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METTL3介导的m^(6)A修饰调控miR-1224-5p在前列腺癌细胞增殖和迁移中的作用

中国肿瘤生物治疗杂志 2025年第1期32卷 64-72页

作者：胡东来赵梓岐楚元奎宁夏医科大学检验学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750003

目的:探究miR-1224-5p在前列腺癌细胞增殖、迁移与凋亡中的生物学作用及其表达调控机制。方法:选用人前列腺癌细胞PC3、DU145、LNCaP、22Rv1和正常前列腺上皮细胞RWPE-1,利用qPCR法检测miR-1224-5p在前列腺癌细胞中的表达。使用脂质体... 详细信息

目的:探究miR-1224-5p在前列腺癌细胞增殖、迁移与凋亡中的生物学作用及其表达调控机制。方法:选用人前列腺癌细胞PC3、DU145、LNCaP、22Rv1和正常前列腺上皮细胞RWPE-1,利用qPCR法检测miR-1224-5p在前列腺癌细胞中的表达。使用脂质体转染技术分别将miR-1224-5p模拟物(mimic)、抑制剂(inhibitor)及相应的阴性对照(NC)质粒转染至PC3和DU145细胞中,qPCR法验证转染效率,采用CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕愈合实验和流式细胞术分别检测转染miR-1224-5p mimic与inhibitor对细胞增殖、迁移和凋亡的影响。借助SRAMP网站预测pri-miR-1224-5p序列中潜在的N6-甲基腺苷(m^(6)A)修饰位点,通过甲基化RNA免疫沉淀实验(MeRIP)验证预测结果,qPCR法检测m^(6)A修饰关键调控分子甲基转移酶3(METTL3)在前列腺癌细胞中的表达,CCK-8实验和Transwell实验分别检测转染METTL3 siRNA对PC3和DU145细胞增殖和迁移的影响,qPCR法和MeRIP检测METTL3介导的m^(6)A修饰对miR-1224-5p表达的调控作用。结果:miR-1224-5p在前列腺癌细胞中均呈高表达(均P<0.01)。转染miR-1224-5p mimic能够促进PC3和DU145细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡(P<0.05或P<0.01),转染miR-1224-5pinhibitor能够抑制PC3和DU145细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡(P<0.05或P<0.01)。pri-miR-1224-5p具有m^(6)A修饰位点;METTL3在前列腺癌细胞中均呈高表达(均P<0.01),转染METTL3 siRNA能够抑制PC3和DU145细胞的增殖和迁移(均P<0.01);METTL3介导的m^(6)A修饰能够调控miR-1224-5p的表达。结论:miR-1224-5p受METTL3介导的m^(6)A修饰调控,从而在前列腺癌细胞中呈高表达,下调miR-1224-5p能够抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移并诱导细胞凋亡。

关键词：前列腺癌 miR-1224-5p N^(6)-甲基腺苷甲基转移酶3 增殖迁移凋亡

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多模态超声观察微波消融治疗裸鼠胶质瘤的实验室研究

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中国超声医学杂志 2025年第3期41卷 330-333页

作者：祁娇娇柯青兰马丽园常瑞姣张效敏杨光飞宁夏医科大学总医院妇产中心功能检查部宁夏医科大学总医院超声科

目的本研究旨在探讨多模态超声成像技术在微波消融(MWA)治疗裸鼠U87胶质瘤细胞移植瘤中的应用效果。方法建立裸鼠U87胶质瘤细胞移植瘤模型，待瘤体长径达至1.2～1.5 cm时，在超声引导下对移植瘤进行MWA治疗。之后采用常规超声、弹性... 详细信息

目的本研究旨在探讨多模态超声成像技术在微波消融(MWA)治疗裸鼠U87胶质瘤细胞移植瘤中的应用效果。方法建立裸鼠U87胶质瘤细胞移植瘤模型，待瘤体长径达至1.2～1.5 cm时，在超声引导下对移植瘤进行MWA治疗。之后采用常规超声、弹性超声及超声造影(CEUS)等多模态成像技术，评估消融前及消融后肿瘤内部的各声学特征变化。随后，在消融后48 h对肿瘤进行病理检查，以评估消融效果并分析组织坏死情况。结果本研究成功建立了12只裸鼠胶质瘤模型，MWA治疗后常规超声示瘤内回声显著增强，血流信号明显减少，CEUS示消融区几乎无造影剂充填，弹性成像表明瘤内硬度显著增加。消融后，瘤内二维超声灰度值从14.28±0.71显著增加至28.52±1.52(P<0.05),CEUS灰度值也从119.42±0.73降低至19.33±0.41(P<0.05)。病理检查结果表明，MWA治疗后消融区细胞坏死率达到94%。结论多模态超声能够实时有效地评估裸鼠胶质瘤MWA治疗的效果，为MWA治疗脑肿瘤提供了初步的实验支持，并为进一步的临床应用提供了依据。

关键词：胶质瘤微波消融多模态超声移植瘤

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构建并外部验证XGBoost模型鉴别乳腺非肿块病变良恶性

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磁共振成像 2025年第1期16卷 118-126,145页

作者：杨文杨蔚周晓平杨妍张宁妹尹清云张朝林刘召弟宁夏医科大学第一临床医学院银川750004 宁夏医科大学总医院放射科银川750004 32752部队信息技术中心襄阳441000 宁夏医科大学总医院病理科银川750004 宁夏医科大学总医院肿瘤内科银川750004 宁夏医科大学总医院肿瘤外科银川750004 石嘴山市第一人民医院放射科石嘴山753200

目的本研究旨在构建一个基于临床和影像学特征的极端梯度提升(extreme gradient boosting,XGBoost)模型,以鉴别乳腺非肿块病变的良恶性。材料与方法收集2018年1月至2024年7月2个机构,2种乳腺X线设备检查的有病理结果的首诊乳腺非肿块病... 详细信息

目的本研究旨在构建一个基于临床和影像学特征的极端梯度提升(extreme gradient boosting,XGBoost)模型,以鉴别乳腺非肿块病变的良恶性。材料与方法收集2018年1月至2024年7月2个机构,2种乳腺X线设备检查的有病理结果的首诊乳腺非肿块病变480个。患者被分为建模组[n=310,数字乳腺X线摄影(digital mammography,DM)检查]、内部验证组(n=108,DM检查),和外部验证组[n=62,数字乳腺体层合成摄影(digital breast tomosynthesis,DBT)检查]。记录患者术前乳腺X线(DM或DBT),MRI以及临床特征。采用XGBoost算法和多因素逻辑回归分析,分别构建XGBoost模型和逻辑回归(logistic regression,LR)模型。使用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估模型的诊断效能。结果在建模组中,患者以7∶3随机分为训练集(n=217)和测试集(n=93)。训练集、测试集、训练集的内部验证组及训练集的外部验证组中,恶性非肿块病灶分别为159(73%)、58(62%)、73(68%)和43(69%)。XGBoost模型的诊断效能明显优于LR模型,在独立的训练集、测试集、训练集的内部验证组及训练集的外部验证组中均表现出良好的诊断效能,曲线下面积(area under the curve,AUC)在0.884~0.913之间。XGBoost模型在四个队列中也表现出良好的校准能力和临床净获益。结论XGBoost模型能够准确鉴别乳腺非肿块病变的良恶性,具有推广应用的潜力。

关键词：非肿块强化乳腺癌极端梯度提升机器学习磁共振成像乳腺X线摄影

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基于数据非依赖采集定量蛋白质组学技术分析不同类型抑郁障碍单核细胞生物标志物

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中华行为医学与脑科学杂志 2025年第3期34卷 236-244页

作者：刘竹华韩盼盼李子华闵莉评宁夏医科大学总医院心理卫生中心银川750003 宁夏医科大学基础医学院银川750004

目的比较不同类型抑郁障碍患者与正常人外周血单核细胞中显著差异表达的蛋白,探寻具有诊断意义的客观生物标志物。方法2024年3月至5月从宁夏医科大学总医院心理卫生中心门诊收集双相-抑郁发作患者(BP组)、单纯抑郁患者(DEP组)、恶劣心... 详细信息

目的比较不同类型抑郁障碍患者与正常人外周血单核细胞中显著差异表达的蛋白,探寻具有诊断意义的客观生物标志物。方法2024年3月至5月从宁夏医科大学总医院心理卫生中心门诊收集双相-抑郁发作患者(BP组)、单纯抑郁患者(DEP组)、恶劣心境患者(PDD组)和正常人(NP组)的外周血样本。利用数据非依赖采集(DIA)定量蛋白质组学技术寻找在不同类型抑郁障碍患者和正常人外周血中存在的差异表达蛋白,对其进行生物信息学分析获得候选客观生物标志物,筛选确定不同类型抑郁障碍共有及特有的客观生物标志物。数据分析采用R软件(version 4.0)和SPSS 27.0软件。结果BP组与NP组共筛选出167个差异表达蛋白,DEP组与NP组共筛选出30个差异表达蛋白,PDD组与NP组共筛选出14个差异表达蛋白。BP组特有的差异蛋白是ARPC4、SPARC、MTPN、SNCA、YWHAH、MIF、COTL1;DEP组特有的差异蛋白是RBBP9、APOF、S100A6;PDD组特有的差异蛋白是APOA5、CA1、IGLV3-25、APOC2。结论利用DIA定量蛋白质组学技术获得的客观生物标志物及其涉及的信号通路对揭示不同类型抑郁障碍的生物学基础和精准诊断不同类型抑郁障碍具有重要意义。

关键词：抑郁障碍数据非依赖采集蛋白质组学生物标志物精准医疗

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基于交叉协同注意力网络的小样本肠道息肉图像语义分割

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中国数字医学 2025年第1期20卷 39-44页

作者：张浩曹磊马利亚宁夏医科大学总医院信息中心银川750001

目的:提高肠道息肉图像语义分割模型对查询图片中未知目标的分割性能。方法:提出一种基于交叉协同注意力网络的小样本肠道息肉图像语义分割方法。首先,利用预训练的VGG-16网络提取支持图片和查询图片的视觉特征;然后,利用支持特征和查... 详细信息

目的:提高肠道息肉图像语义分割模型对查询图片中未知目标的分割性能。方法:提出一种基于交叉协同注意力网络的小样本肠道息肉图像语义分割方法。首先,利用预训练的VGG-16网络提取支持图片和查询图片的视觉特征;然后,利用支持特征和查询特征建立分支间特征的交叉融合,促进分支间特征语义的对齐;最后,利用无参数的度量方法,逐像素实现查询图片中每一位置的像素分类。结果:在Kvasir-SEG等4个开源的肠道息肉图像数据集中,本研究所提出方法的前景背景交并比(FB-IoU)分值均优于经典的医学图像语义分割模型U-Net。结论:基于交叉协同注意力网络的小样本肠道息肉图像语义分割方法可以精准定位支持图片和查询图片中的息肉区域,具有较好的分割性能。

关键词：肠道息肉图像语义分割交叉协同注意力网络语义对齐

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甜菜碱抑制ABCB1逆转前列腺癌化疗耐药的作用及其机制

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解放军医学杂志 2025年第2期50卷 197-206页

作者：李亚杰张航聂黎虹安康杰杨尉鑫田国林赵瑞宁宁夏医科大学总医院泌尿外科宁夏银川750001 巴中市中心医院泌尿外科四川巴中636000 宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750001 宁夏回族自治区人民医院泌尿外科宁夏银川750001

目的探讨甜菜碱(BET)抑制ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)逆转前列腺癌(PCa)化疗耐药的作用及其机制。方法培养PCa化疗敏感株C4-2B细胞,通过多西他赛(DTX)浓度梯度递增法建立PCa对DTX耐药株TaxR细胞,采用CCK-8法和集落形成实验检测C4-2B、T... 详细信息

目的探讨甜菜碱(BET)抑制ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)逆转前列腺癌(PCa)化疗耐药的作用及其机制。方法培养PCa化疗敏感株C4-2B细胞,通过多西他赛(DTX)浓度梯度递增法建立PCa对DTX耐药株TaxR细胞,采用CCK-8法和集落形成实验检测C4-2B、TaxR细胞对DTX的耐药性,Western blotting、qRT-PCR检测ABCB1的表达情况。将TaxR细胞分为:(1)对照组、阴性对照组、siABCB1-1组与siABCB1-2组,采用Western blotting检测小干扰沉默ABCB1的效果,CCK-8法检测各组对DTX耐药性的差异;(2)不同浓度BET(0、100、200、400、600、800 mmol/L)组,采用CCK-8法检测细胞活性,Western blotting检测ABCB1蛋白的表达情况;(3)对照组、DTX组(20 nmol/L DTX处理)、BET组(200 mmol/L BET处理)与DTX+BET组(20 nmol/L DTX+200 mmol/L BET联合处理),采用流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期,Western blotting检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、BAX、c-caspase-3)的表达情况;(4)对照组、BET组(200 mmol/L BET处理)、渥曼青霉素(WM)组(100μmol/L WM处理)与BET+WM组(200 mmol/L BET+100μmol/L WM联合处理),采用Western blotting检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)及ABCB1蛋白的表达情况;(5)对照组、BAY组(10μmol/L BAY处理)、BET组(200 mmol/L BET处理)与BAY+BET组(10μmol/L BAY+200 mmol/L BET联合处理),采用Western blotting检测NF-κB p65、p-ikBα和ABCB1蛋白的表达情况。利用网络药理学联合转录组测序相关研究结果预测BET逆转化疗耐药的可能通路。结果与C4-2B细胞相比,TaxR细胞对DTX的耐药性明显增强(P<0.01),且高表达ABCB1(P<0.01)。siRNA沉默ABCB1后TaxR对DTX的耐药性被明显抑制(P<0.01)。200 mmol/L BET对TaxR细胞的抑制率低于20%,且可明显降低TaxR细胞中ABCB1蛋白的表达(P<0.05)。200 mmol/L BET与20 nmol/L DTX联合应用较二者单独应用细胞凋亡率增高,细胞周期S期比例增高,Bcl-2蛋白表达降低,BAX、c-caspase-3蛋白表达增高(P<0.01);200 mmol/L BET与100μmol/L WM联合应用时PI3K、Akt、ABCB1蛋白表达降低(P<0.01);200 mmol/L BET与10μmol/L BAY联合应用时NF-κB p65、p-ikBα、ABCB1蛋白表达降低(P<0.01)。结论BET可能通过PI3K/Akt/NF-κB信号通路下调ABCB1的表达进而逆转TaxR化疗耐药。

关键词：甜菜碱前列腺癌化疗耐药 ABCB1

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基于网络药理学探讨月见草油改善多囊卵巢综合征大鼠主动脉内皮损伤的机制研究

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中国实验动物学报 2025年第3期33卷 324-341页

作者：刘自钰惠亮马文欣刘畅虎娜赵帅陈冬梅杨丽蒲静穆胜马会明宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学中医学院银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室银川750003 宁夏医科大学实验动物中心银川750004

目的基于网络药理学和体内实验探究月见草油(evening primrose oil, EPO)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)大鼠主动脉血管内皮损伤的改善作用机制。方法通过网络药理学技术预测EPO改善PCOS大鼠主动脉内皮损伤可能... 详细信息

目的基于网络药理学和体内实验探究月见草油(evening primrose oil, EPO)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)大鼠主动脉血管内皮损伤的改善作用机制。方法通过网络药理学技术预测EPO改善PCOS大鼠主动脉内皮损伤可能的靶点,并且通过实验对筛选出的核心靶点及通路进行验证。58只雌性SD大鼠随机分为:空白对照组(10只)、造模组(48只);空白对照组给予正常饮食,造模组给予高脂饮食8周,第6周联合来曲唑(1 mg/(kg·d))灌胃21 d进行PCOS模型制备,造模结束尾静脉取血,收集血清检测激素水平后,模型大鼠随机分为4组,给予相应药物灌胃治疗6周。给药结束后收集大鼠血液、血管及卵巢组织。苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态,ELISA检测血清中促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、促卵泡激素(FSH)、内皮素(ET-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,分光光度法测定大鼠血清中一氧化氮(NO)水平。Western Blot及免疫组织化学法(IHC)分别检测核心靶点与RAS通路相关因子等蛋白表达水平。结果网络药理学分析得到EPO与PCOS交集靶点25个,KEGG结果显示EPO通过肾素-血管紧张素通路(renin-angiotensin signaling, RAS)等多条通路改善PCOS大鼠血管损伤。与模型组相比,EPO低、高剂量组血清中TNF-α、FSH、LH以及T含量均有所下降,差异具有显著性(P<0.01);EPO低、高剂量组主动脉AngⅠ、VEGF-B、AT_2R、ET-1和TNF-α蛋白表达量显著降低(P<0.01),AngⅡ、CD31蛋白显著升高,差异具有显著性(P<0.01),EPO高剂量组eNOS蛋白显著升高,差异具有显著性(P<0.01)。结论 EPO可能通过抑制RAS信号通路ACE/AngⅡ/AT_1轴过度活化改善PCOS模型大鼠血管内皮损伤。

关键词：多囊卵巢综合征肾素-血管紧张素通路主动脉内皮损伤月见草油网络药理学

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1987—2023年中国区域犬感染弓形虫的空间流行病学分析

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中国人兽共患病学报 2025年第2期41卷 121-128页

作者：苏雅静林雪梁小燕张晨薛頔宁夏医科大学总医院医学科学研究院宁夏临床病原微生物重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心银川750004 宁夏大学教育学院银川750021

目的刚地弓形虫是一种全球广泛分布的胞内原生动物病原体,犬类被认为是人类感染弓形虫的潜在危险因素。本研究旨在系统分析1987—2023年中国区域犬弓形虫感染的流行病学特征,以期为我国刚地弓形虫的预防和控制提供科学依据。方法通过P... 详细信息

目的刚地弓形虫是一种全球广泛分布的胞内原生动物病原体,犬类被认为是人类感染弓形虫的潜在危险因素。本研究旨在系统分析1987—2023年中国区域犬弓形虫感染的流行病学特征,以期为我国刚地弓形虫的预防和控制提供科学依据。方法通过PubMed、中国知网(CNKI)、万方数据库和百度学术数据库检索1987—2023年中国区域犬弓形虫流行病学数据,并利用Excel建立数据库。ArcGIS 10.2软件对犬弓形虫流行病学数据进行可视化展现。统计分析采用SPSS 26.0软件,采用χ2检验进行组间差异的比较,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 1987—2023年,中国犬感染弓形虫的血清阳性率总体呈平稳趋势,犬弓形虫血清抗体总阳性率为13.97%。其中,云南省的犬弓形虫血清阳性率居全国之首,高达27.65%,而陕西省的犬弓形虫血清阳性率则较低,仅为0.56%,各省份间差异具有统计学意义(P<0.05)。全国34个省级行政区中,部分地区未见犬弓形虫流行病学数据。西南地区的犬弓形虫血清阳性率显著高于其他地区(P<0.05)。对比1987—2004年和2005—2023年2个时期的犬弓形虫血清阳性率,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论犬弓形虫感染在我国分布广泛,流行周期稳定。应采相应防控措施,加强相关疫情监测,提高公众对弓形虫病的防控知识普及,以降低弓形虫病的传播风险,保障公共健康安全。

关键词：弓形虫犬空间流行病学动态 GIS技术

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基于左心室压力-应变环评估功能正常的二叶式主动脉瓣畸形患者主动脉病变与左心室心肌做功的相关性

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中国医学影像学杂志 2025年第2期33卷 152-157页

作者：王栎茗吴楠王莉莉纳丽莎宁夏医科大学总医院心脏中心功能部宁夏银川750004 西安市中医医院功能科陕西西安710000

目的应用左心室压力-应变环定量评估功能正常的二叶式主动脉瓣畸形(BAV)患者左心室心肌做功改变,并探讨主动脉病变与心肌做功参数的相关性。资料与方法回顾性选取2022年6月—2023年6月宁夏医科大学总医院心脏中心的BAV患者65例,根据经... 详细信息

目的应用左心室压力-应变环定量评估功能正常的二叶式主动脉瓣畸形(BAV)患者左心室心肌做功改变,并探讨主动脉病变与心肌做功参数的相关性。资料与方法回顾性选取2022年6月—2023年6月宁夏医科大学总医院心脏中心的BAV患者65例,根据经体表面积校正的主动脉内径大小分为主动脉未扩张组35例(主动脉直径<40 mm或主动脉大小指数<22 mm/m^(2))和主动脉扩张组30例(主动脉直径≥40 mm或主动脉大小指数>22 mm/m^(2)),同期选取34名健康者作为对照组。研究对象均行超声心动图检查获取左心室心肌做功参数[整体纵向应变(GLS)、心肌整体做功指数(GWI)、整体有用功(GCW)、整体做功效率(GWE)、整体无用功(GWW)]及常规二维超声参数,对3组间的各参数进行比较分析。结果与对照组相比,主动脉未扩张组及主动脉扩张组患者GLS绝对值、GWE降低,GWI、GCW、GWW、升主动脉内径、升主动脉僵硬指数升高,差异有统计学意义(P<0.05);与主动脉未扩张组相比,主动脉扩张组GLS绝对值、GWE降低,升主动脉僵硬指数、GWW升高,差异有统计学意义(t=-3.567、-2.219、5.266、3.339,P<0.05)。升主动脉内径与GLS绝对值、GWE呈负相关(r=-0.219、-0.324,P<0.001),与GWI、GCW、GWW、升主动脉僵硬指数呈正相关(r=0.178、0.229、0.315、0.529,P<0.001)。结论心肌做功是早期发现功能正常的BAV患者亚临床左心室心肌功能障碍的新方法,对评估BAV患者主动脉病变进展下左心室心肌做功改变具有潜在应用价值。

关键词：二叶式主动脉瓣疾病超声心动描记术压力-应变环心肌做功主动脉扩张

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刚地弓形虫Ⅰ/Ⅲ型ROP16调控TAF15对THP‑1细胞影响及机制研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第1期43卷 103-111页

作者：殷荷马磊党甜甜李佳铭赵志军宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏医学检验临床医学研究中心宁夏银川750004 宁夏大学生命科学学院宁夏银川750004

目的探究刚地弓形虫Ⅰ、Ⅲ型棒状体蛋白16(ROP16)通过调控TATA结合蛋白相关因子15(TAF15)对人单核细胞白血病细胞(THP-1)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法将Ⅰ、Ⅲ型ROP16过表达慢病毒转染至THP-1细胞,构建稳定表达ROP16的细胞株(THP-1... 详细信息

目的探究刚地弓形虫Ⅰ、Ⅲ型棒状体蛋白16(ROP16)通过调控TATA结合蛋白相关因子15(TAF15)对人单核细胞白血病细胞(THP-1)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法将Ⅰ、Ⅲ型ROP16过表达慢病毒转染至THP-1细胞,构建稳定表达ROP16的细胞株(THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ),以转染空载体慢病毒的细胞为空载体对照组(THP-1-Venus),未转染细胞为对照组(THP-1),通过实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blotting)验证过表达效果。利用免疫沉淀-质谱联用技术(IP-MS)在THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ细胞株中预测ROP16的互作蛋白,并通过RT-qPCR和Western blotting检测细胞中互作蛋白TAF15的表达。将3条作用于TAF15基因不同位点的小干扰RNA(siRNA 1215、siRNA 825、siRNA 288)分别干扰THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ细胞株,分为THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 1215/825/288组,同时设未干扰对照组(THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC),Western blotting验证TAF15沉默效果。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)与流式细胞术检测各组细胞增殖及凋亡情况,Western blotting检测细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)、周期素依赖性激酶6(CDK6)、G1/S特异性周期蛋白(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)及磷酸化信号转导和转录激活因子3(P-STAT3)蛋白的表达。结果THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组ROP16 mRNA的相对转录水平为2679.427±250.600、2395.410±325.700,均高于THP-1-Venus组(1.036±0.102)(F=153.3,P<0.01);ROP16蛋白的相对表达水平为4.526±0.020、5.457±0.250,均高于THP-1-Venus组(1.688±0.653)(F=76.4,P<0.01)。TAF15为Ⅰ、Ⅲ型ROP16的互作蛋白,THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组TAF15 mRNA的相对转录水平为6.027±0.313、5.567±0.088,均高于THP-1-Venus组(0.985±0.027)(F=869.4,P<0.01);TAF15蛋白的相对表达水平为1.789±0.145、1.593±0.029,均高于THP-1-Venus组(1.010±0.365)(F=50.6,P<0.01)。TAF15 siRNA转染48 h后,THP-1-ROP16Ⅰ+siRNA 1215/825/288组TAF15蛋白的相对表达水平分别为0.384±0.047、0.246±0.072、0.125±0.026,均低于THP-1-Venus组(1.007±0.019)(F=313.1,P<0.01);THP-1-ROP16Ⅲ+siRNA 1215/825/288组细胞TAF15蛋白的相对表达水平分别为0.186±0.020、0.180±0.015、0.112±0.019,均低于THP-1-Venus组(0.995±0.052)(F=3046.0,P<0.01)。THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC组细胞CCK-8实验A450值分别为0.803±0.015、0.813±0.011,低于THP-1-Venus组(0.997±0.010、0.995±0.016)(t=19.2、24.0,均P<0.01);THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 825/288组A450值分别为0.986±0.010、0.983±0.004,0.980±0.006、0.984±0.010(F=3.5、2.9,均P>0.05)。THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC组细胞凋亡率分别为(38.19±0.45)%、(38.06±0.84)%,高于THP-1-Venus组的(28.41±0.69)%(t=20.5、17.7,均P<0.01);THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 825/288组分别为(30.03±1.83)%、(28.78±0.72)%,(29.33±0.80)%、(28.94±0.58)%(F=1.5、0.4,均P>0.05)。THP-1-ROP16Ⅰ+siRNA NC组p21、Bax、caspase-9、cleaved caspase-3及P-STAT3蛋白的相对表达水平分别为1.322±0.027、1.493±0.030、1.3

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白16 TATA结合蛋白相关因子15 THP‑1细胞

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