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中国人兽共患病学报 2008年第10期24卷 909-912页

作者：朱晓彤陈光刘英杰王继春曹雅明中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳110001 佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室佳木斯154000 中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的探讨再感染早期宿主保护性免疫应答的相关机制。方法采用致死型约氏疟原虫(Plasmodiumyoelii 17XL,Py17XL)感染抵抗型DBA/2小鼠,待全部小鼠自愈后用同种疟原虫株再次攻击。吉姆萨薄血膜染色法观察小鼠原虫血症水平;被动转移实验评... 详细信息

目的探讨再感染早期宿主保护性免疫应答的相关机制。方法采用致死型约氏疟原虫(Plasmodiumyoelii 17XL,Py17XL)感染抵抗型DBA/2小鼠,待全部小鼠自愈后用同种疟原虫株再次攻击。吉姆萨薄血膜染色法观察小鼠原虫血症水平;被动转移实验评估免疫血清的保护性作用;流式细胞仪检测脾中T、B细胞亚群动态变化。结果2/3小鼠能够完全抵御同种疟原虫再感染,仅1/3小鼠出现一过性低水平原虫血症,且于再感染后第8d自愈;免疫血清显著抑制初次感染小鼠原虫血症水平并延长其生存期;与初次感染相比,再感染早期脾CD4+T细胞、B220+和B220lowCD138+(浆细胞)亚群数目显著增加。结论特异性IgG抗体在宿主抗再感染免疫中发挥重要作用,记忆性T、B细胞可能为宿主保护性免疫应答的关键参与者。

关键词：约氏疟原虫再感染保护性免疫抗体

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金黄色葡萄球菌重组表皮剥脱毒素A的原核表达

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重庆医科大学学报 2015年第3期40卷 436-440页

作者：王毅肖异珠杨致邦欧阳莹李咏梅罗晓燕重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016 重庆医科大学附属儿童医院皮肤科重庆400014 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:通过基因工程技术获取重组表皮剥脱毒素A(recombine exfoliative toxin A,r ETA),为深入研究表皮剥脱毒素的致病机制提供实验材料。方法:根据Gen Bank公布的ETA基因序列设计引物,从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)基因... 详细信息

目的:通过基因工程技术获取重组表皮剥脱毒素A(recombine exfoliative toxin A,r ETA),为深入研究表皮剥脱毒素的致病机制提供实验材料。方法:根据Gen Bank公布的ETA基因序列设计引物,从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)基因组中扩增ETA基因,插入原核表达载体p QE30,构建重组质粒p QE30-ETA。将p QE30-ETA转化表达菌*** M15,优化诱导表达条件,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western blot鉴定。重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后,注入BALB/C小鼠皮下,观察皮肤病理改变,鉴定重组蛋白的生物学活性。结果:重组质粒p QE30-ETA序列分析显示插入的基因片段全长927 bp,与基因文库中的ETA序列完全吻合。SDS-PAGE分析显示表达产物相对分子量约为27 k D,在IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时间4 h,可得到最大表达量的可溶性蛋白,约为20%。Western blot显示与***产生的ETA蛋白在同一位置,重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后蛋白纯度达90%以上,注射重组蛋白的小鼠表皮内出现水疱和裂隙。结论:成功构建了重组质粒p QE30-ETA,表达了具有生物学活性的重组***表皮剥脱毒素A。

关键词：金黄色葡萄球菌葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征表皮剥脱毒素A 原核表达

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白纹伊蚊rAlb-34k2蛋白对C6/36细胞内的DENV2早期抑制作用

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中国病原生物学杂志 2021年第2期16卷 167-170,176页

作者：朱亚妮金芮代薇露李莹陈玲玲赵久刚吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室

目的探讨白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白在DENV2感染C6/36细胞中的作用。方法采用RT-qPCR检测不同浓度rAlb-34k2蛋白作用6 h、60 h后C6/36细胞内DENV2 NS1核酸的变化;采用Dot-ELISA检测rAlb-34k2蛋白与DENV2颗粒结合情况;采用ELISA及Western blot分别检测rAlb-34k2蛋白与C6/36细胞膜蛋白结合的差异。结果rAlb-34k2蛋白作用6 h后,C6/36细胞内DENV2 NS1 RNA的相对表达被抑制,其中10、25、100μg/ml浓度组NS1 RNA的相对表达(2^(-ΔΔCT))值分别为(0.6778±0.04827)、(0.5972±0.06369)和(0.4704±0.05297),差异有统计学意义(P<0.05);rAlb-34k2蛋白作用60 h后,各蛋白组间差异无统计学意义。Dot-ELISA检测rAlb-34k2蛋白(71、118.3、177.5μg/ml)可与DENV2病毒颗粒结合。间接ELISA检测rAlb-34k2蛋白与C6/36细胞疏水性膜蛋白和亲水性膜蛋白结合的A值分别为(1.1±0.26)和(3.1±0.047),差异有统计学意义(P=0.0016),Western blot检测亲水性膜蛋白的阳性结合条带数显著多于疏水性膜蛋白。结论白纹伊蚊雌蚊唾液特异性rAlb-34k2蛋白体外能与DENV2病毒颗粒及C6/36细胞膜蛋白结合,并抑制DENV2病毒早期在C6/36细胞中增殖。

关键词：白纹伊蚊 rAlb-34k2蛋白 DENV2 亲水性膜蛋白

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特定双歧杆菌菌株对炎症性肠病小鼠的影响

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微生物学通报 2011年第3期38卷 383-387页

作者：金丹孟繁平崔逢德李红花金寿起延边大学基础医学院免疫学与病原生物学教研部吉林延吉133000 韩国延世大学原州医科大学微生物学教研室

为了观察特定双歧杆菌菌株对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的Balb/c小鼠结肠炎的影响,探讨该双歧杆菌菌株对炎症性肠病(IBD)的防治作用及其可能机制。将小鼠分为3组:正常对照组、模型组(DSS组)、实验组(DSS+Bf组)。用已挑选好的双歧杆菌菌株预... 详细信息

为了观察特定双歧杆菌菌株对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的Balb/c小鼠结肠炎的影响,探讨该双歧杆菌菌株对炎症性肠病(IBD)的防治作用及其可能机制。将小鼠分为3组:正常对照组、模型组(DSS组)、实验组(DSS+Bf组)。用已挑选好的双歧杆菌菌株预先处理小鼠4周后,用4%DSS溶液诱导急性结肠炎。实验结束后,检测每组小鼠结肠的长度及结肠炎炎症程度,利用半定量RT-PCR法检测小鼠肠道派伊尔结细胞中IL-10的表达,利用免疫组化实验检测肠道黏膜中IL-10分泌阳性细胞。结果实验组小鼠结肠的平均长度为7.80 cm±0.21 cm,虽较正常对照组(9.10 cm±0.82 cm)缩短,但较模型组(6.80 cm±0.31 cm)其缩短程度减少;结肠炎炎症程度肉眼评分结果:模型组和实验组分别为8.60±0.24分和6.60±0.68分,两组之间均有显著性差异(P<0.05),显微镜下评分结果为实验组(6.80±0.73分)较模型组(8.80±0.37分)明显减少(P<0.05);实验组小鼠肠道派伊尔结细胞IL-10的表达和肠道黏膜IL-10分泌阳性细胞数明显多于模型组。该实验所用的双歧杆菌菌株减轻了DSS诱导的小鼠肠道炎症反应,并且增强了肠道免疫细胞的IL-10的表达及分泌。

关键词：双歧杆菌炎症性肠病白介素-10

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甲基苯丙胺与HIV-1Tat蛋白协同诱导神经细胞自噬的研究进展

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中国药理学通报 2019年第11期35卷 1488-1491页

作者：黄俭李娟杨根梦李媛媛刘柳沈宝玉曾晓锋李桢昆明医科大学法医学院法医毒理学教研室云南昆明650500 昆明医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系云南昆明650500

甲基苯丙胺滥用与HIV感染是当今世界严重的公共卫生问题及社会问题。自噬是内质网衍生的囊泡包裹异常蛋白及细胞器,形成自噬小体,并转运至溶酶体降解的过程。甲基苯丙胺与HIV-1Tat蛋白均可诱导神经细胞自噬,该文综述近年来两者诱导神经... 详细信息

甲基苯丙胺滥用与HIV感染是当今世界严重的公共卫生问题及社会问题。自噬是内质网衍生的囊泡包裹异常蛋白及细胞器,形成自噬小体,并转运至溶酶体降解的过程。甲基苯丙胺与HIV-1Tat蛋白均可诱导神经细胞自噬,该文综述近年来两者诱导神经细胞自噬的研究进展,并探讨两者与自噬的关系,为寻找有效的药物干预靶点提供参考。

关键词：甲基苯丙胺 HIV-1Tat蛋白神经细胞自噬神经毒性机制

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共表达口蹄疫病毒VP1-2A与猪IFN-α的重组腺病毒增强小鼠免疫功能

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第11期30卷 1129-1132页

作者：苏春霞段相国曹瑞兵郑洁陈溥言宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系宁夏银川750004 宁夏医科大学检验学院临床免疫学检验系宁夏银川750004 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

目的构建串联表达口蹄疫病毒VP1-2A和猪干扰素-α的重组腺病毒,并研究重组病毒对小鼠特异性免疫的影响。方法将FMDV VP1-2A基因和α干扰素基因先后克隆到腺病毒的穿梭载体中,得到的阳性穿梭质粒与腺病毒骨架载体在大肠杆菌BJ5183中进行... 详细信息

目的构建串联表达口蹄疫病毒VP1-2A和猪干扰素-α的重组腺病毒,并研究重组病毒对小鼠特异性免疫的影响。方法将FMDV VP1-2A基因和α干扰素基因先后克隆到腺病毒的穿梭载体中,得到的阳性穿梭质粒与腺病毒骨架载体在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组。重组腺病毒质粒感染HEK293A细胞,获得重组腺病毒rAd5VP1-2A-poIFN-α。用rAd5VP1-2ApoIFN-α免疫BALB/c小鼠,同时设注射单独表达FMDV VP1的重组腺病毒(rAd5VP1)和空腺病毒的对照组。通过ELISA检测血清中特异性IgG、IgG1、IgG2a及细胞因子IL-4、IFN-γ的表达水平;MTT法检测淋巴细胞增殖指数。结果成功构建了共表达FMDV VP-2A和IFN-α的重组腺病毒rAd5VP1-2A-poIFN-α。小鼠免疫实验结果显示,与单独表达FMDV VP1基因的重组腺病毒rAd5VP1相比,重组腺病毒rAd5VP1-2A-poIFN-α能增强特异性IgG、IgG1和IgG2a的分泌,促进IL-4和IFN-γ的分泌,并能增强小鼠淋巴细胞增殖功能。结论重组腺病毒rAd5VP1-2A-poIFN-α能明显增强小鼠特异性免疫应答。

关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒 VP1基因干扰素-α

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埃及伊蚊丝氨酸蛋白酶抑制蛋白基因家族的筛选和表达谱分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017年第6期35卷 527-535页

作者：程金芝刘鉴翟慧吕清巧颜凤商正玲吴家红贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室现代病原生物学实验室贵阳550025 贵州医科大学微生物与生化药学工程中心贵阳550025 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵阳550025

目的筛选并鉴定埃及伊蚊(Aedes aegypti)全基因组中的丝氨酸蛋白酶抑制蛋白(serine protease inhibitor,serpin)基因,分析其基因结构以及在不同发育时期和不同组织中的表达谱。方法运用生物信息学方法在埃及伊蚊全基因组数据库中筛选并... 详细信息

目的筛选并鉴定埃及伊蚊(Aedes aegypti)全基因组中的丝氨酸蛋白酶抑制蛋白(serine protease inhibitor,serpin)基因,分析其基因结构以及在不同发育时期和不同组织中的表达谱。方法运用生物信息学方法在埃及伊蚊全基因组数据库中筛选并鉴定埃及伊蚊serpin基因家族,利用Vector NTI11.0软件进行同源性比对、保守性分析,采用MEGA7.0软件构建系统进化树。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测埃及伊蚊不同发育时期(卵、Ⅰ~Ⅳ龄幼虫、蛹、雄蚊和未吸血雌蚊),以及未吸血雌蚊不同组织(唾液腺、中肠、脂肪体和卵巢)的serpin基因表达变化。结果从埃及伊蚊全基因组中筛选出26条serpin基因序列。生物信息学分析结果显示,19条具有信号肽,16条推测具有抑制酶活性。进化分析表明,埃及伊蚊serpin基因家族被分为A、B和C分支,B分支分为4组,每分支均具有同源性,且不同成员间在进化上相对保守。qRT-PCR结果显示,Aa SRPN25在雌蚊中特异性表达,相对表达量为0.074±0.015(P<0.01);Aa SRPN19~22在雄蚊中丰富表达;Aa SRPN23在Ⅰ龄幼虫时期特异性高表达,而且在唾液腺中也特异性高表达,相对表达量分别为22.9±5.28和4.24±1.39(P<0.01);Aa SRPN25在唾液腺中特异性高表达,相对表达量为74.44±25.76(P<0.01),Aa SRPN6、Aa SRPN14在中肠中的表达量最高,相对表达量分别为1.80±0.33、0.703±0.501;Aa SRPN17、Aa SRPN20在脂肪体中的表达量最高,相对表达量分别为0.34±0.09、0.15±0.03。结论从埃及伊蚊全基因组中筛选出26条serpin基因序列,其中19条具有信号肽,16条推测具有抑制酶活性的作用。

关键词：埃及伊蚊丝氨酸蛋白酶抑制剂实时荧光定量PCR 时空表达谱

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嗜肺军团菌mip基因联合疫苗诱导的小鼠免疫应答

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第1期30卷 45-47页

作者：吴静惠英华曹秀琴杨志伟宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室宁夏银川750004 生育力保持省部级共建教育部重点实验室宁夏银川750004

军团病主要由嗜肺军团菌引起，嗜肺军团菌共有15个血清型，其中血清1型在人军团菌病中最常见，约占80％[1]，可引起严重肺炎[2]。军团菌污染的水源通过加湿器、喷雾器、淋浴器、水龙头等载体形成气溶胶。人体吸人气溶胶后引起军团菌感染... 详细信息

军团病主要由嗜肺军团菌引起，嗜肺军团菌共有15个血清型，其中血清1型在人军团菌病中最常见，约占80％[1]，可引起严重肺炎[2]。军团菌污染的水源通过加湿器、喷雾器、淋浴器、水龙头等载体形成气溶胶。人体吸人气溶胶后引起军团菌感染[3-4]。随着人们生活水平的提高，人工冷热水系统、空调等现代化设施进入千家万户，军团菌爆发的机率也随之增大。因此军团菌的预防显得尤为重要。

关键词：嗜肺军团菌 MIP蛋白 DNA疫苗 DNA初次免疫-蛋白加强免疫

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夏氏疟原虫感染早期易感和抵抗小鼠树突状细胞亚群和表型的变化特点

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中国人兽共患病学报 2011年第1期27卷 45-48页

作者：武静静刘军郑伟潘艳艳李莹延娟武剑华曹雅明郑丽中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳110001 徐州医学院病原生物学与免疫学教研室徐州221002 沈阳军区总医院检验科沈阳110016

目的探讨夏氏疟原虫（Plasmodium chabaudi chabaudi AS）感染早期,树突状细胞（Dendritic cells,DCs）亚群和表型的变化特点。方法感染易感的DBA/2和抵抗的BALB/c小鼠,制备感染前和感染后第3、5、8d小鼠脾细胞悬液,采用流式细胞分析技... 详细信息

目的探讨夏氏疟原虫（Plasmodium chabaudi chabaudi AS）感染早期,树突状细胞（Dendritic cells,DCs）亚群和表型的变化特点。方法感染易感的DBA/2和抵抗的BALB/c小鼠,制备感染前和感染后第3、5、8d小鼠脾细胞悬液,采用流式细胞分析技术检测2种小鼠脾细胞悬液中髓样DCs和浆样DCs的数量以及表面表达MHC Ⅱ类分子和CD80分子的DCs的百分含量。结果 DBA/2小鼠和BALB/c小鼠分别呈现以髓样DCs和浆样DCs为主的增殖模式。2种小鼠表达MHCⅡ类分子和CD80分子的DCs数量在感染后3~5d明显升高,并于感染后第8d达到最高水平,然而感染后第8d,BALB/c小鼠表达MHCⅡ类分子和CD80分子的DCs的数量明显低于DBA/2小鼠。结论感染早期,DBA/2和BALB/c小鼠在DCs亚群的增殖模式、成熟表型特征性分子的表达水平上存在显著差异。

关键词：夏氏疟原虫树突状细胞免疫应答

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氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

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药学服务与研究 2008年第3期8卷 204-208页

作者：李小彦武文明栗俊杰廖飞陈全重庆医科大学药学院重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016

目的:观察氯沙坦对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法:采用链脲霉素诱导SD大鼠造模,大鼠分为3组:正常对照组、DM模型组和氯沙坦治疗组。12周末时,采用HPLC-荧光分析法测定血浆同型半胱氨酸(homocystein... 详细信息

目的:观察氯沙坦对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法:采用链脲霉素诱导SD大鼠造模,大鼠分为3组:正常对照组、DM模型组和氯沙坦治疗组。12周末时,采用HPLC-荧光分析法测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)含量;常规方法检测各组大鼠肾重/体重、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率;放射免疫法检测肾组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)含量;免疫组化法检测肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth fac-tor,CTGF)表达;透射电镜观察肾脏超微结构。结果:12周末时,DM模型组大鼠血浆Hcy的含量明显增加,肾皮质CTGF表达显著升高,肾组织AngⅡ含量显著增多,肾重/体重、血糖、尿白蛋白排泄率、尿素氮、血肌酐显著增高,肾脏超微结构改变明显。氯沙坦治疗组上述指标显著低于DM模型组(P<0.01),肾脏超微结构改变明显较轻。结论:氯沙坦对DM大鼠肾脏形态和功能有明显保护作用,其机制值得进一步研究。

关键词：糖尿病肾病氯沙坦结缔组织生长因子血管紧张素Ⅱ 大鼠

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