检索结果-内蒙古大学图书馆

宁夏医科大学学报 2023年第5期45卷 469-474页

作者：王佳马丽媛母春兰刘春莲焦海燕宁夏医科大学教育部生育力保持重点实验室银川750004 宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系银川750004 宁夏医科大学总医院生殖中心银川750004

目的构建并鉴定H_(2)O_(2)诱导小鼠睾丸间质TM3细胞铁死亡模型。方法常规培养TM3细胞,采用MTS法选择H_(2)O_(2)的处理浓度,设置TM3细胞常规培养组(T组)、2 mmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理TM3细胞1 h组(H_(2)O_(2)-T组)、1μmol·... 详细信息

目的构建并鉴定H_(2)O_(2)诱导小鼠睾丸间质TM3细胞铁死亡模型。方法常规培养TM3细胞,采用MTS法选择H_(2)O_(2)的处理浓度,设置TM3细胞常规培养组(T组)、2 mmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理TM3细胞1 h组(H_(2)O_(2)-T组)、1μmol·L^(-1)GSH过氧化物酶4抑制剂(RSL3)处理TM3细胞1 h组(RSL3-T组)和3μmol·L^(-1)i FSP1处理TM3细胞24 h组(i FSP1-T组);采用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;检测试剂盒检测细胞的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化物(LPO)含量,Phen-Green-SK荧光探针经激光共聚焦显微镜检测Fe2+含量;采用透射电镜观察线粒体形态结构。结果根据MTS法选择2 mmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理TM3细胞;与T组相比,H_(2)O_(2)-T组ROS水平、MDA和LPO含量均上升(P均<0.001)、SOD活性下降(P <0.001);细胞内Fe2+含量上升(P<0.01),与RSL3-T组和i FSP1-T组相比,H_(2)O_(2)-T组细胞内LPO、Fe2+含量差异均无统计学意义(P均>0.05);透射电镜结果显示,H_(2)O_(2)-T组细胞线粒体变小皱缩,嵴减少,外膜破裂,与RSL3-T组和i FSP1-T组相似。结论 H_(2)O_(2)可诱导小鼠睾丸间质细胞TM3细胞发生铁死亡。

关键词：铁死亡活性氧脂质过氧化物线粒体 Fe^(2+)含量

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靶向REV3基因siRNA抑制人结肠癌细胞裸鼠移植瘤增殖作用的研究

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宁夏医科大学学报 2017年第1期39卷 19-23,F0003页

作者：隋御马璐辛淑文尹明伟贾伟王媛徐方宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系银川750004 宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院检验中心银川750004

目的检测靶向REV3基因的si RNA对裸鼠体内人类结肠癌SW480和COLO-205细胞移植瘤增殖的影响。方法采用脂质体-质粒转染技术构建REV3的siRNA,特异性地下调人类结肠癌细胞(SW480、COLO-205)中REV3基因的表达,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)... 详细信息

目的检测靶向REV3基因的si RNA对裸鼠体内人类结肠癌SW480和COLO-205细胞移植瘤增殖的影响。方法采用脂质体-质粒转染技术构建REV3的siRNA,特异性地下调人类结肠癌细胞(SW480、COLO-205)中REV3基因的表达,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测细胞的干扰效率,选择低表达效率具有统计学意义的细胞作为实验组细胞。将空白对照组、阴性对照组及实验组细胞分别注入到相应组裸鼠体内。通过观察裸鼠移植瘤的体积及裸鼠的体重来评价REV3 siRNA对人结肠癌细胞裸鼠移植瘤增殖的影响。结果 REV3基因的表达下调后,裸鼠体内移植瘤(SW480、COLO-205)实验组细胞成瘤的瘤体体积较对照组细胞成瘤的瘤体体积明显减小,实验组成瘤裸鼠的体重较对照组成瘤裸鼠的体重明显增加(P<0.05);而阴性对照组和空白对照组的人结肠癌细胞裸鼠移植瘤的瘤体体积及裸鼠体重差别均无统计学意义(P>0.05)。结论特异性的下调REV3基因在结肠癌细胞(SW480、COLO-205)中的表达量,可能对裸鼠体内移植瘤的增殖具有一定的抑制作用。

关键词： REV3基因 RNA干扰裸鼠移植瘤增殖

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宁夏回汉族人群RANTES基因多态性的分布特征

宁夏回汉族人群RANTES基因多态性的分布特征

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中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会

作者：随瑞枝张淑雅裴秀英宁夏医科大学基础医学院生化与分子生物学系宁夏生殖与遗传重点实验室

CCL5是β趋化因子亚家族CC类的成员,其基因定位于染色体17q11.2～12上,作用于单核/巨噬细胞以及淋巴细胞,在慢性炎症,自身免疫性疾病和肿瘤等发生发展中均起着重要作用。为探索宁夏回汉族人群RANTES基因多态性的分布特征,研究应用聚合... 详细信息

CCL5是β趋化因子亚家族CC类的成员,其基因定位于染色体17q11.2～12上,作用于单核/巨噬细胞以及淋巴细胞,在慢性炎症,自身免疫性疾病和肿瘤等发生发展中均起着重要作用。为探索宁夏回汉族人群RANTES基因多态性的分布特征,研究应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测RANTES基因-403(G/A)、-28(C/G)多态性位点的基因型。结果显示:宁夏回与汉族群体的RANTES基因-403、-28多态性位点基因型频率和等位基因频率的分布均无统计学差异(P>0.05);宁夏人群-403位点的基因型频率和等位基因频率与湖南、南京、北京、北方、香港、日本群体差异无统计学意义(P>0.05),而突变频率显著高于西班牙群体,差异有统计学意义(P<0.01);宁夏人群-28位点的基因型频率和等位基因频率与北方、香港、日本群体差异无统计学意义(P>0.05),而突变频率显著高于南京、北京、墨西哥、西班牙群体,差异有统计学意义(P<0.05)。说明不同的区域种族群体RANTES基因-403、-28位点的基因型频率和等位基因频率分布有其群体特征。

关键词： RANTES基因 SNPs,回族,汉族

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促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1相互作用的筛选和鉴定

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第三军医大学学报 2007年第6期29卷 482-485页

作者：张翠莉杨晓明成海恩刘涛王应雄重庆医科大学公共卫生学院生殖医学系遗传学教研室重庆400016 军事医学科学院放射医学研究所北京100850 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 第三军医大学西南医院全军感染病研究所重庆400038

目的利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac/DIABLO的相互作用蛋白。方法①设计促凋亡因子野生型Smac/DIABLO引物,利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac/DIABLO基因片段,构建酵母真核表达载体pDBLeu-Smac/DIABLO。②pDB... 详细信息

目的利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac/DIABLO的相互作用蛋白。方法①设计促凋亡因子野生型Smac/DIABLO引物,利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac/DIABLO基因片段,构建酵母真核表达载体pDBLeu-Smac/DIABLO。②pDBLeu-Smac/DIABLO诱饵质粒转化酵母MaV203,Western blot检测融合蛋白在酵母中的正确表达,自激活作用的检测并确定抑制His基础表达的3AT浓度。③对成人肝cDNA文库的筛选。选择能同时激活His、Ura、LacZ3个报告基因的克隆为阳性,利用回转实验和GST-pull down对阳性克隆进行鉴定。结果成功构建pDBLeu-Smac/DIABLO载体,转化酵母细胞MaV203,无细胞毒性,无自激活作用,3AT浓度为25mmol/L。经回转实验和GST-pull down证实了线粒体促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1之间具有相互作用。结论Smac/DIABLO可能通过与核受体NR4A1的相互作用来影响核受体NR4A1对细胞生存或者凋亡的调控。

关键词： Smac/DIABLO NR4A1 酵母双杂交

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结核分枝杆菌生物膜形成相关基因的筛选与鉴定

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中国生物工程杂志 2013年第4期33卷 15-21页

作者：刘霞郭庆龙王若珺王洪海裴秀英张雪莲复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室医学科学技术研究中心银川750004

目的:通过菌落表型变化并结合生物膜生长缺陷筛选并鉴定可能与生物膜形成相关基因。方法:利用带有Himar1转座子的MycoMarT7转座子系统建立结核分枝杆菌H37Ra随机插入突变库;筛选细菌表面结构发生变化和生物膜形成有变化的突变菌株;运用... 详细信息

目的:通过菌落表型变化并结合生物膜生长缺陷筛选并鉴定可能与生物膜形成相关基因。方法:利用带有Himar1转座子的MycoMarT7转座子系统建立结核分枝杆菌H37Ra随机插入突变库;筛选细菌表面结构发生变化和生物膜形成有变化的突变菌株;运用T-A克隆法并结合抗性标记挽救法获得突变菌株的随机插入基因侧翼序列从而鉴定突变基因,并运用生物信息学方法分析预测突变基因的功能。结果:通过菌落形态变化及生物膜缺陷表型筛选出39株突变株,成功鉴定其中16株突变株,涉及16个基因发生突变,其中5个与脂质代谢相关,4个与细胞壁合成相关、2个与中间代谢和呼吸作用相关、1个调节蛋白相关基因,1个毒力相关基因,1个PE/PPE家族基因,还有2个功能未知基因。结合生物膜形成缺陷分析,其中8个基因可能与H37Ra体外生物膜的形成相关。结论:成功构建库容量约为1×104结核分枝杆菌转座子随机插入突变文库,筛选获得生物膜生长受损突变株及可能与结核分枝杆菌生物膜形成相关的基因信息,为后续深入开展生物膜形成机制研究奠定基础。

关键词：结核分枝杆菌 MycoMarT7噬菌体转座子菌落形态生物膜

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结核分枝杆菌Ag85B、TB10.4及Ag85B-TB10.4融合基因的克隆表达及生物信息学分析

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宁夏医科大学学报 2013年第7期35卷 738-742,747页

作者：王博丁晓颜贝高玉婧蒲静裴秀英宁夏医科大学基础医学院生化与分子生物学系宁夏生殖与遗传重点实验室医学科学技术研究中心银川750004

目的构建结核分枝杆菌Ag85B、TB10.4及Ag85B-TB10.4融合表达载体,并进行抗原的生物信息学分析,为候选疫苗筛选奠定基础。方法从结核分枝杆菌H37Rv菌株中分别扩增出Ag85B基因,TB10.4基因,Ag85B-TB10.4;将Ag85B克隆入pET-28a(+)表达载体中... 详细信息

目的构建结核分枝杆菌Ag85B、TB10.4及Ag85B-TB10.4融合表达载体,并进行抗原的生物信息学分析,为候选疫苗筛选奠定基础。方法从结核分枝杆菌H37Rv菌株中分别扩增出Ag85B基因,TB10.4基因,Ag85B-TB10.4;将Ag85B克隆入pET-28a(+)表达载体中,将TB10.4和Ag85B-TB10.4分别克隆入pET-SUMO表达载体中。上述重组质粒转化入大肠埃希杆菌BL21菌中(DE3),经IPTG诱导表达,并对其进行生物信息学分析。结果 (1)成功将结核分枝杆菌Ag85B和TB10.4,Ag85B-TB10.4基因分别克隆入pET28a(+)和pET-SUMO表达载体中,经IPTG诱导蛋白表达后,对经超声裂解的菌液上清进行SDSPAGE电泳,表明获得了与预期蛋白大小一致的表达产物,重组融合蛋白pET-SUMO-Ag85B-TB10.4蛋白分子质量约为54kDa。(2)生物信息学分析显示Ag85B-TB10.4融合蛋白具有多个潜在抗原位点。结论成功构建了重组质粒pET-28a-Ag85B,pET-SUMO-TB10.4和pET-SUMO-Ag85B-TB10.4,并获得了Ag85B,TB10.4和Ag85B-TB10.4的可溶性原核表达产物;生物信息学分析在Ag85B与TB10.4蛋白加入一段蛋白linker后蛋白的亲水性增强,抗原决定簇面积增大,为后续的功能实验研究奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌 Ag85B TB10.4 基因融合生物信息学

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一家系3例染色体t(11;12)平衡易位的细胞遗传学分析

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宁夏医科大学学报 2012年第2期34卷 167-168,F0004页

作者：张玉玲党洁焦海燕陆宏彭亮陈银涛宁夏医科大学基础医学院医学实验教学中心银川750004 宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏医科大学生育力保持省部共建教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系银川750004

染色体平衡易位是一类常见的染色体结构畸变,是由染色体片段位置改变所致,可涉及每条染色体的各个区带,是导致不孕不育、流产、胚胎停育等不良孕产的主要原因之一。由于没有遗传物质的丢失,平衡易位通常不引起明显的遗传效应,故易位携... 详细信息

染色体平衡易位是一类常见的染色体结构畸变,是由染色体片段位置改变所致,可涉及每条染色体的各个区带,是导致不孕不育、流产、胚胎停育等不良孕产的主要原因之一。由于没有遗传物质的丢失,平衡易位通常不引起明显的遗传效应,故易位携带者尽管有染色体结构异常但表型通常正常,但其在生育时,

关键词：染色体t平衡易位细胞遗传学

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沉默REV7联合奥沙利铂诱导人结肠癌细胞THC 8307凋亡的研究

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宁夏医科大学学报 2017年第2期39卷 121-125,130,F0004页

作者：王蒙蒙李昕马璐李元杰隋御马会明徐方宁夏医科大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学系生育力保持教育部重点实验室/宁夏生殖与遗传重点实验室银川750004

目的探讨抗肿瘤药物奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)联合沉默REV7基因对人结肠癌细胞THC8307细胞凋亡的影响。方法体外培养人结肠癌细胞株THC8307,将REV7基因的特异性siRNA片段转染THC8307细胞,运用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Wester... 详细信息

目的探讨抗肿瘤药物奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)联合沉默REV7基因对人结肠癌细胞THC8307细胞凋亡的影响。方法体外培养人结肠癌细胞株THC8307,将REV7基因的特异性siRNA片段转染THC8307细胞,运用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot法检测转染后细胞中REV7 mRNA和蛋白表达;运用MTT方法确定L-OHP对THC8307细胞的半数抑制浓度,实验分为不作任何处理的THC8307组、加药处理的L-OHP组,药物联合REV7 siRNA处理的L-OHP+REV7 siRNA组,采用细胞免疫荧光法检测THC8307细胞Bax、BCL-2的表达定位;采用流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率;Western blot法检测各组细胞Bax、BCL-2蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,流式细胞术结果显示L-OHP、L-OHP联合REV7 siRNA组均能促进THC8307细胞凋亡,Western blot结果显示,L-OHP、L-OHP联合REV7 siRNA可明显下调凋亡因子BCL-2、上调Bax的蛋白表达水平、BCL-2/Bax灰度比值显著性下降(P<0.05),同时L-OHP、L-OHP联合REV7 siRNA两组相比较,后者较单独L-OHP组对THC8307细胞促进凋亡作用更加显著(P均<0.05)。结论 L-OHP联合沉默REV7基因可显著性地诱导人结肠癌细胞THC8307凋亡,发挥抗肿瘤作用。

关键词：结肠癌细胞奥沙利铂 REV7 细胞凋亡

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重组蛋白GDF-9对卵巢黄素化颗粒细胞增殖和凋亡的影响

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宁夏医科大学学报 2016年第5期38卷 484-489,474页

作者：马会明李昕王蒙蒙王永峰田洪成王飞苗王燕蓉裴秀英宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系组织胚胎学教研室银川750004 宁夏医科大学总医院生殖医学中心银川750004

目的探讨重组生长分化因子-9(GDF-9)对人卵巢黄素化颗粒细胞周期及细胞增殖、凋亡的影响。方法收集因输卵管和(或)男性因素而接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者的卵泡液进行密度梯度离心,收集黄素化颗粒细胞,接种于M199培养基进行... 详细信息

目的探讨重组生长分化因子-9(GDF-9)对人卵巢黄素化颗粒细胞周期及细胞增殖、凋亡的影响。方法收集因输卵管和(或)男性因素而接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者的卵泡液进行密度梯度离心,收集黄素化颗粒细胞,接种于M199培养基进行原代培养,实验组在M199培养基中添加100ng·m L-1GDF-9因子,对照组未添加GDF-9因子;培养48h后,用CCK-8试剂盒测定细胞增殖情况;用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡;Western blot法检测裂解的半胱氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase-3)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化表达水平。结果原代培养的人黄素化颗粒细胞在培养第2~4天时处于分裂增殖高峰期,贴壁培养24h再添加GDF-9因子作用48h后,细胞周期检测结果显示,GDF-9使颗粒细胞周期表现为GO/Gl期的比例明显减少,S+G2/M期的比例明显增高(P<0.05)。细胞凋亡检测结果显示,颗粒细胞凋亡率显著减少(P<0.05)。Western blot检测发现,添加GDF-9使cleaved-caspase-3蛋白的相对表达量降低,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的相对表达量显著增高(P<0.05)。结论重组GDF-9因子可促进颗粒细胞增殖,抑制颗粒细胞凋亡,其机制可能与活化ERK和抑制cleaved-caspase-3途径、调节细胞周期有关。

关键词：生长分化因子-9 半胱氨酸蛋白水解酶3 细胞外信号调节激酶1/2 颗粒细胞卵巢

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rhFSH干预对玻璃化冻融小鼠卵巢中葡萄糖神经酰胺转移酶表达及卵泡凋亡的影响

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宁夏医科大学学报 2015年第12期37卷 1379-1383,封2页

作者：马文叶张红杨延周裴秀英常青马会明马文智孙苗于佳蔡玉芳王红燕黑常春赵承军王燕蓉宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏生殖与遗传重点实验室银川750004 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系银川750004

目的通过观察重组人卵泡刺激素(rh FSH)干预对玻璃化冻融小鼠卵巢中葡萄糖神经酰胺转移酶(UGCG)表达以及卵泡凋亡的影响,提供rh FSH降调神经酰胺的含量从而达到抗凋亡作用的实验室依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为三组:新鲜... 详细信息

目的通过观察重组人卵泡刺激素(rh FSH)干预对玻璃化冻融小鼠卵巢中葡萄糖神经酰胺转移酶(UGCG)表达以及卵泡凋亡的影响,提供rh FSH降调神经酰胺的含量从而达到抗凋亡作用的实验室依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为三组:新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、300 IU·L^(-1)rh FSH干预玻璃化冻存组(rh FSH-VG)。通过对冻融卵巢内各级卵泡计数、免疫组织化学技术及Western blot技术,观察并分析各组卵巢内葡萄糖神经酰胺转移酶(UGCG)、抗凋亡蛋白Bcl2和促凋亡蛋白Bax在卵巢不同细胞中的定位和蛋白表达量。结果与FCG组相比,两个冻融组卵巢结构较疏松,但rh FSH-VG组卵泡基质结构较VCG组整齐且较致密。原始卵泡、初级卵泡、正常卵泡和卵泡总数的计数及UGCG和Bcl2的表达显示,rh FSH-VG组高于VCG组(P<0.05),但这两个冻融组均低于FCG组(P<0.05)。闭锁卵泡计数和Bax的表达显示rh FSH-VG组低于VCG组(P<0.05),但这两个冻融组均高于FCG组(P<0.05)。结论玻璃化冻融过程中添加rh FSH可以上调UGCG和Bcl2的表达,下调Bax表达,提示其可能通过降调神经酰胺的含量从而达到抗凋亡目的。

关键词：小鼠卵巢重组人卵泡刺激素玻璃化冻融葡萄糖神经酰胺转移酶 Bcl2 Bax

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