mL(50 g·L^(–1))经气管注入。通过HE染色和Masson染色评价CWP模型组小鼠肺部损伤及纤维化情况;铁离子检测试剂盒检测小鼠肺部铁离子浓度;分别检测丙二醛(MDA)浓度和荧光强度、谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)值评价小鼠肺部脂质过氧化情况;通过Western blotting和实时荧光定量PCR评价谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX_(4))、铁蛋白的mRNA和蛋白表达水平。[结果]CWP模型组小鼠肺部正常结构受损,肺泡壁厚度增加,出现炎症细胞浸润,胶原蛋白沉积较生理盐水组明显增加。CWP模型组小鼠肺组织铁离子质量浓度[(10.75±5.42)mg·L^(–1)],较生理盐水组[(1.14±0.37)mg·L^(–1)]增加(P<0.01)。CWP模型组小鼠肺组织MDA浓度[(37.32±12.18)μmol·L^(–1)]较生理盐水组[(18.70±8.22)μmol·L^(–1)]增加(P<0.01)。CWP模型组鼠肺组织MDA荧光强度高于生理盐水组。CWP模型组小鼠肺组织GSH/GSSG值(1.50±1.70)较生理盐水组(4.95±2.86)降低(P<0.01)。CWP模型组小鼠肺组织GPX_(4)、铁蛋白的mRNA相对表达水平(14.29±7.21、106.70±36.70)均较生理盐水组(38.84±15.61、225.90±54.34)降低(均P<0.01),同时GPX_(4)、铁蛋白的蛋白相对表达水平(0.92±0.22、0.97±0.09)也均较生理盐水组(1.47±0.54、1.73±0.34)降低(均P<0.05)。[结论]铁死亡可能参与了煤尘诱导小鼠CWP的形成。

关键词：煤工尘肺铁死亡脂质过氧化谷胱甘肽过氧化物酶4 铁蛋白

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高同型半胱氨酸通过Notch1/Hes1信号通路促进HT22细胞自噬和凋亡

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南方医科大学学报 2023年第10期43卷 1796-1803页

作者：张竞文何静米晓娟许贤瑞田英燕茹宁夏医科大学基础医学院//国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏银川750004

目的探讨高同型半胱氨酸(HHcy)引起神经细胞损伤的相关机制。方法采用HT22细胞,分为空白对照组(简称0组),高同型半胱氨酸组(Hcy 100μmol/L,简称100组),高同型半胱氨酸维生素B干预组(Hcy 100μmol/L+叶酸+维生素B12,简称100+fv组),空白... 详细信息

目的探讨高同型半胱氨酸(HHcy)引起神经细胞损伤的相关机制。方法采用HT22细胞,分为空白对照组(简称0组),高同型半胱氨酸组(Hcy 100μmol/L,简称100组),高同型半胱氨酸维生素B干预组(Hcy 100μmol/L+叶酸+维生素B12,简称100+fv组),空白对照+叶酸+维生素B12组(简称0+fv组)。通过透射电镜和流式细胞术观察自噬及凋亡;Western blotting、Real-time PCR检测Hes1、Hes5、Notch1、Jagged1、Bcl-2、Bax、P62、LC3II/LC3I表达。结果培养48 h后,高同型半胱氨酸组(100组)中死亡细胞明显增加(P<0.05)。流式细胞检测结果显示,高同型半胱氨酸组凋亡细胞比例均高于0组、100+fv组和0+fv组(P<0.05)。透射电镜观察显示,在高同型半胱氨酸组,线粒体肿胀、空泡化,自噬体增加。Western blot显示,在高同型半胱氨酸组,Bax/Bcl-2比值明显高于对照组和100+fv组(P<0.05);P62相对值明显低于对照组(P<0.05);LC3II/LC3I比值明显高于对照组和100+fv组(P<0.05);HES1、HES5、Notch1和Jagged1蛋白表达明显低于对照组(P<0.05)。Real-time PCR检测结果显示,在高同型半胱氨酸组,LC3 mRNA、Beclin1 mRNA明显高于对照组和100+fv组,P62mRNA明显低于100+fv组(P<0.05);Hes1 mRNA和Hes5 mRNA明显低于对照组、100+fv组和0+fv组(P<0.05)。Hes1 siRNA干扰后,Hes1和Jagged1表达量明显低于对照组,Notch1表达量无显著性差异(P>0.05)。结论高同型半胱氨酸能诱导HT22细胞自噬和凋亡增加,伴有Hes1和Jagged1基因表达下调。

关键词：同型半胱氨酸细胞自噬凋亡 Notch1 HES1 Jagged1

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铁死亡参与四氯化碳致肝纤维化发病过程的研究

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现代预防医学 2022年第12期49卷 2241-2246页

作者：王秋实孙岳刘太阳宝瑞郝玮刘耀阳李媛媛畅思容王梦刘志宏宁夏医科大学公共卫生与管理学院国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室

目的探讨铁死亡是否参与CCl4致肝纤维化发病过程。方法小鼠分为对照组和CCl4组。采用腹腔注射法造模，每隔2 d给药1次，共8次，造模完成后隔2 d处死。通过HE、MASSON和天狼星红染色评价CCl4致小鼠肝损伤及纤维化情况；铁离子检测试剂... 详细信息

目的探讨铁死亡是否参与CCl4致肝纤维化发病过程。方法小鼠分为对照组和CCl4组。采用腹腔注射法造模，每隔2 d给药1次，共8次，造模完成后隔2 d处死。通过HE、MASSON和天狼星红染色评价CCl4致小鼠肝损伤及纤维化情况；铁离子检测试剂盒检测小鼠肝组织铁离子含量；MDA检测试剂盒检测小鼠肝组织MDA含量;免疫荧光法观察小鼠肝组织中MDA含量；谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽（GSH/GSSG）评价小鼠肝组织脂质过氧化情况；通过Western Blot和RT-qPCR评价谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、铁蛋白（Ferritin）的蛋白和mRNA表达水平。结果通过HE染色、MASSON染色和天狼星红染色发现，CCl4引起小鼠肝细胞排列紊乱，炎症细胞浸润，纤维化隔片形成。而对照组没有显著的病理变化；CCl4组小鼠肝组织铁离子含量（2.83±0.81）μmol/g较对照组小鼠肝组织铁离子含量（1.54±0.19）μmol/g增加（t=5.415,P<0.001）;CCl4组MDA荧光强度高于对照组；CCl4组MDA含量（0.74±0.13） nmol/mg较对照组MDA含量（0.21±0.06） nmol/mg增加（t=15.650,P<0.001）;GSH/GSSG在CCl4组（1.29±0.19）较对照组（1.90±0.16）降低（t=10.580,P<0.001）；在CCl4组GPX4蛋白相对表达水平（0.27±0.07）较对照组（0.42±0.10）降低（t=3.000,P=0.013）。CCl4组Ferritin蛋白相对表达水平（0.18±0.06）较对照组（0.30±0.06）降低（t=3.571,P=0.005）;CCl4组Ferritin mRNA相对表达水平（1.83±0.60）较对照组（0.84±0.30）降低（t=4.420,P<0.001）。CCl4组GPX4 mRNA相对表达水平（1.10±0.45）较对照组（3.54±0.87）降低（t=7.385,P<0.001）。结论铁死亡参与了四氯化碳致肝纤维化的发病过程。

关键词：铁死亡脂质过氧化谷胱甘肽过氧化物酶4 铁蛋白

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铁死亡参与高蛋氨酸饮食所致的ApoE-/-小鼠肾脏损伤

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现代预防医学 2023年第17期50卷 3133-3138+3150页

作者：畅思容孙岳杨安宁李媛媛王梦宝瑞余梦雪刘志宏宁夏医科大学公共卫生与管理学院国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏医科大学基础医学院

目的探讨铁死亡是否参与高蛋氨酸饮食所致的ApoE-/-小鼠肾脏损伤。方法 C57BL/6J普通饲料喂养小鼠作为正常对照组、将Apo E-/-小鼠随机分为模型对照组（普通饲料喂养）和高蛋氨酸组（高蛋氨酸饲料喂养），每组6只小鼠。PAS和Masson染... 详细信息

目的探讨铁死亡是否参与高蛋氨酸饮食所致的ApoE-/-小鼠肾脏损伤。方法 C57BL/6J普通饲料喂养小鼠作为正常对照组、将Apo E-/-小鼠随机分为模型对照组（普通饲料喂养）和高蛋氨酸组（高蛋氨酸饲料喂养），每组6只小鼠。PAS和Masson染色观察小鼠肾脏损伤以及纤维化情况；免疫荧光染色检测肾组织纤维连接蛋白（fibronectin）含量；比色法检测肾组织二价铁离子含量；免疫荧光染色和硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid,TBA）法检测肾组织丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量；Western blotting和qRT-PCR检测p53、SLC7A11和GPX4的蛋白以及mRNA表达水平，多组数据比较采用单因素方差分析，多重比较采用Tukey检验。结果染色结果显示，载脂蛋白E（apolipoprotein E,Apo E）基因缺失引起肾脏细胞外基质沉积，出现肾损伤，而高蛋氨酸饮食则进一步加重了肾脏细胞外基质沉积，肾损伤加重；与正常对照组相比，模型对照组和高蛋氨酸组Fibronectin含量增加（F=87.330,P<0.001），铁离子（F=111.200,P<0.001）和MDA（F=205.200,P<0.001）含量增加，p53的蛋白水平增加（F=32.380,P<0.001）、mRNA水平增加（F=24.840,P<0.001）,SLC7A11和GPX4的蛋白水平降低(FSLC7A11=18.620,P<0.001;FGPX4=20.830,P<0.001)、m RNA水平降低(FSLC7A11=11.200,P<0.001;FGPX4=23.530,P<0.001)；与模型对照组相比，以上指标在高蛋氨酸组变化更显著（P<0.05）。结论铁死亡参与了高蛋氨酸饮食所致的Apo E-/-小鼠肾脏损伤。

关键词：肾脏损伤铁死亡 HHcy GPX4 脂质过氧化

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同型半胱氨酸通过上调Rap1A表达促进小鼠巨噬细胞增殖及M1极化

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中国病理生理杂志 2021年第12期37卷 2113-2121页

作者：杨亚丽田荣袁茵王艳佳杨晓玲宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川750004

目的:研究Ras相关蛋白1A(Rap1A)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的ANA-1小鼠腹腔巨噬细胞增殖和M1极化的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养ANA-1细胞,建立高Hcy血症细胞模型,并将细胞分成对照(control)组、Hcy组、Hcy+Rap1A干扰腺病毒(Ad-s... 详细信息

目的:研究Ras相关蛋白1A(Rap1A)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的ANA-1小鼠腹腔巨噬细胞增殖和M1极化的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养ANA-1细胞,建立高Hcy血症细胞模型,并将细胞分成对照(control)组、Hcy组、Hcy+Rap1A干扰腺病毒(Ad-shRNA/Rap1A)组和Hcy+阴性对照腺病毒(Ad-shRNA/GFP)组。采用CCK-8法和EdU染色检测各组细胞的增殖能力;ELISA检测细胞培养液中炎症因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度;RT-qPCR检测各组细胞Rap1A、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期抑制蛋白p27、M1极化标志物CD80和CD86及M2极化标志物CD163和CD200R的mRNA表达;Western blot检测Rap1A、PCNA和p27蛋白表达。结果:与control组相比,Hcy组细胞活力、EdU阳性细胞数目、细胞培养液中IL-6和TNF-α浓度、CD80和CD86的mRNA表达水平及Rap1A和PCNA的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而CD163和CD200R的mRNA表达水平及p27的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与Hcy+Ad-shRNA/GFP组相比,Hcy+AdshRNA/Rap1A组细胞活力、EdU阳性细胞数目、CD80和CD86的mRNA表达水平及Rap1A和PCNA的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),CD163和CD200R的mRNA表达水平及p27的mRNA水平和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论:Hcy能够促进小鼠巨噬细胞增殖及M1极化,其机制与Hcy上调Rap1A表达有关。

关键词：同型半胱氨酸 Ras相关蛋白1A 巨噬细胞细胞增殖 M1极化

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