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DNA损伤诱导的长链非编码RNA(DINO)下调MMP2表达抑制人绒毛膜滋养层细胞侵袭与迁移

细胞与分子免疫学杂志 2022年第8期38卷 736-742页

作者：吴凯刘圆张辉王艳华张慧萍姜怡邓宁夏医科大学基础医学院组织胚脂学教研室宁夏银川750004 宁夏医科大学基础医学院病理生理学教研室宁夏银川750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院妇产科宁夏银川750004

目的探讨DNA损伤诱导的长链非编码RNA(DINO)通过调控迁移相关因子基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达对人绒毛膜滋养层细胞侵袭与迁移的影响。方法收集子痫前期(PE)患者和正常孕妇的胎盘组织(对照组)各20例,Masson染色观察胎盘组织结构改变,... 详细信息

目的探讨DNA损伤诱导的长链非编码RNA(DINO)通过调控迁移相关因子基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达对人绒毛膜滋养层细胞侵袭与迁移的影响。方法收集子痫前期(PE)患者和正常孕妇的胎盘组织(对照组)各20例,Masson染色观察胎盘组织结构改变,免疫荧光组织化学染色检测胎盘组织滋养层细胞MMP2的表达;实时荧光定量PCR检测DINO的表达;将HTR-8/SVneo人绒毛膜滋养层细胞转染DINO小干扰片段(si-DINO)后,实时荧光定量PCR验证DINO、MMP2 mRNA表达,Western blot法检测MMP2蛋白表达;Transwell^(TM)侵袭实验和细胞划痕实验检测细胞侵袭、迁移情况。结果与对照组相比,PE患者血压、蛋白尿水平明显增高;胎盘组织可见纤维素样坏死,绒毛膜绒毛减少;免疫荧光显示胎盘滋养层细胞MMP2表达减弱、DINO表达增加;转染si-DINO后,DINO表达降低,而MMP2 mRNA及蛋白表达增加,HTR-8/SVneo细胞侵袭和迁移能力显著增加。结论DINO下调MMP2表达,抑制胎盘滋养层细胞的侵袭与迁移。

关键词：子痫前期 DNA损伤诱导长链非编码RNA(DINO) 基质金属蛋白酶2(MMP2) 侵袭迁移

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成年大鼠脑出血后海马齿状回神经前体细胞的增殖与分化

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解剖学杂志 2012年第2期35卷 186-189页

作者：文玉军王登科孙征刘海洋张莲香王效军秦毅宁夏医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系银川750004 宁夏师范学院医学院解剖学教研室固原756000

目的：观察成年大鼠脑出血后海马齿状回神经前体细胞的增殖与分化，探讨脑出血后神经前体细胞的变化规律。方法：制作大鼠脑出血模型，5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）腹腔注射标记增殖细胞，用免疫组织化学法检测大鼠海马齿状回Br-du、神... 详细信息

目的：观察成年大鼠脑出血后海马齿状回神经前体细胞的增殖与分化，探讨脑出血后神经前体细胞的变化规律。方法：制作大鼠脑出血模型，5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）腹腔注射标记增殖细胞，用免疫组织化学法检测大鼠海马齿状回Br-du、神经元核抗原（NeuN）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞数的变化。结果：正常组和假手术组大鼠海马齿状回均有少量BrdU阳性细胞，脑出血后大鼠各时间段的BrdU阳性细胞均较正常组和假手术组增加，7d组达到峰值后逐渐下降，28d组仍高于正常组和假手术组。正常成年大鼠海马齿状回可见少量BrdU／NeuN和BrdU／GFAP双标阳性细胞，脑出血后双标阳性细胞数较正常组增加。结论：脑出血后大鼠海马齿状回神经前体细胞增殖明显，且可以向神经元和神经胶质细胞分化。

关键词：脑出血海马齿状回神经前体细胞增殖分化大鼠

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circRNA CPSF6核内转移促进同型半胱氨酸诱导的滋养细胞凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第2期38卷 146-152页

作者：高丽娜吴琪瑞殷荷刘林英吴玉珠张玉月王艳华吴凯张慧萍宁夏医科大学临床医学院妇产科宁夏医科大学总医院妇产科宁夏医科大学基础医学院组胚学教研室国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川750004

目的探讨环状RNA剪切及多聚腺苷酸化特异因子6(circRNA CPSF6)在同型半胱氨酸(Hcy)致滋养细胞凋亡中的作用及机制。方法体外培养HTR-8/SVneo人绒毛膜滋养层细胞,分为对照组(0 mmol/L Hcy处理)与1 mmol/L Hcy处理组。采用免疫荧光细胞化... 详细信息

目的探讨环状RNA剪切及多聚腺苷酸化特异因子6(circRNA CPSF6)在同型半胱氨酸(Hcy)致滋养细胞凋亡中的作用及机制。方法体外培养HTR-8/SVneo人绒毛膜滋养层细胞,分为对照组(0 mmol/L Hcy处理)与1 mmol/L Hcy处理组。采用免疫荧光细胞化学染色检测滋养细胞胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达,Western blot法检测caspase-3蛋白水平;实时定量PCR检测circRNA CPSF6的mRNA表达水平;同时,运用小干涉RNA(siRNA)技术敲低滋养细胞circRNA CPSF6表达,Western blot法检测细胞caspase-3、caspase-9、B细胞淋巴瘤分子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)表达;实时定量PCR检测circRNA CPSF6在Hcy处理前后滋养细胞胞质/胞核中的表达水平。结果与对照组相比,Hcy处理组caspase-3表达明显增加,circRNA CPSF6 mRNA表达上调;敲低circRNA CPSF6后,caspase-3表达降低,线粒体凋亡途径被抑制;正常培养的滋养细胞中circRNA CPSF6在胞质大量表达,而给予Hcy处理后,circRNA CPSF6主要在胞核表达。结论通过circRNA CPSF6核内转移激活线粒体凋亡途径促进Hcy诱导的滋养细胞凋亡。

关键词：环状RNA剪切及多聚腺苷酸化特异因子6(circRNA CPSF6) 滋养细胞同型半胱氨酸(Hcy) 细胞凋亡

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G-CSF对帕金森病小鼠运动能力和黑质纹状体神经元的影响

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神经解剖学杂志 2019年第1期35卷 1-7页

作者：张丹丹张宇新张乘云郭森崔海鹏贾桦宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系银川750004 华北理工大学基础医学院人体解剖学教研室唐山063200 承德医学院人体解剖学教研室承德067000 承德医学院病理生理学教研室承德067000

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中脑黑质致密部(SNpc)及纹状体(STR)多巴胺(DA)能神经元的影响。方法:正常健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、MPTP组及MPTP+G-CS... 详细信息

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中脑黑质致密部(SNpc)及纹状体(STR)多巴胺(DA)能神经元的影响。方法:正常健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、MPTP组及MPTP+G-CSF组,采用腹腔注射MPTP法制作小鼠PD模型,MPTP+G-CSF组于最后一次MPTP注射后再腹腔注射G-CSF。爬杆实验观察小鼠的行为学改变;尼氏染色技术观察各组小鼠黑质致密部神经元数量及形态学变化;免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)在各组小鼠中脑黑质致密部及纹状体的表达; Western Blot法检测各组小鼠中脑TH蛋白的表达量。结果:与对照组相比,MPTP组小鼠较对照组爬杆用时显著延长(P <0. 05),尼氏染色显示黑质致密部神经元数量显著减少(P <0. 05),黑质致密部、纹状体TH表达量显著减少(P <0. 05); MPTP+G-CSF组较MPTP组爬杆用时显著缩短(P <0. 05),神经元丢失减少(P <0. 05),神经元形态较完整;与MPTP组比较,MPTP+G-CSF组黑质致密部、纹状体TH表达水平显著增高(P <0. 05)。结论:G-CSF能够改善PD小鼠运动功能,减少黑质致密部多巴胺能神经元丢失,增加TH表达水平。

关键词：帕金森病 1-甲基4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶粒细胞集落刺激因子酪氨酸羟化酶小鼠

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组织学与胚胎学教学过程中基础理论与临床问题相结合的教学探讨

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解剖学杂志 2023年第1期46卷 74-76页

作者：蒙兆年李卉黑常春王进宝宁夏医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室银川756000

医学是一门博大精深、纷繁复杂的学科。有别于有些学科只注重理论知识体系培养,医学培养的是治病救人、救死扶伤的白衣天使。医学职业神圣庄严,容不得半点马虎疏漏。临床上疾病千奇百怪,病情千变万化,疾病症状因人而异,医护人员在临床... 详细信息

医学是一门博大精深、纷繁复杂的学科。有别于有些学科只注重理论知识体系培养,医学培养的是治病救人、救死扶伤的白衣天使。医学职业神圣庄严,容不得半点马虎疏漏。临床上疾病千奇百怪,病情千变万化,疾病症状因人而异,医护人员在临床上给患者诊疗时,必须具备扎实过硬的实践操作能力,在正确的理论知识指导下,才能够给患者进行疾病的诊治。在医学教学中教师除了给学生培养扎实的理论基础外,还要培养过硬的实践操作能力,使学生理论知识与临床实践能够很好地衔接起来。

关键词：实践操作能力疾病症状理论知识体系临床实践教学探讨组织学与胚胎学教学理论与临床白衣天使

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重组蛋白GDF-9对卵巢黄素化颗粒细胞增殖和凋亡的影响

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宁夏医科大学学报 2016年第5期38卷 484-489,474页

作者：马会明李昕王蒙蒙王永峰田洪成王飞苗王燕蓉裴秀英宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系组织胚胎学教研室银川750004 宁夏医科大学总医院生殖医学中心银川750004

目的探讨重组生长分化因子-9(GDF-9)对人卵巢黄素化颗粒细胞周期及细胞增殖、凋亡的影响。方法收集因输卵管和(或)男性因素而接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者的卵泡液进行密度梯度离心,收集黄素化颗粒细胞,接种于M199培养基进行... 详细信息

目的探讨重组生长分化因子-9(GDF-9)对人卵巢黄素化颗粒细胞周期及细胞增殖、凋亡的影响。方法收集因输卵管和(或)男性因素而接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者的卵泡液进行密度梯度离心,收集黄素化颗粒细胞,接种于M199培养基进行原代培养,实验组在M199培养基中添加100ng·m L-1GDF-9因子,对照组未添加GDF-9因子;培养48h后,用CCK-8试剂盒测定细胞增殖情况;用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡;Western blot法检测裂解的半胱氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase-3)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化表达水平。结果原代培养的人黄素化颗粒细胞在培养第2~4天时处于分裂增殖高峰期,贴壁培养24h再添加GDF-9因子作用48h后,细胞周期检测结果显示,GDF-9使颗粒细胞周期表现为GO/Gl期的比例明显减少,S+G2/M期的比例明显增高(P<0.05)。细胞凋亡检测结果显示,颗粒细胞凋亡率显著减少(P<0.05)。Western blot检测发现,添加GDF-9使cleaved-caspase-3蛋白的相对表达量降低,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的相对表达量显著增高(P<0.05)。结论重组GDF-9因子可促进颗粒细胞增殖,抑制颗粒细胞凋亡,其机制可能与活化ERK和抑制cleaved-caspase-3途径、调节细胞周期有关。

关键词：生长分化因子-9 半胱氨酸蛋白水解酶3 细胞外信号调节激酶1/2 颗粒细胞卵巢

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肌苷对原代培养的少突胶质前体细胞化学性缺氧损伤后存活的作用

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神经解剖学杂志 2015年第6期31卷 729-733页

作者：孙金萍马全瑞邝芳宁夏医科大学总医院病理科银川750004 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系银川750004 第四军医大学基础部神经生物学教研室暨脑科学协同创新中心全军神经科学研究所西安710032

目的:探讨肌苷对化学性缺氧损伤后少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPC)存活的影响。方法:原代培养新生SD大鼠脑皮层OPC,随机分为四个组,即空白对照组、肌苷对照组、鱼藤酮损伤组和肌苷治疗组。肌苷治疗组是在添加肌... 详细信息

目的:探讨肌苷对化学性缺氧损伤后少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPC)存活的影响。方法:原代培养新生SD大鼠脑皮层OPC,随机分为四个组,即空白对照组、肌苷对照组、鱼藤酮损伤组和肌苷治疗组。肌苷治疗组是在添加肌苷30 min后再用鱼藤酮损伤,24 h后用MTT、PI染色和免疫荧光组织化学染色检测各组细胞吸光值的差异、细胞死亡比率的差异和细胞凋亡比率的差异。结果:与对照组比较,鱼藤酮损伤组的吸光值明显下降(P<0.001)、细胞死亡比率明显增加(P<0.001)但细胞凋亡比率没有差异;与空白对照组比较,10 mmol/L肌苷对照组的的吸光值明显下降(P<0.01);与鱼藤酮损伤组比较不同剂量肌苷治疗组的吸光值、细胞死亡比率和细胞凋亡比率均没有差异。结论:在鱼藤酮介导的化学性缺氧损伤条件下,肌苷对OPC的存活没有明显的保护作用,而且大剂量肌苷还可损伤正常的OPC,提示大剂量肌苷在中枢神经系统损伤后髓鞘的修复过程中可能具有负面作用。

关键词：肌苷少突胶质前体细胞存活化学性缺氧损伤细胞培养大鼠

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氧化苦参碱对人白血病K562细胞株凋亡作用的研究

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宁夏医科大学学报 2011年第10期33卷 924-927页

作者：郭宏伟王芳牛志英王燕蓉宁夏医科大学总医院银川750004 宁夏医科大学临床学院诊断学教研室银川750004 宁夏第五人民医院灵武中心医院灵武751400 宁夏医科大学基础医学院组织胚胎学系银川750004

目的探讨氧化苦参碱(Oxymatrine,Oxy)对人慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞凋亡的影响。方法用Oxy处理K562细胞,MTT法检测药物对细胞的抑制作用;荧光显微镜及透射电镜观察细胞形态变化;流式细胞仪分析细胞DNA含量变化及凋亡细胞的比例,琼... 详细信息

目的探讨氧化苦参碱(Oxymatrine,Oxy)对人慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞凋亡的影响。方法用Oxy处理K562细胞,MTT法检测药物对细胞的抑制作用;荧光显微镜及透射电镜观察细胞形态变化;流式细胞仪分析细胞DNA含量变化及凋亡细胞的比例,琼脂糖凝胶电泳技术观察DNA降解。结果 Oxy能够抑制K562细胞生长,对K562细胞的IC50约为***-1。Oxy作用后的K562细胞呈现凋亡形态学改变,流式细胞仪可在2倍体前检测到凋亡峰,凋亡细胞比例为7.03%～54.99%,琼脂糖凝胶电泳呈现出细胞凋亡特征性的DNA梯状带。结论 Oxy能够诱导K562细胞发生凋亡。

关键词：氧化苦参碱慢性粒细胞白血病 K562细胞凋亡

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癫痫对大鼠卵巢和生长卵泡的影响

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宁夏医科大学学报 2010年第8期32卷 860-863,F0004页

作者：潘娟张灵武王峰孙涛黑常春张焱宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学附属医院妇产科银川750004 宁夏医科大学附属医院神经外科银川750004 宁夏医科大学基础医学院组织胚胎学教研室省部共建生育力保持重点实验室银川750004 宁夏医科大学科技研发中心电镜室银川750004

目的探讨癫痫对大鼠卵巢和生长卵泡的影响。方法双极电极植入大鼠左侧杏仁核,给予连续电刺激,建立电点燃的癫痫模型;假手术组,电极植入后不给予电刺激;对照组为正常雌性大鼠。癫痫模型大鼠在点燃20d后于动情间期取双侧卵巢,同期其它两... 详细信息

目的探讨癫痫对大鼠卵巢和生长卵泡的影响。方法双极电极植入大鼠左侧杏仁核,给予连续电刺激,建立电点燃的癫痫模型;假手术组,电极植入后不给予电刺激;对照组为正常雌性大鼠。癫痫模型大鼠在点燃20d后于动情间期取双侧卵巢,同期其它两组大鼠也分别于动情间期摘取双侧卵巢,右侧卵巢HE染色后光镜下阅片,通过Image-Pro Plus 6.0软件对窦前卵泡、窦卵泡、闭锁卵泡及卵泡总数进行分析,左侧卵巢选择窦状卵泡进行透射电镜观察。结果癫痫模型组大鼠卵巢增大,卵巢中窦前卵泡、总卵泡数及闭锁卵泡显著增多(P<0.05),窦状卵泡颗粒层变薄,卵泡膜明显增厚,电镜下显示癫痫组大鼠窦状卵泡中的颗粒细胞凋亡增多,增生的卵泡膜细胞更加富含脂滴。结论癫痫可导致大鼠卵巢发生多囊性改变,生长卵泡凋亡增多,卵泡膜细胞增生分泌增强。

关键词：癫痫点燃模型生长卵泡多囊卵巢颗粒细胞卵泡膜细胞

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小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH、FSH+LH对Cx43表达的影响

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宁夏医科大学学报 2015年第12期37卷 1391-1395,封4页

作者：陈杰常青杨延周裴秀英马文智马会明黑常春于佳孙苗王燕蓉内蒙古医科大学人体解剖学教研室呼和浩特010000 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏生殖与遗传重点实验室银川750004 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系银川750004

目的通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)、FSH和促黄体生成素(LH)共同干预,观察FSH及FSH+LH干预对冻存卵巢卵泡缝隙连接蛋白(connexin-43,Cx43)表达的影响,从而判断最佳的激素保护方法。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵... 详细信息

目的通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)、FSH和促黄体生成素(LH)共同干预,观察FSH及FSH+LH干预对冻存卵巢卵泡缝隙连接蛋白(connexin-43,Cx43)表达的影响,从而判断最佳的激素保护方法。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG),玻璃化冻存对照组(VCG),0.3IU·m L^(-1)FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),以及0.15IU·m L^(-1)FSH+0.15IU·m L^(-1)LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+LH)。通过免疫组织化学法、Western blot技术及荧光定量PCR检测,观察并分析各组卵巢组织Cx43蛋白表达量。结果免疫组织化学及Western blot检测结果表明Cx43蛋白表达量在OG-FSH+LH组最高,其次为OG-FSH组、CG组及VCG组(P<0.05),各组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05);荧光定量PCR检测结果显示Cx43mRNA表达量从高到低依次为OG-FSH+LH组、OG-FSH组、CG组及VCG组(P<0.05),且各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH+LH的干预方式更有利于冻融卵巢组织缝隙连接蛋白Cx43蛋白的表达。

关键词：小鼠卵巢促卵泡刺激素促黄体生成素玻璃化冻存缝隙连接蛋白

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