检索结果-内蒙古大学图书馆

解放军医学杂志 2022年第10期47卷 984-991页

作者：刘达越董小艳徐灵博张慧萍全尚琨马胜超白永生杨勇李桂忠宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室/宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院产前诊断中心宁夏银川750004 宁夏回族自治区人民医院神经内科宁夏银川750004 宁夏回族自治区人民医院核医学科宁夏银川750004

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠心肌细胞凋亡、增殖的作用及其可能机制。方法将大鼠心肌细胞分为对照组与Hcy组(用终浓度为3 mmol/L的Hcy刺激24 h),采用Western blotting检测TLR4、髓样分化因子(MyD88)、NF-κB、磷酸化的NF-κB(p-NF-... 详细信息

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠心肌细胞凋亡、增殖的作用及其可能机制。方法将大鼠心肌细胞分为对照组与Hcy组(用终浓度为3 mmol/L的Hcy刺激24 h),采用Western blotting检测TLR4、髓样分化因子(MyD88)、NF-κB、磷酸化的NF-κB(p-NF-κB),凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,EdU染色观察心肌细胞增殖情况。将TLR4干扰片段转染心肌细胞,采用Western blotting检测TLR4表达情况,对干扰片段进行筛选和验证。将心肌细胞分为干扰片段空载体组(si-NC+Hcy组)与干扰TLR4组(si-TLR4+Hcy组),并加入3 mmol/L的Hcy干预24 h,采用Western blotting检测心肌细胞MyD88、NF-κB、p-NF-κB,凋亡相关蛋白Bax、cleavedcaspase-3及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,EdU染色观察心肌细胞增殖情况。结果Western blotting检测结果显示,与对照组比较,Hcy组TLR4、MyD88、p-NF-κB及凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3表达水平升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平降低(P<0.01);与si-NC+Hcy组比较,si-TLR4+Hcy组TLR4、MyD88、p-NF-κB及凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3的表达水平降低(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平升高(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,Hcy组细胞凋亡率明显增高(P<0.01);与si-NC+Hcy组比较,si-TLR4+Hcy组细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。EdU染色结果显示,与对照组比较,Hcy组EdU阳性细胞率明显降低(P<0.01);与si-NC+Hcy组比较,si-TLR4+Hcy组EdU阳性细胞率明显增高(P<0.01)。结论Hcy可诱导大鼠心肌细胞凋亡,抑制心肌细胞增殖,其机制可能与TLR4/NF-κB信号通路有关。

关键词：同型半胱氨酸 TLR4/NF-κB信号通路心肌细胞细胞凋亡增殖

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circRNA RBM39与miR-5088-5p在缺氧诱导的滋养细胞自噬中的作用

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实用医学杂志 2020年第5期36卷 570-574页

作者：吴琪瑞王艳华柴丽芬张辉李淑霞刘林英石青吴凯张慧萍宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学总医院银川750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室银川750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室银川750004

目的探讨circRNA RBM39与miR-5088-5p在缺氧诱导的胎盘滋养细胞自噬中的作用。方法体外培养人胎盘滋养细胞株(HTR8-S/Vneo),分为正常组和缺氧组。采用Western blot检测各组细胞自噬标志蛋白LC3B和p62的表达水平;运用qRT-PCR检测circRNA ... 详细信息

目的探讨circRNA RBM39与miR-5088-5p在缺氧诱导的胎盘滋养细胞自噬中的作用。方法体外培养人胎盘滋养细胞株(HTR8-S/Vneo),分为正常组和缺氧组。采用Western blot检测各组细胞自噬标志蛋白LC3B和p62的表达水平;运用qRT-PCR检测circRNA RBM39的表达水平;同时,检测circRNA RBM39在HTR8-S/Vneo细胞胞浆/胞核中的表达水平,分析其表达位置;通过TargetScan生物信息学分析circRNA RBM39可竞争结合的miRNAs;而后qRT-PCR检测miR-5088-5p的表达;分别将circRNA RBM39和miR-5088-5p的表达水平与LC3B和p62的表达水平进行相关性分析。结果与正常组相比,缺氧组LC3BⅡ/Ⅰ蛋白表达增加(P<0.001),而p62蛋白表达降低(P<0.001);另外,circRNA RBM39在缺氧组中表达上调(P<0.05),并且主要在胞浆中分布;生物信息学发现circRNA RBM39可竞争性结合miR-5088-5p,而且miR-5088-5p在缺氧组中表达下调(P<0.05);最后,通过相关性分析发现circRNA RBM39与自噬水平呈正相关(P<0.01),miR-5088-5p与自噬水平呈负相关(P<0.01)。结论circRNA RBM39及miR-5088-5p与滋养细胞自噬密切相关,而circRNA RBM39可能通过竞争性结合miR-5088-5p在调节缺氧诱导的滋养细胞自噬中发挥重要作用。

关键词：缺氧滋养细胞自噬 circRNA miRNAs

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高同型半胱氨酸血症诱导Cbs^+/-小鼠肾损伤的作用机制

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中国组织工程研究 2021年第11期25卷 1728-1732页

作者：吴凯刘昆谢琳卢冠军马胜超李桂忠曹军揭育祯姜怡邓郝银菊宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院宁夏回族自治区银川市750004

背景:在慢性肾脏病中常常伴有同型半胱氨酸水平升高,导致足细胞凋亡,但是其具体机制还尚未清楚。目的:探讨高同型半胱氨酸血症诱导Cbs^+/-小鼠肾损伤的作用机制。方法:选取体质量相近的Cbs^+/+小鼠(对照组)和Cbs^+/-小鼠(模型组),每组10... 详细信息

背景:在慢性肾脏病中常常伴有同型半胱氨酸水平升高,导致足细胞凋亡,但是其具体机制还尚未清楚。目的:探讨高同型半胱氨酸血症诱导Cbs^+/-小鼠肾损伤的作用机制。方法:选取体质量相近的Cbs^+/+小鼠(对照组)和Cbs^+/-小鼠(模型组),每组10只,两组小鼠均饲以高蛋氨酸饮食,8周后处死,分离血清,留取肾脏组织。采用全自动生化分析仪检测血清同型半胱氨酸、尿素氮、肌酐水平;糖原染色法及透射电镜观察肾脏损伤情况;TUNEL染色观察肾小球中细胞凋亡情况;Western blot检测Bax、Bcl-2和caspase12的蛋白表达水平。结果与结论:①与Cbs^+/+小鼠比较,Cbs^+/-小鼠血清同型半胱氨酸、尿素氮及肌酐水平均明显升高(P<0.01);②糖原染色结果显示,Cbs^+/+小鼠肾小球基底膜清楚,粗细均匀,而Cbs^+/-小鼠肾小球基底膜则呈现不同程度的粗细不均,膜区增宽、基质增厚;③透射电镜显示,Cbs^+/+小鼠肾小球基底膜清晰,足突规则,而Cbs^+/-小鼠肾小球基底膜局灶性增厚,足突不规则融合;④TUNEL染色结果显示,与Cbs^+/+小鼠比较,Cbs^+/-小鼠肾小球内凋亡细胞数量明显增加;⑤Western blot检测结果显示,Bax/Bcl-2和caspase12的蛋白水平均升高(P<0.05);⑥结果表明:足细胞凋亡在高同型半胱氨酸血症诱导Cbs^+/-小鼠肾损伤中发挥着重要的作用。

关键词：肾损伤高同型半胱氨酸血症凋亡足细胞同型半胱氨酸尿素氮肌酐小鼠

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叶酸和维生素B12在同型半胱氨酸诱导内皮细胞凋亡中的作用及机制研究

叶酸和维生素B12在同型半胱氨酸诱导内皮细胞凋亡中的作用及机制...

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第十五次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：马鹏俊张鸣号郭伟马胜超孙磊李桂忠姜怡邓宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏医科大学临床学院宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏医科大学基础学院银川 750004

目的：探讨叶酸和维生素B12 在Hcy 通过MST1 诱导内皮细胞凋亡中的作用及机制。方法：人脐静脉内皮细胞分为3 组,分别为对照组(0μmol/L Hcy),Hcy 组(100μmol/L Hcy)、干预组(100μmol/L Hcy+30μmol/L 叶酸+30μmol/L 维生素B12 组)...

目的：探讨叶酸和维生素B12 在Hcy 通过MST1 诱导内皮细胞凋亡中的作用及机制。方法：人脐静脉内皮细胞分为3 组,分别为对照组(0μmol/L Hcy),Hcy 组(100μmol/L Hcy)、干预组(100μmol/L Hcy+30μmol/L 叶酸+30μmol/L 维生素B12 组)。细胞处理72h 后,流式细胞术检测内皮细胞凋亡率;荧光倒置显微镜观察DNMT1 过表达腺病毒转染效率,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot 分别检测MST1 及DNMT1 的mRNA、蛋白表达水平,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)法检测MST1启动子区的甲基化水平。

关键词：

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miR-148a-5p参与了高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠的肝细胞凋亡

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中国组织工程研究 2020年第35期24卷 5632-5637页

作者：马芳张辉李桂忠马胜超沈江涌孙磊郝银菊马生贤姜怡邓宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院烧伤整形外科宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学药学院宁夏回族自治区银川市750004

背景:高蛋氨酸饮食可以导致ApoE^-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义。目的:探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠肝细胞凋亡中的作用。方法:12只ApoE^-/-小鼠随机分... 详细信息

背景:高蛋氨酸饮食可以导致ApoE^-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义。目的:探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠肝细胞凋亡中的作用。方法:12只ApoE^-/-小鼠随机分为2组,每组6只,ApoE^-/-对照组为普通饮食,ApoE^-/-高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食。苏木精-伊红染色观察2组肝组织形态学变化;TUNEL染色观察肝细胞的凋亡情况;Western blot测定Bax、Bcl-2的表达改变;荧光定量PCR检测miR-148a-5p的表达;运用Target Scan靶基因预测软件预测miR-148a-5p的靶基因;双荧光素酶活性实验明确其靶向关系。结果与结论:①与对照组相比,ApoE^-/-高蛋氨酸组肝脏组织肝小叶结构发生明显紊乱,部分细胞呈胞浆疏松化变性,肝细胞凋亡增加,Bax的表达明显上升且Bcl-2的表达显著下降(P<0.01);②荧光定量PCR结果显示,ApoE^-/-高蛋氨酸组miR-148a-5p的表达增加(P<0.05);③靶基因预测软件提示,Bcl-2为miR-148a-5p的潜在靶基因;④双荧光素酶活性实验确定了miR-148a-5p与Bcl-2的靶向关系(P<0.05);⑤肝细胞中过表达miR-148a-5p后Bax的表达显著上升且Bcl-2的表达明显下降(P<0.01);⑥提示在高蛋氨酸饮食诱导的ApoE^-/-小鼠肝细胞中,miR-148a-5p通过负调控Bcl-2促进肝细胞凋亡,这可能是造成肝损伤的机制之一。

关键词： miR-148a-5p Bcl-2 高蛋氨酸饮食肝细胞凋亡动物

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高血糖经抑制磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶加重脑缺血再灌注损伤

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解剖学杂志 2019年第2期42卷 132-137页

作者：肖亚利马艳梅郭永真李雅琼张建忠景丽宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复重点实验室银川750004 宁夏医科大学宁夏颅脑疾病重点实验室-国家重点实验室培育基地银川750004

目的:探讨磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)在高血糖加重脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:通过注射链脲佐菌素制备糖尿病高血糖模型,线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型;分为假手术组(sham组),正常血糖脑缺血再灌注24 h组(NM ... 详细信息

目的:探讨磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)在高血糖加重脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:通过注射链脲佐菌素制备糖尿病高血糖模型,线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型;分为假手术组(sham组),正常血糖脑缺血再灌注24 h组(NM I/R 24 h组)、72 h组(NM I/R 72 h组),高血糖脑缺血再灌注24 h组(HM I/R 24 h组)以及72 h组(HM I/R 72 h组),采用组织学、免疫组织化学及免疫印迹等方法,比较观察脑组织的损伤及p-AMPK的表达。结果:NM I/R 24 h组、NM I/R 72 h组大鼠均可见神经功能缺失的表现,HM组大鼠神经功能缺失评分明显高于NM组。NM I/R 24 h组梗死区脑组织疏松水肿,神经元固缩;HM组大鼠脑组织疏松水肿及固缩神经元较NM组大鼠明显增加;与NM I/R 72 h组比较,HM组大鼠仍存在脑组织疏松水肿,较多固缩神经元。免疫组织化学显色和免疫印迹结果可见,I/R 24 h和I/R 72 h,HM组p-AMPK相对蛋白量明显低于NM组。p-AMPK定位观察可见,p-AMPK与神经元共表达,但不与星形胶质细胞共表达。结论:糖尿病高血糖加重大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,可能与神经元磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶减少有关。

关键词：脑高血糖糖尿病缺血再灌注神经元腺苷酸活化蛋白激酶

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HDAC2在D-半乳糖诱导的衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用

HDAC2在D-半乳糖诱导的衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用

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2018中国生理学会第25次全国会员代表大会暨生理学会学术大会

作者：王睿王艳华马晓莉柴丽芬李桂忠姜怡邓宁夏医科大学基础医学院宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川 750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川 750004

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miR-30a-5p启动子区DNA甲基化在同型半胱氨酸致肝损伤中的作用研究

miR-30a-5p启动子区DNA甲基化在同型半胱氨酸致肝损伤中的作用研究

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第十五次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：孙磊郭伟马鹏俊马胜超杜星辰张鸣号郝银菊姜怡邓宁夏医科大学基础医学院宁夏银川 750004 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川 750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川 750004 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川 750004 宁夏医科大学药学院宁夏银川 750004

目的：探讨miR-30a-5p 启动子区DNA 甲基化在肝损伤中的作用.方法：随机选取4 周龄CBS 基因正常(CBS+/+,n=12)及单基因敲除小鼠(CBS+/-,n=12),均给予高蛋氨酸饮食8 周.HL-7702 细胞体外常规培养,分为Control 组、Hcy 组、Hcy+AZC 组.全...

目的：探讨miR-30a-5p 启动子区DNA 甲基化在肝损伤中的作用.方法：随机选取4 周龄CBS 基因正常(CBS+/+,n=12)及单基因敲除小鼠(CBS+/-,n=12),均给予高蛋氨酸饮食8 周.HL-7702 细胞体外常规培养,分为Control 组、Hcy 组、Hcy+AZC 组.全自动生化分析仪检测小鼠血清Hcy、ALT、AST 水平;微板法测定肝细胞ALT、AST 水平;小鼠肝脏石蜡切片HE 染色观察肝脏损伤情况;细胞活力染色检测肝细胞活力;实时定量PCR(RT-qPCR)法检测小鼠肝脏组织和肝细胞miR-30a-5p 的表达;Pearson 相关性分析肝脏miR-30a-5p 表达与血清ALT、AST 水平的相关性;巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测小鼠肝脏组织以及肝细胞miR-30a-5p 启动子区DNA 甲基化水平的变化.

关键词：

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lncRNA DINO在同型半胱氨酸致内皮细胞凋亡中的作用

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宁夏医科大学学报 2021年第4期43卷 333-338页

作者：刘圆张辉马胜超李桂忠姜怡邓宁夏医科大学基础医学院宁夏血管损伤与修复研究重点实验室国家卫健委代谢性心血管疾病研究重点实验室银川750004

目的探讨DNA损伤诱导的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)DINO在同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)致内皮细胞凋亡中的作用。方法以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)为研究对象,MTT法检测不同浓度的Hcy对内皮细胞增殖的影响,筛选合适浓度;最适浓度Hcy干预细胞后分为对照组(0μmol·L^(-1) Hcy)和实验组(100μmol·L^(-1) Hcy),用细胞活力染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA DINO的表达;细胞活力染色、流式细胞术、蛋白免疫印迹(Western blot)分别检测Hcy作用于转染lncRNA DINO干扰片段的HUVECs细胞的凋亡情况及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果100μmol·L^(-1) Hcy对内皮细胞的增殖有抑制作用(P<0.001);与对照组相比,实验组细胞凋亡数增加,且lncRNA DINO表达增加(P均<0.01);转染干扰片段si-DINO、lncRNA DINO表达下降(P<0.01);Hcy作用于转染lncRNA DINO干扰片段的HUVECs细胞的凋亡数下降,Bax/Bcl-2比值下降(P均<0.01)。结论lncRNA DINO能够促进Hcy诱导的内皮细胞凋亡。

关键词： DNA损伤诱导的长链非编码RNA 同型半胱氨酸内皮细胞凋亡

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HDAC1重组质粒构建及其对泡沫细胞脂质聚集的影响

HDAC1重组质粒构建及其对泡沫细胞脂质聚集的影响

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2018中国生理学会第25次全国会员代表大会暨生理学会学术大会

作者：李南赵清国郭凤英王睿李思睿张玲杨晓玲李桂忠姜怡邓宁夏医科大学药学院宁夏医科大学基础医学院宁夏血管损伤与修复实验室(宁夏银川 750004) 宁夏医科大学基础医学院宁夏医科大学公共卫生学院宁夏血管损伤与修复实验室(宁夏银川 750004)

目的构建组蛋白去乙酰化酶 1(Histone deacetylase 1,HDAC1)过表达质粒并检测HDAC1 对泡沫细胞脂质聚集的影响.方法体外复制THP-1 单核源性泡沫细胞模型,采用油红O染色验证模型的复制是否成功,扩增HDAC1 CDS序列,在pcDNA3.1-EGFP 载体... 详细信息

目的构建组蛋白去乙酰化酶 1(Histone deacetylase 1,HDAC1)过表达质粒并检测HDAC1 对泡沫细胞脂质聚集的影响.方法体外复制THP-1 单核源性泡沫细胞模型,采用油红O染色验证模型的复制是否成功,扩增HDAC1 CDS序列,在pcDNA3.1-EGFP 载体CMV启动子下游多克隆位点插入HDAC1 CDS序列,经酶切和DNA序列分析鉴定后,将重组HDAC1质粒转入泡沫细胞48h,实时定量PCR和Western blot分别检测HDAC1 mRNA及蛋白的表达水平,ELISA、油红O及ADFP免疫荧光染色检测泡沫细胞脂质沉积情况.结果成功构建了重组HDAC1 过表达质粒,阳性克隆鉴定结果显示HDAC1 已连接进入重组质粒中;重组HDAC1 过表达质粒转染泡沫细胞 48h后,泡沫细胞内HDAC1 mRNA的表达水平明显上调(P＜0.05),同时,western blot检测HDAC1 蛋白表达,结果与其mRNA表达变化趋势一致(P＜0.05);ADFP免疫荧光及油红O染色结果显示HDAC1过表达后泡沫细胞脂滴面积增大,脂质沉积程度增加,ELISA结果显示过表达HDAC1 后泡沫细胞内的总胆固醇含量明显增加(P＜0.05).结论成功构建了HDAC1 过表达质粒,HDAC1 过表达可加速THP-1单核源性泡沫细胞脂质聚集.

关键词：动脉粥样硬化组蛋白去乙酰化酶 1 泡沫细胞脂质聚集

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